同种异体耳移植的实验研究

目的：①观察同种异体兔耳移植后排斥反应的组织病理学、细胞免疫、体液免疫变化的情况;②为提高同种异体移植耳成活率,预防排斥反应,提供一个有效的免疫抑制治疗方案。方法：以青紫蓝兔和日本大耳白兔为实验动物。以耳大动、静脉及外侧耳缘静脉为蒂,获得单侧（右）全耳,应用显微外科微血管吻合技术进行异体移植。其中青紫蓝兔为受体,日本大耳白兔为供体。实验共选用40对（青紫蓝兔和日本大耳白兔各40只）动物,按受体免疫抑制剂治疗方案随机分为5组：O组,手术对照组（N=5对）,行自体兔耳离断回植术;C组,对照组（N=5对）,同种异体耳移植后不给予免疫抑制剂;T1组（N=10对）,同种异体耳移植后给予FK506单一免疫抑制剂;T2组（N=10对）,同种异体耳移植后给予FK506和强的松两联免疫抑制剂;T3组（N=10对）,同种异体耳移植后给予FK506、MMF和强的松三联免疫抑制剂。动脉、静脉吻合均选用端端吻合技术。术后观察移植耳存活情况、急性排异发生率及严重程度;供体组织病理分级;受体血浆IL-2、IL-4、IL-8的变化以及受体T淋巴细胞CD4^＋、CD8^＋的变化。结果：同种异体兔耳移植30天、100天后T3组在急性排斥反应发生率、供体组织病理分级和受体IL-2、IL-4、IL-8水平与CD4、CD8值的变化等方面与C组、T1组、T2组相比较均有显著差异（P〈0.05）。结论：三联免疫抑制剂方案（FK506、MMF和强的松）是预防同种异体兔耳移植排斥反应的一个有效治疗方案。     

复合环孢菌素同种异体骨的免疫学与组织学评价

目的对比评价复合环孢菌素同种异体骨（CAB）的免疫学特性及成骨特性。方法54只新西兰兔随机分为三组（每组18只）：实验组（植入CAB修复兔桡骨中段骨缺损）、对照组（植入深冻／冻干辐照同种异体骨修复兔桡骨中段骨缺损）、材料提供组。于不同时间点抽血行淋巴细胞亚群分析并取材，标本经处理后分别行CD25分子免疫组化染色和改良马松三色法染色并图像分析，对淋巴细胞亚群及新骨面积行统计学分析。结果术后16周对照组CD25分子密度明显高于实验组，且对照组各个时间点间的CD4^＋T淋巴细胞百分数及CD8^＋T淋巴细胞百分数波动明显，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组各骨缺损修复部位新骨生成面积均大于对照组，差异有统计学意义（P〈0．001）。结论免疫学及组织学结果初步显示，与深冻／冻干辐照同种异体骨相比，CAB可以更稳定持久地抑制免疫排斥反应并更好地促进新骨生成。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在维持小鼠肝脏移植自发性免疫耐受状态中的作用

目的 探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在维持小鼠肝脏移植免疫耐受状态中的作用。方法 进行小鼠原位肝脏移植,诱导出移植免疫耐受后,向受体注射抗CD25抗体（PC61）以去除CD4^＋CD25^＋T细胞,检测受体内CD4^＋CD25^＋T细胞数量及叉状头／翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）的表达以确定CD4^＋CD25^＋T细胞完全被清除,同时观察受体生存时间。结果与同种同系小鼠肝脏移植结果相似,同种异系肝脏移植小鼠的生存时间亦均超过70d。移植免疫耐受诱导后,PC61不同注射方案均能完全去除受体小鼠肝脏、脾脏及血液中的CD4^＋CD25^＋T细胞,且移植肝脏中Foxp3mRNA的表达也明显降低,表明完全去除了CD4^＋CD25。调节性T细胞,但肝脏移植动物生存时间并未受到影响。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对于小鼠肝脏移植自发性免疫耐受的维持并非必需。     

