肿瘤患者血浆内源性二氢尿嘧啶及尿嘧啶的测定

目的测定肿瘤患者血浆中的二氢尿嘧啶(H2U)与尿嘧啶(U)的比值来间接估计二氢尿嘧啶脱氢酶(DPD)的活性。方法采用HPLC法测定肿瘤患者血浆中内源性物质H2U和U的比值。色谱柱:反相C18柱(300mm×4.6mm,5μm);流动相:0.01mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH3.0),5μmol·L-1磷酸三乙胺;检测波长204nm。结果202例肿瘤患者入选,其H2U/U为(2.50±1.25)(0.53~7.51),男性为(2.58±0.85),女性为(2.41±0.98);有50例的H2U/U低于2.0,其中男性患者为29例,女性为21例。DPD酶活性与年龄、性别不存在相关性(P>0.05)。结论通过HPLC法测定血浆DPD酶活性来调节氟尿嘧啶的剂量,从而达到个体化给药的目的。     

HPLC法测定血浆中尿嘧啶和二氢尿嘧啶的含量

目的：建立人血浆中内源性尿嘧啶（U）和二氢尿嘧啶（UH2）的HPLC测定方法，为通过UH2／U比值评价体内二氢嘧啶脱氢酶活性提供方法学基础。方法：采用Shim-packCLC—ODS柱（6mm×150mm，5μm），以0．05mol·L^-1磷酸盐缓冲液（pH值为4．0）为流动相，测定U的检测波长为260nm，测定UH2的检测波长205nm。以含3％牛血清白蛋白（BSA）的水溶液配制标准样品和质控样品。以溴尿嘧啶为内标，采用叔丁基甲醚／正丙醇（75：25）为提取溶剂进行两次提取，氮气吹干、复溶后进样分析。结果：U在5—200μg·L^-1的范围内线性良好（r=0．9995，n=6），测定的批内变异RSD在1．73％-3．45％之间，批间变异RSD在1．76％～2．53％之间，回收率为96．15％-105．09％；UH2在10-400μg·L^-1的范围内线性良好（r=0．9996，n=6），测定的批内变异RSD在3．67％-3．80％之间，批间变异RSD在3．40％～5．74％之间，回收率为101．51％～104．06％。结论：本方法灵敏度高，操作简便易行，为测定体内尿嘧啶和二氢尿嘧啶，进而评价二氢嘧啶脱氢酶活性提供方法学基础。     

5—氟尿嘧啶的毒副作用与二氢嘧啶脱氢酶基因多态性关系的研究进展

5-氟尿嘧啶(5-FU)对肿瘤患者应用广泛，疗效较显著，但有时会发生严重的毒副作用甚至死亡，如能在用药前预测毒副作用的发生，将给患者带来福音。本文主要介绍了有关5-FU的代谢过程、二氢嘧啶脱氢酶的作用机制、二氢嘧啶脱氢酶基因的结构及研究进展，并讨论了预测5-FU毒副作用的手段，其中主要强调了利用基因手段来进行检测，同时指出了该手段目前存在的问题及前景。     

二氢嘧啶脱氢酶活性替代值在结直肠癌化疗中个体化给药的应用

目的:在氟尿嘧啶(5-FU) 醛氢叶酸(CF)结直肠癌化疗方案中,测定二氢嘧啶脱氢酶(DPD)活性替代值并评价与5-FU血药浓度及毒性级别的相关性.方法:以高效液相色谱法测定结直肠癌患者体内内源性嘧啶类物质二氢尿嘧啶(UH2)与尿嘧啶(U)的比值,作为DPD活性的替代值,同时行连续5 d的5-FU CF辅助化疗方案,第5天监测5-FU血药浓度,评价DPD酶活性替代值与5-FU血药浓度及毒性的相关性.结果:50例结直肠癌患者行5-FU CF辅助化疗方案,化疗前测定DPD酶活性替代值为(4.2±1.2),5-FU的血药浓度为(2 203.6±612.4)μg·L-1,DPD酶活性替代值与5-FU血药浓度、5-FU毒性级别呈负相关.结论:血中DPD酶活性替代值(UH2/U值)的测定可作为5-FU结直肠癌化疗时的血药浓度及毒性的预测指标,修正5-FU按体表面积的给药方式,为结直肠癌5-FU化疗个体化剂量的确定提供更为可靠的理论依据.     

