阻断肿瘤坏死因子-α的作用对慢性充血性心力衰竭时神经递质失衡的影响

目的 通过中枢阻断肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的作用,观察对慢性充血性心力衰竭（心衰）时神经递质失衡的影响,探讨中枢炎性因子对心衰时交感兴奋的作用.方法 采用结扎冠状动脉左前降支致心肌梗死的方法制备心衰大鼠模型,假手术对照只穿线不结扎.对心衰大鼠和假手术大鼠持续4周经侧脑室灌流TNF-α阻断剂依那西普（etanercept,ETN） 10μg/h或人工脑脊液（aCSF）;另一种处理则是以腹腔注射方式给予相似剂量的ETN.4周后测定心脏功能学指标和形态学指标（LVEDP、±dp/dt max、RV/BW、Lung/BW）和肾交感神经放电（RSNA）; ELISA技术测定促炎因子（PIC）在血浆和下丘脑室旁核（PVN）中的含量以及血中血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）水平;PVN中谷氨酸（Glu）、去甲肾上腺素（NE）及血中儿茶酚胺的含量利用高效液相色谱法获得;免疫组织化学染色确定PVN内酪氨酸羟化酶（TH）和谷氨酸脱羧酶（GAD67）,后二者分别为NE和γ-氨基丁酸（GABA）的限速酶,以及神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达.结果 与假手术组相比,心衰大鼠PVN区NE和TH表达增强,GAD67和nNOS表达减弱;血浆炎性因子、儿茶酚胺、血管紧张素Ⅱ增多;肾交感神经活动增强.对心衰大鼠经侧脑室持续灌流ETN可减轻上述神经递质失衡现象和心衰时肾交感神经的过度兴奋表现;而经腹腔灌注相似剂量的ETN对心衰大鼠PVN处的NE、TH、GAD67和nNOS的含量没有影响,对肾交感神经兴奋也无作用,说明上述影响是通过位于中枢的PIC起作用.结论 心衰时PVN区炎性因子增高,引起中枢兴奋性神经递质增多,抑制性神经递质减少,神经递质平衡失调,从而增强交感兴奋促进心衰发展.     

下丘脑室旁核氧化应激反应对心力衰竭时肾交感神经活动的影响

目的 探索心力衰竭(HF)时下丘脑室旁核(PVN)氧化应激反应是否能够增强肾交感神经(RSNA)活动,进而促进HF的发生发展.方法 取SD大鼠行冠脉结扎术制作心衰模型,对照组(SHAM)大鼠不结扎冠脉,两天后通过侧脑室插管给予tempol(氧自由基清除剂)或人工脑脊液(VEH).正常饲养4周后,测量各组大鼠血流动力学、RSNA、PVN区域NADPH亚基gp91 phox的表达.结果 HF组大鼠心功能明显低于SHAM组大鼠,RSNA增强、PVN区域NADPH亚基gp91 phox的表达增加.HF大鼠给予tempol治疗后心功能各项指标有所改善,RSNA减弱,PVN区域gp91 phox的表达降低,但达不到SHAM组水平.结论 心衰时PVN区域氧化应激反应增强与RSNA增加有关,降低该区域氧自由基水平可能延缓HF的发生发展过程.     

不同麻醉药对L-谷氨酸兴奋室旁核所致心血管效应的影响

目的探讨不同麻醉药对L-谷氨酸兴奋室旁核所致心血管效应的影响及机制。方法将16只大鼠分成α-氯醛糖组和乌拉坦组,腹腔分别注射α-氯醛糖（0．3g／kg）和乌拉坦（1g／kg）,观察各组室旁核微量注射L-谷氨酸后对血压、心率和肾交感神经放电活动（RSNA）变化。结果α-氯醛糖组血压下降、心率减慢、RSNA减弱;乌拉坦组血压升高、心率加快、RSNA增强。结论不同麻醉药产生不同心血管效应,可能与直接作用于室旁核—交感传出通路有关。     

活性氧在慢性缺氧性肺动脉高压发病机制中的作用

活性氧(reactive oxygen species,ROS)是肺血管系统内一种重要的信号传导分子.慢性缺氧使肺内动脉ROS生成增多,其主要来源是NAD(P)H氧化酶和(或)线粒体电子传递链.ROS的过度产生可引起肺动脉收缩反应和肺动脉结构重塑,在慢性缺氧性肺动脉高压的发生、发展中起重要作用.     

