骨组织结构显微形态分析

目的 应用原子力显微镜和扫描电镜观察分析人长管状骨组织中的微观结构,以了解骨组织的超微结构以及胶原和矿物质的构成和形态。方法 取新鲜人尸体肱骨标本,固定脱水,分别制作骨磨片和切成薄片,分别在光学显微镜、原子力显微镜和扫描电镜分析骨组织矿化区的结构。结果 在光学显微镜下,骨陷窝呈环状排列在哈佛管周围,骨小管沟通骨陷窝与哈佛管和骨陷窝之间的联系。在原子力显微镜的观察下,大胶原蛋白的形态清楚显示;在矿化区胶原蛋白纤维增厚,呈小盘叠加形态,钙-磷晶体呈椭圆柱形状;可清晰观察到骨小管和骨陷窝的大小和形态及骨小管和骨陷窝的关系。在扫描电镜下,骨基质呈环形沿哈佛系统排列,钙-磷晶体之间相互呈规则排列。结论 原子力显微镜可分析胶原蛋白和基质中钙-磷晶体的三维结构形态、骨小管和骨陷窝的三维构成及大小;骨小管是交流营养物质和分子信号到骨陷窝中骨细胞的通道。     

组织工程中胶原基纳米骨复合材料的研制

目的：依据仿生原理制备纳米骨框架材料。方法：以胶原分子为模板,调制钙磷盐在液相中沉积其上,得到矿化胶原基复合材料,并采用液相分离法与少量聚乳酸复合进一步制备成为三维多孔框架材料。分离成骨细胞并在三维框架材料上培养,用x-ray、衍射扫描电镜、透射电镜、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜进行观察和分析。结果：胶原基纳米晶钙磷盐复合材料的晶粒度较低,晶体极为细小,与天然骨类似;材料为多孔状,孔隙率较高;内部为典型的纤维束状结构,该纤维束有HA晶体的衍射图样,且具有[002]择优取向;成骨细胞可在其上贴附、生长和繁殖。结论：仿生制备的三维胶原基纳米骨框架材料,无论从结构还是性能上,都是骨组织工程中的优选材料之一。     

绿色荧光蛋白标记兔BMSCs体外成骨的定量能谱分析

目的观察绿色荧光蛋白( GFP)标记的兔骨髓间充质干细胞( BMSCs)成骨诱导后形态学改变和体外骨生成中矿化钙结节的形成,并结合扫描电镜和X射线能谱分析技术( SEM/EDS)对矿化钙结节元素进行定量能谱分析。方法
　　用携带GFP基因的腺病毒转染兔BMSCs进行示踪标记,并诱导细胞向成骨方向分化,通过倒置荧光显微镜、钙结节茜素红染色观察成骨诱导后细胞形态改变和矿化钙结节的形成,结合SEM/EDS技术观测矿化钙结节的表面微观结构及其元素构成。结果腺病毒介导GFP基因( Ad-GFP )转染兔 BMSCs后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,经成骨诱导后细胞形态向成骨方向分化,并形成不透光的矿化钙结节,钙结节茜素红染色见红色矿化结节,SEM下见矿化钙结节散布于细胞中,细胞重叠生长,分泌基质旺盛。 EDS分析显示矿化钙结节主要组成元素与正常骨组织相同,其钙磷比(Ca/P)为1.55,接近正常骨组织钙磷比1.49。结论 Ad-GFP能成功转染并标记兔BMSCs,成骨诱导后BMSCs向成骨方向分化,具备较好的骨生成能力,BMSCs体外矿质化成骨过程与体内基本相同。     

骨巨细胞瘤中的多核巨细胞体外骨吸收研究

目的：比较破骨细胞与骨巨细胞瘤中多核巨细胞的特点，明确后者的性质和来源。方法：用倒置相差显微镜观察体外培养的多核巨细胞的一般形态及降钙素对它的影响；用骨片与多核巨细胞共同培养法观察多核巨细胞的体外骨吸收功能，用扫描电镜观察骨吸收陷窝，Ｇｏｍｏｒｉ染色观察多核巨细胞的酸性磷酸酶活性。结果：倒置相差显微镜下可见多核巨细胞胞核较多（２０个以上），胞浆周边不规则，有伪足样突起；胞浆内可见较多大小不等的空泡；降钙素（１００μｇ·Ｌ－１）可抑制多核巨细胞的伪足样运动；多核巨细胞与灭活的骨片共同培养时可见骨吸收陷窝形成，扫描电镜下可见吸收陷窝底面有原纤维；Ｇｏｍｏｒｉ染色时可见多核巨细胞的酸性磷酸酶呈阳性。结论：证实了多核巨细胞具有破骨细胞的形态特征与骨吸收功能，可能来源于骨髓的破骨细胞前体细胞     

