骨髓间充质干细胞在骨髓移植中的应用

间充质干细胞（Mesenehymal Stem Cells，MSC）是中胚层来源的具有多向分化能力的干细胞，是成体干细胞的一种，主要存在于结缔组织和器官间质中，以骨髓组织中含量最为丰富。由于骨髓是其主要来源，因此统称为骨髓间充质干细胞（bone marrow meschymal stem cell，BM—MSC）。也因其比较容易贴壁和形成成纤维样的克隆，又可称为贴壁细胞或者成纤维细胞集落形成单位（CFU—F）、骨髓基质细胞（MSC）或间充质干细胞或间充质祖细胞（MPC）。许多研究发现，BM—MSC在骨髓移植中有着极其重要的应用价值，一方面在骨髓微环境中支持造血；另一方面，对移植免疫有一定的影响，能够在某些方面减轻移植物抗宿主效应。     

骨髓间质干细胞移植治疗缺血性卒中

骨髓基质细胞内有一类具有多向分化潜能的千细胞称作间质干细胞（Mesenchymal Stem Cells,MSC），MSC在体内或体外（在诱导剂的诱导下）可转化为神经元和星形胶质细胞等。MSC治疗卒中目前还处于动物实验阶段，其可能的机制为：（1）MSC在新环境下表达神经细胞表型替代损伤细胞，（2）可分泌促进神经功能恢复的各种因子；（3）有新生血管生成。     

不同类型急性白血病患者骨髓间充质干细胞的病理学特征

骨髓间充质干细胞（MSC）具有在体内和体外支持造血的功能，因此联合MSC的造血干细胞移植有可能增强移植效果，最近研究结果证实联合MSC的造血干细胞移植可以促进造血干细胞的植入和造血恢复。既往研究发现急性白血病患者骨髓造血微环境存在病理改变，包括细胞的组成和功能改变。但是，急性白血病患者骨髓MSC是否受到影响以及影响程度，尚不清楚。此外，MSC的来源有限，而且异基因MSC存在归巢效率低等问题。     

肝细胞生长因子和低氧诱导因子1修饰间充质干细胞的应用研究进展

间充质干细胞（MSC）是一种具有自我更新和多向分化潜能的干细胞,肝细胞生长因子（HGF）是一种多功能细胞生长因子,HGF修饰骨髓MSC可以抑制骨髓MSC凋亡,提高细胞存活率.此外,MSC对缺氧反应的分子机制主要涉及低氧诱导因子1（HIF-1）信号通路,HIF-1修饰的MSC将改善干细胞移植时的缺点,降低凋亡、促进增殖,提高细胞黏附能力,促进血管生成.同时,MSC可以成为HGE和HIF-1理想的细胞表达载体,可能成为组织工程和细胞治疗等领域的研究热点.     

间充质干细胞治疗肾纤维化的现状与展望

肾纤维化（renal fibrosis,RF）是慢性肾病进展为终末期肾病的重要途径。目前实验发现,多种因素可导致RF。干细胞是一类具有自我复制和多向分化潜能的原始未分化细胞。细胞治疗越来越普遍,间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）成为治疗RF的一种有前途的细胞类型。MSC具有多种分化能力,可释放多种因子调节炎症和免疫反应。本文综述了影响RF发生的相关机制及MSC治疗RF的应用现状,并对现存问题及前景进行展望。     

猪骨髓间充质干细胞成骨分化后白细胞表面抗原的表达及意义

目的：研究猪骨髓间充质干细胞（MSC）成骨分化（DOC）后在干扰素-γ（IFN-γ）刺激下对猪白细胞表面抗原（SEA）的变化及外周血单个核细胞（PBMC）增殖的影响，了解其免疫原性。方法：以未分化的MSC为对照，采用流式细胞术分别检测未诱导、成骨诱导的MSC、MSC＋IFN-γ、DOC＋IFN-γ的SLA分子的表达，采用单向混合淋巴反应观察各组细胞对外源凝集素（PHA）刺激PBMC的每分钟脉冲值（CPM）变化。结果：MSC＋IFN-1组和DOC＋IFN-1组SLA—Ⅰ表达上调（P〈0．05），SLA—Ⅱ表达明显上调（P〈0．01）。MSC成骨分化后能抑制PHA刺激的PBMC增殖反应。结论：在体外实验中，DOC后的MSC在IFN-γ刺激下仍具有低免疫原性，且具有免疫调节作用。     

间充质干细胞免疫调节作用的研究进展

自Friedenstein等1976年报道了骨髓中存在克隆性生长的基质细胞以来，关于基质细胞的研究不断深入，1991年Caplan正式将这类细胞命名为间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）。间充质干细胞目前有多种名称，如骨髓基质干细胞（marrow strmal stem cell），成纤维细胞集落形成单位（CFU-F），多功能成体祖细胞（multipotent adult progenitor cell，MAPC），中胚层祖细胞（mesodermal progenitor cell，MPC）。至今命名仍有争议。     

