乙型肝炎核酸疫苗研究进展

全世界大约有3．5亿的慢性HBV携带，慢性乙型肝炎的防治研究一直是肝病研究的重大课题。干扰素能使部分患有持续性反应，拉米呋啶能迅速抑制病毒复制，但是停药易反跳，用药后导致变异株的产生，两种药物治疗均使病毒进入低复制状态。因此，为了治愈乙型肝炎，需要探索其他的治疗途径。近年来，由于基因重组技术的发展与应用，使得利用核酸疫苗来治疗慢性HBV感染成为研究的热点。本对目前乙肝核酸疫苗研究情况作一综述。     

HCV核酸疫苗研究进展

丙型肝炎病毒是目前输血后肝炎的主要病因。并且与肝硬化和肝癌的发生和发展密切相关。由于ＨＣＶ存在不同的基因型,基因突变率高,特别是ＨＣＶ相似株的存在和免疫逃避现象,使传统疫苗的研制存在一定困难。随着基因免疫和基因治疗的兴起,ＨＣＶ核酸疫苗的研制就成为许多研...     

乙型肝炎病毒核心抗原核酸疫苗对猕猴的体液免疫原性观察

核酸疫苗 ( DNA疫苗 )能够有效地刺激机体的特异性免疫应答已经成为共识。鉴于乙型肝炎病毒核心抗原 ( HBc Ag)是机体细胞毒性 T细胞 ( CTL )识别和攻击 HBV感染肝细胞的主要靶抗原 ,我们构建了 HBc Ag核酸疫苗 ,并已观察到该核酸疫苗经不同接种方法免疫不同品系小鼠均可引起特异性体液免疫和细胞免疫应答。为进一步观察该核酸疫苗对非人灵长类动物的免疫原性 ,我们用该核酸疫苗接种猕猴 ,发现猕猴对该核酸疫苗具有良好的抗体应答反应。1　材料和方法( 1 ) HBc Ag核酸疫苗的制备　 HBc Ag核酸疫苗 ( p JW430 3/HBc)及对照质粒 ( …     

核酸疫苗研究进展

20世纪初以来，众多疫苗相继出现，为全世界挽救了无数的生命。但是，一些传染病和新发的传染病，如流感、丙型肝炎、艾滋病和疯牛病等还没有十分有效的疫苗。这些都证明了传统疫苗能力有限或显得无能为力。1990年Wolff等人将DNA重组表达载体注入小鼠的骨骼肌中，结果意外发现载体上的基因在局部肌细胞内表达，且产生了抗体，这一偶然发现导致核酸疫苗的诞生。     

乙型肝炎病毒DNA疫苗的免疫效果

用已构建的不同载体乙型肝炎。基因疫苗（ＰＣＲ３．１－Ｓ，ｐｃＤＮＡ３－Ｓ）和乙型肝炎Ｃ基因疫苗（ＰＣＲ３．１－Ｃ０分别给Ｂａｌｂ／ｃ小鼠多点肌肉注射，２周后追加免疫一次，用ＥＬＩＳＡ法及ＭＴＴＩ地分别检测小鼠血清抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢＣ抗体及地ＨＢｓＡｇ或ＨＢｃＡｇ的特异性增殖反应。结果：免疫接种２周后小鼠血清抗－ＨＢＳ及抗－ＨＢＣ抗体ＯＤ值分别为０．８３７３和０．７９６１均明显高于对照组（０．１２     

猕猴对乙型肝炎病毒核心抗原核酸疫苗的特异性细胞免疫应答

目的 观察乙型肝炎病毒核心抗原核心酸疫苗即ＨＢｃＡｇ核酸疫苗（ｐＪＷ４３０３／ＨＢｃ）免疫猕猴的特异性细胞免疫应答。方法 猕猴分别在第０、２、４、６个月肌肉注射法接种核酸疫苗（ｐＪＷ４３０３／ＨＢｃ）或对照质粒（ｐＪＷ３０３）；ＥＬＩＳＡ法检测猕猴外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），经特异性抗原（ＨＢｃＡｇ）刺激后，培养上清中人白细胞介素－４（ＩＬ－４）和干扰素γ（ＩＦＮ－γ）以及猕猴血清中抗－ＨＢｃｌ     

