VEGF和MMP-9在颅内动脉瘤中的表达及临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在颅内动脉瘤组织中的表达及其在颅内动脉瘤形成、发展中的作用.方法:采用SP免疫组化法,检测18例颅内动脉瘤标本和9例正常脑动脉血管组织中VEGF和MMP-9的表达.结果:颅内动脉瘤组中,VEGF和MMP-9的平均吸光值显著高于对照组,相比较有统计学差异(P<0.05);颅内动脉瘤组VEGF和MMP-9阳性表达率分别为89.5%和84.2%,对照组无阳性表达,两组相比较有差异(P<0.05).结论:VEGF和MMP-9在颅内动脉瘤组织中有高表达,VEGF和MMP-9参与了颅内动脉瘤的形成和发展.通过检测VEGF和MMP-9的阳性表达可以为颅内动脉瘤的干预和治疗提供参考.     

葛根素对自发性高血压大鼠肠系膜动脉舒张功能的影响

目的　探究葛根素对自发性高血压大鼠肠系膜动脉舒张功能的影响。 方法　20只自发性高血压大鼠随机分为5组：高血压组,卡托普利组,葛根素低、中、高剂量组,每组4只,另外4只WKY作为正常对照组。于给药前、给药8周后测量体重和血压,检测血清中NO和血浆中ET-1含量,分离肠系膜三级动脉做HE染色并计算管壁厚度/管腔半径（WT/LR）。利用离体血管压力直径测定仪检测葛根素对内皮完整和去内皮动脉环的舒张效应,并观察内皮依赖性途径阻滞剂和非内皮依赖性途径阻滞剂孵育后,葛根素对动脉环舒张作用的影响。 结果　与高血压组相比,葛根素低、中、高剂量组的收缩压差值和舒张压差值均降低。葛根素高剂量组血清NO含量下降、血浆ET-1含量升高。葛根素中、高剂量组肠系膜三级动脉WT/LR均下降。葛根素对内皮完整和去内皮的动脉环均有浓度依赖性舒张作用,但内皮完整动脉环舒张作用更强。内皮依赖性通路阻滞剂和非内皮依赖性通路阻滞剂孵育后,葛根素的舒张效应均下降。 结论　葛根素对自发性高血压大鼠肠系膜动脉的舒张效应同时具备内皮依赖性和非内皮依赖性。其内皮依赖性途径通过NO-sGC-cGMP信号通路途径来实现的,同时也与促进前列腺类物质释放有关。葛根素非内皮依赖性途径可能是与血管平滑肌上K+通道开放有关。     

雌激素对人脐带来源间充质细胞骨架和超微结构的影响

目的研究在17β-雌二醇（E2）作用下人脐带间充质干细胞骨架、超微结构的形态学变化,并分析其骨架蛋白的表达情况及其可能的机制。方法用三酶法分离培养人脐带间充质干细胞,流式细胞仪检测所得细胞表型。E2处理48h后,用激光共聚焦显微镜观察肌动蛋白和纽蛋白的表达情况;用透射电子显微镜观察细胞超微结构的变化。结果分离得到的人脐带间充质干细胞纯度达到95%以上;E2对肌动蛋白的形成和分布没有影响,但使纽蛋白的分布集中于核周;在E2作用下,人脐带间充质干细胞出现老化,自噬体增多,线粒体出现代偿性增加。结论 E2能改变人脐带间充质干细胞的细胞骨架和超微结构,从而可能影响其功能。     

