2015年甘肃省外环境禽流感病毒监测预警分析CSCD

目的 了解甘肃省外环境中禽流感病毒H5、H7、H9亚型的分布状况,科学指导全省禽流感防控工作.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应法（Real-time fluorescence quantitativePolymerase Chain Reaction,real-time PCR）对2015年全省14个市州采集的标本2 015份进行禽流感病毒核酸检测.结果 FluA、H5、H7、H9的检出率依次为：19.90％、0.05％、0和19.65％.FluA检出率最高的环境标本为宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本（31.09％）,最低的为粪便标本（13.85％）.FluA检出率在12月份最高（28.18％）,6、7月份最低（8.59％和8.66％）.定西市和陇南市禽流感病毒核酸FluA和H9的检出率显著高于其他市州（χ^2=4.523 - 88.059,P=0.000-0.043〈0.05）.结论 2015年甘肃省涉禽外环境中存在的禽流感病毒污染主要为H9亚型,未检出H7N9,应加强监测,做好禽流感预警.     

荧光RT—PCR法及两种培养法检测流感病毒的比较分析

目的通过2009年下半年深圳市流感监测数据,对荧光RT—PCR,细胞培养法和鸡胚培养法进行分析比较。方法对2009年下半年的1092份咽试子样本采用荧光RT-PCR,细胞培养法和鸡胚培养法三种方法进行检测,对检测结果用统计学方法进行分析。结果荧光RT—PCR,细胞培养法和鸡胚培养法的阳性率分别为54．21％、27．11％和16．21％,灵敏度分别为100％,50％和29．9％。荧光RT—PCR的检出限为10^-2 TCID 50／ml。结论荧光RT-PCR的灵敏度要明显高于培养法,而且同样具有非常高的特异度,其在流感的应急检测应用中要明显优于两种培养法。细胞培养法对H3N2亚型的敏感性高,而鸡胚培养法对B型流感的敏感性高。     

PCR—限制性内切酶图样分析在流感病毒基因分析中的应用

ＰＣＲ－限制性内切酶图样分析为当前流感病毒基因分析中较简便的一种方法。它可对大量的流感病毒进行初步的基因分析；了解每个时期在人群中流行的流感病毒优势株。病毒株基因大体演变过程；为流感病毒疫苗株挑选提供科学的依据；也为流感病毒基因重配株的基因分析和研究提供了简便和可靠的方法。     

楚雄州2017—2022年流感病原学监测结果分析

目的分析楚雄州2017—2022年流感病原学监测结果, 掌握流感病毒流行特点, 为流感防控提供科学依据。方法采用real-time PCR检测技术和MDCK细胞培养法对2017—2022年哨点医院流感样病例(influenza-like cases , ILI)标本和暴发流感疫情病例标本进行流感病毒核酸检测和分离培养。结果 2017—2022年, 共检测7 302份病例标本, 阳性1 079份, 阳性率为14.78%, 2017—2022年年度的阳性率依次为14.71%、15.44%、20.11%、5.04%、10.90%和21.08%, 其中2020年阳性率最低;阳性率甲型高于乙型, 冬春季高于夏秋季, 检出H9N2人感染禽流感病毒1份。暴发疫情以B型流感为主, 甲型H3N2次之, 学生为易感人群。流感样病例以0～5岁组占比最高(64.16%), ≥60岁组占比最低(0.05%)。结论 2017—2022年楚雄州以甲型流感流行为主, 冬春季高发, 流感毒株呈现多样性, 各型别毒株交替流行。实施新冠防控措施可有效的降低流感病毒感染率。此外, 州内存在人感染禽流感病例, 应加强和继续完善...     

临床实验室流感病毒检测的相关影响因素分析

目的 在流感流行季节对流感样病例进行流感病毒筛查,分析影响流感病毒阳性检测结果的相关因素,提高流感的阳性检测率.方法 选取发热门诊就诊的流感样病例,采集鼻咽拭子,应用胶体金抗原快速检测法与巢氏PCR法进行流感病毒的检测并对比结果.分析患者就诊时间、临床症状及检测方法、采样部位等因素对阳性率的影响.结果 研究发现年龄>60岁、体温在38.0℃~38.9℃之间、发热2 d就诊的患者,流感病毒阳性检出率高于其他组;鼻拭子及咽拭子流感病毒检出率无统计学差异;不同检测方法,流感病毒胶体金抗原快速检测法阳性检出率为17.6%,核酸PCR阳性检出率为31.0%,差异有统计学意义,流感病毒胶体金抗原快速检测法的敏感性27.6%,特异性86.9%,阳性预测值48.8%,阴性预测值72.8%,与PCR的一致性为68.6%.结论 发病早期就诊的流感样病例,流感病毒阳性检出率偏高;不同标本采样部位流感病毒检出率差别不大.虽然流感病毒胶体金抗原快速检测法操作简单、方便快捷,但其敏感性偏低,且存在一定假阴性结果,而流感病毒核酸检测阳性率较高,但实验要求高,操作过程复杂.     

