冬凌草抗菌活性成分研究

目的：研究冬凌草的抗菌活性成分。方法：利用纸片扩散法（K-B 法）进行抗菌活性成分筛选;采用色谱法对活性部位进行分离,并运用波谱技术鉴定结构。结果：从冬凌草乙酸乙酯部位分离鉴定了6 个化合物：冬凌草甲素（1）、迷迭香酸（2）、咖啡酸（3）、水杨酸（4）、阿魏酸（5）和香草酸（6）。冬凌草甲素对金黄色葡萄球菌（SA）、耐甲氧西林葡萄球菌（MRSA）、β-内酰胺酶阳性的金黄色葡萄球菌（ESBLs-SA）均有一定的抗菌活性,且抗菌活性最强（MIC 为3.125、6.25、6.25 μg·disc-1）,但仍弱于阳性对照小檗碱（MIC 值均为0.156 μg·disc-1）。阿魏酸对SA 和MRSA 有一定的抗菌活性（MIC 为50 和50 μg·disc-1）,水杨酸仅对SA 有抗菌活性（MIC 为50 μg·disc-1）。结论：冬凌草甲素、阿魏酸和水杨酸是冬凌草的主要抗菌活性成分。     

流式细胞术检测蜀葵花抑菌作用的初步研究

目的 探讨流式细胞术（FCM）在蜀葵花抑制金黄色葡萄球菌（金葡菌）药敏试验中的应用价值.方法 应用FCM检测蜀葵花对金葡菌的抗菌活性,药物作用3h后,用碘化丙啶（PI）染色,分别检测10株金葡菌阴性对照管和最低抑菌浓度（MIC）药物浓度作用管的平均荧光强度（MFI）,计算两者比值并设定流式细胞药敏试验（FCST）检测MIC的判断值,根据该判断值对21株临床菌株同时进行常规药敏和FCST双盲测定.结果 10株金葡菌测得的MFI比值为2.95±0.117,将MFI大于阴性对照管3倍（增加200%）的最低药物浓度定义为该菌的MIC;21株临床菌株中20株两种方法测得MIC值相差在1个倍比稀释度以内,两者比较无显著性差异（P〉0.05）.结论 FCST与常规药敏试验结果有很好的一致性,并具有快速、敏感、准确的优势.     

林氏咽宁散体外抗菌和局部刺激性实验研究

目的：探讨林氏咽宁散体外抗菌作用及其生物安全性。方法：采用液体试管法观察该药体外对金黄色葡萄球菌的抗菌作用。观察金黄色田鼠口腔一次性给药后24h期间给药部位的反应。结果：液体试管法测定林氏咽宁散的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）均为0.025g/mL。口腔、咽喉黏膜给药部位与对照组相比未见明显异常。结论：实验表明,林氏咽宁散对金黄色葡萄球菌有一定的抗菌作用;未见林氏咽宁散对口腔、咽喉黏膜产生明显的刺激作用。     

大黄抗无芽胞厌氧菌的体外实验研究

目的：检测大黄体外抗菌活性。方法：采用无芽胞厌氧菌药敏实验的肉汤微量稀释法。结果：大黄对脆弱类杆菌,多形拟杆菌的抗菌活性最强,MIC值为0．3125－2．5mg/ml,MBC值为1．25－10mg/ml,对产黑素普雷活氏菌的抗菌活性较强,MIC值为0．625－5mg/ml,MBC值为5－10mg/ml,对其他的无芽胞厌氧菌也是一定的抗菌活性,结论：大黄是一种有效的抗无芽胞厌氧菌的药物,但需进一步临床研究。     

楮叶体外抗真菌作用的实验研究

目的：研究楮叶提取物体外抗真菌作用，为进一步开发和利用楮叶资源提供依据。方法：采用试管药基法，进行了楮叶的5种提取物对4属6种皮肤癣菌和白念珠菌的抑菌实验及MIC测定。结果：5种提取物总平均最低抑菌浓度MIC（g／100mL）值范围在2．68—6．67（g／100mL）之间，以75％乙醇提取物抗菌作用最强，其次分别为残留水液、乙醇提取物的正丁醇提取部位、醋酸乙酯提取部位和石油醚提取部位。结论：楮叶可作为抗浅部真菌中草药，值得进一步研究开发和利用。     