乙型肝炎疫苗研究进展

乙型肝炎是全世界最常见的传染病之一。据统计,全球已有20多亿人经历过乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染,其中有3．5亿为慢性HBV感染者, 我国占1.2亿以上,居世界第一位。乙肝疫苗用于乙肝病毒感染的预防取得了可喜的成果,然而,仍有     

汉坦病毒核酸疫苗研究进展

汉坦病毒引起的疾病是一种人畜共患性疾病，它在世界上有着广泛的流行区域，尤其在我国是除乙肝外的第二大传染病。目前发现汉坦病毒有二十余种血清／基因型，引起人类肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome，HFRS)主要是汉滩病毒(Hantaan Virus，HTNV)、汉城病毒(Seoul Virus，SEOV)、晋马     

乙型肝炎病毒S基因多样性的研究进展

乙型肝炎病毒 (HBV)属于嗜杆DNA病毒科。在感染的肝细胞中 ,HBV主要以RNA为中间体逆转录复制 ,复制时利用的是病毒本身的DNA聚合酶 ,此酶缺乏校对修复活性 ,发生变异后难以修正 ,所以造成复制过程中的反转录失真。HBV基因的突变率较一般DNA病毒为高。据估计 ,嗜杆DNA病毒的突变率接近于 2× 10 - 4·位 - 1·年 - 1[1] ,这比RNA病毒的突变率低 1～ 2个数量级 ,但却比一般的DNA病毒高出 4个数量级[2 ] 。S基因编码的HBsAg可以诱导保护性抗体的产生 ,是乙型肝炎疫苗的主要成分 ,也是诊断HBV感染的主要依据之一 ,所以S基因变异…     

鸭乙型肝炎病毒核酸荧光定量PCR方法的建立及应用

目的：建立鸭乙型肝炎病毒核酸(DHBV DNA)荧光定量的方法。方法：根据DHBV DNAS基因区的序列设计扩增所需3条引物，通过偶联反应用AmpliSensor荧光信号标记半巢式引物，经过前期不对称扩增、半巢式扩增及在线检测建立DHBV DNA阳性标准品QPCR的标准曲线，并将70份鸭血清分别用荧光定量PCR方法和地高辛标记的DHBV DNA探针斑点杂交的方法检测，比较结果的相关性。结果：DHBV DNA阳性标准品经过30次循环后，扩增产物经2％琼脂糖凝胶电泳检测，可以看出有180bp、70bp两个片段，与设计的片段大小相符，扩增产物的浓度与标准品的起始浓度成正比，扩增指数的数值大小与该循环时己合成的扩增产物的量成正比，起始浓度的大小与要合成的一定扩增产物的量所需的循环次数成反比。用荧定量PCR方法和斑点杂交的方法检测血清中DHBV DNA的结果有良好的相关性(r＝0．97，P＜0.01，ν＝58)。结论：荧光定量PCR方法可作为检测DHBV DNA含量的一个重要手段。     

汉坦病毒核酸疫苗研究进展

汉坦病毒引起的疾病是一种人畜共患性疾病,它在世界上有着广泛的流行区域,尤其在我国是除乙肝外的第二大传染病。目前发现汉坦病毒有二十余种血清/基因型,引起人类肾综合征出血热(hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome ,HFRS)主要是汉滩病毒(Han taanVirus ,HTNV)、汉城病毒(SeoulVirus ,SEOV)、普马拉病毒(PuumalaVirus ,PUUV )和Dobrava病毒(DOBV) ,疫源地在亚洲与欧洲。而引起人类汉坦病毒肺综合征(hantaviruspuImonarysyndrom ,HPS)除辛诺柏病毒(SinNombreVirus ,SN)外,还发现有纽约病毒(NewYorkVirus ,NYV)、长沼病毒(…     