活性氧参与益母草水苏碱抗AngⅡ诱导心肌细胞肥大的影响

目的 利用新生大鼠心肌细胞,观察益母草水苏碱对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌细胞肥大和活性氧(ROS)含量的影响.方法 培养新生大鼠心肌细胞,利用AngⅡ诱导心肌细胞肥大,观察不同浓度的益母草水苏碱对细胞肥大的影响(细胞数目、蛋白以及DNA含量),同时用H2DCFDA荧光探针标记、流式细胞仪检测ROS含量.结果 ①AngⅡ(10-6mol/L)使心肌细胞蛋白含量明显增高(P<0.05),对细胞数目和DNA含量无影响(P>0.05);②10-7 mol/L～10-4 mol/L浓度的益母草水苏碱呈剂量依赖性关系对抗AngⅡ导致的蛋白含量的增高(P<0.05);③AngⅡ可诱导心肌细胞内ROS含量增加,加入益母草水苏碱抑制了AngⅡ的这一作用.结论 益母草水苏碱可抑制AngⅡ诱导的新生大鼠心肌细胞肥大,抑制ROS含量增加可能是其作用机制之一.     

应激性高血压大鼠室旁核内白细胞介素-1β和血管紧张素Ⅱ及其受体表达及与血压的相关性

目的 研究白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)及其受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)在应激性高血压大鼠室旁核(paraventricular nucleus,PVN)中的表达,并探讨IL-1β、AngⅡ及AT1R与血压的关系.方法 对Wistar大鼠采用电击足底结合噪声的应激刺激的方法(每日2次,每次2 h,连续15 d)建立大鼠应激性高血压模型.应用免疫组化SP染色法检测PVN细胞内IL-1β、AngⅡ及AT1R的表达情况.结果 大鼠应激刺激后第3天血压开始升高,5～6 d血压达最高值(P＜0.001),免疫组化显示PVN IL-1β、AngⅡ及AT1R的阳性细胞数量明显增加,染色加深,显著高于未刺激组(P＜0.01),各表达水平与血压之间均呈正相关关系(P＜0.001).结论 PVN中IL-1β、AngⅡ及AT1R参与应激刺激引起大鼠血压升高过程,可能通过IL-1β、AngⅡ及其受体的相互作用调节血压.     

丹参酮ⅡA磺酸钠对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌细胞外信号调节激酶1/2的作用

目的 研究丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌肥大反应中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)是否有抑制作用.方法 培养新生大鼠心肌细胞,考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量、[3H]-亮氨酸掺人法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标;用免疫荧光标记法和Western-blot测定磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达.结果 1)Ang Ⅱ(1 μmol/L)处理24 h,心肌细胞[3H]-亮氨酸掺入率、蛋白含量明显增加,STS能明显抑制Ang Ⅱ介导心肌细胞[3H]-亮氨酸掺人率、蛋白含量的增加;2)Ang Ⅱ刺激心肌细胞可见胞核内出现磷酸化ERK1/2荧光染色,丹参酮ⅡA可阻断AngⅡ引起的ERK1/2活化、入核过程.3)用Ang Ⅱ(1 μmol/L)处理心肌细胞5 min,磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达即开始增加,10 min左右时最明显.4)STS剂量依赖性抑制Ang Ⅱ诱导的心肌细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达.结论 STS可以抑制Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚,其机制与抑制磷酸化ERK1/2表达有关.     

血管紧张素(1-7)通过p53/Drp1轴对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞衰老的影响

目的 观察血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)衰老的作用及机制。方法 体外用含有10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基培养HUVEC 48 h,随机分为对照组、Ang(1-7)组(1 μmol/L)、AngⅡ组(1 μmol/L)和AngⅡ＋Ang(1-7)组。通过细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色试剂盒检测各组衰老细胞数量(光学显微镜观察),通过活性氧检测试剂盒测定各组细胞活性氧(ROS)的水平,通过Western blot检测各组细胞p53和动力蛋白相关蛋白1(Drp1)的表达。结果 与对照组比较,AngⅡ组SA-β-Gal染色阳性细胞明显增多(P＜0.001),细胞ROS水平增加(P＜0.001),p53及Drp1蛋白表达量明显增加(P＜0.01)。与AngⅡ组比较,AngⅡ＋Ang(1-7)组SA-β-Gal染色阳性细胞率(P＜0.01)、细胞ROS水平(P＜0.001)、p53及Drp1蛋白表达量(P＜0.05)均降低。结论 Ang(1-7)可能通过影响p53/Drp1通路,抑制HUVEC内ROS生成,减轻AngⅡ诱导的HUVEC衰老。     