可诱导性共刺激分子单抗联合细胞毒T淋巴细胞4Ig在大鼠胰腺移植中的作用

目的 探讨可诱导性共刺激分子（ICOS）单抗、细胞毒T淋巴细胞4ig（CTLA41g）阻断共刺激通路对于异基因大鼠胰腺移植的作用及其机制。方法 建立胰腺移植模型，分A组（对照组），B组（CTLA4Ig组），C组（抗ICOS单抗组），D组（联合CTLA4Ig和抗ICOS单抗组）。术后1、4,7d监测血糖，第7天取胰腺做苏木素-伊红染色，脾脏做流式细胞检测CD3^＋CD8^＋T细胞、CD4^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋T细胞。结果 与A组比较：B、C、D组排斥反应较A组明显减弱，显著延长了移植物的存活时间。CD3^＋CD8^＋T细胞计数B、C、D与A组比较均有减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。CD4^＋T细胞B、D与A组的差异有统计学意义（P〈0．05）。CD4^＋CD25^＋T细胞各组间逐渐升高，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 抗ICOS单抗和CTLA4Ig能有效地抑制大鼠胰腺移植排斥反应，延长移植物存活时间，且联合应用比单一应用更有效。其可能机制为诱导了CD4^＋CD25^＋T细胞的产生。     

反义细胞外信号调节激酶对移植物血管的保护作用

目的探讨反义细胞外信号调节激酶（ERK1／2）基因治疗对移植物血管的保护作用及可能的保护机制。方法建立BN至Lewis大鼠的腹主动脉移植模型。反义ERK1／2治疗组移植前取供者动脉血管段给予经脂质体包装的反义ERK1／2基因转染；腹主动脉移植术后1个月内受者每日从尾静脉或阴茎背静脉注入经脂质体包装的反义ERK1／2寡核苷酸100μl。对照组移植未经任何处理的血管段，移植后也无特殊处理。移植术后60d取移植段主动脉进行组织病理学观察内膜和胶原纤维变化；免疫组织化学法观察移植段血管ERK1／2基因的表达和CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞的浸润情况；ELISA法检测血清中细胞间粘附分子（ICAM-1）的变化。结果移植术后60d，对照组的移植动脉呈慢性移植物血管病表现，血管内膜显著增厚，移植血管中ERK1／2基因高表达，CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞大量浸润；反义ERK1／2基因治疗组移植动脉呈血管内膜炎改变，ERK1／2基因表达不明显，内膜有少量CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞；对照组ICAM-1表达显著高于反义ERK1／2治疗组（P〈0．05）。结论反义ERK1／2基因治疗对移植物血管具有保护作用，可以减缓慢性移植物血管病的发生，这种保护机制可能和减少ICAM-1的表达以及减少移植血管T淋巴细胞的浸润有关。     

以生物衍生材料为支架的组织工程骨移植早期兔外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的检测体外构建的组织工程骨移植后兔外周血T细胞亚群的变化，对移植组织进行组织学观察，探讨以生物衍生材料作为骨组织工程支架材料的可行性。方法组织工程骨以兔骨膜来源的成骨细胞为种子细胞，经抗原自消化、部分脱钙、冻干后的异体骨为支架材料于体外构建。将健康新西兰白兔48只制成1cm长桡骨缺损模型后，随机分成A～D4组，每组12只，分别用部分脱钙冻干骨（partial demineralized freeze—dried bone，PDFDB）、组织工程骨、自体骨、同种异体骨植入兔桡骨节段性缺损。术后1、2、4周取材，用流式细胞仪检测4种材料移植早期兔外周血T淋巴细胞亚群的变化；通过常规组织学检测观察2、4、8、12周时4种材料的成骨作用。结果B组术后2周材料孔隙内有成骨细胞和成软骨细胞，可见骨、软骨混合性新生物形成，周边分布有破骨细胞，部分网架呈蚕食状被破坏吸收。术后4周，形成的新生骨过渡为编织骨。A、B组材料植入后1、2周外周血CD4^＋和CD8^＋T细胞较术前明显升高（P〈0．05）；术后4周CD4^＋T细胞较术前轻度偏高，但无统计学差异（P〉0．05）。C组术后CD4^＋和CD8^＋T细胞升高不明显（P〉0．05）。D组术后1、2、4周外周血CD4^＋和CD8^＋T细胞较术前及其他各组同期均明显增高（P〈.．05）。结论PDFDB为支架材料构建的细胞一材料复合物移植后外周血T淋巴细胞增高，但不影响其良好的修复骨缺损能力，生物衍生骨可作为支架材料应用于骨组织工程研究。     

