硒-甲基硒代半胱氨酸诱导乳腺癌细胞凋亡作用

目的 探讨硒-甲基硒代半胱氨酸（MSC）对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长抑制作用。方法 不同浓度MSC培养液（12.5、25.0、50.0、100.0、200.0 μmol/L）作用于MDA-MB-231细胞24、48 h,噻唑蓝法检测MSC对细胞增殖的抑制作用;Hoechst染色法观察细胞凋亡形态;试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力变化。结果 MSC对细胞增殖具有抑制作用,与对照组比较（100±0.00%）,200 μmol/L MSC处理24、48 h细胞生存率[分别为（64.15±2.81）%、（42.57±2.25）%]明显下降（P<0.01）,呈剂量和时间效应关系;Hoechst染色结果显示,高剂量MSC组细胞可见明显染色质凝聚现象;与对照组[SOD （82.47±1.99）、GSH-Px （46.69±0.55） U/mgprot、MDA （5.80±0.11）μmol/mgprot]比较, 200 μmol/L MSC处理组细胞24 h时,细胞内SOD、GSH-Px活力[分别为（20.99±3.03）、（22.00±0.75） U/mgprot]明显下降,MDA含量[（36.20±0.25）μmol/mgprot]明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）;相同剂量MSC作用MDA-MB-231细胞48 h时,细胞内氧化应激指标变化趋势与作用24 h时趋势相同。结论 MSC能够抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与细胞内氧化应激状态改变有关。     

L-半胱氨酸-原子荧光法测定食品中的硒

目的:利用氢化物发生-原子荧光光谱法,在L-半胱氨酸存在下,测定食品中的硒。方法:样品经酸加热消化后,用2%盐酸溶液做载流,原子荧光分光光度计进行测定。结果:方法的测定范围为10.0μg/L~50.0μg/L,相对标准偏差为0.70%~1.90%,回收率为93.0%~101.0%,检出限为0.051μg/L。结论:由于L-半胱氨酸的存在,改善了氢化物发生条件,增敏光谱测定信号,降低了溶液的酸度,金属离子的干扰显著地得到了抑制,适用于食品中硒的测定。     

硒甲基硒代半胱氨酸对乳腺癌细胞凋亡及Caspase蛋白表达影响的研究

目的研究硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-methylselenocysteine,MSC)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase的影响,探讨其诱导细胞凋亡的作用。方法不同浓度的MSC(12.5、25、50、100、200μmol/L)RPMI-1640培养液作用于人乳腺癌MDA-MB-231细胞24h、48h,MTT法检测MSC对细胞增殖的抑制作用,Western blot法检测caspase3,8,9蛋白表达,SPSS16.0进行数据录入及统计学分析。结果 MSC对MDA-MB-231细胞的增殖具有抑制作用,呈现时间-浓度依赖性(P0.01),其中200μmol/L浓度抑制作用最明显。24h及48h后,凋亡相关蛋白caspase9和caspase3的蛋白表达较空白对照组明显上调(P0.01),变化呈浓度依赖性;而caspase8蛋白表达无显著性变化(P0.05)。结论 MSC能抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖,诱导其凋亡,呈现时间浓度依赖性;其发生可能与线粒体途径的细胞凋亡有关。     

硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对LLC-PK_1细胞DNA合成影响的比较

采用~3H-TdR掺入实验观察了D,L-硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK_1)DNA合成代谢的影响。结果显示,两种硒化合物对DNA的合成均呈双相效应,在硒浓度为0.5～50μmol/L时,能促进DNA的合成,并且D,L-硒代蛋氨酸的作用比亚硒酸钠更为有效;随硒浓度的增高,两种硒化合物均呈现对LLC-PK_1细胞DNA合成的抑制作用,亚硒酸钠的毒性作用明显大于D,L-硒代蛋氨酸,亚硒酸钠浓度为400μmol/L时,LLC-PK_1细胞DNA合成的抑制率为94.1%,而D,L-硒代蛋氨酸浓度为400μmol/L时,仅呈现对LLC-PK_1细胞DNA合成的轻度抑制作用,与文献结果比较,LLC-PK_1细胞对硒的毒性作用有较高的耐受性。     

硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对心肌细胞动作电位影响的比较

在培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞上观察了硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对膜电位活动的影响。结果表明，硒代蛋氨酸与亚硒酸钠（１．０，２．０，４．０ｍｇ／Ｌ）均可使心肌细胞动作电位幅值（ＡＰＡ）、超射（ＯＳ）、阈电位（ＴＰ）、最大舒张电位（ＭＤＰ）及最大除极速率（Ｖｍａｘ）显著降低；硒代蛋氨酸使复极化时程（ＡＰＤ１０、ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０）缩短，动作电位发放频率（ＡＰＦ）加快；而亚硒酸钠在４．０ｍｇ／Ｌ硒剂量时使所有的ＡＰＤ均延长，动作电位发放频率减慢，在作用剂量为１．０、２．０ｍｇ／Ｌ硒时，使ＡＰＤ１０延长，而ＡＰＤ５０、ＡＰＤ９０缩短。表明两种硒化合物均具有Ｃａ２＋通道阻滞作用，而亚硒酸钠还具有Ｋ＋通道阻滞作用     

