转化生长因子β及其受体在翼状胬肉中基因表达的定量检测

目的：定量检测转化生长因子-β（Transforming Growth Factor-β,TGF-β）及其受体在翼状胬肉和正常球结膜组织中的表达水平,探讨其在翼状胬肉病变发生发展过程中的作用。方法：随机选取翼状胬肉患者30例,手术切除翼状胬肉组织,并留取患眼角膜上缘上方的正常球结膜组织作为自身对照,实时荧光定量PCR技术分析翼状胬肉和正常球结膜组织中TGF-β1、TGF-β2及其I型和Ⅱ型受体相对于内参照基因18S的相对mRNA含量。结果：TGF-β1在正常球结膜和翼状胬肉组织中平均表达水平分别为4．26×10^-7±1．45×10^-7和10．67×10^-7±7．47×10^-7,TGF-β2在正常球结膜和翼状胬肉组织中表达水平分别为1．08×10^-10±0．68×10^-10和8．23×10^-11±6．63×10^-11。TGF-βI型受体在正常球结膜和胬肉组织中平均表达水平分别为0．003015±0．0036和0．000379±0．000281,TGF-βⅡ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平分别为5．33×10^-5±5．05×10^-5和1．002×10^-5±9．04×10^-6。TGF-β1在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为2．9±2．8,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGF-β2在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为7．5±1．4,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGF-βI型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。TGF-βⅡ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中表达水平明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：TGF-β1和TGF-β2在胬肉组织中表达水平均高于正常球结膜组织。TGF-β1在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均远高于相应组织中的TGF-β2表达,但是TGF-β2在胬肉中表达水平升高变化幅度高于TGF-β1。TGF-βI型和Ⅱ型受体在胬肉组织中表达水平均低于正常球结膜组织。TGF-I型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均高干相应组织中的TGF-βⅡ型受体表达,提示胬肉组织中I型、Ⅱ型受体表达的降低可能导致TGF-β分泌的增加,从而导致翼状胬肉病变的发生发展,提示转化生长因子-β及其受体在翼状胬肉病变发生发展中可能起着重要的作用。     

转化生长因子β及其受体在翼状胬肉中基因表达的定量检测(英文)

目的:定量检测转化生长因子-β(Transforming Growth Fac-tor-β,TGF-β)及其受体在翼状胬肉和正常球结膜组织中的表达水平,探讨其在翼状胬肉病变发生发展过程中的作用。方法:随机选取翼状胬肉患者30例,手术切除翼状胬肉组织,并留取患眼角膜上缘上方的正常球结膜组织作为自身对照,实时荧光定量PCR技术分析翼状胬肉和正常球结膜组织中TGF-β1、TGF-β2及其I型和II型受体相对于内参照基因18S的相对mRNA含量。结果:TGF-β1在正常球结膜和翼状胬肉组织中平均表达水平分别为4.26×10-7±1.45×10-7和10.67×10-7±7.47×10-7,TGF-β2在正常球结膜和翼状胬肉组织中表达水平分别为1.08×10-10±0.68×10-10和8.23×10-11±6.63×10-11。TGF-βⅠ型受体在正常球结膜和胬肉组织中平均表达水平分别为0. 003015 ±0. 0036和0. 000379 ±0.000281, TGF-βⅡ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平分别为5.33×10-5±5.05×10-5和1.002×10-5±9.04×10-6。TGF-β1在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为2.9±2.8,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-β2在胬肉组织中表达水平比正常结膜中表达水平升高倍数为7.5±1.4,差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-βⅠ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-βⅡ型受体在胬肉组织中表达水平比正常球结膜中表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:TGF-β1和TGF-β2在胬肉组织中表达水平均高于正常球结膜组织。TGF-β1在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均远高于相应组织中的TGF-β2表达,但是TGF-β2在胬肉中表达水平升高变化幅度高于TGF-β1。TGF-βⅠ型和Ⅱ型受体在胬肉组织中表达水平均低于正常球结膜组织。TGF-βⅠ型受体在正常球结膜和胬肉组织中表达水平均高于相应组织中的TGF-βⅡ型受体表达,提示胬肉组织中Ⅰ型、Ⅱ型受体表达的降低可能导致TGF-β分泌的增加,从而导致翼状胬肉病变的发生发展,提示转化生长因子-β及其受体在翼状胬肉病变发生发展中可能起着重要的作用。     

