低氧预处理脐带间充质干细胞移植促进大鼠脊髓损伤修复

目的:评估低氧预处理脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)移植修复大鼠急性脊髓损伤的作用并初步探讨其机制。方法:分别于常氧和低氧条件下培养UCMSCs,细胞免疫荧光鉴定细胞,ELISA测定细胞脑源性生长因子(BDNF)、血管源性生长因子(VEGF)、睫状生长因子(CNTF)和肝细胞生长因子(HGF)的浓度。采用改良的Al1en’s法(2.5 g×10 cm)建立60只大鼠T10脊髓损伤模型,随机分为假手术组、模型组、低氧细胞移植组及常氧细胞移植组,每组20只,损伤后即刻移植1×10~6个细胞至低氧细胞移植组及常氧细胞移植组动物脊髓内。术前及术后每周进行运动功能BBB评分;采用免疫荧光法检测移植细胞的存活、神经细胞凋亡;采用ELISA法检测细胞移植第2、14、28 d脊髓组织肝细胞生长因子的浓度。结果:在低氧组,体外由UCMSCs分泌的BDNF、VEGF、CNTF和HGF浓度显著高于常氧组细胞。与模型组比较,细胞移植组运动功能评分和HGF含量增加,而神经细胞的凋亡率降低,但以低氧细胞移植组改变最明显。结论:低氧预处理的UMCSCs具有提高神经营养因子分泌作用,其机制可能与下调神经细胞凋亡,增加受损脊髓组织HGF有关。     

骨髓间充质干细胞移植联合吡拉西坦修复大鼠脊髓损伤

背景：单纯的干细胞移植对脊髓损伤的修复作用并不理想,主要是因为脊髓损伤后损伤区域神经组织的水肿、缺血、缺氧等引起继发性损伤造成的。 目的：在骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的同时应用吡拉西坦,观察两者对大鼠脊髓损伤恢复的影响。 方法：雌性Wistar大鼠参照改良Allen打击法制备大鼠脊髓损伤模型。随机分成3组,即单纯损伤组、骨髓间充质干细胞移植组及骨髓间充质干细胞移植联合吡拉西坦组。于伤后1,2,4,6,8周进行BBB评分和斜板实验等运动功能检测。第4周取材行病理切片苏木精-伊红染色,通过SRY-PCR检测雄性大鼠Y染色体上特有的基因SRY,从而得知移植骨髓间充质干细胞是否存活。8周后取材,行辣根过氧化物酶示踪观察,并通过透射电镜观察轴突的再生情况。 结果与结论：伤后4周,骨髓间充质干细胞移植组、联合治疗组大鼠后肢运动功能均有较明显恢复,联合治疗组较骨髓间充质干细胞移植组恢复快(P < 0.05)。单纯损伤组亦有所恢复,但程度较轻。病理切片单纯损伤组未见神经轴索通过;骨髓间充质干细胞移植组可见少量神经轴索样结构;联合治疗组可见较多神经轴索样结构。骨髓间充质干细胞移植组、联合治疗组有SRY基因表达,单纯损伤组未检测到SRY基因。辣根过氧化物酶阳性神经纤维数联合治疗组﹥骨髓间充质干细胞移植组>单纯损伤组,差异具有显著性意义(P < 0.05)。透射电镜下,骨髓间充质干细胞移植组、联合治疗组正中横断面可见新生的无髓及有髓神经纤维。提示骨髓间充质干细胞移植联合吡拉西坦促进大鼠损伤脊髓结构和功能恢复的效果明显优于单纯细胞移植组,两者联用具有协同效应。     

