NADH对DENA所致L02细胞H-ras基因突变及c-erbB-2表达的影响

目的:研究还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)对二乙基亚硝胺(N-nitrosodiethylamine,DENA)诱变L02细胞过程中H-ras基因突变及c-erbB-2表达的影响.方法:聚合酶链式反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)法检测NADH对DENA所诱发的L02细胞H-ras基因突变的影响;Southern印迹法分析其对c-erbB-2基因表达的影响;RT-PCR法检测NADH对rasp21、c-erbB-2 mRNA表达水平的调控.结果:经NADH防护的DL02-Ⅲ细胞和DL02-B 细胞的H-ras exon1突变率分别降至25.0%(3/12)和41.7%(5/12),与DENA致突变组相比,差异有统计学意义(P<0.05);Southern 检测结果显示,NADH可下调由DENA所诱变的L02细胞中c-erbB-2基因的表达提高;RT-PCR检测结果提示,DENA诱变组细胞的rasp21、c-erbB-2 mRNA表达水平上调,而经NADH处理后,与DENA诱变组相比,可明显降低rasp21和c-erbB-2 mRNA表达水平上调的程度.结论:NADH抗突变作用的可能机制,与其在基因突变以及在转录水平对H-ras、c-erbB-2等相关癌基因的调控有关.     

NADH对二乙基亚硝胺所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响

背景与目的:研究NADH对二乙基亚硝胺(DENA)所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响。材料与方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)及聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测DENA所致的L02细胞p53基因突变;Southern blot分析DENA对c-erbB2基因表达的影响;研究辅酶NADH的抗突变作用。结果:PCR-SSCP分析显示NADH保护的DL02-Ⅲ细胞和DL02-B细胞p53exon7突变率均较DENA致突变组降低,差异有统计学意义(P<0.01);PCR-RFLP分析结果显示NADH降低DENA所诱发的L02细胞p53基因第7外显子249位密码子点突变率(P<0.01)。Southern blot检测结果也显示NADH可抑制DENA所致的L02细胞c-erbB2基因的表达上调。结论:还原型辅酶NADH具有抗突变作用,可降低DENA所致的L02细胞p53基因的突变,并抑制c-erbB2基因的表达。     

FANCF基因与肿瘤发生和耐药性形成的研究进展

范可尼贫血(Fanconi anemia,FA)是一种罕见的常染色体遗传病。FA复合体可通过FA/BRCA通路参与细胞周期调控、细胞凋亡、DNA修复等生命信号转导与调控。范可尼贫血相关基因F(Fanconi anemia complementation group F,FANCF)作为关键因子,参与FA复合体稳定、FANCD2泛素化及FA/BRCA通路生物学功能调控。研究表明,FANCF在肿瘤的发生和耐药性形成发挥重要作用。本文对该方面的相关研究进行综述。     

Fe3O4-As2O3-PLA复合体联合热疗对骨肉瘤治疗的细胞学研究

目的 研究磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子(Fe₃O₄-As₂O₃-PLA)复合体联合磁流体热疗对骨肉瘤细胞株UMR-106的生长的影响。方法 磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体的制备,透射电镜及荧光光度计对其形态及载药量进行观察,高频交变磁场中对其进行体外升温实验,骨肉瘤细胞的培养,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体联合磁流体热疗对骨肉瘤细胞株UMR-106生长的影响,流式细胞仪(FCM)检测凋亡细胞。结果 所制备的磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体比较均匀,粒径在60~70 nm,载药量约为10.3%,在输出电流Ⅰ=300 A的高频交变磁场中具有升温能力,且能达到肿瘤治疗的有效温度(41℃~46℃),磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体联合磁性热疗能抑制骨肉瘤细胞株UMR-106的生长,促进其调亡,且较单纯的As₂O₃液组及单纯的Fe₃O₄磁性纳米粒子热疗组的治疗效果明显。结论 Fe₃O₄-As₂O₃-PLA复合体联合磁性热疗可同时发挥As₂O₃的细胞毒性作用和磁感应加热的联合定向治疗作用,效果优于单纯的As₂O₃液组及单纯的Fe₃O₄磁性纳米粒子热疗组,为临床治疗骨肉瘤提供新的治疗方法。     