翼状胬肉相关致病因子的研究进展

翼状胬肉(ptergium)是在多种因素和因子的共同作用下形成的眼表疾病,主要的发病机制与紫外线照射及辐射后所引起的一系列改变有关,具体过程至今仍不明确。血管内皮生长因子(VEGF)升高、炎症反应加重、新生血管的产生、氧化应激反应、上皮-间质细胞转化(EMT)、抑癌基因失活等是目前公认的翼状胬肉发病的原因,但各个因素及因子的具体作用过程仍有待研究。探究其具体相关因素及其在翼状胬肉发病过程中的作用,有助于为临床诊治提供靶向治疗方案及有效预防措施。     

TGF-β1、TGF-βRⅡ及Smad4蛋白在原发性翼状胬肉中的表达

目的研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、转化生长因子-β1Ⅱ型受体(transforming growthfactor-β1receptorⅡ,TGF-βRⅡ)和Smad4蛋白在原发性翼状胬肉组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法检测56眼翼状胬肉头部组织及8眼正常结膜组织中TGF-β1、TGF-βRⅡ及Smad4蛋白的表达,阳性表达率用阳性细胞占细胞总数百分率的平均值表示,利用统计学软件SPSS13.0分析本研究结果。结果TGF-β1在胬肉头部侵入角膜缘≤1mm、2~3mm和≥4mm翼状胬肉组和正常结膜组的阳性表达率利用分别为(21.08±3.63)%、(20.12±2.68)%、(21.55±3.07)%、(12.36±1.97)%;TGF-βRⅡ的表达率分别为(15.35±9.37)%、(21.07±10.96)%、(15.48±8.80)%、(33.77±9.31)%,Smad4蛋白的表达率分别为(14.38±4.02)%、(13.05±3.50)%、(13.13±4.10)%、(38.69±5.70)%,TGF-β1在各翼状胬...     

TGF-β1和HSP-47在翼状胬肉中的表达及其意义

目的：研究转化生长因子β1（transforming growth factor -β1, TGF-β1）和热休克蛋白47（heat shock protein 47,HSP-47）在翼状胬肉和正常结膜组织表达的差异,从而探讨它们在翼状胬肉发生、发展中的作用,为翼状胬肉的治疗提供新的方向。 方法：采用免疫组化方法比较翼状胬肉和正常结膜组织中TGF-β1和HSP-47的表达差异。 结果：TGF-β1在翼状胬肉的鳞状上皮细胞中的表达水平明显高于正常结膜组织,在其基质层和内皮层有中等量表达,同时,在翼状胬肉纤维层的炎性细胞和血管内皮细胞中TGF-β1也有明显表达。与此相反,在正常结膜组织中TGF-β1表达较弱。 HSP-47在翼状胬肉的固有层高表达,在上皮细胞表达较弱,在正常结膜组织中则未见明显表达。 结论：相比正常结膜组织,TGF-β1和HSP-47均在翼状胬肉组织中有较高水平的表达,因此推测二者在诱导翼状胬肉的发生、发展中起着重要的作用。     

翼状胬肉患者泪液中表皮生长因子的含量分析

目的研究表皮生长因子（EGF）在翼状胬肉发生发展中的作用。方法用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测60例单眼不同时期翼状胬肉患者患眼与对侧健康眼泪液中EGF的含量,并进行统计学分析。结果静止期翼状胬肉患眼组泪液中EGF的含量与对照组的差别无统计学意义（P〉0.05）;进行期翼状胬肉患眼组泪液中EGF的含量与对照组的差别有统计学意义（P〈0.01）;进行期翼状胬肉组泪液中EGF的含量与静止期翼状胬肉组的差异有统计学意义（P〈0.05）。结论翼状胬肉的发展可能与泪液中的EGF水平有关。     

