促甲状腺素释放激素增强失血性休克大鼠心脏受体功能及其机理

本文用失血性休克大鼠离体左房观察了促甲状腺素释放激素（ｔｈｙｒｏｔｒｏｐｉｎｒｅｌｅｎｓｉｎｇｈｏｒ－ｍｏｒｅ，ＴＲＨ）对肾上腺素能和多巴胺受体激动剂正性肌力作用的影响，用全细胞记录式膜片钳制技术研究了ＴＲＨ对豚鼠单一心肌细胞慢钙内流的作用及对肾上腺素能和多巴胺受体激动剂促钙内流作用的影响。结果显示，ＴＲＨ本身对失血性休克大鼠离体左房仅有轻微的正性肌力作用，但却可增强异丙肾上腺素和多巴胺的正性肌力作用，但不增强苯肾上腺素的正性肌力作用。表明ＴＲＨ对休克大鼠心脏β－肾上腺素能和多巴胺受体具有一定的增敏作用。ＴＲＨ可延长豚鼠单一心肌细胞的钙通道开放时间，增强异丙肾上腺素和多巴胺的促钙内流作用，这可能是ＴＲＨ增敏心脏β和ＤＡ受体，增加其受体激动剂正性肌力作用的重要原因。     

β_2-肾上腺素能受体过表达后成年犬心肌细胞收缩功能的改变及机制

背景:在转基因小鼠、大鼠等小动物实验中发现,心肌细胞特异性过表达β-肾上腺素受体可以改善其收缩功能,但目前尚缺乏在大型哺乳动物进行的有关实验报道。目的:探讨犬心肌细胞过表达β2-肾上腺素受体后心肌细胞收缩功能的改变及其可能机制。方法:采用胶原酶消化法分离培养犬心肌细胞,用携带β2-肾上腺素受体目的基因的重组腺病毒转染心肌细胞。转染48h后观察心肌细胞β2-肾上腺素受体蛋白表达及在基础状态和最大收缩状态下(以异丙肾上腺素10-6mol/L刺激)心肌细胞cAMP水平及收缩功能的变化。结果与结论:转染β2-肾上腺素受体的心肌细胞β2-肾上腺素受体蛋白表达及胞内cAMP水平明显增多(P0.05),基础状态下收缩功能明显增强,但不改变最大收缩幅度百分比。说明β2-肾上腺素受体的过表达可能通过增加心肌细胞内cAMP水平改善心肌细胞的收缩功能。     

哮喘患者不同期外周淋巴细胞β肾上腺素能受体的变化

目的:研究不同期哮喘患者外周淋巴细胞β肾上腺素能受体数量及功能的变化。方法:用放射配基结合分析及放射免疫分析法测定外周淋巴细胞β肾上腺素能受体和血浆cAMP、cGMP水平,同时测定通气功能。结果:缓解期哮喘患者外周淋巴细胞β肾上腺素能受体最大结合量(Bmax)较正常人明显增高,平衡解离常数(Kd)亦增高,血浆cAMP水平无显著差异;发作期哮喘患者β肾上腺素能受体Bmax较正常人显著降低,Kd值无明显差异,而血浆cAMP水平则显著降低。结论:哮喘时β肾上腺素能受体的改变与哮喘患者所处状态有关,是其发病过程中伴随出现的病理变化。     

腺苷A3受体(A3AR)在失血性休克血管反应性调节中的作用

目的： 阻力血管对血管活性物质反应性的降低是决定创伤休克发生、发展及预后的重要因素。腺苷是机体遭受创伤、缺氧时大量释放的重要内源性调质,并通过相应受体发挥作用。本研究拟观察腺苷A3受体(A3AR)在失血性休克大鼠肠系膜上动脉的表达变化情况及其与休克血管反应性变化间的关系,初步探讨A3AR是否参与对休克血管反应性的调节。方法：参照以往的工作基础,建立大鼠失血性休克(40 mmHg)模型;大鼠肠系膜上动脉对缩血管物质去甲肾上腺素(NE)诱导的收缩反应性采用离体小血管张力测定仪检测;A3AR的蛋白及mRNA表达变化情况分别采用Western blotting及RT-PCR进行检测。结果：结果显示,在大鼠失血性休克后0-4 h,其肠系膜上动脉1-2级分支血管对由NE诱导的收缩反应性呈现“双向性”变化;A3AR mRNA表达随休克时间的延长呈逐渐降低的趋势,但无显著差异;而肠系膜上动脉血管平滑肌A3AR的蛋白表达在休克后即刻呈增加趋势,随着休克时间的延长,其表达逐渐下降,尤其以休克后4h的表达下降最为明显;此外,A3AR激动剂可部分恢复休克2 h大鼠肠系膜上动脉对NE的收缩反应性,且该作用可被A3AR阻断剂MRS1523所拮抗。结论：A3AR参与失血性休克血管低反应性的形成,在失血性休克后激动A3AR受体可保护血管功能,部分恢复失血性休克后大鼠阻力血管对NE的收缩反应性。     

