肢体缺血再灌注后关节软骨细胞凋亡的规律

目的：观察肢体缺血再灌注后关节软骨细胞凋亡情况，探讨其机制及凋亡对关节软骨退行性变的影响。方法：35只成年健康新西兰大白兔随机分为7组(每组5只)，行左侧后肢缺血8h(右侧为对照)，于再灌注后1，3d，1，2，4，8和12周取膝关节胫骨平台软骨组织，行透射电镜观察，原位末端标记(in situ terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测关节软骨细胞凋亡情况。结果：肢体缺血再灌注后1d，实验侧的TUNEL阳性细胞均数[(19．8&;#177;2．1)个／高倍视野)]明显多于对照侧(P&;lt;0．01)，3d组最多，达到对照侧的360％，之后逐渐回落。透射电镜下发现缺血再灌注早期大量细胞坏死。结论：肢体缺血再灌注可引起关节软骨细胞损伤，软骨细胞凋亡，导致关节软骨蜕变。     

肢体缺血再灌注后关节软骨细胞凋亡的规律

目的:观察肢体缺血再灌注后关节软骨细胞凋亡情况,探讨其机制及凋亡对关节软骨退行性变的影响。方法:35只成年健康新西兰大白兔随机分为7组(每组5只),行左侧后肢缺血8h(右侧为对照),于再灌注后1,3d,1,2,4,8和12周取膝关节胫骨平台软骨组织,行透射电镜观察,原位末端标记(insituterminaldeoxynucleotidyltransferase-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测关节软骨细胞凋亡情况。结果:肢体缺血再灌注后1d,实验侧的TUNEL阳性细胞均数犤(19.8±2.1)个/高倍视野)犦明显多于对照侧(P<0.01),3d组最多,达到对照侧的360%,之后逐渐回落。透射电镜下发现缺血再灌注早期大量细胞坏死。结论:肢体缺血再灌注可引起关节软骨细胞损伤,软骨细胞凋亡,导致关节软骨蜕变。     

诱导型一氧化氮合酶在关节软骨缺血再灌注损伤及软骨细胞凋亡中的作用

目的：观察兔膝关节软骨缺血再灌注损伤过程中诱导型一氧化氮合酶的表达规律及软骨细胞的凋亡情况，探讨诱导型一氧化氮合酶在关节软骨缺血再灌注损伤中的作用。方法：实验于2004-03／09在泰山医学院形态学研究室完成。①选择健康新西兰白兔45只，随机分为假手术组5只，暴露股动静脉但不阻断血运，术后4h取材；缺血组5只，缺血4h不恢复血运即取材；缺血再灌注组35只，阻断股动静脉4h后恢复血运，于缺血再灌注2，4，8，24h，3，7，14d取材，每时点各5只。②采用免疫荧光法测定软骨内诱导型一氧化氮合酶的表达阳性细胞，染色成功后用激光共聚焦显微镜观察并扫描记录。阳性细胞标记为红色荧光。③采用原位末端标记法测定凋亡软骨细胞数目，染色成功后在显微镜下观察并记数。细胞核中有棕黄色颗粒者为阳性细胞，即凋亡细胞。结果：纳入动物45只，均进入结果分析。①缺血再灌注组诱导型一氧化氮合酶阳性细胞数高于缺血组和假手术组f假手术组、缺血组、缺血再灌注2，4，8，24h，3，7，14d分别为0，（1．20&;#177;0．40），（22．20&;#177;1．30），（33．00&;#177;1．58），（40．00&;#177;1．58），（33．80&;#177;1．30），（18．20&;#177;1．48），（11．20&;#177;1．67），（3．00&;#177;1．00）个／mm^2，P〈0．01]。②缺血再灌注组软骨细胞凋亡数高于缺血组和假手术组[假手术组、缺血组、缺血再灌注2，4，8，24h，3，7，14d分别为[（0．50&;#177;0．40），（1．20&;#177;0．45），（7．80&;#177;1．30），（12．60&;#177;1．14），（16．60&;#177;1．12），（17.80&;#177;1．30），（15．20&;#177;0．87），（13．60&;#177;0．89），（4．40&;#177;1．67）个／mm^2，P〈0．011。③诱导型一氧化氮合酶的表达与软骨细胞凋亡数高度相关（r=0．716，P=0．046）。结论：诱导型一氧化氮合酶参与了软骨缺血再灌注损伤，并可能是触发软骨细胞凋亡的重要因素。     