姜黄素对哮喘大鼠肺组织MMP-9与TIMP-1的表达以及气道重构的影响

目的探讨姜黄素对卵清白蛋白致敏哮喘模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制物-1(TIMP-1)的表达与气道重构的影响。方法 36只清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组、哮喘组和姜黄素组,用卵蛋白作为致敏原制备哮喘大鼠模型,对支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数及嗜酸性粒细胞计数,采用动物呼吸机检测各组大鼠气道呼气阻力,HE染色观察各组大鼠肺组织的病理学变化,采用图像分析软件测定肺组织切片中的支气管壁内周长(Pi)、支气管管壁面积(WAt)、支气管平滑肌面积(WAm),Western blot方法检测各组大鼠肺组织MMP-9与TIMP-1的表达。结果姜黄素干预可显著降低哮喘大鼠BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数、降低哮喘大鼠肺组织的炎性细胞浸润,降低气道炎症,降低WAt/Pi、WAm/Pi的比值(P0.01);肺功能分析结果显示,姜黄素干预可显著降低哮喘大鼠的呼气阻力(P0.01);Western blot结果显示,姜黄素干预可显著降低哮喘大鼠肺组织MMP-9的表达,上调TIMP-1的表达(P0.01)。结论姜黄素降低哮喘大鼠气道炎症及气道阻力,减轻哮喘气道重构,可能与降低MMP-9的表达,上调TIMP-1的表达相关。     

雌激素对人骨髓间质细胞BMP-2 mRNA表达的影响

目的： 探讨雌激素对人骨髓间质干细胞BMP-2基因转录的影响。方法: 将骨髓间质干细胞第3代细胞经1周成骨诱导后，分为17β-雌二醇 100 nmol/L 处理组和对照组，通过RT-PCR法扩增BMP-2 mRNA，测定扩增条带的吸光度值，并与3-磷酸甘油醛脱氢酶看家基因GAPDH的mRNA之比值表示产物mRNA的相对含量。结果: 雌激素处理组BMP-2 mRNA表达明显高于非处理组（P<0.05）。结论: 雌激素通过刺激间质细胞BMP-2 mRNA的表达以发挥其促成骨作用。     

3.0T磁共振血管造影普查对颅内动脉开窗畸形的诊断价值

目的通过大样本病例研究颅内动脉开窗畸形磁共振血管造影(MRA)的检出率、好发部位及其临床意义。方法2009年10月至2011年3月行MRA 2 036例患者,确诊动脉开窗畸形25例(开窗畸形组),其中男性14例,女性11例;年龄30~81岁,平均年龄60.5岁。全部行头颅三维时间飞跃MRA(3D-TOF MRA)扫描,将原始图像经工作站处理,得到最大密度投影(MIP)和容积重组(VR)图像,分析颅内动脉开窗畸形的影像学特点,与伴发动脉瘤之间的相关性。结果 2 036例患者中,发现动脉开窗畸形共计25例(检出率1.23%,25/2 036),其中位于基底动脉11例;位于椎动脉颅内段4例;位于前交通动脉区6例;位于大脑中动脉3例;位于大脑后动脉1例。25例开窗畸形中有6例合并动脉瘤,4例位于颈内动脉颅内段,2例位于大脑前动脉。结论 3D-TOF MRA检查能准确诊断、显示颅内动脉开窗畸形。     

雌激素对血管内皮功能的保护作用及其机制

已知血管内皮功能失调与心血管疾病的发生发展密切相关 ,对其功能失调进行逆转性治疗 ,是现代心血管疾病治疗的发展趋势。雌激素主要通过保护血管内皮功能而发挥心血管保护作用。雌激素可通过受体和非受体途径直接保护和调节血管内皮功能 ,以及通过改善血脂代谢和发挥抗氧化作用间接保护血管内皮功能。     

局麻下颅内动脉狭窄支架置入术的可行性研究

目的：探讨在清醒状态下颅内动脉狭窄支架置入术的可行性及临床意义。方法：2007年2月到2008年1月,在局麻下应用血管内支架置入术治疗颅内动脉狭窄患者12例,其中颈内动脉系狭窄7例,椎-基底动脉系狭窄5例。结果：本组12例均成功接受了血管内支架置入,术中患者清醒,配合良好,无不良反应。术后6个月复查DSA提示,颅内动脉狭窄程度由原来的67．5％±9．5％下降至9．5％±2．8％（P〈0．01）。随访12～23个月,12例患者症状均改善,无卒中发生。结论：局麻下行血管内支架置入术治疗颅内动脉狭窄,可将重要并发症的危险性降到最低;颅内动脉痛觉神经并不敏感,完全可以承受介入支架置入操作。     