18种抗炎症中草药的抑菌作用研究

目的观察部分中草药的抑菌作用。方法通过对湖南新化民间中医药资源进行深入调查，采集并选用了18种具有消炎、抗菌、杀毒作用的中草药，进行抑菌实验。通过药敏纸片法初步筛选出5种对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、粪肠球菌及鸡沙门氏杆菌有较强抑菌效果的中草药。通过试管二倍稀释法测定5种中草药的MIC值（最低抑菌浓度），筛选出香薷、千里光2种押菌效果最强的中草药。研究了在不同pH值条件下2种中草药提取物抑菌效果以及用MIC、2MIC、4MIC浓度作用不同时间的抑菌效果。结果千里光在pH值为8—9的范围内，抑菌效果最好，香薷在pH值为7—9的范围内，抑菌的效果最好；中草药的抑菌效果与作用时间呈正相关。     

浅析抗菌药物的经验性治疗

目的：为了解我院重症监护病房（ICU）医师经验性选择抗菌药物的准确性及在药敏报告后抗菌药物的调整应用情况,随机抽查了我院ICU病房部分病例进行回顾性分析.分析医师经验性选择抗菌药物的准确性及在药敏报告后抗菌药物的调整应用情况.方法：随机抽取ICU病房2012年1～6月份的有药敏报告的部分病例101份,男55例,女46例.结果：常用抗菌药物的敏感性测试：首次选择抗菌药物用药72h有效的比率为70.30％;报告前后调整抗菌药物结果表现：经验性选择抗菌药物与药敏报告的符合率为69.31％.结论：各级医师应熟悉《抗菌药物临床应用指导原则》,根据药敏结果及时更换较窄谱的针对性强的抗菌药物.     

红粉、轻粉体外抗菌作用实验研究

目的：观察丹药红粉和轻粉的体外抗菌谱及抗菌力。方法：用临床药敏实验方法,观察红粉、轻粉对标准质控菌株（金黄色葡苟球菌ATCC25933、大肠杆菌ATCC25922、绿脓杆菌ATCC27853）的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。并和外科常用抗菌素（庆大霉素、氯霉素）进行比较。结果：红粉对3种实验菌株均有抗菌和杀菌作用,轻粉对绿脓杆菌只有抑菌作用而无杀菌作用,红粉的MIC和MBC均低于轻粉。结论：丹药红粉、轻粉具有抗菌谱广、抗菌力强的作用。     

羟丙基甲基纤维素-卡波普缓释亲水凝胶骨架片的研制和释药影响因素的考察

 目的 以盐酸苯丙醇胺（PPA）为模型药物,以羟丙基甲基纤维素(HPMC) K100M和卡波普971P为骨架材料,研制具有良好缓释特性的亲水凝胶骨架片,并考查影响释药的因素。方法 粉末直接压片法制备骨架片,反相高效液相色谱法检测释放介质中PPA的浓度。运用正交设计法,以美国的PPA缓释片Acutrim^?为对照,相似因子f₂值为指标,筛选较优处方,并考察影响PPA释放的因素。结果 释药曲线均符合Higuchi方程（R＞0.98,P＜0.01）。正交设计获得的最优处方在0.1 mol·L^-1HCl,H₂O（pH6.5）,磷酸盐缓冲液（PBS）pH 5.0,6.8和7.4的介质中,以及在0.1 mol·L^-1HCl中释放2 h,转移至pH 6.8 PBS中释放10 h,相对于对照品的f₂值为63～74,表明在各介质中两制剂的释药曲线相似。在本实验考察范围内,骨架片在水中的释药速率与HPMC K100M和卡波普971P的用量呈负相关。HPMC K100M和卡波普971P的比例（保持聚合物总用量相同）,硬脂酸镁用量和骨架片硬度对释药速率无显著性影响。结论 以HPMC K100M和卡波普971P为骨架材料的PPA亲水凝胶骨架片具有明显的缓释效果,影响药物释放的主要因素是HPMC K100M和卡波普 971P的用量。     