白细胞介素-1β对应激大鼠室旁核血管紧张素Ⅱ及血管紧张素Ⅰ型受体表达的影响

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)对应激大鼠室旁核(PVN)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其血管紧张素1型受体(AT1R)表达的影响。方法选取16只Wistar雄性大鼠随机分为正常组和应激组,每组8只。应激组大鼠每天给予电击足底结合噪声的应激刺激,每日2次,每次2h,连续15d,正常组不予刺激。大鼠在侧脑室给予IL-1β抗体,采用免疫组化方法观察IL-1β对AngⅡ及AT1R在PVN内的表达。结果正常大鼠侧脑室给予IL-1β(1.0mg/L或5.0mg/L)后,PVNAngⅡ及AT1R的阳性细胞数量显著增加,染色加深,显著高于对照组(P<0.01)。与正常组比较,应激大鼠AngⅡ及AT1R在PVN内有广泛的表达,阳性细胞的数量较多,但在给予IL-1β(100mg/L)抗体后,应激大鼠PVN内的AngⅡ和AT1R阳性细胞的胞浆染色面积明显减少(P<0.05或P<0.01)。结论IL-1β可能增加内源性AngⅡ的释放及上调PVN内的AT1R。     

下丘脑室旁核炎性细胞因子在依普利酮改善心力衰竭中的作用

目的探讨下丘脑室旁核(PVN)炎性细胞因子在依普利酮(EPL)改善心力衰竭中的作用。方法Wistar大鼠分为假手术组(n=6)、模型组(n=10)、吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)组(n=10)、依普利酮组(n=10)。结扎左冠状动脉前降支诱导急性心肌梗死后心力衰竭,根据分组情况分别给予PDTC[(150 mg/(kg·d)]、依普利酮[30 mg/(kg·d)]和清洁蒸馏水灌胃,假手术组只在相同位置穿线而不结扎。6周后进行血流动力学测定,留取下丘脑、血浆标本,检测PVN内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB/p65(NF-κB/p65)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的表达,并检测血浆TNF-α、去甲肾上腺素(NE)、醛固酮(ALD)水平。结果依普利酮和PDTC干预后大鼠心功能较模型组明显改善。模型组血浆ALD、NE、TNF-α水平显著升高,而依普利酮和PDTC干预后ALD、NE、TNF-α水平降低(P0.05)。模型组PVN内CRH、AngⅡ表达显著增多,依普利酮和PDTC干预后PVN内CRH、AngⅡ表达显著减少(P0.05),NF-κB/p65在依普利酮组和PDTC组的表达较模型组显著降低(P0.05)。依普利酮、PDTC可降低PVN内CRH阳性神经元表达。结论心力衰竭时大鼠PVN内炎性细胞因子表达增多,依普利酮可以改善心力衰竭大鼠心功能,与抑制PVN内炎性细胞因子过表达有关。     

蓝莓花色苷对人脐静脉内皮细胞分泌活性氧的影响

目的观察蓝莓花色苷对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌活性氧(ROS)的影响及其保护血管内皮细胞的作用机制。方法将HUVEC常规复苏传代,建立HUVEC损伤模型,采用MTT法检测细胞活性,随机分为空白对照组(Control)、AngⅡ诱导组(AngⅡ)、蓝莓花色苷组(BBA)、AngⅡ+蓝莓花色苷干预组(AngⅡ+BBA)。采用ROS测试盒测定胞内ROS水平。结果与空白对照组对比,经AngⅡ刺激后,HUVEC内的ROS水平明显增加(P<0.01)。与AngⅡ诱导组对比,AngⅡ+蓝莓花色苷干预组内ROS水平下降(P<0.05)。结论 AngⅡ可以降低HUVEC的活性,导致ROS分泌增加;蓝莓花色苷改善被AngⅡ损伤的HUVEC的活性与其降低ROS的分泌有关。     