基质金属蛋白酶-1及其抑制剂和转化生长因子-β1在翼状胬肉中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶1(matrixmetalloproteinase1,MMP1)及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子1(tissueinhibitorofmetalloproteinase1,TIMP1)和影响两者作用的转化生长因子β1(transforminggrowthfoctorβ1,TGFβ1)在翼状胬肉头部组织中的表达及意义。方法采用免疫组化技术检测MMP1、TIMP1及TGFβ1在翼状胬肉头部(22例)和正常结膜(12例)中的表达。结果MMP1与TGFβ1在翼状胬肉头部组织中的阳性表达率显著高于正常结膜(P<0.01),而TIMP1的表达差异无显著性(P>0.05)。经Spearman等级相关分析可知,翼状胬肉中MMP1与TGFβ1阳性表达间存在正相关(r=0.625,P<0.01);TIMP1与TGFβ1阳性表达间无相关性(r=-0.0512,P>0.05)。结论MMP1,TIMP1及TGFβ1可能积极参与翼状胬肉发生、发展过程中的基质重构与角膜Bowman’s膜的破坏。     

血管内皮生长因子受体-1在初发与复发翼状胬肉中的表达

目的探讨血管内皮生长因子受体-1(vascular endothelial growth factor receptor-1,VEGFR-1)在初发与复发翼状胬肉中的表达差异及其相关性。方法用免疫组织化学方法检测初发和复发翼状胬肉组织中VEGFR-1(各30例)的表达,并与20例正常角膜缘结膜组织对照。结果 VEGFR-1主要位于复发翼状胬肉血管内皮细胞,多样本比较秩合检验(Kruskal-Wallis法,即H值检验)结果显示:正常结膜、初发和复发翼状胬肉中VEG-FR-1表达差异有统计学意义(χ2=21.75,P=0.000)。按α=0.05水准,复发翼状胬肉中的表达最多(平均秩为50.83),其次为初发胬肉(平均秩为36.77),正常结膜组织表达最少(平均秩为25.05)。结论 VEGFR-1在复发胬肉中更高表达,提示血管组织增生可能是翼状胬肉复发的重要因素。     

翼状胬肉术后滴用重组人表皮生长因子的疗效

目的观察翼状胬肉切除加干细胞移植术后重组人表皮生长因子（rhEGF）滴眼液的效果。方法静止期翼状胬肉200例（200眼），均在手术显微镜下切除翼状胬肉加干细胞移植。采用双盲法，设实验组100例（100眼），术后滴rhEGF滴眼液和迪可乐滴眼液或眼膏，对照组100例（100眼），术后不滴rhEGF滴眼液，其他同实验组。观察术后角膜刺激症状，角膜上皮愈合情况及复发情况。结果角膜刺激症状消失时间，实验组为12小时、对照组为1天。角膜上皮愈合时间，实验组为3天，对照组为6天，复发情况，实验组为2％，对照组为3％。结论rhEGF滴眼液能明显控制角膜刺激症状，促进角膜上皮细胞再生与修复，且复发率稍低。     

转化生长因子-β与葡萄膜黑色素瘤

转化生长因子-β(TGF-β)是一种具有多种生物学功能的多肽类生长因子。TGF-β在肿瘤的发生过程中起着双向调节作用,同时TGF-β对细胞的增殖与分化、细胞外基质的产生、血管的生成及机体免疫系统均起着重要作用。近年研究TGF-β的异常过表达以及信号传导通路的异常与葡萄膜黑色素瘤生长和侵袭转移能力密切相关。就TGF-β的结构、功能以及它在葡萄膜黑色素瘤发生过程中的作用进行综述。     

转化生长因子-β与青光眼术后滤过泡瘢痕化的关系

青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化是手术失败的最主要原因.转化生长因子-β( TGF-β)能诱导人Tenon囊成纤维细胞表型转化,进一步迁移、增殖,合成细胞外基质,与滤过泡瘢痕化有重要关系.近年来在细胞因子及基因水平抗纤维化方面的研究取得一定进展,通过TGF-β抗体(如重组抗人TGF-β2单克隆抗体、CAT-152)、TGF-β抑制剂(如Decorin、糜酶抑制剂、SB-431542等)以及基因水平(如TGF-β的反义寡核苷酸等)来抑制TGF-β信号通路(如ALK5/Smad2/Smad3通路、MAPK通路、Rho-ROCK通路、PI3 K-AKT通路等)的重要靶点或蛋白表达,从而达到调控滤过泡瘢痕形成的作用.但目前很多药物的应用均缺乏临床试验支持,同时也缺少不同药物比较的研究.探索TGF-β细胞信号转导不同通路之间的关系,并寻找调控滤过道瘢痕化的最佳靶点是今后的研究方向.     

