铁皮石斛多糖促进毛发生长的实验研究

目的：观察铁皮石斛多糖（DCP）促毛发生长的功效并探讨其作用机制,为铁皮石斛的开发利用奠定基础。方法：采用水提醇沉法提取DCP,并用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。取C57BL/6J小鼠30只,用脱毛膏去除其背部毛发建立脱发模型,分为对照组、阳性对照组和DCP组,每日分别涂抹超纯水、米诺地尔酊、DCP（5.0 g·L^-1）l 次,每次 0.2 mL,连续给药21 d,应用小鼠毛发生长情况评分标准对C57BL/6J小鼠给药7,14 d毛发生长情况进行评分,及称量给药21 d C57BL/6J小鼠单位脱毛区域毛发质量评价DCP对C57BL/6J小鼠毛发生长的影响。采用MTT法和RT-PCR法分别评价DCP对人永生化角质形成细胞（HaCaT细胞）增殖和对HaCaT细胞血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达的影响。结果：DCP提取率为29.87%,DCP质量分数为79.65%。DCP组C57BL/6J小鼠的毛发生长平均得分、平均质量均显著优于对照组;DCP组HaCaT细胞生存率和VEGF mRNA的表达水平与对照组比较均显著提高。结论：DCP具有促毛发生长的作用,其机制可能是上调VEGF mRNA的表达。     

基于“药辅合一”理念的当归精油纳米乳递药系统的构建、表征及评价

目的 构建当归精油纳米乳（Angelica Sinensis Radix essential oil-loaded nanoemulsion,AEO-NE）递药系统并对其进行表征及稳定性、毛囊靶向、毛发生长促进作用评价。方法 分别应用伪三元相图法和星点设计-响应面法（central composite experiment design-response surface method,CCD-RSM）对纳米乳处方进行筛选和优化。对纳米乳乳剂类型、粒径、ζ电位、多分散指数（polydispersity index,PDI）、微观形态、黏度、pH值进行表征。以粒径、PDI、外观变化及Z-藁本内酯含量为指标，评价最优处方纳米乳离心稳定性、放置稳定性以及稀释稳定性。通过在体给药荧光标记的AEO-NE于小鼠背部皮肤研究制剂毛囊靶向能力。应用C57BL/6小鼠研究AEO-NE体内促进毛发生长的作用。结果 AEO-NE最优处方为AEO-辛基酚聚氧乙烯醚10(OP-10)-无水乙醇-水（2.25∶0.75∶1∶96）；按最优处方所制AEO-NE外观澄清、透明、微泛蓝光，乳剂类型为O/W型，平均粒径为（...     

何首乌提取物对C57BL/6J小鼠毛囊生长和毛发生长周期的影响

目的:观察何首乌提取物对C57BL/6J小鼠毛囊体外培养和在体毛发生长周期的影响。方法:对小鼠毛囊生长的影响采用C57BL/6J小鼠触须毛囊体外培养模型,实验分为9组,空白对照组(蒸馏水)、阳性对照组(章光101)、何首乌提取物75,150,300,600,1 200,2 500,5 000μg·L-1组,24孔板,每孔2枚毛囊,培养12 d,通过观察毛发生长时间和生长速度,评价何首乌提取物对毛囊生长的影响;对小鼠毛发生长周期的影响采用C57BL/6J小鼠背部脱毛,分为5组,阳性对照组(章光101)、空白对照组、何首乌提取物高、中、低(2,1,0.5 g·mL-1)剂量组,涂抹不同浓度的何首乌提取物,观察其对小鼠毛发生长周期的影响。结果:体外毛囊培养实验表明,何首乌提取物在300,600,1 200μg·L-1浓度时对毛囊生长早、中、晚期都有加速生长的作用,并可延长毛发的生长时间,且在早、中期呈现一定的剂量依赖性,与空白对照组比较均有显著性差异。其中300μg·L-1时,第2,6,12天毛发生长速度分别为(0.236±0.061),(0.427±0.078),(0.325±0.054)mm·d-1,毛发生长时间为(9.60±1.43)d,与空白对照组比较P<0.01,与阳性对照组比较P<0.01;600μg·L-1时,第2,6天,毛发生长速度分别为(0.313±0.044),(0.522±0.084)mm·d-1,与空白对照组比较P<0.01,与阳性对照组比较P<0.05,第12天为(0.439±0.064)mm·d-1,毛发生长时间为(11.00±1.15)d,与空白对照组比较P<0.01;1 200μg·L-1时,第2,6,12天毛发生长速度分别为(0.406±0.053),(0.642±0.067),(0.475±0.036)mm·d-1;毛发生长时间为(12.40±1.43)d,与空白对照组比较P<0.01。体内药效学实验表明,何首乌提取物较空白对照组可以使毛发从休止期进入生长期,加速毛发的生长,具有显著性差异。高剂量组时皮肤粉红到变灰的时间为(9.06±0.43)d,灰色皮肤长出毛的时间为(14.68±1.19)d,皮肤长满毛的时间为(26.86±2.02)d,与空白对照组比较P<0.01,较中、低剂量可以加速皮肤黑色素的形成;毛发生长后期,剂量依赖关系不明显。结论:何首乌提取物能诱导C57BL/6J小鼠毛发生长,使其从休止期进入生长期,从而加速毛发生长,体内、外实验结果一致。     