诱导型一氧化氮合酶在关节软骨缺血再灌注损伤及软骨细胞凋亡中的作用

目的:观察兔膝关节软骨缺血再灌注损伤过程中诱导型一氧化氮合酶的表达规律及软骨细胞的凋亡情况,探讨诱导型一氧化氮合酶在关节软骨缺血再灌注损伤中的作用。方法:实验于2004-03/09在泰山医学院形态学研究室完成。①选择健康新西兰白兔45只,随机分为假手术组5只,暴露股动静脉但不阻断血运,术后4h取材;缺血组5只,缺血4h不恢复血运即取材;缺血再灌注组35只,阻断股动静脉4h后恢复血运,于缺血再灌注2,4,8,24h,3,7,14d取材,每时点各5只。②采用免疫荧光法测定软骨内诱导型一氧化氮合酶的表达阳性细胞,染色成功后用激光共聚焦显微镜观察并扫描记录。阳性细胞标记为红色荧光。③采用原位末端标记法测定凋亡软骨细胞数目,染色成功后在显微镜下观察并记数。细胞核中有棕黄色颗粒者为阳性细胞,即凋亡细胞。结果:纳入动物45只,均进入结果分析。①缺血再灌注组诱导型一氧化氮合酶阳性细胞数高于缺血组和假手术组[假手术组、缺血组、缺血再灌注2,4,8,24h,3,7,14d分别为0,(1.20±0.40),(22.20±1.30),(33.00±1.58),(40.00±1.58),(33.80±1.30),(18.20±1.48),(11.20±1.67),(3.00±1.00)个/mm2,P<0.01]。②缺血再灌注组软骨细胞凋亡数高于缺血组和假手术组[假手术组、缺血组、缺血再灌注2,4,8,24h,3,7,14d分别为[(0.50±0.40),(1.20±0.45),(7.80±1.30),(12.60±1.14),(16.60±1.12),(17.80±1.30),(15.20±0.87),(13.60±0.89),(4.40±1.67)个/mm2,P<0.01]。③诱导型一氧化氮合酶的表达与软骨细胞凋亡数高度相关(r=0.716,P=0.046)。结论:诱导型一氧化氮合酶参与了软骨缺血再灌注损伤,并可能是触发软骨细胞凋亡的重要因素。     

诱导型一氧化氮合成酶在股骨头骺关节软骨缺血-再灌注后的表达

目的:对发育期髋关节股骨头骺关节软骨中诱导型一氧化氮合成酶在缺血-再灌注后的表达进行检测,了解其在缺血-再灌注后关节软骨损害中的作用。方法:实验于2005-11/2006-05在温州医学院完成。取4周龄雄性SD大鼠80只,体质量(75±10)g,将大鼠随机抽签法分为缺血-再灌注组和假手术组,每组40只。缺血-再灌注组以无损伤血管夹夹闭分叉处或稍上方夹闭腹主动脉3h,以50g/L水合氯醛6mL/kg腹腔内注射麻醉,腹腔内注入生理盐水1～2mL。假手术组开腹暴露腹主动脉5min常规关腹。两组分别于术后3,6,12,24,48h,5d,2,4周不同时间点对股骨头骺关节软骨诱导型一氧化氮合成酶表达进行免疫组织化学检测。切片观察股骨头骺关节软骨各层的着色情况,肉眼判断强弱情况及对着色强度进行灰度分析。结果:纳入大鼠80只均进入结果分析。①在假手术组未见明显的诱导型一氧化氮合成酶着色信号。在缺血-再灌注后3h也未见明显的诱导型一氧化氮合成酶表达,6h有诱导型一氧化氮合成酶的表达,24,48h,5d,2周的诱导型一氧化氮合成酶表达着色增强。②在股骨头骺关节软骨浅、中、深各层6,12,24,48h,5d均有着色,着色分布不尽一致。③在缺血-再灌注组的24,48h,5d浅层及中层的表达灰度增强,经比较,在上述时间点缺血-再灌注组有诱导型一氧化氮合成酶的增强表达(P<0.05)。结论:发育期髋关节缺血再灌注损害后关节软骨因素中有诱导型一氧化氮合成酶表达机制参与,抑制诱导型一氧化氮合成酶的表达可能有助于抗发育期关节软骨的损害。     