人脐血间充质干细胞移植修复骨髓造血损伤

文题释义：间充质干细胞：是一种多功能干细胞,由胚胎发育早期的中胚层发展而来,存在于人的各种组织、器官中,如骨、软骨、脂肪、外周血和肌肉等。骨髓组织中的间充质干细胞最多,但其在骨髓细胞中的比例仍很低,只有0.01%-1.00%,且年龄越大其含量越少,骨髓中的间充质干细胞分化能力也呈下降趋势。与骨髓相比,脐血中所含的间充质干细胞更加原始,因而有更强的增殖、分化能力。相较于骨髓间充质干细胞而言,人脐血间充质干细胞具有来源广泛、取材方便、无伦理方面的限制,使得人脐血间充质干细胞成为再生医学中的另一重要来源。骨髓造血损伤动物模型：建立骨髓造血损伤动物模型的方法有很多,主要分为物理方法、化学方法及物理化学方法等。物理方法包括各种射线,如X射线等,化学方法主要指以环磷酰胺为代表的烷化剂类化疗药物,而物理化学方法也叫混合性方法,联合应用放射线和化疗药物建立动物模型。  摘要背景：大多数研究间充质干细胞体外培养对造血干细胞的增殖作用和骨髓间充质干细胞移植可降低辐照引起的造血细胞死亡,增加骨髓细胞存活,修复造血功能,而少有研究人脐血间充质干细胞移植对骨髓造血损伤的修复。目的：探讨人脐血间充质干细胞对骨髓造血微环境的修复情况。方法：选用雄性BALB/c小鼠随机分为3组,实验组和对照组小鼠进行总剂量为6 Gy的X射线全身照射,建立骨髓造血损伤模型,正常组为未经处理的正常小鼠。实验组小鼠照射当天经尾静脉输入CM-DiL标记的人脐血间充质干细胞5×10⁶/只(0.2 mL),对照组和正常组经尾静脉输入生理盐水0.2 mL,移植后第1,5,7,14,21天观察外周血血象恢复情况和骨髓造血微环境修复情况。结果与结论：①外周血常规：移植后第1,5,7天,实验组和对照组小鼠与正常组小鼠比较,白细胞、血小板、红细胞计数及血红蛋白浓度进行性下降,第7天下降最为明显,移植后第14天三系较前有所恢复,移植后第21天基本恢复正常,与实验组相比,对照组三系下降更为明显,移植后第14天实验组较对照组恢复快;②骨髓涂片情况：移植后第1,5,7,14天实验组及对照组小鼠骨髓出现造血功能抑制,以第7天最为明显,移植后第14天骨髓增生较前有所恢复,实验组优于对照组;移植后第21天实验组及对照组小鼠骨髓造血功能恢复,与正常组相比无差异;③骨髓病理切片情况：移植后第1,5,7,14天实验组及对照组小鼠骨髓出现造血功能抑制;移植后第14天实验组及对照组小鼠的骨髓造血功能较前开始恢复,实验组小鼠的骨髓增生情况优于对照组小鼠, 移植后第21天实验组及对照组小鼠骨髓增生情况与正常组比较无差异;④结果表明,人脐血间充质干细胞对骨髓造血功能恢复均有明显促进作用。ORCID: 0000-0002-7547-9664(高坤莉) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

人脐血源性MSCs的免疫调节作用

目的 从人脐血中分离、培养间充质干细胞(MSCs)并探讨其对淋巴细胞的免疫调节作用.方法 淋巴细胞分离液分离人脐血单个核细胞,利用贴壁筛选法通过多次传代得到MSCs,流式细胞仪测定细胞表型;将获得的MSCs分别以不同数量加入到外周血混合淋巴细胞培养体系和植物血凝素(PHA)刺激的外周血淋巴细胞转化体系中,用H3-TdR标记β液体闪烁计数仪检测细胞增殖,观察脐血来源的MSCs对混合淋巴细胞反应和淋巴细胞转化的影响.结果 从人脐血中分离获得的贴壁细胞,呈成纤维样的细胞形态,CD29、CD105和CD166表达阳性,CD14、CD34和CD45表达阴性;人脐血源性MSCs在体外对混合淋巴细胞反应和PHA诱导的淋巴细胞转化均具有明显的抑制作用,抑制作用与细胞数量呈正相关.结论 从人脐血中可以成功地分离出MSCs,其对同种异体淋巴细胞具有免疫调节作用,为其作为骨组织工程异基因种子细胞来源打下基础.     