宁舒洗剂的体外抗菌作用

目的：研究宁舒洗剂的体外抗菌作用特点。方法：80株细菌全部近期临床分离所得，其中G^ 菌34株，G^-菌46株；采用试管内药液二倍稀释法，测定宁舒洗剂的NIC、MBC，对于产ESBLS的大肠杆菌（耐药菌株）与不产ESBLS的普通大肠杆菌的MIC和MBC进行比较，另外，观察了细菌接种量和药物PH值分别对MIC、MBC的影响。结果：①宁舒洗剂对所有试验菌株均有抑菌作用，对G^ 的作用较好，其MIC50为1：32，而G^-菌的MIC50为1：8。②对试验菌均具有杀菌作用，仍对G^ 的作用较好，其MBC50为1：32，而G^菌的MBC50为1：4。每种细菌的MBC50与MIC50和MIC90等值均十分接近甚至相等。③对于产ESBLS大肠杆菌的抗菌作用与普通大肠杆菌相同，MIC50、MIC90、MBC50、MBC90均为1：4。④细菌接种量为10^2cfu/ml的效价均高于10^4cfu/ml。⑤药物PH值为8.0时药物的效价高于PH6.0。结论：宁舒洗剂具有体外抑菌和杀菌作用，对G^菌的作用较好，对产ESBLS的大肠杆菌也具有抗菌作用。     

加味生脉散对气虚型鼻咽癌大鼠的放射增敏作用及相关机制

目的:探讨加味生脉散对气虚型鼻咽癌大鼠放疗增敏作用及相关机制。方法:SD大鼠于玻璃水缸中游泳,每天10 min,共30 d。同时在大鼠腋部皮下注射二亚硝基哌嗪(DNP),剂量为0.5 mg/只/次,每3 d注射1次,共注射30次,于90 d内完成,构建鼻咽癌大鼠模型。实验分为对照组、药物组、放疗组、药物+放疗组,通过测量肿瘤体积及计算抑瘤率,观察药物加味生脉散的放疗增敏作用;荧光定量PCR及Western-blot检测瘤组织多药耐药基因-1(MDR1)基因的表达差异。结果:肿瘤质量,对照组(1 230.0±106.8)mg,放疗组为(447.2±121.9)mg,与对照组比较,P<0.05,抑瘤率53.25%;药物加放疗组为(259.9±64.7)mg,与放疗组比较,P<0.05,抑瘤率72.81%;相对表达倍数,药物组为1.21,放疗组为1.85,药物加放疗组为1.34。结论:加味生脉散对鼻咽癌的放疗具有增敏作用,其增敏机制可能与抑制MDR1基因的表达相关。     

左归丸、右归丸复方及相关成分对小鼠胚胎干细胞1B10向生殖细胞方向分化的影响

目的:探索左归丸、右归丸及其相关成分对干细胞向生殖细胞分化的影响。方法:制备左归丸、右归丸、左归丸和右归丸共有成分的大鼠含药血清,以此作为实验药物;以小鼠胚胎干细胞1B10(MESC-1B10)为干细胞代表;然后以上述大鼠含药血清干预MESC-1B10,干预过程中进行显微照像追踪,干预72 h后,提取相关被干预细胞的RNA,立即合成c DNA,最后利用实时荧光定量PCR(q PCR)检测各干预细胞的10种与生殖分化相关基因的表达模式。结果:左归丸大鼠含药血清(ZGWRS)显著上调了Oct-4和SCP3,显著下调了GDF-9和Stra8;右归丸大鼠含药血清(YGW-RS)显著上调了Oct-4,GDF-9,Mvh和SCP3,显著下调了Stra8,Itga6和Itgb1;左归丸和右归丸共有成分的大鼠含药血清(ZGWYGW-RS)显著上调了Oct-4,SCP3和ZP3,显著下调了GDF-9,Stra8,Itga6和Itgb1。结论:ZGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,但是尚不足以推动1B10向生殖细胞分化;YGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,同时推动1B10向雌性生殖细胞分化;ZGWYGW-RS能启动MESC-1B10向减数分裂方向变化,同时能轻微推动MESC-1B10向雌性生殖细胞分化,但是作用弱于YGW-RS。实验结果一方面增强了对左归丸和右归丸及其相关成分影响干细胞生殖分化的认识,另一方面有助于解释左归丸和右归丸治疗不孕不育症的机制。     