骨巨细胞瘤中的多核巨细胞体外骨吸收研究

目的：比较破骨细胞与骨巨细胞中多核巨细胞的特点，明确后的性质和来源。方法：用倒置相差显微镜观察休外培养的多核巨细胞的一般形态及降钙素对它的影响，用骨片与多核巨细胞共培养法观察多核巨细胞的体外骨吸收功能，用扫描电镜观察同吸收陷窝，Ｇｏｍｏｒｉ染色观察多核巨细胞的酸性酸酸酶活性，结果：倒置相差显微镜下可见多核巨细胞核较多（２０个以上）胞浆周边不规则，有伪足样突起，胞闪内可可见较多大小不等的空泡；降钙     

铝对兔骨毒性作用的研究

通过兔动物实验研究了摄入铝对骨骼的毒性作用。结果表明，随铝摄入量增加，骨铝蓄积显著，血清铝及甲状旁腺素（ＰＴＨ）水平增加，并呈正相关（Ｐ＜０．０１）；骨钙、磷增加，血清钙明显下降（Ｐ＜０．０５）。病检查脱钙骨对照组与实验组均未见明显异常；骨组织形态计量学显示高、低铝组组实验动物的类骨质有增加的趋，高铝组趋势，高铝组矿化障碍，同时低铝组骨组织形成有增加的趋势。     

脱钙骨制片与传统骨磨片技术的比较

①目的 比较脱钙骨切片法与骨磨片法显示骨组织结构的效果。②方法 应用硫堇-苦味酸染色显示脱钙骨组织结构，甲紫染色显示骨磨片的骨组织结构。③结果 传统的骨磨片较厚而不均匀，骨小管稀少，其结构不够清晰；脱钙骨切片薄而组织结构典型。④结论 采用硫堇-苦味酸染色制作骨组织切片标本其组织结构清晰可辨，易于提高学生对骨组织结构的辨认能力。     

脱细胞骨基质的立体构筑及TritonX-100残留量测定

目的 制备骨组织工程的新型天然支架材料.方法 取兔双侧胫骨,修整成片状,使用含3%TritonX-100及蛋白酶抑制剂的Tris-HCL的缓冲液洗脱掉骨片中的细胞成份.取脱钙后骨片行HE染色及阿利新蓝染色并用免疫组化方法检测骨片中纤维连接蛋白及层黏连蛋白;Mallory-Heidenhain染色测量骨陷窝形态;对骨片进行扫描电镜及透射电镜观察;使用反相高效液相色谱检测TritonX-100残留量.结果 HE、阿利新蓝染色见脱细胞骨基质胶原纤维排列规则,骨陷窝空虚;骨陷窝形态测量表明脱细胞骨基质的骨陷窝数量与正常骨的骨陷窝数量没有差异;免疫组织化学染色及免疫透射电镜均见纤维连接蛋白与层黏连蛋白存在于脱细胞骨基质和正常骨的骨陷窝周边;TfitonX-100残留量测定表明脱细胞骨基质最低检出极限为0.5μ/UmL.结论 脱细胞骨基质保持了骨的正常立体构筑,是一种新型的生物衍生材料,具有广阔的应用前景.     

脱钙骨基质的临床应用与研究进展

脱钙骨基质是一种具有骨传导和骨诱导性质的生物材料,以多种形式应用于临床治疗四肢长骨骨缺损,并取得了令人满意的效果。脱钙骨基质是由胶原蛋白、非胶原蛋白以及较低浓度的生长因子(如骨形态发生蛋白)等组成的复合物,具有良好的生物学特性、骨诱导及骨传导活性,可生物降解,促进新骨形成及骨组织矿化,加速骨愈合,是骨组织工程比较理想的支架材料,可以单独或者与自体骨及其他生物材料或者生长因子联合运用有效修复骨缺损。     

