绿袍散中金胺O检测方法的建立

摘要：目的:建立绿袍散中金胺O染色物的检测方法,并对其进行筛查,同时建立阳性样品中金胺O的含量测定方法。方法:采用HPLC-DAD法对绿袍散中的金胺O进行筛查,并采用HPLC-MS/MS对阳性样品进行确认。结果:对21批次样品进行筛查和确认发现,有2批样品检出金胺O。金胺O在1.01～5.06μg·ml-1（r=0.999 9）的范围内有良好的线性关系,平均回收率为99.31%,RSD为1.36%（n=9）。阳性样品中检出的金胺O含量分别为132.60,137.41μg·g-1。结论:本方法准确可靠,可作为绿袍散中金胺O的检测。     

HPLC法筛查骨刺片中的金胺O

目的：：筛查骨刺片中金胺 O。方法：采用 HPLC 法筛查骨刺片中金胺 O。色谱柱：Diamonsil -C18柱(250 mm ×4.6 mm,5μm);流动相：乙腈-0.025 mol·L-1磷酸二氢钾(含0.2%三乙胺,并用磷酸调节pH至3.0)(35∶65);流速：0.8 ml· min-1;检测波长：432 nm;柱温：35℃;进样量：10μl。结果：金胺O 的检测限为0.5 ng。经检测的45批市售品,有7批含有金胺O。结论：该方法简便、快速、准确,为保证该制剂的用药安全提供了依据。     

胃康灵胶囊中金胺O染色物的检测方法研究

［摘 要］目的：建立胃康灵胶囊中金胺O染色物的检测方法,并对其进行筛查,同时建立阳性样品中金胺O的含量测定方法。方法：采用UPLC-PDA法对胃康灵胶囊中的金胺O进行筛查,并采用UPLC-MS/MS二级质谱对阳性样品进行确证。结果：对来自37家企业的123批次样品进行筛查和确认发现：有6家企业的23批次样品中检出金胺O;金胺O进样在0.42～208.72 ng 的范围内有良好的线性关系。胃康灵胶囊阳性样品中金胺O的含量在1.0～28.7μg?粒-1。结论：本方法准确可靠,可作为胃康灵胶囊中金胺O染色物的检测方法。     

用替代对照品法和质谱数据库快速筛查保健品或中成药中添加镇静安神类药品

目的:建立中成药及保健品中添加镇静安神类化学药品的HPLC-DAD及HPLC-MS/MS分析方法,建立HPLC-DAD数据库及二级质谱库,并应用分析。方法:HPLC-DAD法采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C8(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,0.02 mmol·L-1磷酸二氢钾-甲醇(95∶5)为流动相,流速1.0 m L·min-1;HPLC-MS/MS法采用Shim-Pack VP-ODS(150 mm×2.0 mm,5μm)色谱柱,0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.3 m L·min-1,质谱检测器以正离子和MRM方式进行检测。样品以甲醇为溶剂,超声提取。结果:HPLC-DAD法采用有效相对保留时间和紫外光谱相似度双指标进行定性准确可靠,相对校正因子法回收率98%~105%。优化HPLC-MS/MS条件,确定了定性离子及建立质谱库的最佳质谱条件。结论:该法快速准确,适用于中成药及保健品中非法添加镇静安神类化学药的质量监控,为替代对照品法及二级质谱库在此类研究中提供依据。     

HPLC-MS/MS法测定人体内美沙拉嗪血药浓度

目的建立快速、灵敏的HPLC-MS/MS法测定人体内美沙拉嗪血药浓度。方法血浆样品经乙腈沉蛋白进行提取,用Agilent-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,以喷昔洛韦为内标,流动相为甲醇-乙腈-体积分数为0.05%的甲酸溶液(体积比为50∶20∶30),流速为500μL·min~(-1)(柱后分流比为1∶1),采用ESI源,正离子检测,多反应监测(MRM)扫描方式。结果人体血浆中的内源物质不干扰美沙拉嗪的测定,美沙拉嗪在50~2 500μg·L~(-1)内峰面积与质量浓度线性关系良好(r=0.996 8),最低检测限为50μg·L~(-1),低、中、高3个质量浓度质控样品的日内,日间精密度均小于15%,准确度为97.0%~101.8%,提取回收率在71.4%~73.4%,基质效应可忽略不计。结论HPLC-MS/MS法可用于人血浆中美沙拉嗪测定。     

妇科止带片中金胺O的检测方法研究

目的建立高效液相色谱(HPLC-PDA)法和液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法对妇科止带片中可能掺入的化工染料金胺O进行测定。方法采用HPLC-PDA法对妇科止带片样品进行筛查,采用LC-MS/MS法对筛查结果进行验证。结果市售的25批样品中,有5批检出了金胺O。结论建立的检查方法准确、可靠、专属性强,可有效检测妇科止带片中金胺O的染色情况。     