HPLC法间接测定肿瘤患者外周血中二氢尿嘧啶脱氢酶的活性

目的:建立间接测定肿瘤患者外周血中二氢尿嘧啶脱氢酶(DPD)活性的方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定肿瘤患者血浆中内源性物质二氢尿嘧啶(H2U)和尿嘧啶(U)的比值,间接估算DPD的活性。其中,色谱柱为XterraRPC18,流动相为甲醇-0.02mol·L-1磷酸二氢钠(pH4.0)(5:95),流速为1.0mL·min-1,检测波长分别为204nm(H2U)、260nm(U)。结果:H2U、U检测浓度分别在62.5～2000μg·L-1(r=0.9997)、15.625～500μg·L-1(r=0.9993)范围内线性关系良好,日内RSD分别≤7.7%、8.3%,日间RSD分别≤13.8%、13.4%,方法回收率分别为99.63%～103.02%、98.38%～109.08%。63例肿瘤患者的DPD活性(H2U/U比值)在肿瘤患者中变异较大,范围为1.51～6.67。结论:本方法可用于肿瘤患者外周血DPD活性的常规监测。     

HPLC法同时测定人血浆中5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2＇-脱氧尿嘧啶核苷的浓度

目的：建立一种同时测定人体血浆中5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2＇-脱氧尿嘧啶核苷浓度的HPLC法。方法：以肌苷为内标，血浆样品用硝酸银（10％）沉淀蛋白质，采用C18柱，检测波长为266nm，流动相：0．01mol·L^-1磷酸盐（用2mol·L^-1氢氧化钠溶液调pH为7．0）-甲醇（96：4），流速1．0mL·min^-1，柱温为45℃。结果：5-氟尿嘧啶和5-氟-2＇-脱氧尿嘧啶核苷分别在0．1～20μg·mL^-1（r=0．9997）和0．2～40μg·mL^-1（r=0．9997）浓度范围内线性关系良好，最低检测浓度分别为5和10ng·mL^-1，方法回收率分别为98．2％～101．2％、99．5％～102．3％，日内、日间RSD均小于6％。结论：方法灵敏、快速、准确，适用于临床上测定5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2＇-脱氧尿嘧啶核苷的血药浓度及药动学的研究。     

尿嘧啶还原酶抑制剂5-乙炔基尿嘧啶的合成工艺研究

目的 合成5-乙炔基尿嘧啶并进行工艺研究。方法 以乙酰乙酸乙酯与原甲酸三乙酯为起始原料，缩合得到α-乙氧亚甲基乙酰乙酸乙酯，再与尿素环合得到5-乙酰基尿嘧啶，之后通过氯化、水解得到尿嘧啶还原酶抑制剂5-乙炔基尿嘧啶。结果与结论 与文献报道的方法相比，该合成路线具有原料价廉易得、反应条件温和等优点。     

HPLC法同时测定人血浆中5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2′-脱氧尿嘧啶核苷的浓度

目的:建立一种同时测定人体血浆中5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2′-脱氧尿嘧啶核苷浓度的HPLC法。方法:以肌苷为内标,血浆样品用硝酸银(10%)沉淀蛋白质,采用C_(18)柱,检测波长为266nm,流动相:0.01mol·L~(-1)磷酸盐(用2mol·L~(-1)氢氧化钠溶液调pH为7.0)-甲醇(96∶4),流速1.0mL·min~(-1),柱温为45℃。结果:5-氟尿嘧啶和5-氟-2′-脱氧尿嘧啶核苷分别在0.1～20μg·mL~(-1)(r=0.9997)和0.2～40μg·mL~(-1)(r=0.9997)浓度范围内线性关系良好,最低检测浓度分别为5和10ng·mL~(-1),方法回收率分别为98.2%～101.2%、99.5%～102.3%,日内、日间RSD均小于6%。结论:方法灵敏、快速、准确,适用于临床上测定5-氟尿嘧啶及其活性代谢物5-氟-2′-脱氧尿嘧啶核苷的血药浓度及药动学的研究。     

LC-MS/MS法同时检测人血浆中氟尿嘧啶、尿嘧啶和二氢尿嘧啶的浓度及其临床应用

目的:建立同时测定人血浆中氟尿嘧啶、尿嘧啶和二氢尿嘧啶浓度的方法 ,并应用于临床.方法:建立LC-MS/MS法,以溴尿嘧啶为内标,采用Waters Atlantis T3色谱柱(100 mm×3.0 mm,3μm);0.1％ 甲酸水溶液(V:V,A相)-甲醇(B相)为流动相,梯度洗脱(0～2 min,5％B;2.0～2...     

胰岛素-5-氟尿嘧啶偶联物在体外的细胞毒性和细胞亲和性

目的 研究胰岛素-5-氟尿嘧啶偶联物(insulin-5-Fu)在体外的细胞毒性和细胞亲和性.方法 通过MTI比色法和荧光标记成像来检测insulin-5-Fu对正常肝细胞和肝癌细胞的作用效应.结果 偶联物在体外能够与肝癌细胞迅速地特异性结合;在中、低浓度下对肝癌细胞具有与原药相近的细胞毒性,对于正常细胞,其初期毒性较低;在高浓度下对正常细胞和肿瘤细胞的毒性急剧增加.结论 以胰岛素为靶向载体的偶联物能够靶向肿瘤细胞,在中、低浓度范围内能够达到与原药相近的抑瘤效果,对正常细胞的毒性表现出时间延迟现象,高浓度时具有一定的细胞毒性.     

