含Arg－Arg寡肽的液相合成及活性研究

Ａｒｇ－Ａｒｇ二肽的胍基可以为ＮＯ合成酶利用，产生ＮＯ样舒血管效应．Ａｒｇ－Ａｒｇ的羧端用－ＣＨ＿３封闭，活性降低．Ａｒｇ－Ａｒｇ的两个α－氨基用丙二酰基或丁二酰基封闭，活性进一步降低，为了观察Ａｒｇ－Ａｒｇ的氨端用氨基酸封闭可能造成的影响，本文合成了Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ａｒｇ和Ｓｅｒ－Ｌｅｕ－Ａｒｇ－Ａｒｇ两种寡肽，测定了它们的抗血小板聚集作用和血管舒张作用．结果表明，Ａｒｇ－Ａｒｇ的氨端用氨基酸或寡肽封闭，对舒血管作用无反面影响。合成的两种寡肽还可以有效地抑制ＡＤＰ诱导的血小板聚集．实验表明，设计抗血栓寡肽时，羧端引入Ａｒｇ－Ａｒｇ二肽可能会有益处．     

ADRB1 Arg389Gly多态性对比索洛尔疗效影响的Meta分析

目的 探索ADRB1 Arg389Gly多态性对比索洛尔疗效的影响,为比索洛尔个体化药物治疗提供参考。方法 从PubMed、Embase、Cochrane Library、中国生物医学文献服务系统、中国知网、万方等数据库系统性搜索与比索洛尔和ADRB1 Arg389Gly多态性相关的文献,检索时间为建库至2023年5月。根据研究制定的纳入与排除标准筛选、提取相关文献并进行文献质量评估。使用RevMan 5.4软件对相关结局指标进行Meta分析。结果 最终纳入7项研究,共计1 339人次。其中4项研究涉及比索洛尔治疗前后收缩压（SBP）和舒张压（DBP）的变化量（ΔSBP和ΔDBP）,有4项研究涉及治疗前后左室射血分数（LVEF）的变化量（ΔLVEF）。研究结果显示,比索洛尔对ADRB1 Arg389Gly野生组（AA）和突变组（AG+GG）血压改善的差异均无统计学意义{ΔSBP[SMD=0.17,95%CI(-0.97,1.31),P=0.77]、ΔDBP[SMD=-0.01,95%CI(-0.65,0.62),P=0.97]};比索洛尔对两组ΔLVEF改善的差异亦无统计学意义[SMD...     

探讨皖北地区孕妇人群中p.Arg435His-IgG3同种异型的阳性率

目的:探索皖北地区孕妇人群中IgG3同种异型p.Arg435His(p.Arg435His-IgG3)的阳性率,为后续进一步研究p.Arg435His-IgG3与胎儿和新生儿溶血病的发生发展奠定理论基础。方法:提取177例孕妇血液样本DNA,设计特定引物,采用PCR技术对IgG3重链恒定区CH2和CH3的基因片段进行扩增,再通过Sanger测序法对扩增产物进行基因测序。将测序结果与参考序列AJ390235(IMGT基因库登录号)进行比对,以384位氨基酸密码子突变作为实验内参,查找435位氨基酸密码子是否发生突变并计算出p.Arg435His-IgG3的阳性率。结果:177例孕妇血样中有3例无效样本,在其余174例有效样本中检测到一例为IgG3同种异型p.Arg435His(g.1053927G>A),阳性率为0.57%;通过比对384位氨基酸密码子测序结果提示,在174例样本中有纯合子AGC 30例、AAT 61例,杂合子AG/AC/T 83例。结论:皖北地区孕妇人群中存在p.Arg435His-IgG3同种异型,其阳性率与继往研究相比偏低。     

广西壮族人群CYP1B1基因Arg48Gly和Ala119Ser多态性研究

目的研究CYP1B1密码子48和119在广西壮族人群遗传特征。方法用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性技术对278例广西壮族正常成人进行CYP1B1 Arg48Gly和Ala119Ser基因分型,并分析两位点基因型是否存在连锁不平衡、性别差异及与国内外其他人群分布频率差异。结果 CYP1B1 Arg48Gly和Ala119Ser基因分型无性别差异,且存在连锁不平衡(D’为0.81,r2为0.59),与国内四川和上海人群相应位点基因型分布频率无差异;但与日本、印度、波兰、美国黑人和白人等人群相应位点基因型分布频率差异有统计学意义(P<0.01)。结论广西壮族人群CYP1B1 Arg48Gly和Ala119Ser基因型分布频率无性别差异,且存在连锁不平衡,与其他部分种族存在明显差异。     

Distributive characteristics of Ser49Gly and Gly389Arg genetic polymorphisms of β1-adrenoceptor in Chinese Han and Dai populations