紫杉醇固体脂质纳米粒的制备和质量评价

目的 利用超声分散法制备紫杉醇固体脂质纳米粒,并考察其稳定性.方法 以稳定性、Zeta电位、粒径、包封率为考察指标筛选制备工艺,对超声时间、超声功率、脂质材料和助乳化剂的用量做了详细的考察.结果 通过单因素及正交试验确定最佳处方为:脂质骨架单硬脂酸甘油酯(100/150 mg)、乳化剂豆磷脂(100 mg)、助乳化剂Pluronic F68-聚山梨酯80(2:1),在(75±5) ℃下乳化,之后以功率300 W进行超声,时间为20 min.结论 本实验成功地将紫杉醇装载进固体脂质纳米粒中,纳米粒在胶体分散液中分散均匀,稳定性良好.此制备工艺安全、可靠,有很大的应用前景.     

以茶皂素为天然乳化剂制备水飞蓟素纳米乳及其理化性质考察

目的 以茶皂素为天然乳化剂制备水飞蓟素纳米乳（silymarin nanoemulsion,SM-NE）。方法 使用高速剪切联合高压均质法制备SM-NE,以平均粒径、粒度多分散系数（polydispersity index,PDI）、分层指数和外观为主要评价指标,采用单因素试验对处方和制备工艺进行优化;以摩尔增溶比（molar solubilization ratio,MSR）和胶束-水分配系数（K_m）作为评价指标探究了茶皂素对水飞蓟素的增溶能力;对最佳处方和工艺制备的SM-NE进行了理化性质和稳定性考察。结果 SM-NE的最佳处方为水飞蓟素用量0.15%,茶皂素用量为0.3%,油相用量为5%,最佳制备工艺为剪切速率16 000 r/min,剪切时间3 min,均质压力为100 MPa,均质次数为8次;茶皂素对水飞蓟素增溶参数值MSR和K_m分别为0.011 1和2.31;制得的SM-NE的平均粒径为（204.1±2.8）nm,PDI为0.058±0.007,电导率为（117.8±0.9）μs/cm,pH值为7.31±0.10,浊度为（59.75±1.10）cm^-1,水飞蓟素溶解度为（1.22±0.05）mg/mL;稳定性结果显示,SM-NE具有良好的离心稳定性和储存稳定性。结论 以茶皂素为天然乳化剂成功制备了稳定的SM-NE,茶皂素是一种潜在的用于水飞蓟素新型绿色纳米制剂生产的天然增溶剂。     

