整合素β3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的 检测整合素β3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达,明确整合素β3表达规律.方法 将清洁级性成熟期昆明小鼠44只,雌性24只,雄性20只,雌性小鼠阴道涂片检查为动情前期,在此期注射PMSG和HCG,4只雌鼠不合笼,用颈椎脱臼法处死,剪取子宫组织(孕D0,对照组),直接液氮保存和福尔马林固定保存,其余的雌:雄小鼠1∶1合笼,次日检查阴栓,发现阴栓计为妊娠第1天.分别于妊娠第4、5、6、7和8天用颈椎脱臼法处死,迅速剖腹,剪取子宫组织予以保存(实验组),采用免疫组化方法和Western-blotting技术分析围植入期小鼠子宫内膜中的整合素β3表达规律,采用RT-PCR技术半定量分析围植入期小鼠子宫内膜整合素β3 mRNA表达特征.结果 小鼠整个围植入期子宫内膜中均有整合素β3表达,但表达的高峰在着床窗口期,即孕D5.孕D0(非孕)子宫内膜的整合素β3表达较弱,孕D4时表达增强,孕D5时表达最强,孕D6时表达突然回落,孕D7、孕D8时表达减弱,降至非孕水平.结论 整合素β3在围植入期小鼠子宫内膜中的表达随着孕龄的增加逐渐增强,但表达的高峰在孕D5,与植入窗的开放相吻合,是子宫内膜接受性的客观标志,提示整合素β3在胚泡着床过程中起重要作用,该研究为阐明胚泡着床机制提供实验依据.     

骨桥蛋白(OPN)在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的 检测骨桥蛋白在围植入期小鼠子宫内膜中的表达,明确OPN表达规律.方法 将清洁级性成熟期昆明小鼠44只,雌性24只,雄性20只,雌性小鼠阴道涂片检查为动情前期,在此期注射PMSG和HCG,4只雌鼠不合笼(孕D0,对照组),用颈椎脱臼法处死,剪取子宫组织,直接液氮保存和福尔马林固定保存,其余的雌:雄小鼠1∶1合笼,次日检查阴栓,发现阴栓计为妊娠第1天.分别于妊娠第4、5、6、7和8天用颈椎脱臼法处死,迅速剖腹,剪取子宫组织予以保存(实验组),采用免疫组化方法和Western-blotting技术分析围植入期小鼠子宫内膜中的骨桥蛋白表达规律,采用RT-PCR技术半定量分析围植入期小鼠子宫内膜骨桥蛋白mRNA表达特征.结果 小鼠整个围植入期子宫内膜中均有OPN表达,但表达的高峰在着床窗口期,即孕D5.孕D0(非孕)子宫内膜的OPN表达较弱,孕D4时表达增强,孕D5时表达最强,孕D6时表达突然回落,孕D7、孕D8时表达减弱,降至非孕水平.结论 骨桥蛋白在围植入期小鼠子宫内膜中的表达随着孕龄的增加逐渐增强,但表达的高峰在孕D5,与植入窗的开放相吻合,是子宫内膜接受性的客观标志,提示骨桥蛋白在胚泡着床过程中起重要作用,该研究为阐明胚泡着床机制提供了实验依据.     

整合素β3在小鼠植入期子宫内膜中的表达

整合素是一类糖蛋白．广泛存在于细胞表面,可介导细胞与细胞外基质及细胞与细胞之间的粘连．并参与细胞内外信息传递,胚胎植入是哺乳动物生殖过程的重要环节．在此期间,子宫内膜与胚胎彼此相容．发生一系列生化及形态改变。有关植入的分子机制目前仍不清楚。近年研究表明,雌孕激素、     

整合素avβ3拮抗剂SB-273005抗小鼠胚胎着床的作用

[目的]探讨整合素avβ3拮抗剂SB-273005对小鼠胚胎着床的影响.[方法]雌雄小鼠2：1合笼,次晨检查阴栓,阳性者定为妊娠第1天,记为D1.步骤[1]取D3小鼠40只,随机分为2组,每组20只,实验组连续2 d上午灌胃给SB-273005,于D4下午观察囊胚发育情况.②取D3小鼠80只,随机分为4组,每组20只,A、B、C组为实验组,连续3 d分别灌胃给SB-273005 0．3、1、3 mg·kg-1·d-1,于D8观察胚胎着床数及统计妊娠率.③取D4小鼠40只,随机分为两组,每组20只,实验组双侧宫角注射SB-273005,于D8观察胚胎着床数及统计妊娠率.[4]各对照组用与其相应实验组同方法给同体积二甲亚枫(DMSO).取上述D8处死各组小鼠子宫,观察内膜组织学及D4处死小鼠内膜免疫组化变化.[结果]步骤[1]中实验组与对照组囊胚发育率分别为64．7%和84．5%(P＜0．01).步骤[2]中A、B、C、D组妊娠率分别55%、40%、35%、88%(P＜0．05).步骤[3]中实验组妊娠率为15%．对照组妊娠率为70%,两者相比差异有显著性(P＜0．01).说明SB-273005能降低囊胚发育率、小鼠胚胎着床数及妊娠率.组织学及免疫组化结果表明,SB-273005能引起蜕膜细胞退化解体,抑制整合素avβ3在蜕膜组织中的表达.[结论]整合素avβ3拮抗剂SB-273005对小鼠胚胎着床有抑制作用.     