AIM: Genetic polymorphisms causing Ser49Gly and Gly389Arg mutants of beta(1)-adrenoceptor may result in significant changes in the function of this receptor. The aim of the present study was to investigate the frequencies of the Ser49Gly and Gly389Arg mutant alleles in healthy Chinese populations and to investigate the differences between 2 Chinese ethnic groups (Han and Dai populations) with respect to the frequencies of these alleles. METHODS: A total of 225 Han Chinese and 175 Dai Chinese unrelated healthy volunteers were recruited for this study. Genomic DNA was extracted from peripheral blood leukocytes by using a standard manual chloroform-phenol extraction. Fragments spanning the 2 polymorphisms were amplified by using polymerase chain reaction with template genomic DNA and relevant primers. The DNA products including the polymorphic loci were subjected to restriction endonuclease digestion with Eco0109I and BcgI. Digested fragments were detected with an ultraviolet detector after electrophoresis (100 V for approximately 1.5 h). RESULTS: The frequencies of the Gly49 and Arg389 alleles were, respectively, 16.2% and 76.4% in the Han population and 14.6% and 75.7% in the Dai population. CONCLUSION: The polymorphisms causing the Ser49Gly and Gly389Arg mutations of the beta(1)-adrenoceptor existed in both healthy Han and Dai Chinese populations. The frequencies of the Ser49Gly and Gly389Arg mutant alleles were not significantly different in the Han and Dai populations. However, the frequency of the Gly389 variant seems to be significantly lower in these 2 populations than in an African-American population.     

N—硝基—L—精氨酸对海洛因依赖性大鼠催促戒断的治疗作用及对？…

目的：研究一氧化氮合酶抑制剂Ｎ－硝基－Ｌ－精氨酸对海洛因依赖性大鼠催促后出现的戒断综合征的治疗效果。方法：采用剂量递增法,皮下注射海洛因从１ｍｇ;ｋｇ＾－１增至８ｍｇ．ｋｇ＾－１,并维持该剂量４２ｄ,经纳洛酮催促后得到理想的大鼠海洛因依赖模型。在该模型的基础上选用３,９,１８,２７ｍｇ．ｋｇ＾－１４种Ｎ－硝基－Ｌ－精氨酸剂量给雄性大鼠灌胃。     

RGDS的抗血小板聚集及舒血管效应

血小板聚集是正常止血的要素,并依赖于膜糖蛋白Ⅱ_b/Ⅲ_a(GPⅡ_a/Ⅲ_a)复合物与血浆粘附糖蛋白(包括纤维蛋白原 von Willebrand 因子和 fibronectin)的相互作用。研究 GPⅡ_b/Ⅲ_a 受体与纤维蛋白结合确定了在介导其自身与 GP Ⅱ_b/Ⅲ_a 接触的纤维蛋白分子中存在两种不同的氨基酸序列。其中一种序列是 Arg-Gly-Asp(RGD),该序列不仅出现在纤维蛋白 Aα链中,也出现在 fibronectin 和 von Willebrand 因子中。为了阐明其生物学效应本文合成了RGDS,并进行了与抗栓有关的生物学评价。本研究提供的数据证实 RGDS 明显抑制 PAF或 ADP 诱发的血栓形成(对 PAF 诱导的血小板聚集抑制率为67%,RGDS 浓度为9.6×10~(-7)mol/L;对 ADP 诱导的血小板聚集抑制率为87%,RGDS 浓度为9.6×10~(-7)mol/L)。该观察与 RGDS 延缓血栓形成的发现相符。虽然 RGDS 对 ADP 比对 PAF 更敏感但它对 PAF 的抑制仍十分明显这些结果均属首次报道。本研究进一步揭示了 RGDS 有舒血管作用,而且它对大鼠主动脉肌条的舒张作用不可忽视(与对照相比1×10~(-5)mol/L 的 RGDS 在 NE 处理的鼠动脉肌条上的舒张幅度为8.08±5.0%,P<0.05)。对组织内 cGMP 的累积水平(与对照相比1±10~(-5)mol/L 的RGDS 引起 cGMP 水平增高4.68±1.9pmol/mg,P<0.05)研究结果表明,提高体内 cGMP 的水平可能是 RGDS 发挥生物学作用的机制之一。RGDS 的舒血管和抗血小板聚集两种作用均可作为设计与合成新型抗栓剂的实验依据。     

注射用尤瑞克林致不良反应5例

1病例病例1：患者，男，50岁，体重79kg。因急性脑血栓入院，于2007年3月给予尤瑞克林静脉滴注0．15PNA单位（在37℃pH8．0的条件下，1分钟水解1μmolVal—Leu—Arg—PNA的尤瑞克林量为1PNA单位）。在使用过程中出现了烦躁、面部潮红、身体颤抖等症状。查体：体温38．3℃（患者入院时就有发热，     