氨基己酸注射液中有关物质检查方法的研究北大核心CSCD

目的:对氨基己酸注射液中的有关物质进行研究。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.8μm),流动相为0.02 mol·L^(-1)甲酸铵缓冲液(含0.1%的甲酸)(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速0.4 m L·min^(-1),柱温30℃;在电喷雾离子源正离子模式下,对杂质进行定性研究,确定主要杂质的结构。采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.55%己烷磺酸钠溶液(25∶75,含1%磷酸二氢钾,用磷酸调节pH至2.2),流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,检测波长210 nm,对杂质进行定量测定。结果:建立了氨基己酸注射液中有关物质的检测方法,氨基己酸注射液中的主要杂质为己内酰胺与氨基己酸二聚体,含量分别为标示量的0.002%~0.02%和0.009%~0.05%。结论:本法可用于氨基己酸注射液中有关物质的检测。     

黄柏片中金胺O及重金属检查

目的 建立黄柏片中金胺O的检查方法,同时考察该制剂中重金属残留水平。方法 金胺O采用超高液相色谱串联质谱法（UPLC-MS/MS）进行分析,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈-6 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱离子源为电喷雾离子源（ESI）,数据采集模式为多反应离子监测（MRM）;重金属以汞、铅、铜、镉、砷、铬6种元素为分析指标,运用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）对其含量进行测定。结果 所有样品未检出金胺O;铅、汞、镉、砷、铜5种元素的含量低于标准要求,但有1批样品铬含量超过儿童服用拟定限量值。结论 所建立的UPLC-MS/MS法可有效甄别黄柏片中是否存在金胺O,对重金属残留量的考察有助于评估其安全性。     

高效液相色谱-串联质谱法测定葛根芩连片中染色剂金胺O的方法研究

目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定葛根芩连片中染料金胺O的含量。方法采用Agilent Eclipse plus C18(2.1×100 mm,1.8μm),流动相:乙腈-0.01 mol·L-1乙酸铵,梯度洗脱;流速:0.3 m L·min-1;柱温35℃;进样量:2μL。离子源:电喷雾电离源(ESI);扫描模式:多反应监测(MRM)。结果方法学验证结果表明,金胺O在0.093 4~1.869 pg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为94.38%,RSD为3.60%(n=9)。结论本方法准确、便捷,具有良好的精密度、重现性和稳定性,线性关系良好,可用于检测葛根芩连片中染色剂金胺O的含量。     

HPLC-MS/MS法测定血浆中的他林洛尔及人体药动学研究

目的建立一种灵敏、快速、简便的测定人血浆中他林洛尔浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),为研究他林洛尔在人体内的药物动力学提供手段。方法以盐酸氟西汀作为内标(I.S.),血浆样品用乙腈沉淀蛋白,离心后取上清液进样,用预柱Phenomenex C18柱(10 mm×4.6 mm,5μm),Phenomenex C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),进行分离,以乙腈∶缓冲液(5 mmol.L-1醋酸胺和0.02%甲酸)(45∶55,V/V)为流动相,柱温40℃,流速:0.9 mL.min-1,HPLC-MS/MS选择m/z为364.3(母离子)和308.3(子离子)监测他林洛尔,m/z为310.0(母离子)和148.3(子离子)监测内标氟西汀。结果他林洛尔及内标盐酸氟西汀在9 min内完全分离,他林洛尔在2.0~320.0ng.mL-1时线性关系良好,相关系数为0.9976;平均萃取回收率大于77%;平均方法回收率大于91%,小于103%;最低定量限为2.0ng.mL-1;日内日间RSD均小于9%。主要药动学参数如下:Cmax(91.90±48.09)ng.mL-1;tmax(2.79±0.89)h;t21(14.67±2.15)h。结论本方法简便快速、灵敏准确,适用于他林洛尔药物动力学的研究。他林洛尔片在中国人体内的药动学参数与文献报道相似。     

小儿咽扁颗粒中掺伪山银花检验方法研究

目的：建立小儿咽扁颗粒中山银花的高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)检查方法,打击中药制剂中金银花的掺假行为。方法：采用薄层色谱(TLC)法,以灰毡毛忍冬皂苷乙为指标成分,以三氯甲烷-甲醇-水(6∶4∶1)为展开剂,快速筛查小儿咽扁颗粒中掺伪的山银花;采用HPLC-ELSD法鉴别小儿咽扁颗粒中掺伪的山银花,选择Sun Fire^?C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,进样量10μL;采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)法进行确证,选择Thermo Hypersil GOLD aQ C₁₈(150 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,质谱使用电喷雾离子源,负离子模式下检测。结果：TLC法检测结果显示,34批样品中共有8家企业生产的16批次样品疑似检出灰毡毛忍冬皂苷乙;HPLC-ELSD法的验证结果...     