反义基因转移表达及抗乙型肝炎病毒的作用

目的观察重组逆转录病毒载体－包装细胞系统介导反义基因转移表达和抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的作用。方法将ＨＢＶａｙｗ１４０２－２９０６片段和２８３９－１９８６片段反向插入重组逆转录病毒载体质粒，分别转染ＰＡ３１７包装细胞，分别感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞和２．２．１５细胞。结果转导的ＮＩＨ３Ｔ３细胞内有ＨＢＶ反义ＲＮＡ转录表达。ＨＢＶ反义基因重组逆转录病毒感染２．２．１５细胞后第３天，表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）表达量减少，感染后第５天，ＨＢＶ抗原表达抑制率达高峰。ｐｒｅＳ／Ｓ片段反义基因转移后，ＨＢｓＡｇ表达抑制率为７１％，ＨＢｅＡｇ抑制率为２３％；ｐｒｅＣ／Ｃ片段反义基因转移后，ＨＢ－ｓＡｇ表达抑制率为２３％，ＨＢｅＡｇ抑制率为５９％。结论逆转录病毒载体－包装细胞系统能够介导ＨＢＶ反义基因在真核细胞内转移和表达，并对ＨＢＶ复制和表达均有抑制作用。     

丙型肝炎病毒核酸疫苗的构建及小鼠体液免疫效果

目的 探讨核酸商以苗在HCV感染中的预防和治疗价值。方法 将HCV C区基因插入pEF质粒EF－1α下游,构建pEF-HCV C重组质料,然后经im及皮下注射免疫BALB／c小鼠,免疫次数分别为1,2,3,4次,ELISA法检测免疫小鼠血清中抗－HCV的水平。结果 接种后各组均检测到抗－HCV的水平。结果 接种后各组均检测到抗－HCV,但是抗体滴度较低,在不同的免疫次数中,4次免疫组抗体水平最高。结论 构建的HCV DNA重组体可诱发BALB／d小鼠产生体液免疫应答,加强免疫后可使血清中抗－HCV明显增高。     

慢性乙型肝炎的治疗性疫苗研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)感染是最常见的感染性疾病之一，全世界大约有3．5亿的慢性HBV携带者。我国是HBV感染的高发区，其中HBV携带者约1．2亿人，25％的HBV携带者将死于乙肝相关疾病(门脉高压，肝功能衰竭和肝癌)。闻玉梅等于1986年发现我国90％以上的乙肝患者肝内无病毒基因整合，提示乙型肝炎有治愈的可能。然而目前抗病毒     

抗埃博拉病毒疫苗和核酸类药物研究进展

埃博拉病毒（EBOV）致病性和传染性强,死亡率高,常在西非热带地区暴发流行。目前相应的抗病毒药物和疫苗正加紧研发。 EBOV疫苗依据抗原递送方式主要可分为3类,包括基于非复制性病毒载体的疫苗、基于复制性病毒载体的疫苗和基于病毒蛋白抗原的疫苗。ChAd3-ZEBOV和VSV-EBOV是最具潜力的抗埃博拉疫苗。随着埃博拉病毒感染分子基础研究的深入,抗埃博拉病毒的核酸和核苷类似物药物也成为研究热点。     

血清乙型肝炎病毒核酸定量检测及临床意义

目的: 探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物(HBVM)表现模式、肝损害程度的关系。方法: 采用荧光定量PCR分析系统检测126例乙肝病毒感染者HBV DNA,采用ELISA法检测HBVM。结果: 在HBsAg阳性+HBeAg阳性+抗HBc阳性的血清中HBV DNA阳性率和含量最高,血清HBeAg与HBV DNA含量有一定关系(P<0.01),血清丙氨酸氨基转移酶水平与HBV DNA含量亦有一定关系(P<0.05)。结论: HBV DNA含量与HBeAg有一定关系,肝脏损害程度与血清HBV DNA亦有一定关系。     

乙型肝炎病毒标志物实验室检测的研究进展

<正>迄今为止,全世界大约有3.5~4.0亿慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者,血清学证据表明:约占全球人口总数1/3的人既往或正在感染HBV。每年有超过100万的患者死于HBV感染相关的肝衰竭、肝硬化和肝癌[1]。我国是HBV感染的主要流行区,现有慢性HBV携带者约1.2