整合素αvβ3拮抗剂SB-273005抗小鼠胚胎着床的作用

 【目的】 探讨整合素αvβ3拮抗剂SB-273005对小鼠胚胎着床的影响&#65377;【方法】 雌雄小鼠2∶1合笼,次晨检查阴栓,阳性者定为妊娠第1天,记为D1&#65377;步骤①取D3小鼠40只,随机分为2组,每组20只,实验组连续2 d上午灌胃给SB-273005,于D4下午观察囊胚发育情况&#65377;②取D3小鼠80只,随机分为4组,每组20只,A&#65380;B&#65380;C组为实验组,连续3 d分别灌胃给SB-273005 0.3&#65380;1&#65380;3 mg·kg-1·d-1,于D8观察胚胎着床数及统计妊娠率&#65377;③取D4小鼠40只,随机分为两组,每组20只,实验组双侧宫角注射SB-273005,于D8观察胚胎着床数及统计妊娠率&#65377;④各对照组用与其相应实验组同方法给同体积二甲亚枫(DMSO)&#65377;取上述D8处死各组小鼠子宫,观察内膜组织学及D4处死小鼠内膜免疫组化变化&#65377;【结果】 步骤①中实验组与对照组囊胚发育率分别为64.7%和 84.5%(P < 0.01)&#65377;步骤②中A &#65380;B&#65380;C&#65380;D组妊娠率分别55%&#65380;40%&#65380;35%&#65380;88%(P < 0.05)&#65377;步骤③中实验组妊娠率为15%,对照组妊娠率为70%,两者相比差异有显著性(P < 0.01)&#65377;说明SB-273005能降低囊胚发育率&#65380;小鼠胚胎着床数及妊娠率&#65377;组织学及免疫组化结果表明,SB-273005能引起蜕膜细胞退化解体,抑制整合素αvβ3在蜕膜组织中的表达&#65377;【结论】 整合素αvβ3拮抗剂SB-273005对小鼠胚胎着床有抑制作用&#65377;     

整合素αvβ3拮抗剂SB-273005抗小鼠胚胎着床的作用

【目的】探讨整合素αvβ3拮抗剂SB-273005对小鼠胚胎着床的影响。【方法】雌雄小鼠2：1合笼,次晨检查阴栓,阳性者定为妊娠第1天．记为D1。步骤①取D3小鼠40只,随机分为2组,每组20只,实验组连续2d上午灌胃给SB-273005,于D4下午观察囊胚发育情况。②取D3小鼠80只．随机分为4组．每组20只,A、B、C组为实验组,连续3d分别灌胃给SB-2730050．3、1、3mg&#183;kg^-1&#183;d^-1,于D8观察胚胎着床数及统计妊娠率。③取D4小鼠40只,随机分为两组,每组20只,实验组双侧宫角注射SB-273005,于D8观察胚胎着床数及统计妊娠率。④各对照组用与其相应实验组同方法给同体积二甲亚枫（DMSO）。取上述D8处死各组小鼠子宫,观察内膜组织学及D4处死小鼠内膜免疫组化变化。【结果】步骤①中实验组与对照组囊胚发育率分别为64．7％和84．5％（P〈0．01）。步骤②中A、B、C、D组妊娠率分别55％、40％、35％、88％（P〈0．05）。步骤③中实验组妊娠率为15％,对照组妊娠率为70％,两者相比差异有显著性（P〈0．01）。说明SB-273005能降低囊胚发育率、小鼠胚胎着床数及妊娠率。组织学及免疫组化结果表明．SB-273005能引起蜕膜细胞退化解体,抑制整合素αvβ3在蜕膜组织中的表达。【结论】整合素αvβ3拮抗剂SB-273005对小鼠胚胎着床有抑制作用。     