螺内酯和缬沙坦对高血压大鼠肠系膜微动脉重塑的影响

目的:观察盐皮质激素受体拮抗剂螺内酯和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)AT1受体拮抗剂缬沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜微动脉形态、超微结构和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法:将18只雄性SHR随机分为三组,每组6只,其中两组分别用螺内酯20mg/kg/天、缬沙坦30mg/kg/天溶于饮水中灌胃,连续治疗13周,对照组不用药,正常饮水,并与WKY大鼠(6只)比较。鼠尾法测量大鼠动脉收缩压;应用计算机图像分析系统,计算大鼠肠系膜微动脉管壁与管腔横截面积比;用透射电镜观察大鼠肠系膜微动脉结构的变化;用RT-PCR方法检测肠系膜微动脉Ⅰ型胶原mRNA水平。结果:实验第13周末,SHR对照组血压明显高于WKY组(P<0.01);缬沙坦组和螺内酯组血压明显低于SHR对照组(P<0.01);缬沙坦组的血压与WKY组接近(P>0.05)。螺内酯组和缬沙坦组大鼠肠系膜微动脉的中膜厚度/管腔半径值及中膜面积/管腔面积值仍显著大于WKY组(P<0.05),但较SHR组明显降低(P<0.01)。透射电镜见SHR肠系膜动脉壁有大片纤维组织增生,螺内酯组和缬沙坦组肠系膜动脉壁内仅见少许纤维组织增生。螺内酯组和缬沙坦组Ⅰ型胶原mRNA水平明显低于SHR对照组(P<0.01)。结论:螺内酯和缬沙坦均能抑制SHR的Ⅰ型胶原合成,表明盐皮质激素受体和AngⅡ受体在高血压阻力血管的重塑中起着重要作用。     

分叉和狭窄对颅内动脉血液流体动力学的影响

目的 基于颅内动脉数量众多且影响因素较多,本文重点研究了分叉角度、对称分支动脉狭窄度、不对称分支动脉狭窄度和斑块尺寸对颅内动脉粥样硬化形成和生长的影响作用,以期利用血流动力学参数的评估为动脉粥样硬化的预警、诊断及选择合适的血管内治疗等提供一定的指导作用.方法 基于计算流体动力学方法,构建主支动脉连接分支动脉的几何模型和有限元模型的边界条件,设计45°～135°区间共7种分叉角度,依托狭窄度λ来表征血管的狭窄程度,通过血液压力、流速和剪切力等血液流体力学参数对比分析各因素对颅内动脉粥样硬化的产生及发展过程的机制.结果 分叉角度对速度比最大值和剪切力最大值基本没有影响,对压力最小值影响也较小,最大振幅不超过5％.随着狭窄度的增加,最小压力下降而速度比最大值增加,当λ从0增加到0.5、0.67和0.75时,最小压力分别下降了1.6 Pa、1.8 Pa和3.6 Pa,速度比最大值分别上升了48％、1.2倍和1.9倍;狭窄度对最大剪切力的影响很小,直到当狭窄度增大到0.75时,最大剪切力提升了5％.非对称两个支路狭窄度的比值φ增加时,3个参数均逐渐增加且增加的幅度随φ的增加而增大.随着斑块长度的增加,压力最小值呈线性增加,速度比最大值则逐渐增加,剪切力最大值则是逐渐下降,最后趋势趋于平缓.结论 分叉角度对血液流体力学参数的影响较小;对称分支动脉狭窄度越大,或者不对称分支动脉的狭窄度比值越大,或者斑块长度越短,均引起血管壁剪切力越大,越容易造成血管内壁损伤,加速动脉粥样硬化.本研究为颅内动脉粥样硬化的形成机制、影响因素以及预测转归等方面提供有用信息.     