核心蛋白多糖抑制翼状胬肉成纤维细胞增生的实验研究

目的　观察核心蛋白多糖对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞（ｈｕｍａｎｐｔｅｒｙｇｉｕｍｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ,ＨＰＦ）增生和凋亡的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉切除术后复发的新方法。方法　采用组织块法体外培养ＨＰＦ,将处于对数生长期的细胞用于实验。将０．１ｍｇ?Ｌ－１、１．０ｍｇ?Ｌ－１、１０．０ｍｇ?Ｌ－１的Ｄｅｃｏｒｉｎ分别加入细胞培养基中培养２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ。ＭＴＴ比色法分别测定不同浓度的Ｄｅｃｏｒｉｎ作用于ＨＰＦ不同时间后的细胞生长抑制率,流式细胞仪测定细胞周期时相变化,免疫组织化学法染色ＰＣ-ＮＡ检测细胞生长活性。结果　ＭＴＴ结果显示不同浓度组Ｄｅｃｏｒｉｎ作用ＨＰＦ２４ｈ细胞生长抑制率分别为（７．８１±１２６）％、（１９５２±２．１４）％、（４２．６９±１．６２）％,作用４８ｈ分别为（１０．１９±２．７４）％、（２２．２８±０．９７）％、（４５．７３±０．８２）％,作用７２ｈ分别为（２０．４９±１．３９）％、（２９．５０±２．４７）％、（５９．４１±１．７１）％。随着药物浓度的逐渐增高和作用时间的延长,细胞生长抑制率逐渐增加,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。流式细胞仪检测各浓度Ｄｅｃｏｒｉｎ组ＨＰＦ中Ｇ０／Ｇ１期细胞比率均较空白对照组高,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。当Ｄｅｃｏｒｉｎ浓度在０．１～１０．０ｍｇ?Ｌ－１范围内作用ＨＰＦ７２ｈ,均能够明显抑制细胞表达ＰＣＮＡ（均为Ｐ＜０．０５）。结论　Ｄｅｃｏｒｉｎ可以抑制ＨＰＦ的增生,诱导其凋亡,且呈明显的剂量和时间依赖性,有望成为防治翼状胬肉的药物之一。     

转化生长因子β与视网膜病变

转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)是一类具有多种生物学功能的多肽生长因子,能调节多种细胞的生长、分化和移行,参与细胞外基质成分的合成和免疫调节,它不仅是正常眼内组织代谢及功能的基本因素,在许多眼内病理过程中它也起着重要作用。文章就TGF-β的结构、功能以及它与视网膜疾病关系作一简要综述。     

转化生长因子β信号通路作为防治后发性白内障的靶点

白内障术后晶状体后囊膜混浊（posteriorcapsularopacification,PCO）（后发性自内障）是现代白内障术后最常见的并发症,防治PCO是保障白内障手术远期疗效的关键。术中残留的晶状体上皮细胞增生、移行和上皮一间质转化是PCO形成的细胞学基础。转化生长因子p（transforminggrowthfactorbeta,TGF一8）通过正性调控晶状体上皮细胞的增生、迁移、转分化及凋亡等,促进了PCO的发生发展过程。设想可通过对TGF—B、TGF—p受体及其下游通路中的Smad蛋白和基质金属蛋白酶等进行干预来防治PCO。采用结膜囊涂抹及前房注射TGF—B抗体、基质金属蛋白酶抑制剂及结缔组织生长因子反义寡核苷酸或特异性抗体等将成为PCO防治的新途径。     

Transforming growth factor-beta2 utilizes the canonical Smad-signaling pathway to regulate tissue transglutaminase expression in human trabecular meshwork cells