克感复方对流感病毒抑制作用的实验研究

目的:探讨克感复方在MDCK细胞上抗流感病毒的作用并对其机制进行初步研究。方法:以利巴韦林为阳性对照药物,运用抑制试验、预防试验、中和试验3种方法,以MTT法检测细胞存活率,研究克感复方抗流感病毒的作用并判断其作用原理。同时,通过药物血凝抑制实验分析其抗流感病毒作用是否与病毒血凝素相关。结果:克感复方对MDCK细胞的半数毒性浓度(CC50)为(2.84±0.65)mg/mL,抑制流感病毒增殖的半数有效浓度(EC50)为(0.18±0.12)mg/mL,选择性指数(SI)为15.78。有细胞外杀流感病毒作用,但作用较弱,最高抑制率未超过50%。无阻断流感病毒吸附的作用。无药物血凝抑制作用。结论:克感复方在MDCK细胞上具有抗流感病毒的作用,其中抑制流感病毒增殖的能力最强。     

5种产地苍术提取物主要药理作用比较研究

目的 :比较不同产地苍术的内在质量及药效学差别。方法 :对 5种产地苍术挥发油含量、水提取物得率、体外抑菌作用进行了比较 ,对 5种产地苍术 70 %乙醇提取物抗化学物质引起胃溃疡及对胃、小肠动力学的影响进行了比较研究。结果 :不同产地苍术挥发油含量及抑菌作用有明显差别 ;不同产地苍术 70 %醇提物抗胃溃疡作用及对胃、小肠推进功能影响的强度有明显差别。结论 :药材产地对苍术的内在质量及药效学有明显影响     

艾灸对多药抗药基因产物P-170糖蛋白功能的影响

利用我们建立的S－180抗阿霉素抗药细胞荷瘤BABL／c小鼠，艾灸关元穴可对多药抗药基因产物（P－170）糖蛋白泵出药物功能有微弱的抑制。艾灸能显著增加钙通道抑制剂异博定对泵出药物功能的抑制作用，这种作用只在允许药物剂量范围才显示出来，当剂量大于允许范围时，效果就不明显。此研究不仅为从分子水平探索针灸的作用机理研究开拓新途径，而且在临床上对克服化疗中的抗药性具有应用前景。     

藜蒿叶水提物对白色念珠菌的抗菌效应及强化措施

目的:研究醇沉处理和中药配伍对藜蒿叶水提物抑制白色念珠菌生长作用的影响。方法:采用微量液基稀释法测定不同醇沉浓度纯化处理后的藜蒿叶水提物对白色念珠菌的抑制作用,包括对其菌体生长量、生物膜形成、芽管生成作用等方面的影响,并考察中药配伍对藜蒿叶水提物抗白色念珠菌活性的影响。结果:醇沉处理可显著降低藜蒿叶水提物对白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC),醇沉浓度90%处理使MIC80(下降80%的药物质量浓度)由200 g·L~(-1)降至8 g·L~(-1),同时增强了其对白色念珠菌芽管生成和生物膜形成作用的抑制效果;在选取的18种常见植物药材中,薰衣草、黄芩、莪术对藜蒿叶水提物表现出了显著的抑菌增效作用(部分抑制浓度指数0.5),与黄芩联用时藜蒿叶水提物的MIC80最小,达0.60 g·L~(-1)。结论:醇沉处理和中药配伍可显著提高藜蒿叶水提物对白色念珠菌的抑菌效果,为藜蒿副产物资源的综合利用提供参考。     