雌激素对人乳腺癌细胞株MCF-7 KLK 6 mRNA和蛋白表达水平的影响

 目的： 探讨雌激素与其拮抗剂三苯氧胺对雌激素受体阳性人乳腺癌细胞株MCF-7组织激肽释放酶6（KLK 6）mRNA和蛋白（hK6）表达水平的影响。方法: 取生长良好的MCF-7细胞，在不同浓度的雌激素（17-βE2）和三苯氧胺存在下培养72 h后，收集细胞，分别采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应和流式细胞术，检测KLK6 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果: 实时荧光定量RT-PCR表明，当17-βE2浓度在10-12 mol/L时，与乙醇对照组无明显差异(P>0.05), 17-βE2浓度在10^-10 mol/L和10-8 mol/L时，KLK6 mRNA的相对含量显著少于乙醇对照组；流式细胞术分析表明, 代表hK6含量的相对荧光强度（AFI）显著低于乙醇对照组（P<0.01）。三苯氧胺（10^-6 mol/L）作用组KLK6 mRNA 的相对含量显著高于对照组（P<0.01）；hK6含量与对照组相比差异显著（P<0.01）。结论: 雌激素对MCF-7 KLK6 mRNA和蛋白表达水平有一定的下调作用，而三苯氧胺作用相反。     

依那普利对自发性高血压大鼠心肌ACE和ACE2表达的影响

 目的 观察自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR)心肌的血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme, ACE)和ACE2的表达,以及依那普利干预的影响。方法 将15只SHR随机分为2组：SHR对照组(n=7)和依那普利组(n=8),分别给以安慰剂、依那普利15mg.kg-1.d-1灌胃干预4周。干预结束后处死大鼠,分离左心室,行RT-PCR、western blot蛋白质免疫印迹检测。同步取10只WKY大鼠作为正常血压对照组。结果SHR心肌的ACE的mRNA和蛋白质的表达都显著高于)WKY组(1.68±0.34 vs 0.33±0.12, P＜0.05;1.21±0.14 vs 0.71±0.11, P＜0.05),而ACE2 的mRNA和蛋白质表达皆明显低于WKY组(0.50±0.15 vs 1.16±0.24, P＜0.05; 0.71±0.24 vs 1.22±0.14, P＜0.05)。依那普利明显降低ACE的mRNA和蛋白质表达(0.44±0.19 vs 1.68±0.34, P＜0.01; 0.87±0.13 vs 1.21±0.14, P＜0.05),提升ACE2的mRNA表达(1.77±0.49 vs 0.50±0.15, P＜0.05),对ACE2的蛋白表达无明显影响(0.42±0.22 vs 0.71±0.24, P＞0.05)。结论 SHR心肌ACE明显升高,ACE2显著降低,有利于血压上调。依那普利能降低ACE,提升ACE2,可能是血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitors, ACEI)的降压机制之一。     

颅内外动脉铸型标本的设计和制作

头颈部颅内外血管铸型标本,是管道铸型中较难制作的一种铸型标本.在以往的解剖学技术资料中,都是从颈内动脉插管,颅内外动脉一并灌注.然而,颅内外血管的毗邻结构有明显差异,     

c-myc、MMP-9在受压静脉管壁的表达

目的:研究c-myc蛋白和MMP-9在受压静脉管壁的表达,初步探讨静脉受压后血管重塑的分子机制.方法:42只SD大鼠随机分为对照组(21只)和实验组(每时间点各3只,共21只),用5#注射针头辅助作部分髂静脉结扎造模.分别在0.5、12、24、48、72h、7和14d取材,明胶液包埋后冰冻切片,用免疫组化SP法检测c-myc蛋白和MMP-9的表达,采用计算机图像分析系统测定切片的平均积分光密度(IOD).结果:对照组和正常静脉管壁均未见c-myc蛋白、MMP-9表达,实验组c-myc蛋白从12 h开始表达,MMP-9从24 h开始表达上调,并逐渐增强,IOD逐渐升高,与对照组比较,差异具有显著性(P<0.05).7 d时两者表达同时达到高峰.c-myc蛋白与MMP-9在受压静脉管壁的表达呈正相关(r=0.7532,P<0.05)结论:c-myc基因产物和MMP-9在受压静脉管壁表达增强,两者在受压静脉管壁重塑过程起着重要作用;c-myc基因和MMP-9的表达具有相关性.     