黄连上清丸中金胺O的检测方法研究简

目的建立定性、定量测定黄连上清丸中可能掺入的化工染料金胺O的高效液相色谱法。方法采用高效液相色谱一二极管阵列检测（HPLC—DAD）法、高效液相色谱一质谱（HPLC～MS）法,对黄连上清丸样品进行定性、定量分析。结果经检测,9批市售品中有1批检出金胺0,其含量为13μg／g。结论所建立的检测方法,经方法学验证,可满足定性定量检测的要求。     

液质联用技术用于醋酸阿托西班注射液中杂质结构鉴定

目的:采用高效液相色谱(HPLC)、超高效液相色谱-四极杆串联静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q Orbitrap MS)技术对醋酸阿托西班注射液中杂质结构进行鉴定。方法:HPLC法采用Inertsil ODS-2 C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相A为乙腈-甲醇-三氟乙酸溶液(pH 3.2)(15∶10∶75),流动相B为乙腈-甲醇(60∶40),梯度洗脱，流速1.2 mL·min^-1,检测波长220 nm。UPLC-Q Orbitrap MS法采用BEH300 C₁₈色谱柱(150 mm×2.1 mm, 1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B),梯度洗脱，流速0.2 mL·min^-1;采用电喷雾离子源，选择正离子模式进行Full MS/dd-MS²扫描。结果:对5家企业各1批醋酸阿托西班注射液进行了有关物质测定，以面积归一化计算，含量>0.1%的杂质峰个数分别为9、10、13、9和6,总杂含量分别为0.35...     

UPLC-MS/MS法同时测定止痒乳膏中10个成分的含量北大核心CSCD

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定止痒乳膏中10个主要成分(氧化苦参碱、黄柏碱、芍药苷、升麻素苷、药根碱、小檗碱、巴马汀、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)的含量。方法:采用ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~4 min,5%A→28%A;4~10 min,28%A→30%A;10~11 min,30%A→73%A;11~16 min,73%A→75%A),流速0.4 m L·min^(-1),柱温30℃;采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测模式(MRM),正负离子同时检测。结果:氧化苦参碱、黄柏碱、芍药苷、升麻素苷、药根碱、小檗碱、巴马汀、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的线性范围分别为4.526~452.6μg·m L^(-1)(r=0.999 2)、1.625~32.50μg·m L^(-1)(r=0.999 0)、7.500~150.0μg·m L^(-1)(r=0.998 7)、3.626~181.3μg·m L^(-1)(r=0.998 9)、0.155 0~3.100μg·m L^(-1)(r=0.999 3)、3.376~168.8μg·m L^(-1)(r=0.996 4)、0.015 50~15.50μg·m L^(-1)(r=0.999 6)、0.122 5~24.50μg·m L^(-1)(r=0.999 8)、0.069 00~1.380μg·m L^(-1)(r=0.996 8)和0.016 30~0.815 0μg·m L^(-1)(r=0.998 9);平均加样回收率(n=6)均在96.53%~100.2%范围内,RSD均小于2.04%。3批样品中氧化苦参碱、黄柏碱、芍药苷、升麻素苷、药根碱、小檗碱、巴马汀、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量测定结果分别为2.98~3.17、0.24~0.25、1.69~1.75、0.19、0.003 6~0.004 3、0.30~0.31、0.004 0~0.004 3、0.023~0.026、0.018~0.020和0.000 9~0.001 1 mg·g^(-1)。结论:该测定方法测定结果可为止痒乳膏的质量控制提供依据。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中多潘立酮的浓度北大核心CSCD

目的建立一种血浆中多潘立酮测定的液相色谱-串联质谱法。方法用蛋白沉淀法处理样品,色谱柱:Venusil XBP C_(18)(2.1 mm×50.0 mm,3μm),流动相:100%水含2 mmol·L^(-1)NH_4Ac和0.1%甲酸(A)-100%甲醇(B),流速:0.40 mL·min^(-1),柱温:40℃,梯度洗脱,进样量:20.0μL。采用电喷雾离子源,正离子模式,多反应监测。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、基质效应及稳定性。结果多潘立酮在0.10~50.00ng·mL^(-1)内,线性关系良好,标准曲线为y=3.39×10^(-3)x+4.86×10^(-4)(r=0.999 1),定量下限为0.10 ng·mL^(-1),日内RSD均小于10.3%,日间RSD均小于9.7%,提取回收率可达90.1%以上。结论本方法简便快速,准确度高,灵敏度好,适用于人血浆中多潘立酮的浓度测定。     