孕中期羊水来源胎儿间充质干细胞的分离与培养及其生物学特性研究

近年来，不少研究者从胎儿组织和胎儿附属组织中分离出胎儿的间充质干细胞（mesenehymal stem cell，MSC），胎儿MSC和成人组织来源的MSC具有相同的细胞形态和抗原表型，而且具有更强的增值、分化能力和高效转染、表达外源性目的基因的特性，为胎儿组织工程学研究和基因治疗研究提供了重要的种子细胞来源。     

间充质干细胞外泌体对肺动脉高压治疗作用的研究进展

肺动脉高压（pulmonary hypertension,PH）是一种以进行性肺血管收缩、肺血管重构、右心室肥厚为特征，进而导致右心衰竭的疾病。目前治疗PH的方法仍存在很多不足，需要寻找新的治疗策略。近年来，有关间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）对PH的治疗作用及机制研究相继被国内外许多学者所重视，成为PH细胞治疗的研究热点之一。其中，MSC的旁分泌机制被认为起到一个重要的治疗作用。从MSC中分离出的外泌体（exosomes,EXO）具有抑制肺血管重构的潜力，被认为是治疗PH的一种新的潜在治疗方法。本文就MSC外泌体在PH治疗中的作用及可能机制做一综述，从而为MSC的EXO治疗PH提供理论依据。     

单层间质干细胞移植成功修复大鼠心肌梗死后瘢痕心肌

心肌梗死可导致心肌组织的丢失和左室功能的下降，为心功能衰竭的主要原因之一。修复瘢痕心肌对于心功能衰竭的治疗有着重要意义。虽然已有研究发现心肌注射骨髓干细胞可以促进心肌再生，但很难在梗死变薄的瘢痕区重建足够的心肌容量。间质干细胞（MSC）为存在于骨髓微环境的多能成年干细胞，除了能分化成为格根包尔氏细胞、软骨细胞、神经元和骨骼肌细胞外，也能分化为血管内皮细胞和心肌细胞。MSC可从脂肪组织中分离。日本大阪国立心血管中心研究所Yoshinori Miyahara为首的学者从脂肪组织分离培养MSC并采用细胞板技术研究单层MSC对于心肌梗死后心肌重建治疗的可行性，研究结果发表于近期的《自然医学》杂志（Nature Medicine，2006，12：459-465）。     

PDGF-B基因转染骨髓间充质干细胞的研究

目的：探讨血小板源性生长因子B（PDGF-B）基因转染修饰大鼠骨髓闻克质干细胞（MSC）的可行性。方法：应用FAM标记重组真核表达载体系统（pcDNA3-PDGF-B）。以脂质体法转染原代MSC。观察转染结果、表达情况孕对靶细胞活力的影响。结果：MSC的基因转染成功，持续表达时间超过了8周，没有发现明显的细胞毒作用及对细胞活力的显著影响。结论：采用真柱转染技术可以介导外源基因转染MSC，MSC是一种理想的基因载体细胞。可用于PDGF-B的基因治疗。     

骨髓间充质干细胞与血管平滑肌细胞直接接触培养后的分化及超微结构改变

目的：观察大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）与血管平滑肌细胞直接接触培养后向血管成分细胞的分化及超微结构改变。方法：将MSC（DAPI标记）与血管平滑肌细胞按一定的比例混合培养后,用平滑肌细胞抗体SM-α-actin、calponin及内皮细胞抗体CD31免疫荧光染色,并用透射电镜观察MSC的超微结构改变,检测MSC的分化情况。结果：MSC与血管平滑肌细胞混合培养5d后免疫荧光染色,可见细胞核蓝染的MSC与抗SM-α-actin（绿色）,抗calponin、CD31（红色）的双标细胞出现;而单独培养的MSC抗SM-α-actin阳性,抗calponin、CD31均为阴性。此外,混合培养后的MSC电镜下可见肌丝状结构。结论：与血管平滑肌细胞直接接触可以诱导MSC向血管成分细胞分化。     

MSCs定向诱导分化为软骨细胞实验研究

目的：体外诱导骨髓间充质干细胞（MSC）向软骨细胞定向分化,并对分化后的细胞进行鉴定方法：由健康兔子骨髓中分离出MSC,取第4代细胞进行实验。鉴定后,将细胞在地塞米松,bFGF,维生素C及TGF-B等诱导下分化后,通过RT-PCR检测Ⅱ型胶原（ColⅡ）的表达结果：诱导分化后的MSC可表ColⅡ的mRNA。结论：MSC在地塞米松,bFGF,维生素C及TGF-B等诱导后,可分化为软骨细胞。     