去卵巢和雌激素替代治疗对心肌细胞基因表达谱的影响

目的：本实验通过高通量的cDNA微阵列技术，研究去卵巢和雌激素替代治疗对心肌细胞基因表达谱的影响，寻找雌激素的靶基因。方法:用 1 400 个基因构建的cDNA微阵列检测假手术组（Ⅰ）、去卵巢组（Ⅱ，去势组）和雌激素替代治疗组（Ⅲ，替代组）3组SD雌鼠心肌组织的基因表达差异,随机选2个基因用半定量RT-PCR验证检测结果。结果:假手术组和去势组共检出心肌差异表达的基因177个，其中去卵巢导致上调的基因91个，下调的基因86个；去势组和替代组共检出心肌差异表达的基因164个，其中雌激素替代治疗后导致上调的基因113个，下调的基因54个。Ⅰ/Ⅱ和Ⅲ/Ⅱ比较，相同的差异表达基因54个，雌激素明显影响心肌膜通道和载体（18个）、细胞受体（9个）、信号转导相关基因（7个）和细胞代谢（6个）的mRNA水平。而大部分基因（45个）是在去势组表达下调，在雌激素替代组表达上调。RT-PCR实验证实了cDNA微阵列结果 。结论：长期雌激素替代治疗明显影响心肌细胞膜通道和载体、信号转导、细胞受体和细胞代谢等相关基因的表达。长期雌激素替代治疗可通过增加Na+,K+-ATPase和Na+/H+交换蛋白的基因表达，稳定心肌细胞内Na+和K+的浓度。雌激素还可抑制多巴胺受体基因的表达，预防心肌肥大、充血性心衰等心脏疾病的发生。     

血红素加氧酶-1上调自发性高血压大鼠肝脏MMP-2与MMP-9表达

目的 探讨血红素加氧酶-1 (HO-1)对自发性高血压大鼠(SHR)肝脏基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与-9 (MMP-9)表达的影响.方法 大鼠随机分为4组:Wistar诱导组(WH)与SHR诱导组(SH)按15 mg/kg每天连续4天腹腔内注射浓度为8 g/L的氯化血红素(hemin)诱导HO-1表达;Wistar对照组(W)与SHR对照组(S)腹腔内注射等体积0.1 mol/L NaOH (pH8.3).检测大鼠尾动脉收缩压.免疫组化法分析肝脏HO-1及MMPs表达.明胶酶谱法检测血浆MMP-2及MMP-9的相对活性.结果 WH组与SH组肝脏HO-1、MMP-2与MMP-9表达量均显著高于W组与S组.HO-1诱导可显著降低SHR大鼠血压.S组血浆MMP-2及MMP-9相对活性显著高于W组.WH组与SH组血浆MMP-2及MMP-9相对活性显著高于W组与S组.结论 HO-1可上调SHR肝脏MMP-2与MMP-9表达.     