吡哆胺对血管紧张素Ⅱ诱导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨吡哆胺对血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)诱导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及其作用机制.方法:原代培养自发性高血压大鼠胸主动脉VSMCs,选3～4代处于对数生长期的细胞进行药物干预.以未加任何干预的自发性高血压大鼠VSMCs为对照组,以10-7 mol/L AngⅡ刺激作为AngⅡ组,以不同浓度(0.1 mmol/L、1.0 mmol/L、10.0 mmol/L)吡哆胺预处理作为吡哆胺组.采用四唑盐比色法检测吡哆胺对VSMCs增殖的影响,酶联免疫吸附法检测细胞上清液晚期糖基化终末产物(AGEs)水平,流式细胞仪分析细胞内活性氧簇(ROS)水平,实时荧光半定量PCR检测晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、核因子κB( NFκB)P65、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)氧化酶P47phox的mRNA水平.结果:与对照组相比,Ang Ⅱ组促进细胞增殖(P＜0.01),升高细胞上清液中AGEs浓度(P＜0.01),使细胞内ROS生成增多(P＜0.01),胞内RAGE、NF-κB P65、NADPH氧化酶P47phox mRNA相对量的表达均较对照组显著升高(P＜0.01);1.0mmol/L和10.0 mmol/L吡哆胺预处理可以逆转AngⅡ作用下的细胞增殖(P＜0.01),降低细胞上清液中AGEs 浓度(P＜0.01),减少ROS生成(P＜0.01),使RAGE、NF-κB P65、NADPH氧化酶P47phoxmRNA表达下降(P＜0.01),且吡哆胺10 mmol/L作用比1 mmol/L更显著(P＜0.01).结论:毗哆胺可能通过抑制AGEs的形成、降低胞内ROS水平,减少RAGE、NF-κB P65、NADPH氧化酶P47phox表达,从而有效抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖作用.     

JNK在室旁核内微量注射催产素对大鼠胃缺血-再灌注调控中的作用

目的: 观察胃黏膜细胞c-Jun氨基末端激酶(JNK)在室旁核(PVN)内微量注射催产素(OT)对大鼠胃缺血-再灌注(GI-R)损伤调控中的作用及机制.方法: 将SD大鼠随机分为4组: vehicle组, OT组, OT+atosiban组, atosiban组. 采用夹闭大鼠腹腔动脉30 min, 去除动脉夹再灌注1 h的GI-R损伤模型, 于单侧PVN微量注射OT. 运用免疫组织化学及免疫印迹等实验技术, 观察了PVN微量注射OT对GI-R后胃黏膜细胞p-JNK、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.结果: 与vehicle组相比, PVN内微量注射OT(600ng)能明显减少GI-R后胃黏膜细胞p-JNK及Bax的表达(均P<0.01), 增加Bcl-2的表达( P<0.01).侧脑室给予OT受体特异性拮抗剂atosiban后,可取消OT的效应, 与OT组比较, 差异有统计学意义( F = 56.33, P<0.01;F = 145.2, P<0.01, F =49.32, P<0.01), 胃黏膜细胞p-JNK及Bax的表达较OT组明显增加, 而Bcl-2的表达减少.结论: PVN微量注射OT减轻GI-R损伤的调控机制, 在胃黏膜局部是通过抑制胃黏膜细胞p-JNK和Bax的表达, 促进Bcl-2的表达实现的.     

丹参酮ⅡA磺酸钠对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌细胞外信号调节激酶1/2的作用

目的研究丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥大反应中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)是否有抑制作用。方法培养新生大鼠心肌细胞,考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量、[3H]-亮氨酸掺入法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标;用免疫荧光标记法和Western-blot测定磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达。结果1)AngⅡ(1μmol/L)处理24h,心肌细胞[3H]-亮氨酸掺入率、蛋白含量明显增加,STS能明显抑制AngⅡ介导心肌细胞[3H]-亮氨酸掺入率、蛋白含量的增加;2)AngⅡ刺激心肌细胞可见胞核内出现磷酸化ERK1/2荧光染色,丹参酮ⅡA可阻断AngⅡ引起的ERK1/2活化、入核过程。3)用AngⅡ(1μmol/L)处理心肌细胞5min,磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)表达即开始增加,10min左右时最明显。4)STS剂量依赖性抑制AngⅡ诱导的心肌细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达。结论STS可以抑制AngⅡ诱导的心肌肥厚,其机制与抑制磷酸化ERK1/2表达有关。     