缺血再灌注损伤与心肌细胞凋亡研究进展

再灌注治疗是急性心肌梗死最重要的治疗方法，但再灌注的同时也出现了心肌细胞不可逆的损伤，称为缺血再灌注损伤。坏死和凋亡是缺血再灌注过程中心肌细胞的主要死亡形式，二者的共同作用造成心肌梗死面积的扩大和心功能的下降。心肌细胞凋亡主要由两大途径介导：细胞膜受体介导的外源性途径，线粒体介导的内源性途径。本文就目前有关缺血再灌注损伤中心肌细胞凋亡途径的最新研究进展和缺血后处理对心肌的保护作用进行综述。     

带气囊导管构建脊髓缺血模拟再灌注与缺血分离模型

背景:采用带有气囊的导管急性压迫脊髓缺血模拟人类损伤可以造成再灌注与缺血分离的动物模型。目的:应用免疫组化和生物化学分析方法观察不同缺血时间窗处理对损伤脊髓的影响。方法:SD大鼠36只,随机分为假手术组,带气囊导管造成大鼠脊髓缺血10,30,45,60,90min组。结果与结论:再灌注48h后,随着缺血时间的延长,脊髓前角神经元坏死和凋亡逐渐加重,丙二醛水平逐渐增加,超氧化物歧化酶活性逐渐下降,大鼠的神经行为学病症加重。提示用带气囊的导管建立缺血再灌注大鼠模型成功,再灌注后大鼠脊髓的损伤随缺血时间的延长而加重。     

带气囊导管构建脊髓缺血模拟再灌注与缺血分离模型

背景：采用带有气囊的导管急性压迫脊髓缺血模拟人类损伤可以造成再灌注与缺血分离的动物模型。目的：应用免疫组化和生物化学分析方法观察不同缺血时间窗处理对损伤脊髓的影响。方法：SD大鼠36只,随机分为假手术组,带气囊导管造成大鼠脊髓缺血10,30,45,60,90min组。结果与结论：再灌注48h后,随着缺血时间的延长,脊髓前角神经元坏死和凋亡逐渐加重,丙二醛水平逐渐增加,超氧化物歧化酶活性逐渐下降,大鼠的神经行为学病症加重。提示用带气囊的导管建立缺血再灌注大鼠模型成功,再灌注后大鼠脊髓的损伤随缺血时间的延长而加重。     

缺血再灌注损伤对幼兔股骨头骨骺的影响

目的：建立幼兔股骨头骨骺缺血再灌注损伤的动物模型，观察缺血再灌注损伤对幼兔股骨头骨骺的影响。方法：实验于2003—06／2004—02在解放军总医院骨科实验室及病理科实验室完成。取1月龄左右健康新西兰兔48只，体质量（1．0&;#177;0．25）kg，雌雄不拘。正常组3只，其余45只采用完全随机的方法分为缺血4，8，12h组，每组15只兔。采用髂总动脉阻断-开放法建立幼兔股骨头骨骺缺血再灌注模型。分离髂总动脉，在两侧髂总动脉分叉处以下用无创血管夹夹闭左侧髂总动脉，到达再灌注时间点后松开血管夹，分别记录缺血和再灌注时间。3组分别在缺血4，8，12h再灌注，每组在再灌注后即刻，4，24，72，168h分批麻醉下处死实验新西兰兔，每组每个时间点3只，正常组在实验条件下即刻处死动物取标本。实验中标本均取自实验侧。将标本分为2份，苏木精-伊红染色观察缺血再灌注后股骨头骨骺的病理组织学结构改变；原位末端标记技术观察缺血再灌注后股骨头骨骺细胞在分子生物学水平上的改变。结果：缺血8h组有1只兔死亡。缺血12h组2只兔死亡，1只兔1周后出现局部肢体缺血性坏死，原因不明，予以剔除并及时补充，进入结果分析48只。①缺血再灌注后幼兔股骨头骨骺形态结构逐渐紊乱，缺血4h组细胞核以肿胀为主，少量核固缩；8h组和12h组细胞核以固缩为主，细胞陷窝加深，部分细胞溶解消失。②缺血可造成幼兔股骨头骨骺少量细胞凋亡，再灌注后凋亡细胞明显增多。3组再灌注后4，24，72，168h和再灌注后即刻比较，其细胞凋亡率差异均有显著性意义（0．3584&;#177;0．18．0．5832&;#177;0．07，0．7367&;#177;0．14，0．6172&;#177;0．06，0．1759&;#177;0．04；0．6948&;#177;0．05．0．7930&;#177;0．08，0．8867&;#177;0．06，0．8578&;#177;0．08，0．4751&;#177;0．12；0．7158&;#177;0．11．0．8082&;#177;0．06．0．9360&;#177;0．05，0．9367&;#177;0.04，0．5615&;#177;0．04，P〈0．05），同一缺血时间下随再灌注时间的延长，其细胞凋亡率上升，再灌注后72h细胞凋亡率最高，168h与72h比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：缺血再灌注可加重幼兔股骨头骨骺的损伤，细胞凋亡可能是缺血再灌注早期股骨头骨骺细胞损伤的重要机制。     