血管平滑肌细胞钙库Ca~(2+)动员的变化在休克血管低反应性形成中的作用

目的:探讨大鼠腹主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)在缺氧培养时胞内钙库钙释放的变化情况,并探讨胞内钙库钙释放在休克血管对去甲肾上腺素(NE)低反应性中的可能作用,为进一步阐明休克血管低反应性的发生机制提供依据。方法:建立大鼠失血性休克(40mmHg,2h)的在体模型及大鼠VSMCs缺氧细胞模型;采用Fura-3/AM钙离子成像方法测定VSMCs胞浆钙离子浓度([Ca2+])的变化情况及其与IP3受体(IP3R)及雷诺定受体(RyR)介导的钙释放通道的关系;采用离体器官张力测定技术,检测不同内钙释放依赖信号通路在休克血管低反应性形成中的可能作用。结果:在细胞外液无Ca2+的前提下,NE可通过动员内钙释放引起VSMCs胞浆[Ca2+]的明显升高;缺氧培养后VSMCs胞浆[Ca2+]较正常对照组有所升高,由NE诱导的VSMCs胞浆[Ca2+]较对照组有所降低,但均无显著差别;但在缺氧培养的VSMCs,细胞内钙库钙释放功能明显改变,表现为与正常对照组比较,缺氧VSMCs由IP3R敏感钙释放通道开放剂adenophostinA(10-5mol/L)及ATP-Na2(10-4mol/L)诱导的VSMCs胞浆[Ca2+]升高不显著,但RyR敏感钙释放通道开放剂caffeine可诱导缺氧VSMCs胞浆[Ca2+]的明显升高;失血性休克(40mmHg,2h)可引起大鼠腹主动脉血管对由NE诱导的收缩反应性明显降低,IP3R激动剂ATP-Na2(10-4mol/L)并不明显提高休克血管对NE的收缩反应性,但IP3R阻断剂heparin(104U/L)可明显抑制休克血管对NE的收缩反应性;此外,在无钙及含钙的K-H液中,RyR阻断剂ryanodine(10-5mol/L)可部分恢复休克血管对NE的收缩反应性,而RyR激动剂caffeine(10-3mol/L)可进一步降低休克血管对NE诱导的收缩反应性。结论:失血性休克后由RyR介导的内钙释放被激活部分参与了休克血管低反应性的形成。     

促甲状腺素释放激素增强失血性休克大鼠心脏受体功能及其…

本文用失血性休克大鼠离体左房观察了促甲状腺素释放激素对肾上腺素能和多巴胺受体激素剂正性肌力作用的影响，用全细胞记录式膜片钳制技术研究了ＴＲＨ对豚鼠单一心肌细胞慢钙内流的作用及对肾上腺素能和多巴胺受体激动剂促钙内流作用的影响。     

急性肺损伤大鼠多核白细胞与肺组织β受体变化的相关性研究

目的:观察急性肺损伤(ALI)大鼠循环血多核白细胞(PMN)和肺组织β肾上腺素能受体(β-AR)的变化,并探讨二者β-AR变化的相关性。方法:静注内毒素复制大鼠ALI模型,循环血PMN及肺组织β-AR用放射性配基结合分析法测定。结果:静注内毒素后1、4、6 h,大鼠循环血PMN及肺组织β-AR的最大结合容量(Bmax)均明显低于对照组(P＜0.01);静注内毒素后4 h, 6 h较1 h及6 h较4 h PMNβ-AR的Bmax均显著降低(P＜0.05),肺组织β-AR Bmax各内毒素组间差异不明显(P＞0.05);循环血PMN和肺组织β-AR变化在程度上无相关性(P＞0.05)。结论:ALI时循环血PMN及肺组织β-AR数目均明显减少,其在ALI发生发展中可能起一定的作用,但ALI时外周血PMN β-AR不能作为观察肺组织β-AR变化的相关指标。     