北京市房山区2014-2015年流感病原学监测结果分析

目的 通过对北京市房山区2014-2015年流感病原学的监测结果进行分析,了解房山区流感病毒的流行特征.方法 采集房山区哨点医院流感样病例的咽拭子标本1 339份,用荧光定量PCR法检测核酸及亚型,同时进行流感病毒分离及血凝实验(HA)检测.结果 2014年1月6日-2015年12月28日,共采集1 339份流感样病例咽拭子,荧光定量PCR法检测核酸阳性数为215例(阳性率为16.06％),其中甲型H1N1流感病毒32株,甲型H3N2流感病毒107株,乙型流感病毒76株.病毒分离阳性数为148例(阳性分离率为11.05％).本年度第2-6周和第48-52周流感阳性率较高,且第2-6周以甲型H1N1和乙型流感病毒为主,第48-52周以甲型H3N2流感病毒为主.结论 房山区2014-2015年流感高发季节为第2-6周和第48-52周,上半年致病病原体以甲型HIN1流感病毒和乙型流感病毒为主,下半年以H3N2流感病毒为主,不同性别之间各亚型流感病毒的阳性率构成比无统计学差异(P＞ 0.05).     

2015~2018年乌鲁木齐市B型流感病毒流行特征分析

目的 通过对近几年乌鲁木齐市流感病毒数据的分析,了解B型流感病毒的流行趋势,掌握其流行的特征和规律,为政府有效预防和控制提供科学依据。方法 采用描述性方法,从时空分布和人口特征学等方面对从中国疾病预防控制中心信息系统中导出的乌鲁木齐市2015年4月1日~2018年3月31日B型流感病毒核酸阳性检测结果进行统计分析。结果 2015~2018年乌鲁木齐市B型流感阳性检出率依次为29.02%、21.94%、37.65%,总阳性率在不同时间段之间的差异具有统计学意义（P＜0.05）。男性整体检出率高于女性,不同性别之间阳性标本阳性率差异具有统计学意义（P＜0.05)。以5岁以下低年龄组检出率最高（占68.99%）,6~15岁的年龄组次之,16岁以上年龄组最低,阳性标本在年龄之间的阳性率差异具有统计学意义（P＜0.05)。结论 乌鲁木齐市B型流感主要存在By和Bv两种系别的流行,流行季节以春、冬为主,男性易感于女性,5岁以下婴、幼儿为主要发病人群,加强流感的实时监测,特别是及时掌握已暴发中分离的流感毒株的变异情况,对于B型流感的预防控制有重要意义。     

2009-2010年山西省流感／甲型H1N1流感的病原学监测分析

目的分析掌握山西省2009--2010年流感／甲型H1N1流感的流行特征,为预测和防控流感／甲型H1N1流感流行提供科学依据。方法对哨点医院和集体发热疫情进行监测采样,采用病毒核酸检测法和细胞培养法分离鉴定流感／甲型H1N1流感病毒,并对2009年5月至2010年4月山西省录入“中国流感监测信息系统”的流感样病例监测报告数据及其样本病原学监测数据进行统计分析。结果山西省全年均有流感病毒活动,2009年流行优势毒株为甲型H1N1流感病毒,流行最高峰在11月（阳性率为58．1％,甲型H1N1占88．1％）,主要导致59岁以下人群发病,其中5-24岁年龄组阳性率较高,进入2010年后乙型（Victoria系）流感病毒的活动有所增加,成为流行株。结论流感样病例监测和病原学监测,可以及时反映流感活动状况,对于掌握该省流感／甲型H1N1流感流行规律有着重要意义。     

1983-2013年B型流感病毒的重配研究

目的 研究1983-2013年间B型流感病毒的重配变异情况.方法 对GenBank数据库中1983-2013年间具有8个片段全基因组序列的B型流感病毒进行分析,利用Simplot软件筛选重配病毒,利用MEGA软件进行系统进化分析验证重配病毒.结果 获得432株B型流感病毒的全基因组序列,在66株代表病毒中,共计发现了22株重配株,其中9个为系内重配,13个为系间重配.在9个系内重配病毒中,2个B/Vic-87系内重配,7个B/Yam-88系内重配.Simplot软件结果和MEGA软件验证结果相似.结论 B型流感病毒间的重配事件频繁发生,既存在系内重配,也存在两系间的重配.Simplot软件可以用于快速筛选B型流感重配病毒.     