丙泊酚对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡信号通路的影响

背景:肾移植中肾缺血再灌注损伤能引发凋亡程序的执行,丙泊酚可能的肾保护作用及其与细胞凋亡通路间的关系,有助于探讨丙泊酚的作用机制.目的:探讨丙泊酚对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡通路的影响及可能的作用机制.设计,时间及地点:动物实验,细胞形态学观察,于2004/2005在北京友谊医院泌尿外科研究所实验室共同设计和完成.材料:选取封闭群SD成年雄性大鼠99只.兔抗鼠Bcl-2、Bax、caspase3、cytochrome C均为武汉博士德生物工程有限公司产品.方法:将动物随机分为对照组26只、缺血再灌注组35只、缺血再灌注+丙泊酚组38只.建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,术前单次静脉缓慢输注乳酸林格液5 mL/kg,逐层正中切口开骏,切除右肾,用无创血管夹夹闭左侧肾蒂,缺血时间45 min,松夹再灌注后全层缝合腹壁,取再灌注0,3,12,24,72 h左侧肾脏,取肾同时采血处死动物.缺血再灌注+丙泊酚组在缺血前15 min用药,丙泊酚1 mg/(kg·min)直至再灌注后30 min,共用药75 min.对照组和缺血再灌注组以乳酸林格液等量输注.主要观察指标:观察损伤肾的形态学改变,用免疫组织化学观察细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase 3和细胞色素C的表达情况.结果:光镜可观察到肾缺血再灌注引起的肾损害,程度依次为近曲小管、远曲小管、集合管、肾小球;免疫组化图像分析观察到缺血再灌注组与对照组相比,Bax、caspase 3,细胞色素C表达增加,Bcl-2表达未见明显变化;缺血再灌注+丙泊酚组与对照组比较,前者Bax、caspase 3和细胞色素C表达下降,Bcl-2表达增高(P＜0.05).结论:丙泊酚对肾缺血再灌注损伤引起的细胞凋亡可能具有保护作用,可能机制是抑制促凋亡蛋白Bax、caspase 3和细胞色素C的表达,对Bcl-2的表达无影响,与细胞凋亡的线粒体通路途径有关.     

Pretreatment with probucol attenuates cardiomyocyte apoptosis in a rabbit model of ischemia/reperfusion