重组Arg34-GLP-1[7-37]杂质的分离纯化及质谱解析

目的:对重组Arg³⁴-胰高血糖素样肽-1(Arg³⁴-Glucagon-like Peptide-1[7-37],Arg³⁴-GLP-1[7-37])生产制备过程中的潜在杂质进行分离纯化和结构确证。方法:将发酵后的料液进行高效液相色谱分析检测,利用离子交换色谱和制备液相纯化得到Arg³⁴-GLP-1[7-37]纯品和杂质组分,使用纯品进行高温、酸碱等不同条件下的破坏实验,来探知杂质产生机理,利用MALDI-TOF质谱、蛋白质全序列测序等方式推断杂质的分子量与结构。结果:经阴离子交换色谱及反相制备纯化后,Arg³⁴-GLP-1[7-37]的纯度可达97.9%。分离出3种主要杂质并将其纯化至91.4%,99.2%和96.7%。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF)测试其[M+H]+分子量分别为1033.5446,2744.2397和3112.4475,通过破坏实验及Arg³⁴-GLP-1[7-37]的氨基酸序列来推测杂质1、杂质3与杂质9可能序列分别为E-F-I-A-W-L-V-R,H-A-E-G-T-F-T-S-D-V-S-S-Y-L-E-G-Q-A-A-K-E-F-I-A-W,H-A-E-G-T-F-T-S-D-V-S-S-Y-L-E-G-Q-A-A-K-E-F-I-A-W-L-V-R。将纯化前后的成分进行比对,表明上述3个主要杂质是由发酵过程产生,通过极端条件处理这些杂质,其含量会显著增加。本研究解析的3个杂质结构及机理探究均为首次发表。结论:由于重组Arg³⁴-GLP-1[7-37]在高温、过酸过碱及氧化环境中不稳定,为防止纯化过程中主产物降解,应注意避免这些条件。本研究为胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide1,GLP-1)及其类似物的研究指出了一些应避免的误区。     

心肌肌钙蛋白ⅠR146W突变对CaN-NFAT3信号通路的影响

目的探讨心肌肌钙蛋白ⅠArg146Trp(cTnI R146W)基因突变在钙调神经磷酸酶(CaN)-活化T细胞核因子(NFAT)3信号通路中的作用。方法将大鼠胚胎心肌细胞分为转染含cTnI R146W突变的腺病毒(A)组、转染野生型cTnI基因的腺病毒(B)组、腺病毒空载体对照(C)组和空白对照(D)组,Western blot法分别检测胞浆CaN、胞核NFAT3蛋白表达。结果各组心肌细胞中均有CaN蛋白表达,但组间差异无统计学意义(P>0.05);A组NFAT3蛋白表达显著高于B、C、D组(P<0.05)。结论 CaN-NFAT3信号通路参与cTnⅠ R146W突变导致心肌肥大的过程。     

Effects of cTnI R146W mutation on CaN-NFAT3 signaling pathway

目的 探讨心肌肌钙蛋白I Arg146Trp(cTnI R146W)基因突变在钙调神经磷酸酶(CaN)-活化T细胞核因子(NFAT)3信号通路中的作用.方法 将大鼠胚胎心肌细胞分为转染含cTnI R146W突变的腺病毒(A)组、转染野生型cTnI基因的腺病毒(B)组、腺病毒空载体对照(C)组和空白对照(D)组,Western blot法分别检测胞浆CaN、胞核NFAT3蛋白表达.结果 各组心肌细胞中均有CaN蛋白表达,但组间差异无统计学意义(P＞0.05);A组NFAT3蛋白表达显著高于B、C、D组(P＜0.05).结论 CaN-NFAT3信号通路参与cTnI R146W突变导致心肌肥大的过程.     

白细胞介素13基因Arg 144Gln多态性与小儿哮喘的相关性研究

目的探讨白细胞介素13基因Arg144Gln多态性与哮喘的相关性。方法选择178例小儿支气管哮喘患者为哮喘组,158例健康儿童为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测白介素13（IL-13）基因第4外显子Arg144Gln多态性（rs20541）。结果哮喘组IL-13基因第4外显子rs20541位点CC、CT和TT基因型频率分别为40%、42%和18%,而对照分别为46%,44%和10%,差异具有统计学意义（P〈0.05）;TT基因型在哮喘组明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论IL-13基因第4外显子Arg144Gln多态性和哮喘的发生具有相关性。     