BMSC修复大鼠脊髓损伤的效果的实验研究

目的 研究骨髓间质干细胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)用于修复大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的效果. 方法 30只成年SD大鼠按改良Tuszynsl法建立大鼠脊髓完全横断伤模型,损伤水平位于T9,损伤24 h后随机分为对照组、实验组,实验组经尾静脉注射BMSCs,对照组经静脉注射PBS.利用BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)评分法进行后肢运动功能评价,并进行斜板实验. 结果 实验组运动功能改善,实验组与对照组的BBB评分比较差异有统计学意义(P<0.05),实验组的神经功能恢复较快.其中实验组大鼠在注射BMSCs 后35 d时后肢能支撑身体站立行走.斜板实验结果2组相比有显著性差异(P<0.05). 结论 骨髓间质干细胞移植组大鼠脊髓功能恢复优于对照组,说明骨髓间质干细胞用于修复大鼠SCI作用显著.     

丙戊酸联合骨髓间充质干细胞修复大鼠急性脊髓损伤可行性及其机制研究

目的 探讨丙戊酸(VPA)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)促进大鼠急性脊髓损伤(SCI)修复的可行性及其作用机制。方法 选取3～4周龄健康雄性SD幼鼠5只,在无菌条件下取出双侧干骺端完整的胫骨及股骨,截除干骺骨端,暴露骨髓腔,收集骨髓细胞体外分离培养BMSCs,对第3代BMSCs进行流式细胞仪检测鉴定,并调配成浓度为1×10⁶/mL的BMSCs细胞悬液脊髓移植备用。选取8周龄SD大鼠60只,按随机数字表法分为对照组、SCI模型组、VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组5组,每组12只。每组又按照术后取材时间不同随机分为第7、14天2个亚组,每个亚组6只。对照组12只大鼠仅显露T₁₁脊髓背侧面不作SCI模型,其他4组(48只)大鼠采用改良Allen法制备脊髓损伤模型。模型制备成功后,对照组、SCI模型组在相应脊髓损伤节段一次性注入0.9% 氯化钠注射液1 mL,同时300 mg/kg皮下注射0.9% 氯化钠注射液,每12 h 1次,直至取材;VPA治疗组、BMSCs移植组除在脊髓损伤节段一次性注入0.9% 氯化钠注射液1 mL外,分别给予皮下注射300 mg/kg VPA和1×10⁶/mL的BMSCs细胞悬液1 mL,每12 h 1次,直至取材; VPA+BMSCs联合治疗组在脊髓损伤节段一次性注入1×10⁶/mL的BMSCs细胞悬液1 mL,同时给予皮下注射300 mg/kg VPA,每12 h 1次,直至取材。术后第12 h、7天、14天各组大鼠采用BBB评分法对下肢运动功能进行评定比较。第7天、14天BBB评分后,切取损伤脊髓节段脊髓组织制备切片,进行HE染色,光学显微镜下测量对比各组脊髓空洞的面积;免疫组织化学染色,观察对比术后第14天各组凋亡相关蛋白Caspase-3的表达情况;TUNEL染色观察对比术后第14天各组脊髓神经细胞凋亡情况,并计算对比脊髓神经细胞凋亡指数(AI)。结果 (1)显微镜下观察显示,第 3 代BMSCs细胞形态均一,呈长梭形;流式细胞仪检测显示,BMSCs特异性表面标志物CD34阳性率为0.83%,CD44阳性率为99.4%,提示BMSCs。(2)组内比较:与损伤前比较,对照组损伤后BBB评分差异无统计学意义;SCI模型组、VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组损伤后不同时间点BBB评分均明显降低,但随着时间延长BBB评分逐渐升高,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。组间比较:在损伤后的不同时间点,SCI模型组、VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组BBB评分均明显低于对照组,VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组的BBB评分均高于SCI模型组,VPA+BMSCs联合治疗组BBB评分均高于VPA治疗组、BMSCs移植组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。(3)对照组脊髓组织学形态正常;VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组脊髓空洞面积均小于SCI模型组,VPA+BMSCs联合治疗组脊髓空洞面积小于VPA治疗组和BMSCs移植组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。(4)在损伤后不同时间点对照组偶见Caspase-3表达,SCI模型组、VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组Caspase-3表达明显高于对照组,VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组Caspase-3表达明显低于SCI模型组,VPA+BMSCs联合治疗组Caspase-3表达明显低于VPA治疗组和BMSCs移植组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。(5)TUNEL染色检测脊髓细胞凋亡结果显示:SCI模型组、VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组脊髓细胞凋亡指数均大于对照组,VPA治疗组、BMSCs移植组、VPA+BMSCs联合治疗组脊髓细胞凋亡指数均小于SCI模型组,VPA+BMSCs联合治疗组脊髓细胞凋亡指数均明显低于VPA治疗组和BMSCs移植组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。结论VPA 联合BMSCs移植可促进大鼠SCI修复,特别在减少脊髓空洞的形成、下调Caspase-3的表达、抑制神经细胞凋亡以及促进运动神经功能恢复等方面具有协同作用。     