内毒素休克时大鼠肠系膜微血管对去甲肾上腺素反应性的变化

本文应用微循环显微也视录象技术,研究内毒素休克大鼠在休克不同时期肠系膜微血管对去甲肾上腺素(NA)反应性的变化。发现局部滴用由低至高浓度NA使微血管口径呈剂量依赖性缩小,对照组在相当于休克相应时间三次观察收缩反应曲线无明显差异(P>0.05),而休克早期微血管对NA的缩血管反应明显,晚期收缩反应减弱(均P<0.01);同时,休克早期浓度—反应曲线右移,EC_(50)减小,反应阈值降低;休克晚期浓度—反应曲线左移,EC_(50)增大,反应阈值增高;但对照组三次观察无明显变化。提示内毒素休克早期微血管对NA的反应性增高,晚期反应性降低,一、二级细动脉的变化尤为显著。可能是休克早期的代偿与晚期的失代偿机理之一。     

洛沙坦抑制β-肾上腺素能刺激诱导的大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

目的:研究洛沙坦(Los)能否抑制β-肾上腺素能刺激诱导的大鼠心肌细胞凋亡,及其抑制凋亡的作用机制.方法:体外培养大鼠H9c2心肌细胞株,将其分为对照组、异丙肾上腺素(ISO)组、ISO+Los组、LY294002组和DMSO组,用流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳观察心肌细胞的凋亡状态,通过RT-PCR检测凋亡相关基因的表达,Western blotting检测磷酸化Akt(p-Akt)和总Akt(t-Akt)蛋白水平的表达变化,放射免疫法检测各组细胞cAMP的含量.结果:10 μmol/L ISO可诱导H9c2心肌细胞凋亡,并伴有bax/bcl-2和caspase-9表达增高以及cAMP水平升高;加入10μmol/L Los后可明显抑制细胞凋亡的发生,bax/bcl-2和caspase-9表达减少,同时p-Akt的蛋白水平显著升高,而cAMP的水平降低;当加入LY294002阻断Akt活化后则可增加细胞凋亡的发生,从而取消Los对ISO诱导凋亡的保护作用.结论:ISO通过慢性刺激β-肾上腺素能受体(β-AR)可诱导心肌细胞凋亡,Los通过干扰β-AR下游信号转导通路并增加Akt活化,从而抑制β-肾上腺素能刺激诱导的心肌细胞凋亡.     

CaSR抑制剂Calhex231通过PTH-AR途径参与创伤失血性休克大鼠血管低反应性的调节

目的:探讨钙敏感性受体(CaSR)抑制剂Calhex231(Cal)是否通过甲状旁腺素(PTH)-肾上腺素受体(AR)途径参与创伤失血性休克大鼠血管低反应性的调节.方法:检测Cal对创伤失血性休克大鼠血PTH水平的影响,并观察外源给予PTH对正常和休克大鼠血压的影响;Western blot法检测Cal对大鼠肠系膜上动...     

α_2-肾上腺素能受体激动剂B-TH933抑制LPS处理的心肌细胞释放TNF-α

目的:观察α2-肾上腺素能受体激动剂B-HT933对脂多糖(LPS)刺激的心肌细胞产生肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响,并初步分析其作用机制。方法:分离培养SD大鼠乳鼠心肌细胞。利用免疫荧光染色观察心肌α2A-肾上腺素能受体的分布;B-HT933和/或LPS处理心肌细胞一定时间后,用ELISA方法检测细胞培养液中TNF-α的含量、实时荧光定量PCR测定心肌细胞TLR4和TNF-αmRNA的表达、Western blot分析心肌细胞中相关信号分子的磷酸化水平。结果:免疫荧光染色证实乳鼠心肌细胞中存在α2A-肾上腺素能受体。LPS以剂量和时间依赖的方式刺激心肌细胞产生TNF-α,0.1μmol/L的B-HT933处理能显著抑制LPS诱导的TNF-αmRNA的表达和TNF-α蛋白的产生。而且,BHT能抑制LPS诱导的心肌细胞IκBα的磷酸化。结论:乳鼠心肌细胞上存在α2A-肾上腺素能受体,其激动剂B-HT933可能通过抑制心肌细胞IκBα的磷酸化来减少LPS诱导的TNF-α产生。     