Objective. Apoptosis plays an important role in ischemic reperfusion injury. Probucol is a hypolipidemic agent and has antioxidant activity, which may inhibit the oxidative modification of low‐density lipoprotein cholesterol. Studies have demonstrated that probucol improves left ventricular function, prevents left ventricular dilatation, and reduces cardiac fibrosis. However, the exact mechanism of probucol on the cardioprotective effect is not known. The objective of the present study was to examine the effect of probucol on ischemia/reperfusion‐induced cardiomyocyte apoptosis. Material and methods. Thirty male New Zealand White rabbits were randomly divided into sham, control, and treated groups, each group comprising 10 rabbits. Before establishment of the ischemia/reperfusion model, animals in the treated group were additionally fed daily with probucol (1000?mg per day) for 4 weeks. In the sham group, the heart was exposed after the chest had been opened, but the coronary artery was not ligated. The animals were killed 150?min after the procedure. In the other two groups, the rabbits were subjected to 30‐min of coronary occlusion followed by a 2‐h reperfusion. A blood sample was drawn from the right atrium before the animal was killed. The apoptotic myocytes were detected by terminal deoxynucleotidyl transferase‐mediated dUTP nick‐end labelling. Expression of caspase‐3 and mitochondrial cytochrome c release was detected by immunohistochemical analysis and Western blot analysis. The level of serum superoxide dismutase (SOD) was tested using the xanthine oxidase method, and the content of serum malondialdehyde (MDA) was measured by colorimetry. Results. As compared with the sham group, the control group had a significantly higher apoptotic index ((32.48±4.56)?% versus (0.56±0.18)?%, p<0.01) and serum MDA concentration (2.70±0.64 versus 1.06±0.46?µmol/L, p<0.01), and a significantly lower serum SOD level (144.27±21.69 versus 204.64±16.67?µU/L, p<0.01). Probucol pretreatment apparently caused a decrease in the apoptotic index ((21.64±3.08)?%, p<0.01 versus the sham or control group) and serum MDA concentration (1.95±0.51?µmol/L, p<0.01 versus the sham or control group), and increased the levels of serum SOD (162.61±16.13?µU/L, p<0.01 versus the sham group; p<0.05 versus the control group). The caspase‐3 activation and mitochondrial cytochrome c release in the control group were also higher than those in the treated group (p<0.01). Conclusions. The present study shows that probucol attenuates ischemia/reperfusion‐induced cardiomyocyte apoptosis. The protective effect of probucol on the myocardium may be partly due to its antioxidant activity.     

老龄大鼠脑缺血-再灌注神经细胞凋亡变化规律研究

目的　比较研究青年与老龄大鼠脑缺血再灌注 (I/R)后超微结构与神经细胞凋亡特征。方法　采用线栓法建立急性局灶性脑缺血再灌注损伤模型 ,观察缺血 3h及再灌注 3、6、12、2 4和 72 h脑组织超微结构变化及细胞凋亡。结果　老龄大鼠脑缺血 3h和 I/R12 h脑梗死面积较青年大鼠增大。随着 I/R时间延长 ,脑组织细胞损伤逐步加重 ,老龄大鼠较青年大鼠严重。细胞凋亡随着 I/R时间延长而明显增加 ,老龄大鼠出现的早、持续时间长。结论　老年脑缺血再灌注脑梗死面积增大、超微结构损伤和细胞凋亡出现得早且严重。     

银杏叶提取物对肾缺血-再灌注后细胞凋亡的影响

目的:观察银杏叶提取物对大鼠肾缺血-再灌注后细胞凋亡的影响.方法:采用动脉夹闭大鼠双侧肾蒂45 min、再灌注24 h的方法制成急性肾缺血-再灌注模型.光、电镜观察细胞结构改变;采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的DNA原位末端标记技术检测细胞凋亡的情况,流式细胞仪定量分析细胞凋亡;测定血浆肌酐、尿素氮,并观察肾功能变化.结果:缺血-再灌注组较假手术组肾小管凋亡细胞数明显增多;银杏叶提取物处理组较缺血-再灌注组凋亡细胞数明显减少,组织损害明显减轻.结论:银杏叶提取物预防给药能减轻肾缺血-再灌注损伤,其机制可能与抑制细胞凋亡有关.     