利用同种异体脱细胞血管基质预构小口径血管的研究

目的通过观察狗腹腔内预植同种异体脱细胞血管基质（ACVM）所形成的结缔组织管作为替代血管的力学性能，以及移植于自体股动脉后的组织结构变化，探讨利用同种异体ACVM预构小口径血管的可行性。方法在狗腹腔内埋植长8～12cm用硅胶棒支撑的已制备好的同种异体ACVM，3周后将硅胶棒周围形成的管状物作为血管替代物桥接移植于自体股动脉后，进行力学、组织学检查及与颈动脉、股静脉自体移植的对比分析。于移植术后6个月观测作为替代血管的通畅情况，组织学观察其组织结构变化。结果血管替代物的力学性能弱于正常动脉而强于正常静脉。组织学观察：形成的管状物内腔有少量的间皮细胞黏附；弹性纤维、胶原纤维结构较完整；纤维网中充满成纤维细胞。6个月后内皮细胞在替代物内壁连续覆盖，平滑肌细胞与对照组相近。移植6个月后异体ACVM组血管全部通畅。结论用同种异体ACVM预构的血管替代物，力学性能符合血管移植、血运重建的需求。所形成的结缔组织管作为血管替代物移植6个月后，管壁厚度及组织结构已接近正常血管。     

肾移植患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的观察肾移植患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的变化，探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用。方法采用流式细胞仪检测26例肾移植患者及30例正常对照组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平。结果①慢性肾衰竭患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②非排斥组移植后1、2、4、8周CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于移植前（P〈0．01）。③急性排斥组排斥反应主要发生在术后第7～21d，其CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显低于同期的非排斥组（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的测定可以作为肾移植患者移植后急性排斥反应诊断和预测预后的重要指标。     

供者年龄与肾移植慢性排斥反应关系的实验研究

目的 探讨供者的年龄对大鼠同种异体肾移植慢性排斥反应的影响。方法 分别采用3、12、18个月龄的F－344大鼠肾移植给6个月大小的LEW受鼠,以自体肾移植作为对照组,术后检测各组的肾功能和免疫组化的改变,并进行移植肾的组织学观察。结果 18个月龄供肾移植组术后24h尿蛋白含量、移植肾肾小球硬化程度及纤维化程度均较3个月龄及12个月龄组严重,差异有显著性（P＜0.01）;18个月龄的供肾移植组移植肾组织中ED1^＋单核／巨噬细胞、CD4^＋T淋巴细胞及CD8^ 细胞毒性／抑制性T淋巴细胞明显高于3个月龄供肾组,差异有显著性（P＜0.01）。结论 供者的年龄越大,术后移植肾的肾小球硬化及间质纤维化就出现越早,且越严重。     

CD4-CD8-双阴性T细胞在移植免疫耐受形成中的作用

体内移植物抗宿主反应和宿主抗移植物反应主要是由T淋巴细胞介导。在同种异体移植时,因移植物的组织相容性抗原与受者不符,而刺激受者免疫系统发生排斥反应。由于移植物的细胞构成不同,触发的免疫反应会有所差异。去除T细胞或抑制T细胞的功能均能使移植物的存活时间延长。最近研究发现一种T细胞亚群——αβTCR^＋CD3^＋CD4^- CD8^-双阴性T细胞（double-nega-tiveTcell,DNT）可通过抑制同系基因型CD4^＋ T细胞或CD8^＋ T细胞从而抑制移植物排斥反应的发生,因此研究DNT细胞在移植免疫耐受形成中的作用将有重要意义。     

Acceptance of related and unrelated cardiac allografts in neonatally tolerized mice is cardio-specific and transferable by regulatory CD4+ T cells.