舒芬太尼复合丙泊酚全身麻醉在脐血间充质干细胞移植治疗脊髓损伤中的应用

BACKGROUND:Sufentanil and propofol are both found to have good neuroprotective effects on neurological damage in clinical practice. OBJECTIVE:To investigate the effect of propofol combined with sufentanil in umbilical cord blood mesenchymal stem cells transplantation for the treatment of spinal cord injury. METHODS:Sixty-five Wistar rats were selected to make animal models of acute spinal cord injury using Allen’s method. Six hours after modeling, these rats were randomly assigned into combined group (injection of 2×10⁷/L human umbilical cord blood mesenchymal stem cell suspension (0.5 mL) plus injection of 1.0-1.5 mg/kg propofol and 0.5 μg/kg sufentanil via the tail vein), stem cell group (injection of 2×10⁷/L human umbilical cord blood mesenchymal stem cell suspension (0.5 mL) via the tail vein), or control group (injection of 30 μL of LDMEM containing 5% fetal bovine serum). S100β protein level in serum was detected in each group at 15 and 60 minutes after injection. Motor function of rat in each group was assessed by Basso Beattie Bresnahan (BBB) scoring and incline plane test at 1, 2, 4, 6, 8 weeks after modeling. Pathological changes of the spinal cord were observed at 4 weeks after modeling. Expression of vascular endothelial growth factor was detected using western blot assay at 1 and 2 weeks after modeling. RESULTS AND CONCLUSION:After 15 and 60 minutes of intervention, S100β protein level was lowest in the combined group followed by the stem cell and control groups (P < 0.05). At 2, 4, 6, 8 weeks after modeling, scores on the incline plane test and BBB were ranked as follows: combined group > stem cell group > model group (P < 0.05). At 4 weeks after modeling, severe damage to the spinal cord and few nerve fibers were found in the control group; spinal cord hyperplasia and a few of regenerated axons and PKH-26-positive stem cells appeared in the stem cell group; while in the combined group, there were a large amount of PKH-26-positive stem cells and nerve axon-like structures. At 1 and 2 weeks after modeling, the highest protein level of vascular endothelial growth factor was found in the combined group followed by the stem cell group and control group (P < 0.05). To conclude, these findings indicate that propofol and sufentanil in umbilical cord blood mesenchymal stem cell transplantation therapy can promote the recovery of hindlimb function after spinal cord injury, thereby promoting the functional recovery of rats from spinal cord injury.     

电针与骨髓间充质干细胞移植在脊髓损伤修复及再生中的作用

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后可引起损伤平面以下感觉运动功能丧失,导致患者日常生活不能自理,给家庭和社会带来极大负担.脊髓损伤后的主要病理变化包括大量的神经细胞死亡,轴突退变,弥漫性脱髓鞘,脊髓空洞及胶质瘢痕形成[1],胶质瘢痕在脊髓损伤后形成并逐渐加剧,抑制脊髓损伤的修复[2].这些不可逆的病理过程成为临床治疗脊髓损伤中最棘手的问题.随着干细胞科学的飞速发展,研究发现干细胞移植治疗脊髓损伤具有广阔的应用前景.     

不同时期局部移植人脐带间充质干细胞修复脊髓损伤的组织学观察

BACKGROUND:Spinal cord injury (SCI) is a disease causing a variety of motor and sensory dysfunctions, abnormal muscle tone and pathological reflex. Clinically, human umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation has become an employed therapy for SCI. OBJECTIVE:To investigate the effect of local transplantation of human umbilical cord mesenchymal stem cells in different time after spinal cord injury in rats. METHODS:100 SPF male adult Sprague-Dawley rats were randomly divided into five groups: blank control group, SCI group, post-SCI 3-, 7-, 21-day transplantation groups (n=20 per group). Animal models of T₁₀ SCI were made by Allen’s method in the latter four groups, and rats in the three transplantation groups were given HUCMSCs transplantation at 3, 7, 21 days after SCI, respectively. RESULTS AND CONCLUSION:Compared with the SCI group, improved motor function scores, decreased interleukin-2 level, and increased serum interleukin-10 level were observed in the three transplantation groups at 49 days after modeling, indicating SCI was improved significantly in the three transplantation groups, especially in the post-SCI 7-day transplantation group. These findings suggest that human umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation for SCI repair improves the movement function of rats, and cell transplantation at 7 days after modeling has achieved best outcomes.     