保留乳头乳晕的乳腺癌改良根治术与传统乳腺癌改良根治术的临床疗效对比

[目的]探讨保留乳头乳晕复合体的乳腺癌改良根治术(NSM)与传统乳腺癌改良根治术(MRM)的疗效及术后并发症.[方法]收集上海市第一人民医院宝山分院2008年1月至2011年6月间接受保留乳头乳晕复合体(NAC)乳腺癌改良根治手术的31例患者资料,与62例同期乳腺癌改良根治术患者按照1:2进行配对研究.比较两组的局部区域淋巴结复发率、远处转移率、总生存率及术后并发症情况.[结果]NSM组和MRM组的中位随访时间分别为28个月和29个月.NSM组和MRM组的腋窝淋巴结复发率分别为6.65％和3.23％,两组比较无统计学差异(P=0.598).NSM组与MRM组的锁骨上淋巴结转移率和远处转移率均为3.23％,两组锁骨上淋巴结转移率和肿瘤远处转移率经比较无统计学差异(P值均为1.000).两组生存率分别为96.77％和98.39％,经比较无统计学差异(P=1.000).两组的NAC坏死、皮瓣坏死、切口裂开、皮下积液和上肢淋巴水肿等并发症发生率,经比较无统计学差异(P＞0.05).[结论]保留乳头乳晕复合体的乳腺癌改良根治术在严格入组条件和手术操作的情况下,可以与传统乳腺癌改良根治术达到相同的治疗效果.     

结肠癌HT-29细胞中PIDD蛋白的表达及其对细胞耐药性的影响

目的:以结肠癌HT-29细胞株为载体,研究PIDD(p53-induced protein with a death domain)蛋白在结肠癌耐药中的作用机制.方法:构建并转染PIDD基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段,用Western印迹法检测其干扰效果.通过MTT比色法检测细胞对化疗药物的敏感性,并用凝胶阻滞分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)法检测核因子NF-κB活性的变化.结果:RNA干扰后给予细胞药物刺激,细胞核中PIDD表达下降,核因子NF-κB活性明显降低,细胞耐药性下降.结论:转染siRNA后,HT-29细胞对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)的敏感性增加,此作用可能与细胞核PIDD复合体减少、核因子NF-κB活性减低及细胞凋亡增多有关.     

还原型辅酶Ⅰ对抗肿瘤药物抑制人胃癌细胞的影响

[目的]研究还原型辅酶Ⅰ(NADH)对抗肿瘤药物抑制人胃癌SGC-7901细胞活性的影响.[方法]用MTT法观察NADH和抗肿瘤药物氟尿嘧啶、鬼臼乙叉甙、顺铂、表阿霉素、丝裂霉素对人胃癌SGC-7901细胞活性的抑制率.[结果]NADH可明显降低氟尿嘧啶、鬼臼乙叉甙、顺铂、表阿霉素的肿瘤细胞抑制率(P＜0.05).并且可显著提高人胃癌细胞对丝裂霉素的化疗敏感性(P＜0.01).[结论]NADH可能是肿瘤化疗过程中的重要调节剂.     

TNF-α对三维立体培养的肺癌H460细胞MMP-2和MMP-9表达的影响

目的:研究肿瘤坏死因子-α对三维立体培养中的肺癌H460细胞基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9表达的影响。方法:在天然活性Ⅰ型胶原中建立肺癌H460细胞三维立体培养模型,分为干预组和空白对照组,干预组加入肿瘤坏死因子-α,明胶酶谱法测定各组培养基中MMP-2、MMP-9的表达,采用Bergman法测定其中的羟脯氨酸含量,计算胶原降解量。结果:在肺癌H460细胞三维立体培养模型中,肿瘤坏死因子-α干预组MMP-2、MMP-9的表达高于空白对照组,胶原降解量高于空白对照组(P<0.05)。结论:肿瘤坏死因子-α能上调MMP-2、MMP-9的表达,从而促进肺癌的侵袭与转移。