高度近视糖尿病豚鼠视网膜中骨桥蛋白及整合素αvβ3受体的表达

目的:通过观察糖尿病豚鼠视网膜中骨桥蛋白(OPN)及整合素αvβ3受体的表达水平受高度近视的影响情况,初步探讨高度近视影响糖尿病视网膜病变进展的机制。方法:选取出生1周龄雄性豚鼠90只,随机分为正常对照组(Ⅰ组)、高度近视组(Ⅱ组)、糖尿病组(Ⅲ组)、糖尿病合并高度近视组(Ⅳ组)。Ⅰ组18只,余3组每组24只。Ⅱ组为半透明眼罩遮盖右眼20周;Ⅲ组为饲养8周时左下腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 280 mg/kg;Ⅳ组为半透明眼罩联合注射STZ。每组随机选择18只完成实验测量,摘除眼球后行HE染色、免疫组化染色,观察视网膜组织形态,并对OPN和整合素αvβ3受体阳性细胞率完成计数。结果:各组豚鼠均造模成功。HE染色观察Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的视网膜组织形态,与Ⅰ组相比均有组织学差异,Ⅲ、Ⅳ组可见发生糖尿病视网膜改变,Ⅳ组较Ⅲ组程度轻。免疫组化染色观察,有糖尿病组(Ⅲ组、Ⅳ组)与无糖尿病组(Ⅰ组、Ⅱ组)比较,OPN、整合素αvβ3受体表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。另Ⅳ组与Ⅲ组相比,OPN及整合素αvβ3受体阳性表达率降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:OPN及整合素αvβ3受体在糖尿病合并高度近视豚鼠视网膜组织中的表达较其在糖尿病模型中表达低,可能在高度近视影响DR进程中新生血管的发展中发挥作用。     

整合素β3反义寡核苷酸抗小鼠妊娠的作用

目的：探讨整合素β3反义寡核苷酸(ASODN)活体转染假孕小鼠子宫内膜抗早孕的可能性。方法：将整合素β3反义寡核苷酸注入假孕1d小鼠子宫,同时同侧输卵管植入2细胞期受精卯10枚,小鼠正常饲养,5d天取小鼠子宫内膜进行Western Blotting检测整合素β3蛋白表达情况;19d进行小鼠子代出生率评估。结果：①Western Blotting检测5d天小鼠子宫内膜整合索艮蛋白强表达,10pmol整合素β3反义寡核苷酸转染假孕小鼠子宫内膜后5d天小鼠子宫内膜整合素β3蛋白减弱表达,100pmol整合素β3反义寡核苷酸转染时弱表达,单纯脂质体轻度影响其表达;②19d进行小鼠子代出生率评估,受孕鼠转染整合素β3反义寡核苷酸后子代小鼠出生抑制率为85％。结论：整合素陆反义寡核苷酸可能整合到假孕小鼠子宫内膜抑制其蛋白表达,阻止胚胎着床。由于例数较少,其整合素β3反义寡核苷酸后抑制子代小鼠出生率需进一步研究。     

整合素β3反义寡核苷酸抗小鼠妊娠的作用

目的探讨整合素β3反义寡核苷酸(ASODN)活体转染假孕小鼠子宫内膜抗早孕的可能性。方法将整合素β3反义寡核苷酸注入假孕1d小鼠子宫,同时同侧输卵管植入2细胞期受精卵10枚,小鼠正常饲养,5d天取小鼠子宫内膜进行Western Blotting检测整合素β3蛋白表达情况;19d进行小鼠子代出生率评估。结果Western blotting检测5d小鼠子宫内膜整合素β3蛋白强表达,10pmol整合素岛反义寡核苷酸转染假孕小鼠子宫内膜后5d小鼠子宫内膜整合素β3蛋白减弱表达,100pmol整合素β3反义寡核苷酸转染时弱表达,单纯脂质体轻度影响其表达;19d进行小鼠子代出生率评估,受孕鼠转染整合素β3反义寡核苷酸后子代小鼠出生抑制率为85％。结论整合素β3反义寡核苷酸可能整合到假孕小鼠子宫内膜抑制其蛋白表达,阻止胚胎着床。由于例数较少,其整合素β3反义寡核苷酸后抑制子代小鼠出生率需进一步研究。     

β半乳糖凝集素-3在胚泡植入早期小鼠子宫内膜中的表达

目的 探讨β半乳糖凝集素-3 (Galectin-3)在植入早期小鼠子宫内膜中的表达分布状况及其意义.方法 应用免疫组化SP法检测妊娠1～5 d小鼠子宫内膜Galectin-3的表达情况,并以动情期非妊娠小鼠子宫做对照.结果 小鼠子宫内膜的所有组织中均有Galectin-3表达,主要表达于腺上皮、腔上皮和基质细胞中.随着小鼠妊娠天数的增加,Galectin-3的表达也逐渐增高,在植入窗口期(妊娠4～5 d)达高峰.结论 Galectin-3在妊娠1～5 d小鼠子宫内膜持续表达,提示在小鼠胚泡植入早期,Galectin-3参与了胚泡的植入过程,在胚泡和子宫内膜的识别过程中发挥重要作用.     