Arg早期强化的EN对胃癌患者术后免疫功能的影响

目的：分析联合应用精氨酸(Arg)肠内营养(EN)对胃癌患者根治术后免疫功能的影响,以评价免疫营养对于胃癌患者的化疗疗效、不良反应、生活质量、无进展生存期(PFS)的影响。方法收集符合纳入标准(经PG-SGA评分筛选)的胃癌患者90例,随机分成三组：单纯化疗组(A组)、Arg联合化疗组(B组),术后Arg联合化疗组(C组),每组30例。检测免疫指标、不良反应及无进展生存期指标等。结果经营养治疗后, A、B、C三组的免疫营养状态均呈逐渐好转趋势,但免疫指标B、C组均明显高于A组(P<0.05), B、C组中位无进展生存期高于A组(P<0.05)。结论早期给予精氨酸强化的肠内营养,可增强胃癌患者机体免疫功能,以提高临床化疗效果,明显改善患者生存质量。     

小C肽人胰岛素原类似物（B—Arg—Arg—A）和人胰岛素原（B—C—A）A、B链重组条件

目的：获得更佳的变复性条件和提高人胰岛素原的重组率。方法：采用特有的重组方法，将小Ｃ肽人胰岛素原类似物（Ｂ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａ）与有胰岛素原（Ｂ－Ｃ－Ａ）进行重组条件的比较。结果：发现二者在ｐＨ１０．６左右处重组率达到最大，且在相同的条件下Ｂ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａ蛋白质的重组率（９４％）较Ｂ－Ｃ－Ａ蛋白质（８２％）的高。结论：进一步验证了“胰岛素的Ａ、Ｂ链含有足够使二硫键正确配对的结构信息”的论点。     

广东汉族人β3-肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变频率的检测

目的 探讨β3-肾上腺素能受体(β3-AR)Trp64Arg变异在广东汉族人的分布情况。方法应用聚合酶链反应技术对123例正常人肾上腺素能受体基因Trp64Arg进行扩增并进行图谱分析。结果 广东汉族人β3-肾上腺素能受体基因第64住密码子点突变，其中野生型纯合子频率为69.11％，杂合子频率为27.6%，突变型纯合子频率为3.25％。突变等住基因频率为0.1707。结论 广东汉族人群存在出Trp64Arg基因多态性，不同种族间存在差异。     

非酒精性脂肪肝病理分级与瘦素及其受体基因Lys109Arg多态性的关系

目的 探讨非酒精性脂肪肝(NAFLD)发病与患者血清瘦素、肝脏瘦素受体表达及其基因Lys109Arg多态性、体重指数(BMI)、血脂紊乱的关系.方法 将96例经肝穿活检诊断为NAFLD的患者分为轻、中、重三度,同时选择50例肝穿活检非脂肪肝者为正常对照,检测其血清瘦素、肝组织内瘦素受体mRNA表达情况、瘦素受体基因Lys109Arg多态性、空腹血糖、血脂,计算BMI.结果 NAFLD组与对照组之间血清瘦素水平、肝脏瘦素受体表达,BMI及血脂紊乱比较有显著差异(P<0.05或0.01),NAFLD患者随病变程度加重,血清瘦素水平有逐渐增高的趋势,且呈正相关关系(P<0.05).对照组与NAFLD组及病变不同程度脂肪肝组之间瘦素受体基因Lys109Arg多态性分布差异均无统计学意义.结论 血清瘦素、BMI增高及血脂紊乱是NAFLD发病的危险因素,NAFLD病变程度与血清瘦素水平呈正相关,体内高瘦素对瘦素受体表达有下调作用,这可能是引起瘦素抵抗的机制之一.无证据提示瘦素受体基因Lys109Arg的多态性参与脂肪肝的发生及发展.     

冠心病患者I型对氧磷酯酶基因192 Gln／Arg多态性的研究

目的：探讨中国北方地区I型对氧磷酯酶（paraoxonase,PON1)基因192 Gln/Arg遗传多态性及其与冠心病发病的关系。方法：应用PCR－RFLP技术，检测49例老年CHD患者和38例对照者的PON1－192Gln/Arg基因多态性，等位基因以A／B表示。结果：各基因组（AA，AB，BB）分布在冠心病组：18.4%,51%,30.6%;对照组：39.5%,47.3%,13.2%。两组比较各基因型分布具有显著性差异（X^2=6.35,P=0.042);B等位基因在冠心病组明显增高（0.56vs.0.370);B等位基因携得（AB型＋B型）与AA型纯合子比较，两组间具有显著性差异（x^2=4.77,P=0.029).B等位基因是中国北方地区冠心病发病的危险因素(OR=2.19,95%CI:1.19-4.05)。结论：PON1基因192Gln/Arg遗传多态性与中国北方地区冠心病发病明显相关。该酶切位点多态性具有明显的种族差异。