BACKGROUND: Non-donor-specific cardiac allograft acceptance is induced in C3H/He (C3H; H-2k) recipients injected as neonates with allogeneic BALB/c (BALB; H-2d) fetal liver cells (FLC). This occurs despite intact reactivity to donor-type and third-party alloantigens in in vitro assays and skin transplants. To investigate a role for regulatory T cells, we performed adoptive transfer studies and specifically assessed CD4+ and CD4- T cells. METHODS: Three cell populations (splenocytes, CD4+, CD4-) derived from neonatally-treated mice with accepted C57BL/6 (B6; H-2b) third-party cardiac grafts were adoptively transferred into sub-lethally-irradiated C3H mice. Reconstituted mice were challenged with B6 cardiac grafts, B6 skin grafts, or unrelated cardiac grafts. Separated cells were assessed in vitro. RESULTS: B6, BALB, and NZW (H-2z) graft acceptance was transferred by unfractionated splenocytes. CD4+ cells transferred B6 graft acceptance (85% survival > 100 days). CD4- cells, unfractionated cells from naive or only irradiated mice, and unfractionated cells from neonatally-treated non-transplanted C3H mice rejected grafts within 35 days. No inoculum induced skin graft acceptance. Co-cultured assays confirmed the suppressive function of CD4+ cells in vitro. CONCLUSIONS: Cardiac allograft acceptance in our model is regulated by CD4+ cells. The regulatory cell population is induced by the cardiac graft itself and mediates in vivo cardiac graft acceptance in a tissue-specific but not donor-strain-specific manner.     

CD25+CD4+ regulatory T cells develop in mice not only during spontaneous acceptance of liver allografts but also after acute allograft rejection

BACKGROUND: Liver grafts transplanted across a major histocompatibility barrier are accepted spontaneously and induce donor specific tolerance in some species. Here, we investigated whether liver allograft acceptance is characterized by, and depends upon, the presence of donor reactive CD25CD4 regulatory T cells. METHODS: CD25 and CD25CD4 T cells, isolated from CBA. Ca (H2) recipients of C57BL/10 (B10; H2) liver and heart allografts 10 days after transplantation, were transferred into CBA. Rag1 mice to investigate their influence on skin allograft rejection mediated by CD45RBCD4 effector T Cells. RESULTS: Fully allogeneic B10 liver allografts were spontaneously accepted by naive CBA.Ca recipient mice, whereas B10 cardiac allografts were acutely rejected (mean survival time=7 days). Strikingly, however, CD25CD4 T cells isolated from both liver and cardiac allograft recipients were able to prevent skin allograft rejection in this adoptive transfer model. Interestingly, CD25CD4 T cells isolated from liver graft recipients also showed suppressive potency upon adoptive transfer. Furthermore, depletion of CD25CD4 T cells in primary liver allograft recipients did not prevent the acceptance of a secondary donor-specific skin graft. CONCLUSIONS: Our data provide evidence that the presence of CD25CD4 regulatory T cells is not a unique feature of allograft acceptance and is more likely the result of sustained exposure to donor alloantigens in vivo.     

Transfection of CD40Ig into liver prevents acute rejection in rat liver transplantation