2015—2019年唐山市无偿献血人群HIV感染状况及其特征分析

目的:了解2015—2019年唐山市无偿献血人群HIV感染状况,分析其人群分布特征。方法:对2015—2019年唐山市无偿献者的血标本采用酶联免疫吸附法进行抗-HIV检测,HIV初筛阳性的血标本采用免疫印迹法进行确证试验,并对确诊HIV感染者进行流行病学分析。结果:2015—2019年唐山市无偿献血者463 077例,...     

北京市东城区2014年度流感样病例病原学检测结果分析

目的 通过分析北京市东城区2014年流感病原学检测结果,掌握该年度东城区流感病毒优势株的变化,为突发疫情提供有价值的参考.方法 收集2014年1月至12月期间流感样病例的咽拭子标本共1520件,采用实时荧光RT-PCR方法进行流感病毒的病原学检测.结果 在1520件样本中,1-3月份H3 N2的平均阳性率为8.33％,H1N1的平均阳性率为12.50％,乙型Yamagata 系(BY)的平均阳性率为16.11％.4-8月份H3N2的平均阳性率为3.06％,BY的平均阳性率为1.22％,无H1N1亚型流感检出.9-12月份H3N2平均阳性率达到21.81％.全年的聚集性疫情中,检出的毒株与相应时间段日常监测标本检出的毒株类型相一致.结论 1-3月份的流感病毒的流行株为H3N2、H1N1和BY三种亚型并存,4-8月份为流感病毒流行的低谷期,9-12月份H3N2成为优势株.流感监测是辖区流感防控重要措施,可以为流感疫情防控提供有价值的数据参考.     

北京市西城区2009-2012年度乙型流感病毒病原学监测分析

目的 分析北京市西城区2009-2012年乙型流感病毒的病原学监测结果,为制定预防控制措施提供依据.方法 由两家哨点医院每周随机采集流感样病例的咽拭子共30 ～40份,提取病毒RNA,应用real-time RT-PCR方法进行检测.结果 2009-2010年度乙型流感病毒总阳性检出率为29.7％,2010-2011年...     

天津市津南区2015~2018年儿童流感 病原学监测结果分析

目的 对天津市津南区2015~2018年儿童流感病原学监测资料进行分析,为儿童流感的预防提供依据。方法 采集2015~2018年津南区流感监测哨点医院流感样病例（ILI）患儿的咽拭子标本,采用实时荧光定量PCR进行流感病毒检测,对不同流感病毒的流行进行型别和年龄分布的统计学分析。结果 共采集1783份0~14岁ILI患儿咽拭子标本,核酸阳性549份,阳性率为30.79%。季节性甲型H1N1、季节性H3型、B（Victoria）系（BV）、B（Yamaga-ta）系（BY）病毒交替流行。不同年龄组病毒阳性率呈显著上升又下降趋势,以6~8岁年龄组阳性率最高数（41.90%）,其次为3~5岁年龄组（35.37%）。结论 天津市津南区2015~2018年儿童流感流行高峰主要在冬春季节,优势毒株交替流行出现。应重视季节性甲型H1N1流感病毒对儿童健康的影响,加强对学龄儿童的流感防控工作。     

2015-2016年度中国甲型H1N1亚型流感病毒疫苗候选株的制备及鉴定CSCD

目的 为获得2015-2016年度中国流行的甲型H1N1亚型流感病毒疫苗候选株,制备流感病毒重配株并对其进行鉴定.方法 采用经典重配的方法,将H1N1亚型流感病毒流行株与H3N2亚型的鸡胚高产重配母本株（X-157株）在鸡胚上进行混合培养.用H3亚型的HA蛋白抗血清和X-157株全病毒抗血清对混合培养病毒进行阴性筛选.阴性筛选后HA滴度较高的病毒用Real-Time PCR法对表面蛋白基因型进行鉴定.对表面蛋白基因型正确的毒株用限制性内切酶酶切鉴定法鉴定其内部基因组成.进一步对HA和NA基因进行Sanger法测序,并用表面基因无氨基酸位点突变的毒株免疫雪貂,进行双向血凝抑制（Two-way hemagglutination inhibition test,HI）试验.结果 Real-Time PCR筛选出5株表面蛋白基因型正确的毒株.经内部基因鉴定其中4株为6＋2组成,1株为5＋3组成.5株重配株的HA和NA基因均未发生氨基酸位点突变.5株重配株HA滴度均维持在1 024以上.最终选取的12号重配株免疫原性良好,HI滴度达5 120,双向HI试验均通过.重配后疫苗株在鸡胚上的产量是重配前野毒株的64倍.结论 成功制备了2015-2016年度中国流行的甲型H1N1亚型流感病毒疫苗株,为疫苗贮备和疾病防控奠定了基础.     