血管紧张素Ⅱ引起的靶器官损伤与单核细胞趋化因子-1

肾素-血管紧张素系统(RAS)过度激活时,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的升高在多种心血管疾病、肝脏、肾脏疾病的发病中具有重要的作用。研究表明,AngⅡ可以促进多种炎症因子的分泌,炎症因子参与了AngⅡ引起的靶器官损伤过程。其中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)被认为是介导AngⅡ致靶器官损伤的一个关键因子,它与AngⅡ参与的多种疾病有关。AngⅡ通过激活核因子-kappa B(NF-κB)调控MCP-1的基因转录。除NF-κB之外,AngⅡ还可能通过多条信号途径调节MCP-1的表达。现对AngⅡ对MCP-1的调节,及MCP-1在介导AngⅡ的靶器官损伤中的作用等问题作一综述。     

食欲刺激素抑制血管紧张素Ⅱ诱导的人脐静脉内皮细胞活性氧生成及内皮素1表达

目的 研究食欲刺激素(Ghrelin)在不同浓度下对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)体外诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性氧(ROS)生成和内皮素1(E-1)表达的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,用AngⅡ和Ghrelin联合干预细胞18 h后,采用流式细胞术测定细胞内ROS水平,放射免疫方法测定ET-1含量,用RT0-PCR法测定ET-1 mRNA表达.结果 AngⅡ明显增加HUVECs的ROS生成[(21.4±2.2)比(2.9±0.9)10-7 mol/L]和E-1分泌(111.3±7.9比43.2±9.7)ng/L,P＜0.05;Ghrelin对基础ROS及ET-1分泌无影响,但在10-8～10-6 mol/L范围内剂量依赖性地抑制AngⅡ诱导ROS生成[(14.2±0.7)、(10.4±1.4)和(6.6±0.5)10-7 mol/L]及E-1分泌[(119.3±7.2)、(101.5±2.8)和(72.3±8.8)ng/L]与AngⅡ组(40.5±12.7)ng/L比较,P均＜0.05;RT-PCR显示AngⅡ明显增加ET-1 mRNA表达,此作用可为Ghrelin所抑制,且在10-8～10-6 mol/L浓度范围呈浓度依赖性.结论 Ghelin能够抑制AngⅡ诱导的HUVECs ROS的生成,ET-1的释放及ET-1 mRNA表达,且在一定的浓度范围内(10-8～10-6 mol/L)呈浓度依赖性.     

坎地沙坦抑制盐负荷高血压大鼠肾脏氧化应激

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂坎地沙坦对盐负荷易卒中自发性高血压大鼠(SHR-SP)肾脏氧化应激和氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)表达的影响.方法 12周龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和SHRSP予8%高盐饮食.高盐WKY大鼠(n=6)作为对照组,高盐SHRSP随机分为3组:1)坎地沙坦组(Can,n=6),Can 1.0 mg/(kg·d)灌胃;2)三氯噻嗪组(TCM,n=6),TCM 1.6 mg/(kg·d);3)SHRSP组(n=6),给予等量溶媒.用尾部袖套测量法每周检测1次血压.大鼠给药2周后摘取肾脏,留取24 h尿量.采用实时定量PCR检测肾脏NAD(P)H氧化酶亚单位p22phox、p47phox和gp91phox mRNA表达,RT-PCR方法检测LOX-1、转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅳ型胶原mRNA的表达.免疫组化检测肾组织gp91phox和LOX-1蛋白表达,ELISA方法检测尿白蛋白排泄,放免法检测肾脏AngⅡ水平,天狼猩红染色观察肾组织胶原表达.结果 实验2周后,SHRSP组收缩压显著高于对照组(P＜0.01),Can和TCM均降低高盐SHRSP组的收缩压(P＜0.01),二者间的降压幅度无差别(P＞0.05).与对照组比较,肾皮质NAD(P)H氧化酶亚单位、LOX-1、TGF-β1和Ⅳ型胶原mRNA的表达、肾组织AngⅡ水平和尿白蛋白排泄,SHRSP组显著增高;Can降低高盐SHRSP肾组织AngⅡ水平(P＜0.01),下调肾皮质NAD(P)H氧化酶亚单位、LOX-1、TGF-β1和Ⅳ型胶原mRNA的表达(P＜0.01),减少尿白蛋白的排泄(P＜0.01),减轻肾组织胶原的沉积.等效降压剂量的TCM对高盐SHRSP肾组织NAD(P)H氧化酶亚单位、LOX-1的表达和尿白蛋白水平无明显影响.结论 Can对盐负荷SHRSP的肾脏保护作用,与抑制氧化应激和LOX-1表达有关,可能不一定依赖其降压作用.     