聚合人脐带血血红蛋白预处理对肝缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨聚合人脐带血血红蛋白(PolyPHb)预处理对SD大鼠肝脏缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法采用随机分组对照研究的方法,将30只成年雄性SD大鼠平均分为假手术(Sham)组、I/R组和PolyPHb预处理(PolyPHb)组;采用大鼠70%肝I/R损伤模型,缺血前I/R组和PolyPHb组动物分别静脉推注生理盐水和PolyPHb(0.3 gHb/kg)预处理,然后缺血60 min,再灌注3 h。检测术前及术后丙氨酸转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,并采集术后肝脏组织标本行HE染色和TUNEL染色。结果 PolyPHb组、I/R组的肝酶释放ALT、AST分别为(350.9±80.8)U/L vs(830.5±85.7)U/L(P<0.01)和(446.1±97.10)U/L vs(1 096.2±135.6)U/L(P<0.01),肝细胞凋亡发生率分别为(15.62±8.58)%vs(35.21±9.62)%(P<0.01)。结论 PolyPHb预处理对大鼠肝脏I/R损伤具有明显的保护作用。     

肠缺血/再灌注时卡巴胆碱对肠上皮细胞凋亡的影响

目的研究肠缺血/再灌注(I/R)时卡巴胆碱对肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法雄性Wistar大鼠,戊巴比妥钠腹腔麻醉,结扎肠管造成长约8cm肠袋,采用夹闭肠系膜上动脉(SMA)阻断血流45min后恢复血流的方法,制备肠I/R损伤模型。将动物按随机数字表法分为假手术组(n=40)、I/R模型组(n=40)和卡巴胆碱组(n=40)。卡巴胆碱组在阻断血流的同时向肠袋内注射卡巴胆碱(0.1mg/kg),I/R模型组给予等量生理盐水。分别在再灌注0、30、60、120和240min时,采用病理学方法按Chiu's评分观察肠上皮细胞损伤;原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肠上皮细胞凋亡指数的变化;免疫组化法检测肠上皮细胞凋亡相关半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase-3)和Bcl-2蛋白表达的变化。结果与I/R模型组比较,卡巴胆碱组肠上皮细胞病理学变化较轻,凋亡指数明显降低,caspase-3阳性肠上皮细胞数明显减少,而Bcl-2阳性肠上皮细胞数明显增加(P均<0.01)。结论卡巴胆碱能抑制I/R时肠上皮细胞caspase-3表达,增加Bcl-2表达,减少肠上皮细胞的凋亡。     

缺血预处理加用川芎嗪抑制肠缺血-再灌注性心肺细胞凋亡

目的：研究缺血预处理加川芎嗪对肠缺血-再灌注大鼠心、肺细胞凋亡及相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法：健康SD大鼠,随机分为假手术对照组（Ⅰ组）、肠缺血-再灌注组（Ⅱ组）、川芎嗪治疗组（Ⅲ组）、缺血预处理组（Ⅳ组）和川芎嗪＋缺血预处理组（Ⅴ组）5组.用免疫组化法检测心、肺组织Bcl-2和Bax蛋白表达,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（TUNEL）检测心、肺细胞凋亡,并测定心、肺组织超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性及丙二醛（MDA）含量.结果：Ⅴ组心、肺组织细胞凋亡指数明显低于除Ⅰ组外的其他各组,Bcl-2蛋白表达明显增多,肺组织Bax蛋白表达明显减少,心肌细胞Bax蛋白表达明显比Ⅱ组降低,同时Ⅴ组心、肺组织SOD活性增高,MPO活性和MDA含量降低.结论：缺血预处理与川芎嗪联合应用对抑制肠缺血-再灌注所致的心、肺细胞凋亡具有显著的协同作用.     

黄皮酰胺对高血压局灶性脑缺血-再灌注大鼠Bcl-2蛋白表达和细胞凋亡的影响

目的观察黄皮酰胺对肾性高血压大鼠(RHR)脑缺血-再灌注后Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的影响,探讨其脑保护作用机制。方法75只RHR被随机分成假手术组、单纯缺血-再灌注组和黄皮酰胺组。采用线栓法制作局灶性脑缺血-再灌注模型,假手术组不造成缺血。用免疫组化法和原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL法)分别观察缺血2h后再灌注6、12、24、48和72h脑细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡细胞数。结果①再灌注6h即可见Bcl-2蛋白表达较多,24h达高峰,此后逐渐下降。与单纯缺血-再灌注组比较,黄皮酰胺组Bcl-2蛋白表达于再灌注后各时间点均明显增高,差异均有显著性(P均<0.01)。②再灌注6h后有较多凋亡细胞,于72h达高峰。与单纯缺血-再灌注组比较,再灌注6-24h黄皮酰胺组凋亡细胞均显著减少(P均<0.01),但再灌注48h后细胞凋亡的抑制作用不明显(P均>0.05)。假手术组及缺血-再灌注组的非缺血侧无Bcl-2阳性细胞,仅见0-2个凋亡细胞。结论局灶性脑缺血-再灌注后Bcl-2表达显著增高,细胞凋亡参与了脑缺血-再灌注损伤的过程。黄皮酰胺能显著上调Bcl-2表达,抑制细胞凋亡,并可能与Bcl-2协同抑制细胞凋亡,这可能是黄皮酰胺脑保护作用的机制。     