5-氟尿嘧啶与3种输液配伍的稳定性考察

目的：考察室温,３７℃下,５－Ｆｕ与３种输液配伍的稳定性。方法：用ＨＰＬＣ法测定配伍后２４ｈ内５－Ｆｕ的含量、ｐＨ,同时观察外观。结果;室温,３７℃下２４ｈ内配伍液的外观澄明,无色变及沉淀,ｐＨ及含量无明显变化。结论;室温,３７℃下２４ｈ内,５－Ｆｕ与３种输液可以配伍使用。     

Topical delivery of 5-fluorouracil (5-Fu) by 3-alkylcarbonyl-5-Fu prodrugs

The solubilities in isopropyl myristate (SIPM) and pH 4.0 buffer (SAQ) and the partition coefficients between IPM and pH 4.0 buffer (KIPM:AQ) have been measured for a series of 3-alkylcarbonyl-5-fluorouracil prodrugs (3-AC-5-FU). The 3-AC-5-FU prodrugs were all 100 times more soluble in IPM and the first two members of the series were also more soluble in pH 4.0 buffer than 5-FU. The abilities of the 3-AC-5-FU prodrugs to deliver total 5-FU species through hairless mouse skin from IPM suspensions (Ji) were also measured. The 3-propionyl derivative 3, which exhibited the highest SAQ in the series, gave the highest Ji value. The SIPM, SAQ and molecular weights (mw) of the 3-AC-5-FU series correctly predicted the rank order and very closely (0.10 log units) predicted the absolute values for logJi using the transformed Potts-Guy equation. Although the series of 3-AC-5-FU prodrugs was generally quite effective at increasing Ji (2-20 times), the best 3-AC-5-FU prodrug was not as effective as the best 1-alkylcarbonyl-5-FU prodrug (1-AC-5-FU) at increasing Ji and the ability of the 3-AC-5-FU prodrugs to increase the concentration of total 5-FU species in the skin was 2-5 times less than the 1-AC-5-FU prodrugs. Thus, the 1-AC-5-FU prodrugs remain as the best prodrugs with which to enhance the topical delivery of 5-FU.     

内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶的简易高效液相色谱测定法

目的建立测定内源性嘧啶类物质尿嘧啶(U)及二氢尿嘧啶(HU2)的反相高效液相色谱法,并应用于癌症病人5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗前的嘧啶代谢缺陷及毒性预测.方法色谱柱大连依利特ODS2(250mm×4.6mm,5μm).以5-Fu作内标,经沉淀蛋白并以异丙醇与乙酸混合液提取,进行色谱分析.流动相为0.01mol.L-1KH2PO4-H3PO4缓冲液（pH=3.0）,流速0.5ml.min-1,检测波长204nm.xf js UH2的线性方程为Y=136.70X-9.42(r=0.9909,n=7)U的线性方程为Y=78.05X+1.03(r=0.9993,n=7),线性浓度范围为8μg.L-1～500μg.L-1,UH2最低检测浓度为6μg.L-1,U最低检测浓度为4μg.L-1.平均回收率UH2为66.6%,U为70.4%.结论本方法在同一色谱条件下完全分离二种痕量内源性嘧啶类物质,并予以定量分析,结果可作为确定行5-氟尿嘧啶化疗方案的肿瘤病人个体化给药剂量的依据.     

5-Fu缓释剂对直肠癌区域性化疗局部药物浓度的影响

目的 研究直肠癌患术前直肠黏膜下植入5—Fu缓释剂后，药物在局部的分布、扩散情况。方法 对13例直肠癌拟手术患术前直肠黏膜下植入5—Fu缓释剂500mg，72h后手术，术中抽取肠系膜下静脉血和外周静脉血，并取癌组织癌旁近端的肠壁组织，用高效液相色谱法检测5—Fu浓度。实验数据采用SPSS10软件进行统计学处理。结果 肠系膜下静脉血5—Fu浓度显高于同时相外周血浓度，癌组织5—Fu浓度显高于癌旁组织浓度，全组未发现全身及局部毒副作用。结论 直肠黏膜下植入5—Fu缓释剂是直肠癌术前区域性化疗的最佳途径之一；证实了区域性化疗局部5—Fu高浓度的优势，可望提高直肠癌根治术后的远期疗效。     