橙皮苷纳米乳液的制备及其稳定性研究

目的制备以甘草酸作为乳化剂的橙皮苷纳米乳液(HDN-NE),以期开发橙皮苷的新型绿色纳米制剂。方法采用高速剪切-高压均质技术制备HDN-NE,以粒径、PDI、外观为主要评价指标筛选处方工艺,对以最佳处方工艺制备的HDN-NE的理化性质和相关稳定性进行研究。结果 HDN-NE的最佳制备处方为橙皮苷用量0.1%、甘草酸用量0.3%、油相用量5%,最佳工艺参数为剪切速率13000r/min、剪切时间2min、均质压力100MPa、均质次数6次;制得纳米乳平均粒径为(262.7±3.1)nm、PDI为0.234±0.009、Zeta电位为(-35.42±0.72)m V、溶解度(460.3±2.1)μg/m L、电导率(116.4±1.7)μs/cm、pH值为6.820±0.008、浊度为451 cm-1(n=3);经染色法鉴别为O/W乳液,透射电镜观察乳滴呈圆球状,大小均一;稳定性研究结果表明HDN-NE稳定性良好。结论以甘草酸作为乳化剂的HDN-NE可显著提高橙皮苷的溶解度及稳定性,是一种潜在的安全性高的新型纳米药物。     

茶皂素稳定的芹菜素纳米乳制备及其体外释放研究

目的 以茶皂素为天然乳化剂制备芹菜素纳米乳液（AP-NE）,并对其进行稳定性和体外释放特性的考察,以期获得新型绿色的纳米制剂。方法 采用高速剪切结合高压均质技术制备AP-NE,以平均粒径和多分散指数（PDI）为自变量,运用总评归一值（OD）法对数据进行处理,采用Box-Behnken效应面法优化处方并进行验证,并对最优处方制备的AP-NE进行理化性质和体外释放特性考察。结果 优化结果表明AP-NE的最优制备处方为芹菜素质量分数0.40%、茶皂素质量浓度2.0 mg/mL、油相用量（蓖麻油-辛癸酸甘油酯1∶3）3 mL;测得AP-NE的平均粒径为（259.5±3.6）nm、PDI为0.103±0.005、ζ电位为（−35.81±0.42）mV、电导率为（88.60±1.00）μS/cm,pH为7.37±0.08,溶解度为（128.12±1.35）μg/mL,载药量为（5.77±0.08）%,浊度为（99.45±1.69）cm⁻¹（n＝3）;经染色法鉴别为O/W乳液,透射电子显微镜观察乳滴不粘连,大小均一,呈圆球状;稳定性试验表明AP-NE稳定性良好;体外释放研究表明AP-NE中芹菜素的释放具有缓慢和持续的趋势。结论 以茶皂素作为乳化剂制备的纳米乳可明显提高芹菜素的溶解度和稳定性,是一种潜在的可提高药物有效性的新型纳米制剂。     

洁肤爽乳剂基质组成及工艺的优选

目的 :优选外用O/W型洁肤爽乳剂的基质组成及工艺。方法 :针对影响乳剂质量的因素 ,采用正交设计 ,以乳剂的稳定性参数为主要考察指标 ,综合评分考察了油水组成、乳化剂用量、HLB值、搅拌速度等因素对洁肤爽乳剂质量的影响 ,筛选出了O/W型洁肤爽乳剂的优化处方和制备工艺。结果 :最优的基质组成及工艺 :油水组成比为 2∶3 ,乳化剂用量为 32 0 g(此时取油为 50 0mL) ,HLB值为 1 5 ,乳化温度为70°C ,搅拌速度为 80 0r·min- 1 ,搅拌时间 2 0min。结论 :按此法制备的洁肤爽乳剂符合中国药典 2 0 0 0年版附录的规定     