全骨髓法培养大鼠骨髓间充质干细胞及其生物学特性

目的建立一种简便有效的体外分离纯化及培养扩增大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）的方法,研究MSC的生物学特性。方法贴壁培养法分离纯化大鼠MSC,体外培养和连续传代,在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化;利用四唑盐比色（MTF）法测定MSC的生长曲线;流式细胞仪（FCM）鉴定MSC膜抗原。结果原代分离的MSC在接种后48h贴壁,细胞形态为椭圆形、多角形及短梭形,12天时细胞呈长梭形并达到90％单层融合。经传代扩增,细胞进一步纯化。细胞传代后2天内处于潜伏期,3天后进人生长期,7天后进入平台期。FCM检测CIM5、CD90阳性率分别为19．60％、95．38％。结论贴壁培养法能有效分离纯化大鼠MSC,用此方法培养的细胞生长稳定,增殖能力活跃,具有MSC的一般生物学特性,为其成为组织工程理想的种子细胞提供了进一步的支持。     

骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化和调控

骨髓间充质干细胞(MSC)是存在于骨髓中的非造血干细胞，作为一种组织特异性干细胞，具有多向分化潜能。近年来研究表明，MSC除分化为中胚层的骨细胞，软骨细胞，脂肪细胞和其他结缔组织外，在特定的培养条件下还可分化为骨骼肌细胞，心肌细胞，肝细胞，以及神经胶质细胞和神经元样细胞。文章主要综述关于MSC在体内和体外向神经细胞分化、调控、及其可能机制方面的研究。     

间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮的基础和临床研究

系统性红斑狼疮（SLE）是一种常见的累及多脏器包括心血管系统、关节和肾脏的自身免疫性疾病。其中，狼疮性肾炎是影响SLE患者预后的重要因素。间充质干细胞（MSC）是一种来源广泛的干细胞，具有多向分化功能和免疫调节功能。本课题组前期已从动物实验、临床试验等多方面对MSC移植进行了研究，已初步证实了MSC移植治疗SLE的有效性和安全性，并部分阐明了其相应的机制。     

人脐血间充质干细胞向肝细胞样细胞的分化

目的 从脐血中获得间充质干细胞（MSC），探索体外诱导MSC向肝细胞分化的实验条件。方法 无菌采血，分离脐血单个核细胞。以贴壁培养法获得MSC，采用流式细胞术检测细胞表面标志。分别用联合诱导法(联合诱导组)以及阶段诱导法(阶段诱导组)诱导MSC向肝细胞分化。采用RT-PCR检测ALB、AFP及CK19mRNA的表达情况。结果 MSC呈长梭形，第三代（P4）后增殖较快。流式细胞术检测表明：CD29及CD44阳性，而CD34及CD45阴性。诱导6周后，联合诱导组无变化，而阶段诱导组细胞由长梭型变为不规则型，并检测到AFP mRNA的阳性表达,而未见ALB、CK19 mRNA的表达。继续诱导2周，检测到AFP、ALB、CK19 mRNA的表达。结论 脐血中的MSC对高密度、高血清的依赖性高。在体外，阶段诱导方法可将MSC诱导成肝细胞。     

间充质干细胞外泌体作用机制的研究进展

间充质干细胞（MSC）来源于中胚层,具有修复组织损伤的作用。外泌体是细胞分泌的囊泡样物质,与来源细胞功能相似。近年来,间充质干细胞来源外泌体（MSC-exo）受到广泛关注,其生物学特性及作用机制成为研究热点。本文就外泌体特性及间充质干细胞来源外泌体在治疗疾病中作用机制作一综述。     

骨形态发生蛋白2基因转染对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的：评价携带骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒（Ad-BMP-2）转染人骨髓间充质干细胞（MSC）对其成骨分化的影响。方法：由健康青年男性髂骨抽取骨髓培养MSC，BMP-2基因转染后，用RT-PCR及免疫组化染色证实转基因MSC的BMP-2基因表达，原位杂交及免疫组化染色检测转染后细胞成骨活性，并进行透射电镜观察。结果：转染后细胞稳定表达BMP-2基因，核心结合因子a1、骨钙素、骨桥素、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶呈阳性表达，透射电镜显示细胞外有胶原分泌和钙盐沉积。结论：Ad—BMP-2基因转染可以提高MSC的体外成骨能力。     

刺五加注射液对骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的探讨刺五加注射液对大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）增殖的影响。方法体外培养MSC，用四甲基偶氮唑法检测刺五加注射液促进大鼠MSC增殖的作用；用免疫组化法检测MSC细胞的Brdu标记阳性率。结果4种浓度的药液对MSC的增殖作用与对照组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论刺五加注射液有促进MSC增殖的作用。