Transforming growth factor-beta2 (TGF-β2) is elevated in the aqueous humor of patients with glaucoma. This growth factor is known to increase extracellular matrix (ECM) deposition in the trabecular meshwork (TM) as well as increase intraocular pressure (IOP) in perfused human cultured anterior eye segments. In addition overexpression of TGF-β2 in the mouse TM leads to elevated IOP. Exogenous TGF-β2 also increases tissue transglutaminase (TGM2) protein levels and enzyme activity in TM cells. TGM2 is a calcium-dependent enzyme that mediates cross-linking of ECM proteins, thus making ECM proteins resistant to enzymatic degradation and physical breakdown. We have investigated the signaling pathway by which TGF-β2 induces TGM2 in human TM cells. Primary cultures of human TM cells (N = 6) were treated for 48 h with TGF-β2 (0–10 ng/ml) in serum-free medium. TGM2 enzyme activity differences between non-treated and TGF-β2 treated TM cells were studied using a biotin cadaverine assay. Endogenous TGF-β2 protein levels were examined in normal trabecular meshwork (NTM) and glaucomatous trabecular meshwork (GTM) cell strains. Immunohistochemistry was used to evaluate the expression and co-localization of TGF-β2 and TGM2 in NTM and GTM tissues. Activation of Smad3 signaling pathway was evaluated by western immunoblot analysis using phospho-specific antibodies following exogenous TGF-β2 treatment. Pharmacological specific inhibitor of Smad3 (SIS3) and short interfering (si)RNAs were used to suppress Smad3 activity and CTGF gene expression respectively. Endogenous TGF-β2 levels were significantly elevated in cultured GTM cells (p < 0.05) when compared to NTM cells. Immunohistochemistry studies also demonstrated elevated expression and co-localization of both TGF-β2 and TGM2 in glaucoma human TM tissues. Exogenous TGF-β2 increased both TGM2 protein levels and enzyme activity in TM cells. Phosphorylation of Smad3 was stimulated in TM cell strains by exogenous TGF-β2. TGF-β2 induction of TGM2 was not inhibited with selective siRNA knockdown of CTGF. In contrast, a specific inhibitor of Smad3 (SIS3) and siRNA knockdown of Smad3 (p < 0.05) suppressed TGF-β2 induction of TGM2. This study demonstrated that TGF-β2 induction of TGM2 can be mediated via the canonical Smad-signaling pathway but does not appear to involve CTGF as a downstream mediator. Regulation of the Smad-signaling pathway in the TM may be useful in the therapy for glaucoma associated with aberrant TGF-β2 signaling.     

Anti-fibrotic effect of rosmarinic acid on inhibition of pterygium epithelial cells

AIM: To investigate the anti-fibrosis effect of rosmarinic acid (RA) in pterygium epithelial cells (PECs) to determine if RA is a potent agent for treating pterygium. METHODS: The PECs (1×104 cells/mL) were treated with 100 μmol/L of RA for 1, 3 and 6h. After RA treatment, the cell viability was determined by staining with acridine orange/DAPI and analysis via a NucleoCounter NC-3000. The protein expression levels of type I collagen, transforming growth factor beta-1 (TGF-β1), TGF-β type II receptor (TGF-βRII), p-Smad1/5, p-Smad2, p-Smad3, and Smad4 of the cell lysates were measured by Western blot analysis. RESULTS: The cell viability of PECs was significantly decreased after RA treatment (P<0.01). As the result, RA reduced the protein expression of type I collagen and TGF-β1 of PECs. Additionally, RA also inhibited TGF-β1/Smad signaling by decreasing the protein expressions of TGF-βRII, p-Smad1/5, p-Smad2, p-Smad3, and Smad4. CONCLUSION: This study demonstrate that RA could inhibit fibrosis of PECs by down-regulating type I collagen expression and TGF-β1/Smad signaling. Therefore, RA is a potent therapeutic agent for the treatment of pterygium.     

翼状胬肉中MMP-2,TIMP-2和TGF-β1的表达意义

目的:探讨MMP-2及其抑制剂TIMP-2和影响它们作用的TGF-β1在翼状胬肉中的表达及意义。方法:采用Maxvision免疫组化技术检测在20例翼状胬肉和10例正常球结膜中MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的表达,并比较两组中表达的差异。结果:MMP-2和TGF-β1在翼状胬肉中的表达的阳性率显著高于正常球结膜中它们的阳性表达率(z=-4.618,-4.376,P<0.01),而TIMP-2在两组中的表达差异无显著性(z=-1.319,P>0.05)。经Spearman等级相关检验分析,在翼状胬肉中,MMP-2和TGF-β1的阳性表达率存在正相关(r=0·686,P<0.01);而MMP-2和TGF-β1与TIMP-2阳性表达率之间无相关(r=-0.410,-0.143,P>0.05)。结论:TGF-β1介导的MMP-2和TIMP-2表达失衡在翼状胬肉的发生、发展及侵犯角膜过程中发挥着重要的作用。