改进的线栓法对不同品系小鼠脑缺血模型的构建

目的:建立不同品系小鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型的通用方法。方法:健康雄性昆明(KM)小鼠和C57BL/6小鼠各20只,随机分为对照组10只,MCAO组10只,改良线栓法制作小鼠MCAO模型;大脑中动脉血流监测,栓塞24 h后行神经行为学评分,TTC染色测定脑梗死体积百分比,对模型可靠性进行评价。结果:KM和C57BL/6小鼠MCAO模型组脑血流监测显示梗死处血流基值下降比分别为(81.65±4.59)%,(83.68±6.25)%,神经功能评分分别为(2.30±0.82),(2.50±0.80)分,体征明显,TTC染色可清晰地显示出梗死范围且相对稳定,C57BL/6小鼠有1只TTC染色梗死灶不明显,24 h成活率KM和C57BL/6小鼠分别为100%,80%。结论:颈总插线法制作小鼠脑缺血模型无需开颅,创伤极小,缺血的部位较恒定,从模型制备中线栓、温度、麻醉各个关键环节加以优化和改良,使该模型的制备更加完备。     

W/O/W型人参总皂苷复乳的制备与表征

目的： 制备与表征W/O/W型人参总皂苷复乳。 方法： 采用两步法制备W/O/W人参总皂苷复乳,以离心保留率为综合评价标准,通过正交试验考察乳化剂Ⅰ用量、明胶溶液的质量分数、乳化剂Ⅱ用量及反应温度对复乳处方工艺的影响,同时结合复乳的粒子形态、粒径和粒度分布,筛选最佳处方并对其进行表征。 结果： 最佳处方工艺为乳化剂Ⅰ用量8%,明胶溶液的质量分数0.25%,乳化剂Ⅱ用量8%,反应温度70 ℃。人参总皂苷包裹率71.8%,表面张力32.2 mN·m^-1,电导率453 μs·cm^-1。 结论： W/O/W型人参总皂苷复乳性质稳定、质量合格,为提高人参总皂苷的口服生物利用度提供参考。     

人参提取物对C57小鼠生发作用的影响

目的: 研究人参提取物对C57BL/6J小鼠毛发生长促进作用及其机制。 方法: 实验分为阳性对照组(章光101)、空白对照组、人参提取物高、中、低(2, 1, 0.5 g·mL^-1)剂量组。小鼠脱毛,通过观察脱毛区肤色的变化和组织学检查,研究人参提取物对小鼠毛发生长周期的影响;采用红外测温仪观察对小鼠皮肤温度的影响;采用浊度法和底物发色法,观察其抗血小板聚集的作用,初步探讨其促进毛发生长的机制。 结果: 人参各剂量组均能诱导C57BL/6J小鼠毛发生长,使其从休止期进入生长期,但对毛发的最终长度无影响,且呈现一定的剂量依赖作用(P<0.01),高剂量组与阳性组无显著性差异;组织学检查显示人参提取物可以刺激毛囊生长,产生黑色素;给药20,60 min后,人参各剂量组均能显著提高小鼠的体温(P<0.01),120 min后,恢复到给药前水平;人参高、中、低剂量组对血小板活化因子(PAF)诱导的大鼠5 min时血小板聚集率分别为49.41%,27.80%,18.39%(均P<0.01),且呈现一定的剂量依赖作用,与阳性对照组则无显著性差异;其抗血小板聚集的作用与抗凝血酶有关, 人参高、中、低剂量组的凝血酶抑制率分别为(20.24±2.72)%,(15.42±1.03)%,(8.61±0.80)%(P<0.01)。 结论: 人参提取物具有明显的促进毛发生长的作用,其机制与扩张皮肤毛细血管、改善局部微循环有关。     

骨碎补外用对环磷酰胺致小鼠斑秃模型的影响

[目的]考察骨碎补外用对环磷酰胺致C57BL/6小鼠斑秃模型的影响。[方法]采用环磷酰胺腹腔注射建立C57BL/6小鼠斑秃模型,观察骨碎补外用对小鼠毛囊组织学变化和血清细胞间黏附蛋白(ICAM-1)、内皮细胞-白细胞黏附分子-1(ELAM-1)水平的影响。[结果]骨碎补外用能使实验性斑秃模型小鼠血清ICAM-1和ELAM-1水平降低,毛囊数增多(P<0.05或P<0.01)。[结论]骨碎补外用能够抑制毛囊进入退行期,对斑秃模型小鼠具有治疗作用。     