益气血补肝肾方对子宫内膜整合素αvβ3表达的影响

目的:观察益气血补肝肾方对子宫内膜整合素αvβ3表达的影响,探讨益气血补肝肾方提高妊娠率的机制。方法:600只小鼠随机分为超促排卵组、促排卵组、自然排卵组各200只,每组小鼠中又分为中药干预组与对照组各100只,分别用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法检测整合素αvβ3的表达。结果:超促排卵组和促排卵组小鼠中,中药干预组妊娠率显著高于对照组(P<0.05)。但自然排卵组中药干预后妊娠率与对照组无统计学差异(P>0.05)。免疫组织化学、RT-PCR和Western blot法均显示,超促排卵组和促排卵组小鼠中,中药干预后整合素αvβ3的表达显著升高(P<0.05),而对自然排卵组则无明显影响(P>0.05)。结论:益气血补肝肾可能通过上调超促排卵及促排卵小鼠子宫内膜整合素αvβ3表达,改善子宫内膜容受性,从而提高妊娠率。     

降钙素对小鼠胚泡发育及植入的影响

目的:探讨降钙素对小鼠胚泡发育及植入的影响。方法:将孕4d小鼠胚泡随机接种到添加不同浓度降钙素的培养液内培养,观察记录胚泡的孵化、粘附及扩展等生长情况。于孕4d给小鼠子宫角注射降钙素抗体,孕8d检查胚胎植入数并进行组织学观察。结果:培养液内加入10nmol/L降钙素后,胚泡的孵化、粘附及扩展率均明显提高(P<0.01),注射降钙素抗体的小鼠,其胚胎植入数明显减少(P<0.001),镜下可见胚胎组织蜕化坏死,蜕膜细胞空泡变性。结论:降钙素可促进小鼠胚泡的孵化、粘附及扩展和促进胚泡植入。     

小鼠子宫角注射层粘连蛋白及其抗血清对胚泡着床的影响

目的：研究层粘连蛋白及其特异性抗血清对胚泡着床的影响。方法：在小鼠子宫角内注射层粘连蛋白及其特异性抗血清，并对胚胎着床率与子宫内膜变化进行组织学观察。结果：提示外源性层粘连蛋白在小鼠体内有促进胚泡粘附、植入子宫内膜的趋势，但作用不明显；而层粘连蛋白抗血清则有显著抑制小鼠胚泡着床的效应。结论：小鼠体内的层粘连蛋白对胚胎粘附、着床起重要作用。     

整合素avβ3单克隆抗体对小鼠子宫内膜异位病灶的抑制作用

OBJECTIVE: To explore the potential use of integrin av beta3 (Lm609) monoclonal antibody against ectopic lesion and microvessel angiogenesis of human endometriosis xenografts in SCID mice. METHODS: The endometrial tissues from endometriosis patients were inoculated subcutaneously into SCID mouse, which were treated with Lm609, an inhibitor of angiogenesis, twice a week, for 3 weeks. The mice were sacrificed and immunohistochemical staining was employed to determine the microvessel density (MVD) and expression of integrin av beta3 in the lesion tissues. RESULTS: Lm609 inhibited the growth of the ectopic lesion. The lesion weighted 0.82+/-0.09 g in the treated group versus 0.51+/-0.93 g in the control group (P<0.05). The MVDs of the treated and control groups were 31.2+/-4.4 and 14.4+/-1.8 respectively (P<0.05). CONCLUSION: Lm609 can inhibit the growth of ectopic lesion by reducing angiogenesis in SCID mouse.     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中转化生长因子-β(TGF-β1)和整合素β3(Integrinβ3)的表达

目的研究转化生长因子-β1（TGF-β1）和整合素β3（Integrinβ3）在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达．并探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法采用免疫组织化学染色（SP法）分别检测Integrinβ3、TGF-β1在12例妊娠期高血压疾病患者及13例正常妊娠者胎盘组织中的表达。结果妊娠期高血压疾病组胎盘Integrinβ3表达明显高于正常妊娠组（P〈0．01）。妊娠期高血压疾病组胎盘TGF-β1表达亦明显高于正常妊娠组（P〈0．01）。结论与正常妊娠组比较妊娠期期高血压疾病患者胎盘组织integrinβ3、TGF—β1的表达明均显增高。表明integrinβ3、TGF—β1可能参与妊娠期高血压疾病的发生和发展。     