亚硒酸钠对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及hTERT表达的影响

目的探讨亚硒酸钠对人胃癌SGC-7901细胞株生长、凋亡和hTERT表达的作用及相关机制。方法用含不同浓度亚硒酸钠(0、0.5、2.5、5.0、8.0μmol/L)的培养液培养SGC-7901细胞24、48、72、96h,用相差显微镜观察亚硒酸钠对SGC-7901细胞形态的影响;MTT法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI双染法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞细胞的凋亡的影响;链霉亲和素-生物素-酶复合物(SABC)免疫细胞化学法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞hTERT蛋白表达的影响。结果 (1)MTT法结果显示:用亚硒酸钠培养SGC-7901细胞株24,48,72,96h后,随浓度增加,吸光度值逐渐降低,24h后当亚硒酸钠浓度大于2.5μmol/L时,与对照组比较其吸光度值均明显降低(P<0.01),48、96h后各浓度亚硒酸钠组与正常对照组比其吸光度值均明显降低(P<0.01)。随浓度的增加,亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长抑制率逐渐增加。(2)流式细胞仪检测结果显示:亚硒酸钠可促进SGC-7901细胞发生细胞凋亡。5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组比正常对照组凋亡率明显升高(P<0.01)。(3)免疫细胞化学法检测结果显示:亚硒酸钠可降低SGC-7901细胞中hTERT蛋白免疫细胞化学染色的平均光密度(MOD),24h时5、8μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),48h时0.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),72h时2.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),96h时实验组与对照组比较MOD均明显降低(P<0.01)。结论亚硒酸钠能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡,其作用机制可能与下调hTERT表达有关。     

硒-甲基硒代半胱氨酸对乳腺癌细胞端粒酶活性和hTERT基因表达的影响

目的研究有机硒化合物硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-methylselenoey-stein,MSC)对人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞端粒酶活性的影响,探讨其诱导细胞凋亡的作用机制。方法不同浓度的MSC(12.5、25、50、100、200·mol/L)RPMI-1640培养液分别作用于人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞24h、48h,ELISA法检测端粒酶活性;RT-PCR法检测细胞hTERT mRNA基因的表达;SPSS16.0进行数据录入及统计学分析。结果各MSC浓度处理组明显抑制端粒酶活性和hTERT mRNA的表达(P<0.01)。结论 MSC能够抑制人乳腺癌细胞的增殖并诱导凋亡,其发生机制可能与端粒酶活性、hTERTmRNA表达的降低有关。     

L-硒甲基硒代半胱氨酸对大鼠组织硒分布及GPx-1表达的影响

目的观察给予L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-Se-methyl selenocysteine,MSCys)对大鼠体内组织硒分布及对谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase1,GPx-1)的影响。方法 60只成年大鼠雌雄各半分为空白对照组(Blank)、MSCys低剂量(10μg/kg·bw)和MSCys高剂量(25μg/kg·bw)共3组,灌胃给药。空白对照组给予等体积蒸馏水。连续给药30d(T30)后停止给药,半数大鼠安乐死后取肝、肾、肌肉组织。剩余大鼠继续饲养30d(S30),取肝肾肌肉组织。实验期间每10d采集大鼠毛发和血清。原子荧光光谱法测定血清、毛发、肝、肾和肌肉中总硒含量;ELISA法测定肝、肾和肌肉组织中的GPx-1的含量。结果实验期间,各组内雌雄大鼠各指标均差异显著(P<0.05),故雌雄大鼠均分别进行统计学分析。在给药3～4 w,高剂量MSCys组大鼠的每周体重增加量显著低于低剂量MSCys组和空白对照组(均P<0.05)。在整个实验期间各给药组的毛发和血硒含量均显著高于空白对照(Blank)组(均P<0.05),并且在多数时间...     