人脐血MSCs的生物学特性及其向神经细胞分化的研究进展

脐血间充质干细胞是从脐带血中分离和培养的一种多潜能成体干细胞,具有自我更新和多向分化潜能,在一定条件下可以分化成为神经细胞。脐血间充质干细胞的这些特性吸引了许多学者用它来治疗神经系统疾病如神经退行性疾病,神经损伤和中风等,并取得了一定进展。本文就脐血间充质干细胞的分离纯化和培养方法、生物学特性以及向神经细胞的分化作一简要综述。     

人脐血间充质干细胞移植对脑创伤大鼠的免疫调节研究

目的 探讨人脐血间充质干细胞(HUCBMSCs)移植对脑损伤大鼠的免疫调节和脑保护作用机制,为脑损伤的干细胞治疗提供依据.方法 用Brdu标记的HUCBMSCs经鼠尾静脉植入大鼠创伤性脑损伤模型.采用NSS方法行神经损伤严重程度评分.正常组不作任何处理,在造模后第1天、第2天、第3天、第5天和第7天检测和比较假伤组、损伤组和移植组大鼠血清免疫指标的变化(炎症介质、全血在脂多糖刺激后合成TNF-α的能力).结果 Brdu阳性的MSCs在移植组大鼠脑损伤周边区明显聚集.除第1天外,各时间点移植组大鼠神经功能得分较损伤组降低,差异有统计学意义(t=3.35、5.70、5.40、4.93,P均＜0.05).移植组大鼠在损伤后各个时间点血清IL-6水平较损伤组显著降低(t=4.72、3.53、3.77、2.32、2.43,P均＜0.05),在损伤后第1天血清IL-8水平较损伤组显著降低(t=2.26,P＜0.05),而移植组IL-10经历短暂下降后出现明显的回升趋势,在后期(第5天和第7天)血清IL-10水平甚至高于假伤组(t=2.61、2.81,P均＜0.05).移植组大鼠全血体外合成TNF-α能力在损伤早期虽然出现迅速下调,但中后期可以观察到这个指标上调的趋势,均高于同时间点损伤组大鼠水平(t=2.12、2.53、2.77、4.32、7.43,P均＜0.05).结论 未应用免疫抑制剂的情况下,经尾静脉注射HUCBMSCs可迁移至免疫功能健全的大鼠脑创伤灶周边区,HUCBMSCs能降低严重创伤的高炎性反应,并有效扭转创伤后的免疫抑制状态,有助于神经功能改善.     

脐带间充质干细胞治疗脊髓损伤临床分析

目的观察脐带间充质干细胞（UC-MSCs）鞘内注射治疗脊髓损伤（SCI）的临床效果及安全性。方法对2008年1月至2010年10月收治的22例SCI患者,给予UC—MSCs鞘内注射治疗,细胞数1×10^6个／（kg·次）,1次／周,4次为1个疗程,其中4例接受2个疗程,1例接受3个疗程,余均接受1个疗程。采用美国脊髓损伤协会制定的脊髓损伤神经功能评分标准（ASIA标准）对患者治疗前后神经功能进行评定,采用国际神经修复学会脊髓损伤功能评价量表（IANR—SCIRFS）对患者治疗前后日常生活活动能力进行评定。结果22例患者中13例有效,9例无效。不完全性SCI患者有效率达81．25％,完全性SCI的6例患者均无效。有5例有效的患者接受了2～3个疗程治疗,疗效均有进一步的提高。有效患者多表现为运动和／或感觉功能改善,大小便控制能力增强。22例患者治疗后1个月与治疗前比较,痛觉、触觉、运动、日常生活活动能力评分均有明显升高（P〈0．01）。治疗后常见的不良反应有头痛（1例）、腰痛（1例）,均在1～3d内消失。随访3个月至3年,无治疗相关不良事件发生。结论UC—MSCs鞘内注射治疗是安全的,可以改善大部分不完全性SCI患者的神经功能,提高这些患者的生活质量。     