OBJECTIVE: To investigate the effect of CD40Ig upon acute rejection of rat liver transplants. METHODS: Thirty-two orthotopic liver transplants were performed using Lewis to BN rats with "the two-cuff technique". The rats were randomly divided into three groups. Group A served as controls (n = 10); group B (n = 11) and group C (n = 11); Lipofectamine2000-pcDNA3.1 or Lipofectamine2000-pcDNA3.1. CD40Ig complex was injected into Lewis portal vein ex vivo before cold storage of the liver. On the fifth day after transplantation, three rats in each group were killed to study the pathological changes and TUNEL immune histochemistry performed to examine CD40Ig expression. Lymphocytes were obtained from the spleen. The mixed lymphocyte reaction (MLR) was performed to determine tolerance and sheep anti-human immunoglobulin G (IgG)-FITC-labeled T cells counted by flow cytometry. Postoperative survival times of rats in each group were recorded. The pathological changes of dead rats were observed. RESULTS: The mean survival times of group A and B were 11.00 +/- 4.28 and 12.75 +/- 5.57 days, respectively. There were serious acute rejections in allograft liver in groups A and B. Apoptosis index was 33.67 +/- 5.69 versus 39.00 +/- 5.29. Group C mean survival time was 41.25 +/- 13.70 days (P < .01). Immune histochemistry showed CD40Ig-positive elements in the allograft liver, which revealed light acute rejection and apoptosis index was 0.27 +/- 0.21 (P < .01). The part of the allografted liver in a dead rat showed light acute rejection while the others displayed chronic rejection. Recipients were specifically tolerant to donors in the MLR assay. The IgG-FITC-labeled T cells accounted for 11.57% of all T cells in group C. CONCLUSIONS: CD40Ig transfection inhibited T-cell costimulatory pathway, prevented acute rejection, and prolonged graft survival.     

Proliferation of CD8‐Positive T Cells in Blood Vessels of Rat Renal Allografts

It is still disputed in which anatomical compartments of allograft recipients T‐cells proliferate. After experimental renal transplantation, host monocytes and lymphocytes accumulate in the lumina of graft blood vessels. In this study, we test the hypothesis that T lymphocytes proliferate in the vascular bed of the graft. Kidneys were transplanted in the Dark Agouti to Lewis rat strain combination, an established experimental model for acute rejection. Isogeneic transplantation was performed as a control. Cells in the S‐phase of mitosis were detected in situ three days posttransplantation by pulse‐labeling with BrdU and by immunohistochemical detection of the proliferating cell nuclear antigen (PCNA). More than 20% of all T‐cells in the lumina of allograft blood vessels incorporated BrdU and approximately 30% of them expressed PCNA. In the blood vessels of isografts as well as in other organs of allograft recipients, only few BrdU⁺ cells were detected. A majority of the BrdU⁺ cells in graft blood vessels expressed CD8. In conclusion, we demonstrate that CD8⁺ T lymphocytes proliferate in the lumina of the blood vessels of renal allografts during the onset of acute rejection.     

Tim-3在小鼠心脏移植受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化

目的 检测激活的T_H1类淋巴细胞标记分子"T淋巴细胞免疫球蛋白域及粘蛋白域蛋白-3(Tim-3)"在受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化,探讨其与急性排斥反应的关系.方法 建立小鼠同基因和异基因心脏移植模型(简称:同基因组和异基因组);移植术后第3和第6天,分离和制备两组受者外周血、脾脏、引流淋巴结和移植心内淋巴细胞悬液,采用流式细胞仪检测Tim-3阳性细胞在CD4~+ 和CD8~+ T淋细胞中的比值.结果 两组受者术后外周血和脾脏内Tim-3~+/CD4~+以及Tim-3~+/CD8~+ 的比值比较,差异均无统计学意义(P>O.05).与同基因组比较,异基因组引流淋巴结内Tim-3~+/CD4~+ 比值轻度升高(P<0.05);但异基因组术后第6天与第3天比较,差异无统计学意义(P>0.05).与同基因组比较,移植心内Tim-3~+/CD4~+和TiM-3~+/CD8~+比值均显著升高(P<0.01);异基因组术后第6天与第3天比较.移植心TiM-3~+/CD4~+和Tim-3~+/CD8~+比值也显著升高(P<0.01).结论 小鼠异基因心脏移植受者引流淋巴结和移植心内T淋巴细胞上Tim-3的表达升高与急性排斥反应的进展动态相关.     