狗股骨组织形态学特征的研究

目的 研究鉴别狗股骨组织学的形态特征.方法 取50只2年生以上家犬右后股骨中段做成骨骼组织学切片,经过固定、脱钙、冰冻骨骼组织切片及硫堇苦味酸染色,在显微镜下观察,将显微镜下的图像录入电脑.利用专业软件进行分析、统计数据.结果 狗股骨外环骨板较宽,以较致密的呈层状排列的梭形骨细胞形式存在.内环骨板较窄,以较疏松的呈层状排列的梭形骨细胞形式存在.外环骨板与骨单位分界比内环骨板分界清晰.骨单位较多,形态规则,多呈圆形或类圆形.排列多无规律,靠近外环骨板的骨单位大而圆,靠近内环骨板的骨单位小而椭圆.骨陷窝较多,分布稀疏,未见骨小梁.结论 狗股骨组织学形态特征明显,为骨骼组织学的研究积累了资料,有助于种属鏊别的开展.也为研究生物进化提供了新的观察指标.     

不同条件下保存后自体颅骨瓣活性的研究

随着标准化大骨瓣减压治疗的应用,临床中必然会出现越来越多的大面积颅骨缺损的病例,自体骨瓣具有其他颅骨修补材料不可比拟的优点.有关自体骨瓣保存后活性及术后远期活性的组织学及影像学的研究较为少见.骨瓣埋藏于腹壁下,病理检查发现为骨髓腔细胞的死亡;扫描电镜可见骨板及骨小梁均存在,但是陷窝内骨细胞逐渐死亡.深低温保存的颅骨瓣的骨细胞仅出现皱缩,骨胶质纤维稍紊乱,结构较稳定.组织学发现新鲜骨91.5％的骨陷窝内有骨细胞,冷冻骨73.3％的骨陷窝内有骨细胞,皮下保存骨45.8％的骨陷窝内有骨细胞.自体骨瓣皮下保存与深低温保存的临床和基础研究尚不完备,缺乏与临床治疗时间节点相一致的实验资料,需进一步研究.     

重组合同种异体皮质骨修复大段负重骨缺损的组织计量学研究

目的 :比较不同处理方式的深低温冷冻同种异体皮质骨修复兔大段负重骨缺损的组织计量学效果 ,为临床大段负重骨缺损的重建提供新方法。方法 :4 0只新西兰大白兔随机分为 5组 ,造成左侧股骨中上段缺损 2cm的模型 ,分别采用重组人骨形态发生蛋白 2 (rhBMP 2 )和Ⅰ型可吸收胶原海绵 (ACS)对各组移植骨进行处理 ,其中A组植入异体骨 +rhBMP 2 +ACS ,B组植入异体骨 +rhBMP 2 ,C组植入异体骨 +ACS ,D组单纯植入异体骨 ,E组植入自体骨。术后 1 2周处死动物 ,移植骨和宿主骨远、近结合部及移植骨中段分别取材 ,做不脱钙磨片 ,在荧光显微镜和普通光镜下测量新骨形成率、骨孔隙率、骨单位半径和哈佛氏管直径。结果 :A组在新骨形成率、骨孔隙率、骨单位半径和哈佛氏管直径等方面均优于B、C、D组 ,与E组相仿。结论 :同种异体皮质骨、rhBMP 2和ACS复合移植具有高效持续的骨诱导作用 ,能平衡骨吸收 /骨形成活动 ,移植骨愈合质量好 ,是修复大段负重骨缺损的好方法。     

Binding mechanism of interface of porous coated titanium alloy prostheses

ＢｉｎｄｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｉｎｔｅｒｆａｃｅｏｆｐｏｒｏｕｓｃｏａｔｅｄｔｉｔａｎｉｕｍａｌｌｏｙｐｒｏｓｔｈｅｓｅｓＺｏｕＨｏｎｇｅｎ（邹宏思）；ＹｅＪｕｎ（叶军）；ＴａｎｇＮｏｎｇｘｕａｎ（唐农轩）；ＹｕａｎＣｕｎｈｕａ（袁存华）（Ｄｅ...     

磁性纳米纤维复合材料原位诱导体内成骨的研究

目的:研究一种新型顺磁性的纳米纤维复合支架γ-Fe2O3/nHAP/PDLLA在弱磁场下体内诱导新骨形成的功效.方法:纳米纤维复合材料支架通过电纺丝方法制成,支架内部的微观结构用扫描电镜(SEM)进行表征.将支架植入兔横突根部骨缺损处并在12周后处死动物,应用组织学方法研究支架在动物体内原位诱导新骨形成和胶原蛋白沉积的...     