Transplantation of mononuclear cells from human umbilical cord blood promotes functional recovery after traumatic spinal cord injury in Wistar rats

Cell transplantation is a promising experimental treatment for spinal cord injury. The aim of the present study was to evaluate the efficacy of mononuclear cells from human umbilical cord blood in promoting functional recovery when transplanted after a contusion spinal cord injury. Female Wistar rats (12 weeks old) were submitted to spinal injury with a MASCIS impactor and divided into 4 groups: control, surgical control, spinal cord injury, and one cell-treated lesion group. Mononuclear cells from umbilical cord blood of human male neonates were transplanted in two experiments: a) 1 h after surgery, into the injury site at a concentration of 5 x 10⁶ cells diluted in 10 µL 0.9% NaCl (N = 8-10 per group); b) into the cisterna magna, 9 days after lesion at a concentration of 5 x 10⁶ cells diluted in 150 µL 0.9% NaCl (N = 12-14 per group). The transplanted animals were immunosuppressed with cyclosporin-A (10 mg/kg per day). The BBB scale was used to evaluate motor behavior and the injury site was analyzed with immunofluorescent markers to label human transplanted cells, oligodendrocytes, neurons, and astrocytes. Spinal cord injury rats had 25% loss of cord tissue and cell treatment did not affect lesion extension. Transplanted cells survived in the injured area for 6 weeks after the procedure and both transplanted groups showed better motor recovery than the untreated ones (P < 0.05). The transplantation of mononuclear cells from human umbilical cord blood promoted functional recovery with no evidence of cell differentiation.     

人脐带血来源的间充质干细胞特性及对卵巢癌细胞趋化作用的研究

目的为人脐带血（HUCD）可成为间充质干细胞（MSCs）重要新来源提供依据,着重研究对人卵巢癌细胞的趋化作用,为临床靶向治疗卵巢癌提供新的载体。方法征求足月健康的自然产孕妇同意,获得脐带血,从中提取MSCs。获得稳定增殖传代的MSCs后,鉴定其生物特性和抗原表型,将其与人卵巢癌HO-8910细胞共培养,探讨其对卵巢癌细胞的趋化作用。结果成功从HUCD中提取MSCs,筛选出稳定传代的细胞系。其生物学特性与骨髓来源的MSCs一样具有多向细胞分化潜能,可诱导分化成脂肪细胞、成骨细胞;同时还具有相同的免疫表型,CD29、CD44、CD105阳性表达,CD13、CD14、CD34、CD45阴性表达,并且其免疫表型不随着细胞传代而改变。HUCD来源的MSCs与HO-8910细胞共培养时发现,MSCs对其有趋化作用。结论证实HUCD可以作为MSCs的新的重要来源。实验发现MSCs对人卵巢癌细胞株HO-8910有明显趋化作用,这一发现可能为卵巢肿瘤靶向治疗提供了新的有效载体。     

脐带血间充质干细胞的研究进展

脐带血中存在着丰富的造血干细胞,在移植方面发挥重要作用,在脐血中是否还存在间充质干细胞却有争议,有的学者认为其中有间充质干细胞,且与骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)的形态、表面标志及分化潜能非常相似,有的学者认为含量较低,难以传代培养扩增,总结了近5年来国内外关于脐血间充质干细胞的研究情况,为脐血的充分利用提供更多的资料。     

Embryonic stem cells inhibit expression of erythropoietin in the injured spinal cord