镇肝熄风汤对帕金森病模型小鼠神经行为学及黑质14-3-3、酪氢酸羟化酶表达的影响

目的: 观察镇肝熄风汤对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine MPTP)诱导的C57BL/6小鼠帕金森病模型自主活动的影响及其可能机制。 方法: 连续灌胃14 d给予不同剂量的镇肝熄风汤(12.5, 25,50 g·kg^-1)和司来吉兰(10 mg·kg^-1)预处理,于给药第11天开始连续4 d C57BL/6小鼠皮下注射MPTP(30 mg·kg^-1)制备帕金森病小鼠模型。通过自主活动实验 观察动物行为学表现,采用实时定量RT-PCR法检测多功能蛋白14-3-3和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH) mRNA表达,Western blot方法检测多功能蛋白14-3-3,TH蛋白表达。 结果: 与模型组比较,镇肝熄风汤可显著增强帕金森病小鼠自主活动能力(均P<0.05),上调多功能蛋白14-3-3和TH mRNA和蛋白表达(均P<0.05)。 结论: 镇肝熄风汤具有抗实验性帕金森病的作用,其机制可能与上调多功能蛋白14-3-3和TH的mRNA和蛋白表达有关。     

益气除痰方对脾虚Lewis肺癌小鼠肿瘤生长、生存期及PRDX-1、PRDX-6表达的影响

目的 观察益气除痰方对脾虚C57BL/6J小鼠Lewis肺癌肿瘤生长、肺转移、生存期及肿瘤组织中过氧化物氧化还原酶PRDX-1、PRDX-6表达的影响。     

三氧化二砷对MRL/lpr小鼠CD4+T细胞增殖和IFN-γ、IL-4分泌的调节作用

 目的探讨三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4^+T细胞增殖以及IFN-γ和IL-4转录和翻译水平的影响。方法免疫磁珠分别分选15只MRL/lpr狼疮小鼠和15只C57BL正常对照小鼠脾脏CD4⁺T细胞,进而将CD4⁺T细胞随机分为空白组(RPMI1640),对照组(PHA20mg·L^-1+IL-21000u·mL^-1),ATO组[PHA20mg·L^-1+IL-21000u·mL^-1(48h)后+ATO1.0μmol·L^-1],体外共培养至72h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测3组CD4⁺T细胞的增殖和抑制水平;酶联免疫吸附反应(ELISA)检测上清液中IFN-γ和IL-4水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述细胞因子基因的转录水平。结果①分选后获得的CD4⁺T细胞纯度为(94.12±1.08)%,细胞存活率为(95.82±3.41)%;②MRL/lpr小鼠对照组CD4⁺T细胞的增殖水平(A值)(0.343±0.019)较空白组(0.054±0.008)高(P<0.001);却低于C57BL小鼠对照组的水平(0.375±0.018)(P<0.05);③MRL/lpr和C57BL小鼠ATO组CD4⁺T细胞增殖水平(A值)分别为(0.324±0.013)和(0.362±0.013),均低于对照组(P<0.05,P<0.05);④MRL/lpr小鼠对照组IFN-γ的表达水平[(562.287±60.345)ng·L^-1]明显高于C57BL小鼠对照组[(253.208±59.434)ng·L^-1](P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γ的抑制程度大于C57BL小鼠(P<0.05);MRL/lpr小鼠对照组的IL-4表达水平[(41.332±8.039)ng·L^-1]与ATO组[(23.046±3.253)ng·L^-1]和C57BL小鼠对照组[(29.303±8.038)ng·L^-1]比较,也具有明显的统计学差异(P<0.05和P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IL-4的抑制程度高于C57BL小鼠(P<0.05);⑤在转录水平上,与C57BL小鼠相比,ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γmRNA和IL-4mRNA的抑制程度更加明显(P<0.05和P<0.05);ATO对IFN-γ和IL-4表达水平的抑制和转录水平的抑制正相关,r=0.720(P<0.001)和r=0.557(P<0.01)。结论MRL/lpr小鼠存在CD4⁺T细胞的异常增殖,ATO能在不影响细胞存活率的浓度下抑制MRL/lpr小鼠CD4⁺T细胞的异常增殖活化,通过抑制其细胞因子IFN-γ和IL-4的mRNA分泌影响两者的表达,且对MRL/lpr小鼠抑制程度大于C57BL小鼠,表明ATO能抑制狼疮鼠的异常免疫功能,可进一步用于SLE的治疗。     