3种口尝评价方法用于药物苦度评价的比较

目的: 对比3种口尝评价方法用于药物苦度评价研究的特点。方法: 以苦参碱为模型药物,配制成不同浓度的水溶液,由20名经筛选、培训合格的评价员口尝测试其苦度等级及具体苦度值,对样品进行排序法、评分法、排序结合评分法3种方法的评价,经过对所得数据的处理,用排序正确率、判断灵敏度、赋值精密度、拟合度4个指标综合分析。结果: 排序结合评分法的排序正确率为100%,判断灵敏度为96.4%,拟合方程复相关系数为0.991 6,3个指标均优于其他2种方法;评分法在赋值精密度方面较其他2种方法更优。结论: 3种口尝方法就上述4个指标来看数排序结合评分法最优,但各有自己的特点,具体的口尝方法可根据自己实验目的、样品数目等选择。     

蚂蟥蛋白激酶C基因的克隆和表达分析

蛋白激酶C(PKC)是一类广泛参与细胞增殖和发育的蛋白激酶,但在雌雄同体动物蚂蟥性腺中的发育机制尚不清楚。为探究蛋白激酶C在蚂蟥生殖细胞的发育过程中的作用,该研究克隆蚂蟥PKC基因,进行生物信息学分析,采用荧光定量PCR技术进行雌雄性腺的表达分析。结果表明:(1)克隆得到的Wp-PKC全长2580 bp,相对分子质量76555.19,包含1个编码670个氨基酸的开放阅读框,Wp-PKC和斑马鱼PKC-α及大鼠的PKC-γ亲缘关系较近,氨基酸序列相似度为55%和58%;(2)Wp-PKC编码的蛋白无信号肽,属于亲水性性蛋白,二级结构主要由无规则卷曲、α-螺旋、延伸链、折叠和组成,以无规则卷曲、α-螺旋占比最多,Wp-PKC蛋白不含有跨膜结构域,多序列比对和结构域预测分析显示,Wp-PKC包含4个经典蛋白激酶C的保守结构域;(3)荧光定量的结果显示Wp-PKC在蚂蟥性腺中的表达与生殖细胞的发育呈正相关,其中雄性腺中的表达显著高于雌性腺。综上,Wp-PKC为经典PKC,Wp-PKC可能对蚂蟥性腺发育尤其雄性腺发育起了促进作用,为蚂蟥性腺发育机制的进一步研究提供参考。     

液相色谱-电喷雾质谱定量测定银杏内酯的研究

目的:研究了用液相色谱-电喷雾质谱联用技术定量测定4种银杏内酯的方法。方法:采用ZOR-BAXRX-C₁₈(2.1 mm×150 mm)色谱分析柱,梯度洗脱,0 min时,流动相甲醇-水(25∶75),25 min,甲醇-水(35∶65);柱温25℃;流速0.25 mL.min^-1,采用电喷雾负模式[ESI(Neg)]、选择离子采集方式[SIM]定量测定了银杏内酯A,B,C和白果内酯BB。结果:该方法测定银杏内酯的线性范围为4.04~1.01×10²ng,r为0.993 7~0.999 8,RSD为2.50%~4.73%。选择离子采集方式的检测限可达1.47×10^-3~0.320μg.mL^-1。结论:该方法稳定、可靠,能快速定量测定微量银杏内酯。     

两种反向传播网络测试方法在抑郁症中医证型分类中的对比研究

目的 比较两种反向传播（back propagation,BP）网络测试方法在抑郁症5种中医证型分类中的作用。方法 （1）交叉训练测试法：将1731例抑郁症患者随机分成两组,轮流进行训练和测试。（2）Round-Robin法：从1731例抑郁症中抽取1例测试,1730例训练,测试完成后,该例患者加入训练集,从训练集中另取1例测试,如此循环更替,直至完成1731例样本的测试。结果 BP网络两种测试方法训练总体敏感度分型为97.9％和98.2％,测试总体敏感度分别为72．7％及74．2％。结论 （1）BP网络两种测试方法均能较好地区分抑郁症5种中医证型,在中医证型分类识别中有一定价值。（2）Round-Robin法敏感度略高于交叉训练测试法,但差异无显著性。