Recent observations have demonstrated neuroprotective role of erythropoietin (Epo) and Epo receptor in the central nervous system. Here we examined Epo function in the murine spinal cord after transplantation of pluripotent mouse embryonic stem (ES) cells pre-differentiated towards neuronal type following spinal cord injury. Expression of Epo was measured at both mRNA and protein levels in the ES cells as well as in the spinal cords after 1 and 7 days. Our data demonstrated that expression of Epo mRNA, as well as its protein content, in ES cells was significantly decreased after differentiation procedure. In the spinal cords, analysis showed that Epo mRNA level was significantly decreased after 1 day of ES cell injections in comparison to media-injected control. Epo protein level detected by Western blot was diminished as well. Examination of Epo production in the injured spinal cords after media or ES cells injections by indirect immunofluorescence showed increased Epo-immunopositive staining after media injections 1 day after injection. In contrast, ES cell transplantation did not induce Epo expression. Seven days after ES cell injections, Epo-immunopositive cells’ distribution in the ipsilateral side was not changed, while the intensity of immunostaining on the contralateral side was increased, approaching levels in control media-injected tissues. Our data let us to presume that previously described immediate positive effects of ES cells injected into the injured zone of spinal cord are not based on Epo, but on other factors or hormones, which should be elucidated further.     

脐血来源间充质干细胞可抑制异体T细胞的反应

目的研究脐血间充质干细胞(HUCB-MSCs)对异体T细胞的抑制作用。方法体外培养HUCB-MSCs,流式细胞术测表面标记;取正常人外周血,免疫磁珠分离CD3+T细胞,将分离的CD3+T与HUCB-MSCs 1∶1混合培养5 d,PHA刺激或不刺激,采用3H-TdR掺入法观察T细胞增殖,ELISA方法检测细胞因子,流式细胞术观察细胞凋亡。结果 HUCB-MSCs呈纺锤样的细胞形态,不表达CD14、CD34、CD45、HLA-DR,而表达CD29、CD44、HLA-ABC。HUCB-MSCs抑制PHA引起的T细胞增殖(5 230±550 vs 10 500±800 counts/min,P<0.001);HUCB-MSCs还能抑制异体T细胞分泌IFN-γ(510±60 vs 1 580±100 pg/mL,P<0.001)和TNF-α(590±20 vs 1 180±30 pg/mL,P<0.001),上调IL-4(16.3±8.2 vs 4.1±1.8 pg/mL,P<0.001)和IL-10(105±5 vs 17±2 pg/mL,P<0.001)分泌;HUCB-MSCs不诱导T细胞的凋亡。结论 HUCB-...     

人脐血来源MSCs的主要生物学特性的研究

目的：探讨人脐血间充质干细胞（MSCs）分离、纯化、扩增、表面标志、免疫表型及其造血生长因子（HGFs）分泌等生物学特性方法：(1) Ficoll法分离、纯化人脐血、成人骨髓和胎儿骨髓MSCs，动态观察不同来源MSCs的生长状况。(2) 流式细胞仪检测脐血和骨髓MSCs表面CD34、CD45、CD14、CD29、CD44、CD105、CD166、CD80、CD86、CD40和CD40L的表达。(3) ELISA法检测脐血和骨髓MSCs培养上清中SCF、TPO、FLT-3L和IL-6的分泌水平。结果：(1) 所有骨髓标本中均可分离纯化出MSCs，而15份脐血中仅4份分离纯化出MSCs，脐血MSCs和骨髓MSCs的细胞形态无明显差异,脐血MSCs原代培养所需要的单个核细胞（MNC）量为骨髓MSCs的3倍，且其原代培养的增殖速度较慢，但脐血MSCs传代培养的增殖速度和骨髓相似。(2) 脐血MSCs和骨髓MSCs表面标志无差异，均不表达造血细胞表面标志以及与免疫识别有关的表面抗原。(3) 脐血和骨髓MSCs分泌SCF、TPO、FLT-3L和IL-6的水平相似。结论： (1)脐血和骨髓同样可以分离、纯化MSCs，但脐血中MSCs的含量少，且大部分脐血中不含MSCs。(2)纯化的脐血MSCs扩增能力、表面标志、免疫学表型及HGFs分泌水平和骨髓MSCs相似。     

脐血细胞神经分化与移植的研究进展

自20年前Nakahata等发现人脐血中含有丰富的造血干细胞以来,脐血造血干,祖细胞的研究取得了很大的进展,并已成为一个新的造血干细胞来源。近来研究表明,脐血中的部分细胞在体外培养或体内移植后可分化为神经细胞,并可促进受损动物的神经功能恢复,本文将对脐血源神经细胞的研究进展进行探讨。