奥美沙坦通过延髓腹外侧区AT1受体减弱自发高血压大鼠血管紧张素Ⅱ引发的中枢性升压反应

目的 探讨奥美沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)外源性血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)引发的中枢性升压反应的影响以及与延髓腹外侧头端区(RVLM)血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)的关系.方法 实验大鼠分为SHR对照组(n=20,正常饮水)、奥美沙坦组(n=20,给予奥美沙坦30 mg·kg-1·d-1)和WKY组(n=20,WKY大鼠,正常饮水).4 w后,三组大鼠腹腔麻醉,开颅定位RVLM后,股动静脉插管,观察注射AngⅡ前后血压和心率.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹方法检测各组RVLM内AT1受体mRNA和蛋白的水平,并进行光密度测定.结果 饲养中奥美沙坦组鼠尾血压能够达标.RVLM微量注射AngⅡ后三组大鼠的平均动脉压(MAP)不同程度升高,奥美沙坦组MAP升高幅度明显低于SHR组[(26.3±0.75)vs(47.2±1.41)mmHg,P＜0.01],但仍高于WKY组[(21.5±0.72)mmHg,P＜0.05].三组大鼠心率(HR)均有所升高,但差异无统计学意义.奥美沙坦组RVLM内AT1受体mRNA平均光密度明显低于SHR组[(0.94±0.41) vs (2.41±0.37),P＜0.01],但高于WKY组(0.81±0.22,P＜0.05).奥美沙坦组RVLM内AT1受体蛋白平均光密度明显低于SHR组[(0.51±0.09) vs (0.93±0.07),P＜0.01)],但高于WKY组(0.43±0.03,P＜0.05).结论 长期口服奥美沙坦能够通过降低RVLM组织中AT1受体水平,显著减弱SHR RVLM区微量注射AngⅡ引起的升压反应.     

血管紧张素受体在内皮祖细胞凋亡中的作用

目的探讨在高浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致内皮祖细胞(EPCs)凋亡中,AngⅡ受体(angiotensinreceptor,AT)的作用。方法采集人脐静脉血,用6%羟乙基淀粉沉降和密度梯度离心法联合分离脐带血中的单个核细胞,培养7d,采用免疫荧光法和免疫组化法鉴定EPCs,收集贴壁细胞,加入不同浓度的AngⅡ(10~(-4)、10~(-6)、10~)-8)mol/L),干预一定时间(12、24、48h);加入浓度10~(-6)mol/L的AngⅡ,用AT受体拮抗剂干预后,分别观察各组EPCs的凋亡率。结果 AngⅡ可明显促进EPCs凋亡,与对照组(3.82%±0.10%)比较,EPCs凋亡指数随AngⅡ浓度的增高而升高(10~(-6)mol/L:18.54%±0.97%;10~(-4)mol/L:25.30%±0.99%,均为P0.05),且呈时间依赖性;单用AT1受体拮抗剂氯沙坦对细胞的凋亡无明显作用(P0.05),单用AT2受体拮抗剂PD123319有抑制作用(P0.05),两者合用时,抑制作用明显(P0.01)。结论高浓度AngⅡ可引起EPCs凋亡。氯沙坦对AngⅡ介导的EPCs凋亡影响较小,PD123319则可部分抑制AngⅡ诱导的凋亡,两者合用时抑制凋亡作用明显。     

外源性硫化氢对心肌肥大的保护作用

目的:研究外源性硫化氢(H2S)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)引起的心肌细胞肥大的保护作用。方法:将1~3日龄Wistar乳鼠心肌细胞培养48 h,随机分为正常对照组、AngⅡ组、硫氢化钠组(NaHS组),其中AngⅡ组和NaHS组的心肌细胞经AngⅡ干预48 h制备心肌肥大细胞模型,通过鬼笔环肽染色判定模型成功。NaHS组在肥大基础上用NaHS干预48 h。JC-1染色观察各组线粒体膜电位势能变化。Mitosox测定各组活性氧(ROS)水平。Western blot检测心肌细胞相关蛋白表达水平。结果:AngⅡ能够建立大鼠心肌肥大细胞模型。对照组、NaHS组线粒体膜电位势能均明显高于AngⅡ组。NaHS组ROS、NADPH氧化酶(NOX)4水平均低于AngⅡ组。结论:H2S可减少心肌细胞线粒体氧化应激,减少心肌细胞凋亡。