保胎液对胚泡着床障碍小鼠着床位点数及分布形态影响的实验研究

目的观察保胎液对胚泡着床障碍模型小鼠着床位点数及分布形态的影响。方法采用米非司酮小鼠胚泡着床障碍模型。将孕鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组和中药(高、中、低三种剂量)治疗组,从妊娠第1天起分别给予生理盐水、地屈孕酮和保胎液(高、中、低三种剂量)灌胃治疗。于妊娠第4天上午皮下注射米非司酮,每只0.08 mg。正常组不予任何处理。于妊娠第5天腹腔静脉注射1%浓度的Trypan Blue 0.3 mL,观察10 min,取出子宫,观察蓝染点,计算胚泡着床位点数。结果中药高、中、低治疗组,西药对照组,模型组小鼠胚泡着床位点数均低于正常组(P<0.05);与模型组比较,中药各治疗组、西药组小鼠着床位点数明显提高(P<0.05)。结论保胎液能够增加着床障碍小鼠的胚泡着床位点数,从而有利于胚泡的着床,提高妊娠率。     

盐酸异丙嗪对小鼠胚泡植入的影响

目的 :研究盐酸异丙嗪对小鼠胚植入的影响。方法 :取孕 3～ 7d小鼠 ,每天上午 10时腹腔注射盐酸异丙嗪溶液 ;另取孕 4d小鼠 ,于上午 10时子宫角注入盐酸异丙嗪溶液 ,对照组同时用同法注射生理盐水 0 .2ml。于孕 8d检查胚胎植入数 ,同时 ,取子宫观察内膜的组织学及免疫组织化学变化。结果 :腹腔 2mg药物注射组抗植入率达 10 0 % ,腹腔 1mg药物组的抗植入率为 75 % ,子宫角药物注入组抗植入率达 75 % ,均明显少于对照组。组织学及免疫组化结果表明 ,盐酸异丙嗪可引起蜕膜细胞退化、解体 ,使蜕膜细胞不能正常形成纤维粘连蛋白 (FN)和层粘连蛋白 (LN)。结论 :盐酸异丙嗪对小鼠有明显的抗植入作用     

不同方案超排卵下小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达

目的 以超排卵下小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达为指标,比较不同超排卵方案对小鼠子宫内膜容受性的影响。方法 模拟人类超排卵长周期,对小鼠进行超促排卵。根据超排卵方案的不同,按随机表顺序将40只小鼠分为4组,分别为促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHant)组、促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)组、孕马血清促性腺激素(PMSG)组及对照组,每组10只小鼠。用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3蛋白和mRNA的表达。结果 免疫组织化学结果显示,与对照组相比GnRHa组小鼠整合素β3蛋白的表达明显下降(P=0．023),GnRHant组和PMSG组小鼠整合素β3蛋白的表达明显降低(P=0．001);与PMSG组小鼠相比,GnRHa组小鼠整合素β3的表达明显增高(P=0．001),而GnRHant组整合素β3的表达差异无显著意义(P=0．768);RT-PCR结果与免疫组化结果相符。结论 与小鼠自然周期相比,3种超排卵方案均使小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达明显下降,可能降低了子宫内膜容受性;与单一PMSG超排卵方案相比,GnRHa辅助超排卵方案能明显改善小鼠子宫内膜的容受性;而GnRHant辅助超排卵方案则对小鼠子宫内膜容受性的改善作用不明显。     

整合素avβ3单克隆抗体对小鼠子宫内膜异位病灶的抑制作用

目的 研究整合素avβ3单克隆抗体对SCID小鼠子宫内膜异位病灶生长和微血管形成的影响。方法 建立人子宫内膜异位症小鼠皮下移植病灶模型。治疗组尾静脉注射整合素avβ3单克隆抗体Lm609(250μg/只),对照组给予相应体积的PBS,1周2次。4周后处死动物,测量病灶,采用免疫组化法检测病灶微血管密度(MVD)及整合素avβ3的表达。结果 治疗组与对照组皮下移植病灶质量分别为(0.82±0.09)g和(0.51±0.93)g(P<0.05),病灶组织中MVD则分别为31.2±4.4和14.4±1.8(P<0.05),治疗组病灶受到显著抑制。结论 整合素avβ3单克隆抗体通过抑制微血管形成而抑制子宫内膜异位病灶的生长。