三羟基异黄酮对兔缺血心肌的保护作用

目的探讨三羟基异黄酮(GST)对缺血/再灌注(I/R)心肌的保护效果及可能机制。方法结扎雄兔冠脉左前降支建立心肌I/R模型:心肌缺血40 min,然后再灌注2 h。分4组:Sham组:冠脉不结扎;I/R组;GST+I/R组:心肌缺血前5 min静脉注入1.0 mg/kg GST;Vehicle+I/R组:心肌缺血前5 min静脉注入1 mL二甲基亚砜。检测血清乳酸脱氢酶及肌酸激酶活性,再灌注结束后通过Evans蓝-TTC染色判断心肌梗死范围,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果与I/R组及Ve-hicle+I/R组相比,GST+I/R组心肌梗死范围、心肌酶活性及细胞凋亡指数均显著降低(P<0.01),而前两组之间无显著差异。结论心肌缺血前给予GST能有效地减轻心肌I/R损伤,抗凋亡和减少心肌细胞坏死是其发挥效应的两条途径。     

大鼠肾缺血/再灌注损伤不同时相Fas、FasL蛋白表达及意义

AIM: To study the relationship between the expression of Fas/FasL protein and apoptosis in rats after renal ischemia/repernision. METHODS: Establish the models of renal ischemia/reperfusion injury in rat and SABC im-munohistochemical methods were used to detect the changes of expression of Fas/FasL protein. Pathomorphological changes in renal ischemia/reperfusion injury were observed. RESULTS: The expression of Fas/FasL proteins was negative in the sham operated group. Fas/FasL proteins were increased in renal in ischemia/reperfusion group, and gradually upregulated with the duration of ischemia or reperfusion and peaked at 72 h of reperfusion. The expression of Fas/FasL proteins was atronger in 60 min ischemia group than 30 min ischemia group and they were mainly expressed in renal tubule. We observed local necrosis and inflammatory cells infiltration around infracted area in ischemia/repernision group by HE dyeing methods. And the necrosis area was mainly occurred around proximal convoluted tubule. CO     

犬肠缺血/再灌注时小肠对早期肠内营养耐受能力的实验研究

目的研究肠道低灌注状态下实施早期肠内营养(EEN)时小肠功能指标及耐受能力的变化。方法健康雄性杂种犬24只,夹闭肠系膜上动脉(SM A)1 h后恢复灌注造成肠缺血/再灌注(I/R)损伤,复流后4 h实施EEN,将瑞代营养液(4 m l.k-g 1.-h 1)经肠黏膜张力计管持续滴注3 h,如果动物出现肠道不能耐受症状(如呕吐、腹泻等)则停止,间隔6 h后再次实施EEN,直至动物肠道能够耐受为止。按随机数字表法将动物分成单纯EEN组、单纯I/R组、I/R后EEN组(I/R+EEN组),每组8只。检测小肠黏膜二氧化碳分压(P iCO2)、D木糖吸收量、小肠腔内压力判定小肠灌注和功能变化。结果肠I/R+EEN组肠道不能耐受发生率(87.5%)和严重程度均显著高于单纯EEN组(0)和单纯I/R组(12.5%)。实施EEN后,与单纯I/R组和单纯EEN组相比,I/R+EEN组小肠腔内压力及肠P iCO2均显著升高,而血浆D木糖吸收量显著降低(P均<0.01)。结论肠I/R能显著降低小肠对EEN的耐受能力,肠I/R后过早(<12 h)实施EEN能加重小肠I/R损伤,并进一步抑制小肠吸收和运动功能。