血管活性药物及中药麝香对内毒素性休克的影响及其在抗休克治疗中的作用

目的 :观察缩、扩血管西药及中药麝香对低排高阻型内毒素性休克的影响 ,评价其在抗休克治疗中的疗效。方法 :大鼠随机分为对照组 (A组 )、山莨菪碱组 (B组 )、去甲肾上腺素组 (C组 )、麝香组 (D组 )。颈外静脉推注脂多糖 (LPS)复制内毒素休克模型 ,实验组分别给予山莨菪碱、去甲肾上腺素、麝香药物后观察肠系膜微循环、血压变化。结果 :推注LPS后对照组及实验组动物均发生内毒素性休克 ,出现微循环障碍。山莨菪碱能提高休克后血流速度 ,但A、C、D组微循环未出现明显改善。结论 :山莨菪碱可改善内毒素性休克的微循环瘀滞状态 ,而去甲肾上腺素 ,麝香没有明显作用。     

白细胞介素-1β在病理性疼痛大鼠脊髓LTP中的作用及机制

目的: 探讨白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角C纤维诱发电位长时程增强(long-term potentiation, LTP)中的作用及其机制。方法: 用坐骨神经部分损伤(spared nerve injury, SNI)和腰5前根切断(lumbar 5 ventral root transection, L5 VRT)方法复制大鼠病理性疼痛模型,观察外源性IL-1β对正常大鼠及病理性疼痛模型大鼠脊髓背角C纤维诱发电位的影响,并且检测p38 MAPK (p38 mitogen-activated protein kinase)和NF-κB (nuclear factor-kappa B)信号通路在其中的作用。结果: 500 μg/L IL-1β对正常大鼠C纤维介导的基本突触传递和高频刺激诱导的LTP都没有影响,而5 μg/L的IL-1β可以在神经病理性疼痛模型的大鼠上诱导出LTP。预先用p38 MAPK或NF-κB的抑制剂(SB203580或PDTC)可以完全阻断IL-1β诱导的LTP。结论: 外源性IL-1β可诱导神经病理性疼痛大鼠脊髓背角C纤维诱发电位的LTP。p38 MAPK和NF-κB信号通路可能参与这一过程。     

CaSR在大鼠血管收缩/舒张反应性调节中的作用

目的研究钙敏感性受体(Ca SR)激动剂对大鼠肠系膜动脉收缩和舒张反应性的影响、以及内皮在其中的作用。方法采用内皮完整和内皮去除的大鼠肠系膜动脉,观察Ca SR特异性激动剂cinacalcet对血管基础张力和预收缩的血管张力的影响、以及不同剂量cinacalcet预处理对去甲肾上腺素(NE)诱导的血管收缩反应性和乙酰胆碱诱导的舒张反应性的影响。结果Ca SR激动剂cinacalcet对静息状态下内皮完整和内皮去除的血管基础张力均无明显影响。在内皮完整的血管环,cinacalcet对预收缩血管有明显的舒张作用,并呈剂量依赖性;内皮去除取消了cinacalcet的舒张作用。Cinacalcet预处理30 min,使内皮完整的血管的收缩反应性明显降低,而对舒张反应性无明显影响。对去除内皮的血管环,cinacalcet预处理对血管收缩/舒张反应性均无明显影响。结论 Ca SR在血管收缩反应性调节中有重要作用,并有明显的内皮依赖性。     

肾性高血压大鼠与心脏α1肾上腺素能受体自身抗体的关系

目的:研究肾性高血压大鼠发病与心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体的关系。方法:利用手术的方法建立肾性高血压大鼠模型,观察心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体与肾性高血压发病的关系,同时对自身抗体生物活性进行分析。结果:在狭窄左肾动脉两周后,大鼠血浆中心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体的阳性率和滴度与术前相比均明显升高,并且可持续到12周,以后逐渐下降|同时心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体对培养的乳鼠心肌细胞的跳动具有激动剂样效应。结论:心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体可能通过作用使外周血管阻力增加,从而促进肾性高血压大鼠心肌肥厚。     