转染病毒白细胞介素10基因对同种小鼠心脏移植生存的影响

目的了解病毒白细胞介素10(vIL10)基因对同种小鼠移植心脏的影响。方法用小鼠干细胞病毒(MSCVneo)逆转录病毒表达系统和vIL10cDNA构建MSCVneovIL10重组体,在体外转导CBA(H2K)小鼠的造血干细胞,输入经致死量照射(900rad)的同基因CBA(H2K)小鼠体内,8周后以vIL10表达阳性的CBA(H2K)小鼠(12只,实验组)作为受体,C57BL/6(H2b)小鼠为供体,进行同种腹部异位心脏移植,以未处理、移植无病毒转染的造血干细胞(HSCs)、移植空MSCVneo转染的HSCs鼠(均为10只)为对照组。在移植后第8天,每组受体动物各杀死5只,取出移植心脏行组织病理学、CD+4与CD+8T淋巴细胞浸润(免疫荧光抗体法)检查,IL2、IL4、IL6、小鼠IL10(mIL10)、γ干扰素(IFNγ)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、B71、B72mRNA表达的测定[逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法],余下的动物观察移植心脏存活时间。结果(1)实验组移植心脏存活时间(800±333)d,其他对照组分别为(104±10),(116±11)与(112±17)d(P<001);(2)实验组心肌炎性细胞浸润稀少、心肌结构完整、无明显血管炎,急性排斥反应Ⅰ级,而其他对照组则出现严重的炎性细胞浸润、心肌灶性坏死、心内膜炎、血管炎和心肌出血,急性排斥反应均为Ⅲ级;(3)实验组移植物内IL2、IFNγ、B71、和B72和iNOS的mRNA表达明显下调,而其     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.     

RNA干扰树突细胞主要组织相容性复合物1表达后诱导抑制性T细胞对小肠移植耐受的影响

目的探讨RNA干扰树突细胞（Dc）组织相容性复合物1（MHC-1）表达后获得的CD8＋CD28-抑制性T细胞（Ts）对小肠移植免疫耐受的的影响。方法通过siRNA干扰DC MHC—I表达后,诱导获得CD8^＋CD28^-Ts。建立由Wistar大鼠移植到SD大鼠的小肠移植模型36例,随机分为A组（转染实验组）、B组（未转染组,注射普通T细胞）和C组（移植对照组,注射生理盐水）。术后14d,每组各随机挑选6例,取移植大鼠小肠和血液标本行移植小肠组织病理学检查．并检测移植大鼠血清TGF-β、IFN-γ水平及回肠黏膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性,观察移植大鼠的存活时间。结果术后第14天,A组移植大鼠血清中TGF—β和IFN-γ表达水平高于B、C组（P〈0．05）。A组大鼠肠黏膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性为（6．3±1．0）kU／g,明显高于B组的（3．6±0．9）kU／g和C组的（2．9±1．3）kU／g（P〈0．05）。A组移植小肠病理Parks评分分级明显低于B组和C组（P〈0．05）。A、B和C组移植后大鼠中位生存时间分别为32．0、17．5和21．0d,A组存活时间明显优于B组和C组（P〈0．05）。结论将RNA干扰DCMHC—I表达所获得的CD8^＋CD28^-Ts过继小肠移植大鼠．可以减轻移植大鼠的损伤程度．抑制免疫排斥反应．     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.

Abstract：

Objective To investigate the expression of CXCR6 in allograft rejection and effect of CXCL16/CXCR6 interaction on allograft survival Methods Intra-abdominal heterotopic heart transplantation was performed using wild type (WT) Balb/c mice (H-2d) (allogeneic) as donors or WT C57BL/6 mice (B6, H-2b) (syngeneic) as donors, and using WT B6 mice as recipients. The intragraft expression of CXCR6 and expression of CXCR6 in CD8+ T cells of the spleens from syngeneic and allogeneic recipients were examined. The allogeneic recipients were further divided into the experimental group (n = 5) and control group (n = 6) randomly. The experiment group and control group were injected with anti-CXCL16 mAb or control mAb respectively until rejection occurred. The cardiac allograft survival in experimental group and control group was evaluated. Results Rejected allografts showed higher expression of CXCR6 than syngeneic cardiac grafts. More importantly,expression of CXCR6 in CD8+ T cells was also up-regulated by allograft rejection. However, injection of anti-CXCL16 mAb could not inhibit cytotoxic activity of CD8+ T cells. Moreover, experimental group could not prolong the cardiac graft survival time as compared with control group. Conclusion Expression of CXCR6 in CD8+ T cells is up-regulated in allograft rejection.     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.