Hair Growth‐Promoting Effect of Carthamus tinctorius Floret Extract

The florets of Carthamus tinctorius L. have traditionally been used for hair growth promotion. This study aimed to examine the potential of hydroxysafflor yellow A‐rich C. tinctorius extract (CTE) on hair growth both in vitro and in vivo. The effect of CTE on cell proliferation and hair growth‐associated gene expression in dermal papilla cells and keratinocytes (HaCaT) was determined. In addition, hair follicles from mouse neonates were isolated and cultured in media supplemented with CTE. Moreover, CTE was applied topically on the hair‐shaved skin of female C57BL/6 mice, and the histological profile of the skin was investigated. C. tinctorius floret ethanolic extract promoted the proliferation of both dermal papilla cells and HaCaT and significantly stimulated hair growth‐promoting genes, including vascular endothelial growth factor and keratinocyte growth factor. In contrast, CTE suppressed the expression of transforming growth factor‐β1 that is the hair loss‐related gene. Furthermore, CTE treatment resulted in a significant increase in the length of cultured hair follicles and stimulated the growth of hair with local effects in mice. The results provided the preclinical data to support the potential use of CTE as a hair growth‐promoting agent. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.     

银耳多糖为乳化剂制备槲皮素微乳研究

目的 研究以银耳多糖为乳化剂的槲皮素微乳处方和制备工艺.方法 通过溶解度考察、配伍试验和伪三元相图的绘制优选微乳处方;采用银耳多糖为天然乳化剂,以油相、混合乳化剂及助乳化剂比例为考察因素,粒径、载药量及多分散指数(PDI)为评价指标,采用星点设计-效应面法优化槲皮素微乳处方并对其性质、溶出度及稳定性进行评价.结果 槲皮...     

茶树油凝胶的制备及其药效学与刺激性评价

目的研究茶树油凝胶的处方和制备工艺,并对其抗炎、抑菌功效与刺激性进行评价。方法以卡波姆-940为凝胶基质,聚氧乙烯40氢化蓖麻油(CremophorRH-40)与1,2-丙二醇为溶剂制备茶树油凝胶,并考察其外观性状、pH值、黏度、保湿率、药物含量与稳定性;分别对茶树油凝胶的抗炎、抑菌效果与刺激性进行评价。结果筛选得茶树油凝胶处方:茶树油1.0%、Cremophor RH-40 5.0%、1,2-丙二醇5.0%、卡波姆-940 0.6%、甘油8.0%,加蒸馏水至100 g,三乙醇胺溶液调pH值至5.0;获得澄清透明、均匀细腻、黏稠度适中,且涂展性良好的茶树油凝胶;pH值5.52±0.03,黏度(48782±25)m Pa·s,放置24 h后保湿率(93.32±0.38)%,含茶树油(9.55±0.10)mg/g;茶树油凝胶对小鼠耳廓肿胀抑制率为46.15%,且与阴性对照组相比差异显著(P0.01);对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与绿脓杆菌的抑菌圈直径分别为(15.50±0.96)、(15.25±2.36)、(15.75±1.91)mm;茶树油凝胶的半数溶血率(LC50)为456 157 mg/L,血红蛋白变性指数(DI)为157.98%,LC50/DI值为2887.44,表明无眼刺激性;一次给药后茶树油凝胶对家兔皮肤的刺激反应平均积分为0.125,连续给药14d后动物刺激反应平均积分为0.036,表明对家兔皮肤无刺激性反应;高速离心、强光照与耐寒耐热实验结果表明制剂稳定性良好,应置于阴凉避光处贮存。结论茶树油凝胶处方设计合理,制备工艺简单,符合凝胶局部外用制剂主要指标要求,具有一定抗炎、抑菌功效,安全性良好,为茶树油进一步研究与开发奠定基础。