长期容量超负荷心力衰竭大鼠心脏交感神经去甲肾上腺素转运蛋白表达的变化

目的：检测长期容量超负荷（VOL）条件下大鼠心肌β₁-肾上腺素能受体（β₁-AR）及其上游调控因素心脏交感神经去甲肾上腺素转运蛋白（NET）mRNA表达的变化。方法：用RT-PCR及Northern杂交检测心脏交感神经NET表达组织特异性、VOL后不同时间大鼠心脏交感神经NET及β₁-AR mRNA表达水平变化。结果：①心脏交感神经节专一性表达心脏交感神经NET基因。②VOL后3 d大鼠左心室收缩压（LVSP）下降最显著（24%）（P<0.05）此后逐渐增高,至手术后60 d高于对照组32.8%（P<0.05）;3-30 d舒张末压（LVEDP）显著增177.96%-234.75%（P<0.05）,术后60 d恢复至对照组水平（P>0.05）。③与对照组比较VOL大鼠术后3-30 d NET、β₁-AR mRNA表达无下降（P>0.05）,60 d NET RT-PCR及Northern杂交检测分别显示下降43.3%（P<0.05）和 63.5%（P<0.05）,Northern杂交显示β₁-AR下降50%（P<0.05）。结论：长期心脏VOL大鼠左心室β₁-AR mRNA可维持较长时间稳定与心脏交感神经NET mRNA表达相对稳定有关。NET表达正常对维持β₁-AR对肾上腺素能刺激的敏感性,维持心脏收缩功能正常可能有重要意义。     

感染性和内毒素性休克大鼠动脉组织中硫化氢的变化

探讨内源性硫化氢 (H2 S)在感染性和内毒素性休克大鼠血管组织中的含量变化及意义。用盲肠结扎穿孔法制备大鼠感染性休克模型和静脉注射内毒素法制备内毒素休克大鼠模型 ,观察大鼠血液动力学、代谢变化及测定内源性硫化氢含量和一氧化氮含量 ,并计算其相关性。感染性及内毒素性休克大鼠的血液动力学参数均明显低于对照组 ,而左室舒张末压明显高于对照组 (P <0 0 1) ,血糖明显低于对照组 (P <0 0 1) ,血乳酸水平明显高于对照组(P <0 0 1)。感染性和内毒素性休克大鼠动脉组织中H2 S含量明显高于对照组 ,(均P <0 0 1)。休克大鼠血管H2 S含量与血压、心功能及低血糖的程度呈高度负相关 (均P <0 0 1)。以上结果说明内源性H2 S可能参与休克过程中的病理生理调节     

异丙肾上腺素舒血管作用机制的在体实验研究

目的:研究NOS(一氧化氮合酶)抑制剂对异丙肾上腺素(isoprenaline)产生的血管舒张作用的影响及涉及的β-肾上腺素能受体(β-AR)亚型,探讨NO是否作为β-AR激动后信号转导过程中的信使物质参与β-AR激动产生的血管舒张。方法:利用家兔股动脉恒流灌注模型。结果:(1)Isoprenaline产生浓度依赖的血管舒张。(2)NOS抑制剂L-NAME阻断了isoprenaline产生的血管舒张作用。(3)β₁-AR阻滞剂CGP20712A不能阻断isoprenaline产生的外围血管舒张作用,但β₂-AR阻滞剂ICI118551能阻断isoprenaline产生的外周血管舒张作用。结论:Isoprenaline引起兔股动脉舒张通过激活NOS介导,涉及的β受体亚型为β₂受体。     

哮喘患者不同期外周淋巴细胞β肾上腺素能受体的变化

目的:研究不同期哮喘患者外周淋巴细胞β肾上腺素能受体数量及功能的变化.方法:用放射配基结合分析及放射免疫分析法测定外周淋巴细胞β肾上腺素能受体和血浆cAMP、cGMP水平,同时测定通气功能.结果:缓解期哮喘患者外周淋巴细胞β肾上腺素能受体最大结合量(Bmax)较正常人明显增高,平衡解离常数(Kd)亦增高,血浆cAMP水平无显著差异;发作期哮喘患者β肾上腺素能受体Bmax较正常人显著降低,Kd值无明显差异,而血浆cAMP水平则显著降低.结论:哮喘时β肾上腺素能受体的改变与哮喘患者所处状态有关,是其发病过程中伴随出现的病理变化.     

山茛菪碱的钙拮抗作用

用Langendorff离体心脏灌流方法证明,山茛菪碱(654-2)可使正常大鼠心肌收缩力减弱,心率减慢,冠腺流量减少;高钙及毒毛旋花子甙K可消除654-2对心肌收缩的抑制作用。654-2与钙拮抗剂异搏停一样,还可对抗大剂量异丙肾上腺素所致的心肌细胞钙超负荷及坏死。以上结果提示,山莨菪碱具有钙拮抗作用。