雌激素对运动防治骨质疏松效果的影响

目的 探讨雌激素对运动防治骨质疏松效果的影响.方法 48只5个月龄SD雌性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、假手术加运动组(Sham+run组)、单纯去卵巢组(Ovx组)、去卵巢加运动组(Ovx+run组)、去卵巢加运动加1/4雌激素组(Ovx+run+e1组)和去卵巢加运动加雌激素组(Ovx+run+e2组).其中Ovx+run+e1组和Ovx+run+e2组于术后1周开始皮下注射不同剂量的己烯雌酚,Ovx+run+e1组剂量为0.025mg/kg,1次/4d;Ovx+run+e2组为0.025mg/kg,1次/d,持续12周.Sham+run组、Ovx+run组、Ovx+run+e1组、Ovx+run+e2组于术后1周开始采用大鼠专用跑笼进行运动训练12周.术后13周行股骨远端骨密度和生物力学测量,并对胫骨近端进行骨组织计量学测量.结果 (1)Ovx组股骨远端骨密度值最低[(0.10±0.01)g/cm2],与其他各组相比差异有统计学意义(均P＜0.05);Ovx+run+e2组与Sham+run组骨密度值相当[分别为(0.14±0.02)g/cm2和(0.13±0.02)r/cm2],均显著高于其他各组(均P＜0.05);Sham组、Ovx+run组和Ovx+run+e1组之间骨密度值差异无统计学意义[(0.11±0.01)g/cm2比(0.12±0.01)g/cm2比(0.12±0.01)g/cm2,均P＞0.05].(2)Sham组骨小梁的厚度、骨小梁面积百分比和骨小梁数量与Ovx+run+e2组、Sham+run组差异无统计学意义,且均高于Ovx+run+e1组、Ovx+run组和Ovx组(均P＜0.05);而骨小梁分离度在Sham组、Ovx+run+e2组和Sham+run组之间差异也无统计学意义,但低于Ovx+run+e1组、Ovx+run组和Ovx组(均P＜0.05).骨小梁面积百分比和骨小梁数量:Ovx组＜Ovx+run组＜Ovx+run+e1组(均P＜0.05);骨小梁分离度:Ovx组＞Ovx+run组＞Ovx+run+e1组(均P＜0.05);骨小梁厚度在3组间差异无统计学意义.(3)Ovx组极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变、剪切弹性模量明显低于其他各组(均P＜0.05).Ovx+run+e2组的极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变与Sham+run组相当,均高于其他各组(均P＜0.05);剪切弹性模量则与Sham+run组、Ovx+run组相当,均高于Sham组、Ovx组、Ovx+run+e1组(均P＜0.05).Sham组、Ovx+run+e1组与Ovx+run组极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变之间差异均无统计学意义.Sham组剪切弹性模量小于Ovx+run组(P＜0.05),但Sham组与Ovx+run+e1组、Ovx+run+e1组与Ovx+run组之间差异无统计学意义.结论 雌激素水平对运动防治骨质疏松的效果有显著影响.雌激素充足,对运动防治骨质疏松效果起协同作用;雌激素不足,则对运动防治骨质疏松效果无协同作用.     

雌激素对去卵巢家兔血浆氧化型低密度脂蛋白的影响

目的:探讨胆固醇饲养的去卵巢兔接受17β-雌二醇(17β-estradiol,E₂)替代治疗后血浆氧化型低密度脂蛋白(oxidizedLDL,oxLDL)的变化及其与主动脉粥样硬化形成的关系。方法:全部兔切除双侧卵巢,喂饲含1.5%胆固醇的标准颗粒饲粒。2周后随机分成4组,其中3组分别用E₂1mg,2mg和4mg替代治疗,另1组为对照组。分别在用E₂后0,3,8,12周测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和oxLDL水平,用计算机测定主动脉粥样斑块面积。结果:17β-雌二醇替代治疗后,血清SOD明显上升(P＜0.05),而血浆oxLDL水平和主动脉粥样斑块面积显著降低(P＜0.01),且与E₂有量效关系。全部实验兔血浆oxLDL水平和主动脉粥样斑块面积呈显著正相关(r=0.74,P＜0.01)。结论:雌激素抑制低密度脂蛋白的氧化修饰可能是其抑制主动脉粥样斑块形成的重要机制。     

雌激素对阴道上皮细胞抗念珠菌作用的影响

  目的：研究阴道上皮细胞对白色念珠菌的生长抑制作用及雌激素对此作用的影响。 方法： 用酶消化法分别分离雌激素处理组、动情间期组和去势组小鼠阴道上皮细胞作为效应细胞，白色念珠菌芽生孢子作为靶细胞，将效靶细胞共同孵育9 h，测定白色念珠菌生长抑制率，观察其生长密度及透射电镜超微结构的改变。 结果： 白色念珠菌与阴道上皮细胞共同孵育后，生长受到抑制，生长密度降低，超微结构表现为与阴道上皮细胞靠近的念珠菌细胞壁崩解，细胞膜连续性破坏，甚至细胞器肿胀溶解。雌激素处理组与去势组和动情间期组比较，阴道上皮细胞对念珠菌的生长抑制率下降（P<0.05）。 结论： 小鼠阴道上皮细胞具有天然的抗白色念珠菌作用，雌激素降低此抑制作用。