老年骨质疏松合并颈椎病患者颈椎椎体骨吸收的扫描电镜观察

目的：对老年骨质疏松颈椎椎体小梁经制备行扫描电镜检查,观察骨小染的骨吸收发生机制,方法：收集8例因老年骨质疏松合并颈椎病而行颈前路椎体钻洞减压植骨手术老年患（平均年龄55岁）的颈椎椎体,同年轻成年人的颈椎椎体骨小梁相比,结果：老年骨质疏松患的柱状骨小染椎椎体骨小梁相比,结果：才年为骨小兴的变细,穿孔,圆形,狭长卵圆或梭形的吸收陷窝,陷窝的大小,深浅及内容物都不一致,陷窝四周原来具完整胶原纤维层的静止骨面也先后出现骨吸收,骨吸收过程中,无机盐可以行吸收,殖粗糙不规则的胶原纤丝,骨形成现象较少见到,说明在老年梁异常改建是以不断增多的吸收陷窝导致骨小梁穿孔,变细,吸收其至消失完成的,是造成椎体变形的主要原因。     

用石英晶体微天平研究胶原蛋白在聚乳酸表面的吸附

采用石英晶体微天平(QCM)研究了胶原蛋白在聚乳酸(PLA)表面的吸附,系统地探讨了胶原蛋白在聚乳酸表面的吸附过程,考察了缓冲溶液的离子强度和pH对胶原蛋白吸附的影响。结果表明：胶原蛋白在聚乳酸表面的吸附量随着离子强度的增大先增加后减少,离子强度对不同来源胶原蛋白吸附量的影响差别明显;pH对胶原蛋白的吸附量的影响非常大,在pH略小于等电点处吸附量最大;原子力显微镜(AFM)观察表明不同来源的胶原蛋白在聚乳酸表面吸附层结构差异显著。     

PRODUCTION AND TRANSFORMATION OF IVORY BONE IN OSTEOARTHRITIC FEMORAL HEAD

Twelve femoral heads were collected during total hip replacement forosteoarthritis of hip joint. The areas on the femoral head denuded of articular cartilageand the ivory bone were studied with scanning electron microscope. The following findingswere observed: 1. Over the area denuded of articular cartilage, the subchnodral bone platerevealed flake-like trabeculae whick were unequal in size and haphazard in array. Therewas a transformation of the flake-like trabeculae into lamellar bone tissues. 2. Over theivory bone, the lamellar bone tissues turned into Haversian systems and interstitiallamellae, thereby revealing characteristics of compact bone and became extremely hard. 3.Over the surface of the ivory bone could be seen fibrocartilaginous islands, representingreparative response from the marrow tissues.     

ULTRASTRUCTURAL INVESTIGATION OF EXPERIMENTAL FRACTURE HEALING ROLE OF OSTEOGENESIS PLAYED BY FIBROBLASTS

Transmission electron microscopic investigation of standardized fractures of radii in 50 rabbits re vealed that fibroblasts took part in the formation of bony callus. The osteogenetic role played by the fibroblasts can be categorized into the following 5 aspects: a. Fibroblasts synthesize and secrete Type collagen fibrils and induce deposition of calcium salt crystals in the collagen fibrils. b. Fibroblasts produce matrix vesicles in their surroundings. These matrix vesicles become calcified and turn into floccu- lent calcospherules which coalesce and fuse into bone tissues. c. Fibroblasts harbor calcium granules in their mitochondria, thus providing calcium for calci- fication of the intercellular matrix and bone forma tion between the cells. d. Fibroblasts can transform directly into osteocytes; there is bone formation around the fibroblasts, the bone tissues surround the fibroblast in the form of bony lacuna, then the fibro- blast in the lacuna transforms into osteocyte. e. Fibroblasts can undergo degenerative changes leading to decease and replacement by bone tissues.     

CT DIAGNOSIS OF LACUNAE

Lacuna, a special small infarction in deep regions of the brain, is difficult to diagnose clinically. Of 182 stroke patients receiving CT scanning, 23 were diagnosed as having lacuna. 34 foci found on CT were distributed in the internal capsule, basal ganglia, thalamus and pons, with diameters varying from 3 to 22 mm. Combined CT and clinical findings showed that motor hemiplegia was present in 12 patients, pure sensory stroke in 1, sensory-motor stroke in 9, and the lock-in syndrome in 1.20 (87%) of the 23 patients partly or completely fulfilled the criteria for the lacuna syndrome. The detection of lacunae depends on the property of instrument, the method of scanning, and the thickness of slice. By showing some minor infarctions, CT has offered the possibility of diagnosis of lacunae.