HPLC法测定维格列汀原料药中的有关物质北大核心CSCD

目的:建立维格列汀原料药有关物质的HPLC测定方法。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)对降解杂质和工艺杂质进行定量分析,以10 mmol·L^(-1)辛烷磺酸钠(加入0.1%磷酸调pH至2.1)-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^(-1),检测波长为210 nm。结果:主峰与各杂质峰间能达到基线分离,维格列汀质量浓度在1.521 0~20.280μg·m L^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8),最低检测限为0.5μg·m L^(-1);3批样品有关物质测定结果显示,已知杂质含量均低于0.1%。结论:方法学验证结果表明,本法可作为维格列汀质量控制的方法。     

盐酸小檗碱微透析探针的体内外回收率实验研究北大核心CSCD

目的:研究微透析探针的体外回收率与灌流速度和盐酸小檗碱浓度之间的关系,确定回收率的校正方法。方法:利用高效液相色谱法测定透析液中盐酸小檗碱含量,采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(磷酸调节pH为3.0)(35∶65),流速1 m L·min^(-1),检测波长346 nm,柱温30℃。计算不同灌流速度、不同盐酸小檗碱浓度时,正、反透析法测得的探针体外回收率。同时测定固定流速下,不同药物浓度时探针的体内回收率。结果:在体外回收率实验中,将盐酸小檗碱质量浓度定为5.0μg·m L^(-1),灌流速度分别为1、2和3μL·min^(-1)时,透析法测得的回收率依次为(73.6±5.4)%、(60.4±5.8)%和(35.2±6.3)%;反透析法测得的回收率依次为(70.2±7.0)%、(62.6±4.7)%和(32.5±8.3)%。在体内回收率实验中,将灌流速度定为2μL·min^(-1),盐酸小檗碱灌流液浓度分别为0.1、0.5和5.0μg·m L^(-1)时,体内回收率依次为(51.4±3.5)%、(53.2±2.7)%和(52.6±2.4)%。探针回收率与盐酸小檗碱浓度无关,与流速成反比。体外回收率实验中,透析法与反透析法测得的回收率相近。结论:在用微透析法对盐酸小檗碱生物样品取样时,可采用反透析法对探针回收率进行校正。     

千金止带丸中染色剂金胺O的检测方法研究

目的:建立千金止带丸中染色剂金胺O的检测方法。方法:采用HPLC-PDA法对千金止带丸中金胺O进行筛查,并采用HPLC-Q-TOF/MS对阳性样品进行确证。结果:对来自7家企业的71批次样品进行筛查和确认发现:有2家企业的11批次样品中检出金胺O;金胺O进样在0.082~82.08μg﹒m L~(-1)范围内有良好的线性关系。结论:本方法准确可靠,可作为千金止带丸中金胺O的检测方法。     

HPLC法测定氟康唑的有关物质及最大未知杂质结构鉴定北大核心CSCD

目的:建立HPLC法测定氟康唑的有关物质,并对最大未知杂质进行结构鉴定。方法:采用CERI L-column ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.01 mol·L^(-1)醋酸钠缓冲液(pH 5.0)-甲醇(95∶5)为流动相A,乙腈-甲醇(60∶40)为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^(-1),检测波长261 nm,柱温30℃。用LC-MS分析最大未知杂质,再用半制备液相色谱分离纯化,通过NMR确定结构。结果:建立的HPLC有关物质分析方法具有良好的方法学验证结果,与中国药典方法比较,杂质检出能力更强;最大未知杂质为2-(2,4-二氟苯基)^(-1),3-二(1H^(-1),2,4-三唑^(-1)-基)-丁-2-醇。结论:建立的方法简便、灵敏,专属性好,杂质检出能力强,能有效地反应药品质量。     

高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法推定奥替拉西钾中主要杂质北大核心CSCD

目的:利用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(HPLC-QTOF/MS)对奥替拉西钾中主要杂质进行结构推定,并且分析其来源。方法:采用Waters Sunfire C_(18)(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,以甲醇-10 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液(用乙酸调节pH至4.3)(5∶95)为流动相,流速0.8 mL·min^(-1),检测波长220 nm;采用ESI离子源,正离子扫描模式。结果:通过对奥替拉西钾及其主要杂质的一级与二级高分辨质谱图进行分析,推定主要杂质的分子结构为1,3,5-三嗪-2,4-(1氢,3氢)-二酮和2-(3-氨基甲酰脲基)-2-羰基乙酸。2个主要杂质均由奥替拉西钾降解得到。结论:所建立的方法能够有效地将奥替拉西钾中的主要杂质分离检测,杂质结构的确定为药品的质量控制提供了依据。