原位凝胶材料OALA对氟尿嘧啶生物活性影响

目的:观察原位凝胶材料OALA对肿瘤化疗药物氟尿嘧啶(5-Fu)生物活性的影响,从而为其负载5-Fu提供实验依据。方法:采用MTT法评价不同浓度的OALA对人肺腺癌(A549)、乳腺癌(MCF-7)和结肠癌(LOVO)细胞增殖能力的影响;采用MTT法评价OALA对5-Fu体外细胞毒性的影响;给予不同剂量的5-Fu作用下及以OALA溶液静脉注射干预,观察动物的死亡率,并与单纯注射5-Fu组动物死亡率进行比较;以艾氏腹水癌(EAC)小鼠为模型,观察一定剂量的5-Fu及其联用OALA对小鼠肿瘤生长状况的影响,采用肿瘤生长抑制率作为其评价指标。结果:随着OALA浓度的增加其对A549、MCF-7及LOVO细胞的增殖抑制作用逐渐增强,具有明确的量效关系;30μg.mL-1的OALA合用5-Fu后不会增加或降低药物本身的细胞毒性;OALA能够降低5-Fu中、高剂量组动物的死亡率(P<0.05),但对低剂量组动物的死亡率无明显影响;OALA单次给药能够降低5-Fu对小鼠EAC的抗肿瘤活性(P<0.05),而多次合用药组与5-Fu多次给药组相比抑瘤率无明显改变。结论:OALA对5-Fu的生物活性有一定影响。     

氟尿嘧啶和丝裂霉素联合用药体外药敏试验在大肠癌中的应用

目的在大肠癌中尝试体外抗癌药联合药敏试验的可行性。方法用MTT法测定5-Fu、MMC单药和联合用药对32例大肠癌患者的体外敏感性,分别以金氏公式法和Isobologram分析法统计其体外拮抗、相加、协同作用的发生率。结果合并用药后抗癌药抑制率大于单药,有部分联合用药组与单药组比较存在显著差异。按金氏公式法统计结果,其拮抗、相加、协同作用的发生率分别为22%,50%,28%;而按Isobologram分析法的统计结果,其拮抗、相加、协同作用发生率分别为22%,44%,34%。结论5-Fu、MMC联合用药大肠癌体外药敏试验中,金氏公式法可替代烦琐的Isobologram分析法,体外联合药敏试验的结果与临床化疗疗效的相关性有待实践检验。     

5-氟尿嘧啶脂质体凝胶剂的制备和评价

目的 研制5-氟尿嘧啶(5-Fu)脂质体凝胶剂,并进行质量评价.方法 采用逆相蒸发-冻融法制备5-Fu脂质体,再用卡波普为基质制成凝胶剂;以离心法测定脂质体的包封率;以体外经皮渗透释药法,比较5-Fu脂质体凝胶剂及5-Fu普通凝胶剂中的经皮渗透作用.结果 5-Fu脂质体平均粒径为2.16±0.30μm,平均包封率为(56.17±2.52)%;体外透皮实验中,脂质体凝胶剂24h的药物浓度为158.6 mg·mL-1,明显高于普通凝胶剂91.2mg·mL-1.结论 载药脂质体凝胶剂可显著减少药物经皮吸收,可维持较长释药时间.     

Oral Toxicity of Formaldehyde and Its Derivatives

Abstract

Formaldehyde (FA) has been commercially produced since the early 1900s. Its widespread use in a variety of applications is known to result in appreciable exposure of workers and of a section of the general population.

Formaldehyde is a normal metabolite in mammalian systems. It occurs in air as a product of the natural photooxidation of automobile exhaust, combustion processes, incinerators; formaldehyde has been found in municipal and industrial effluents and is present in food either naturally (fruits and vegetables, in the order of parts per million), or as a result of its use as a food additive.

The use of FA and its derivative, hexamethylenetetramine (HMT), which gradually decomposes to FA under acidic conditions as antimicrobial agents in food, raises questions about their potential chronic oral toxicity.

Furthermore, since FA is a very reactive compound and reacts with different macromolecules such as proteins and nucleic acids, the safety evaluation of FA as a cheese additive must take into account the toxicity of the reaction products between FA and milk components.

Biochemical aspects, acute and short-term toxicity studies including mutagenicity, multigeneration, and reproduction studies, long-term carcinogenicity studies after oral administration of FA and HMT are reviewed in this paper.

The results of these studies indicate that repeated oral exposure of a relatively large amount of FA that could overwhelm the normal metabolic capacity of animals to convert FA into formiate, CO₂, and water produces histopathological gastric changes.

This paper correlates the hazard caused by the exposure to low levels of FA, as far as its carcinogenic potential by oral route is concerned per se or regarding its use as a food additive.

Based on the evidence that FA is formed naturally in food and is a normal mammalian metabolite and that a threshold for carcinogenicity exists both after exposure by inhalation and oral administration, it may be deduced that FA is not carcinogenic at low levels of exposure.