LNA探针同时检测人副流感病毒1,2,3型多重荧光定量RT-PCR方法的建立

目的 人副流感病毒1,2,3型是呼吸道感染的主要病原.本研究建立了特异、快速、灵敏的多重荧光定量RT-PCR方法用于人副流感1,2,3型病毒临床标本检测.方法 针对人副流感1,2,3型病毒设计特异性引物探针,优化荧光RT-PCR反应条件.应用体外转录方法分别制备人副流感1,2,3型病毒的标准品.验证荧光定量RT-PCR方法的特异性,敏感性和稳定性.结果 该方法对人副流感1,2,3型病毒核酸检测有高度特异性,检测的灵敏度HPIV1为10个拷贝,HPIV2为100个拷贝,HPIV3为100个拷贝.可从临床患者鼻咽吸出物标本中直接检出.结论 本研究建立的LNA探针同时检测人副流感病毒1,2,3型多重荧光定量RT-PCR方法具有较高的特异性和敏感性.适用于临床早期诊断和实验室病原谱筛查.     

北京市2010-2015年病毒性肝炎流行特征分析

目的 分析2010-2015年北京市病毒性肝炎的发病趋势和流行特征,为完善病毒性肝炎防控策略提供数据参考.方法 收集2010-2015年通过中国疾病预防控制信息系统报告的各类病毒性肝炎监测数据,并分析病例流行病学特征.结果 2010-2015年,北京市共报告病毒性肝炎病例24 054例,年报告发病率呈逐年下降趋势,年报告发病率在13.82/105-30.63/105之间,其中乙肝和丙肝年报告发病数和发病率分别居同年度各类病毒性肝炎的第一位和第二位.病毒性肝炎以20岁及以上成年人为主,共计占全部报告病例的97.71％.报告病例主要分布在流动人口较为集中的区域.结论 乙肝和丙肝是目前北京市发病率较高的病毒性肝炎,应重点针对流动人口较为集中的区域和行业加强病毒性肝炎的干预工作,以有效控制病毒性肝炎的流行.     

双重荧光定量RT—PCR在快速检测A、B型流感病毒上的应用

目的 建立双重荧光定量RT-PCR技术同时快速检测A、B型流感病毒,并应用于临床样本的检测.方法 在A型流感病毒M基因和B型流感病毒HA基因的保守区序列分别设计特异性引物和Taqman探针,建立优化双重荧光RT-PCR反应体系,评价所建双重RT-PCR反应体系的特异性、敏感性和稳定性,并应用于疑似流感含漱液标本检测.结果 该方法对A、B型流感病毒检测具有高度特异性,检出限分别为0.1TCID50和0.01TCID50,具有较好的稳定性.可从疑似流感患者含漱液中直接检测到流感病毒核酸.结论 本研究建立的双重荧光定量RT-PCR可以同时准确分型A、B型流感病毒,灵敏度高,稳定性好,是一种快速检测流感病毒的新方法.     

苏州市甲型H1N1流感病毒HA基因的分子演变和遗传特征分析

目的 对新型H1N1从2009年在苏州出现至2011年度基本消失整个过程中,苏州分离株血凝素( haemagglutinin,HA)基因的变化和分子特征进行了分析.方法 提取苏州分离株的RNA,以WHO推荐的引物扩增HA基因并测序.采用生物信息学软件对苏州毒株的HA进行详细的分子特征分析,并与疫苗株及全球和全国的代表性毒株进行比对分析.结果 与疫苗株相比,5株苏州株的核苷酸序列同源性在98.8％ ～99.4％之间,氨基酸序列同源性在98.8％～99.4％之间.5株苏州株中3株在1个抗原位点突变,2株有2个抗原位点突变,且有2个抗原位点突变的都是2011年分离株.糖基化位点、二硫键和受体结合位点都没有发生改变.5株苏州株和各地的分离株都表现出按年份聚类的特点.结论 详细分析了苏州地区新型H1N1流感病毒HA的分子特征,表明苏州毒株的抗原位点上出现氨基酸残基的变化,但仍处于稳态.