亚硒酸钠与细胞的作用

通过测定巨噬细胞的存活率、脂质过氧化、细胞内游离Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋的浓度和红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性，研究了亚硒酸钠与细胞的作用。结果表明高浓度的Ｎａ２ＳｅＯ３（≥１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１）有明显的细胞毒性；Ｎａ２ＳｅＯ３对巨噬细胞的毒性作用引起细胞内游离Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋浓度升高；但Ｍｇ２＋浓度升高比Ｃａ２＋慢；较高浓度的Ｎａ２ＳｅＯ３（≥１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１）能抑制红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性，但对Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的抑制作用要低于对Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的抑制作用。     

硒对氟致L-02细胞DNA损伤和凋亡的影响

目的探讨硒对氟导致的L-02细胞DNA损伤和凋亡的影响。方法采用80μg/ml氟化钠和/或1.73μg/ml亚硒酸钠对培养的L-02细胞进行染毒,24 h后采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测各组L-02细胞DNA损伤情况;用流式细胞术(FCM)检测各组L-02细胞凋亡率。结果氟组L-02细胞DNA损伤率和凋亡率明显高于对照组、硒组和氟硒组(P<0.01);而对照组L-02细胞DNA损伤率和凋亡率与硒组和氟硒组之间无显著性差异(P>0.05)。结论氟可导致L-02细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡,适量硒可拮抗氟导致的L-02细胞DNA损伤和细胞凋亡作用。     

甲基硒酸对乳腺癌细胞体外凋亡和细胞周期的影响

目的:观察甲基硒酸(MSA)对乳腺癌细胞系MCF-7凋亡和细胞周期的影响。方法:以不同浓度的MSA作用乳腺癌细胞系MCF-7,在不同时间内,观察不同浓度MSA对乳腺癌细胞凋亡率和细胞周期的影响。流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:①MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡,随着药物浓度及作用时间的增加,乳腺癌细胞凋亡率逐渐增加。②MSA可改变乳腺癌的细胞周期,将乳腺癌细胞周期阻断在G1期,并且减少S期细胞的比例。结论:MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡、调控乳腺癌细胞周期。MSA有望成为预防和治疗乳腺癌的一种新方法。     

亚硒酸钠与硒代蛋氨酸对镉在大鼠体内分布的影响

目的 比较亚硒酸钠(Na_2SeO_3)与硒代蛋氨酸(SeMet)对镉(Cd)毒性的拮抗效应,探讨体内Cd的代谢分布在硒(Se)拮抗Cd毒性作用中的意义。方法 健康雄性Wistar大鼠36只,随机分为6组。Ⅰ组为正常对照组,Ⅱ组为Cd中毒组,Ⅲ组为Na_2SeO_3组,Ⅳ组为SeMet组。Ⅴ组为Cd+Na_2SeO_3组,Ⅵ组为Cd+SeMet组。Cd按100μmol·kg~(-1)体重,Se按10μmol·kg~(-1)体重的剂量隔日1次经口灌胃,其中Ⅴ组和Ⅵ组按先Se后Cd交替灌胃。Se、Cd均灌胃15次。实验时间为30d。实验结束后,取全血、肝脏、肾脏、睾丸,测定其Se、Cd含量。结果 Cd在体内的蓄积主要分布于肝脏和肾脏,全血和睾丸含量较少,Cd的组织分布顺序为肝脏>肾脏>睾丸>全血。2个Cd加Se保护组组织中Cd含量没有减少,表明Se不能促进Cd的排泄。Cd+Na_2SeO_3组肝脏Cd含量明显高于单独给Cd组,但Se含量并未相应增加;Cd+SeMet组大鼠组织Cd含量与单独给Cd组比没有明显差异,由此不能证实有Se-Cd复合物的形成。各组织Se含量,SeMet组明显高于Na_2SeO_3组,表明其生物利用度与Se化合物的形式有关。2种Se化合物吸收后其组织Se的分布顺序均为:全血>肾脏>肝脏>睾丸。结论 Cd在大鼠体内的分布具有脏器选择性,Na_2SeO_3和SeMet对Cd体内分布的影响具有一定的差异,但均不能促进Cd的排泄,也未表明有     

N-乙酰半胱氨酸和硒对镉急性毒性的影响

目的对急性染镉大鼠预先投予N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine，NAC)和亚硒酸钠(Na2SeO3)。探讨其对急性染镉大鼠肝、肾毒性的影响。方法将Wistar大鼠32只随机分成4组。第1组为对照组。皮下注射0．9％氯化钠，第2组为单纯染镉组，皮下注射35μmol／kg的氯化镉溶液；第3、4组大鼠分别腹腔注射1mmol／kg NAC和10μmol／kg Na2SeO3预处理后2h，再皮下注射35μmool／kg的氯化镉溶液。染毒24h后测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(GPT)活性以及肝、肾皮质中镉(Cd)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与对照组比较，单纯染镉组大鼠的血清LDH、GPT活性及肝肾镉含量显著升高，肝GSH、MDA含量显著升高，GSH-Px活性显著下降。与单纯染镉组比较，NAC预处理组的血清GPT和LDH活性及肝GSH、MDA含量显著降低，肝、肾皮质镉含量显著降低；Na2SeO3预处理组血清GPT和LDH活性及肝、肾皮质GSH、镉含量显著降低，肝GSH-Px活性及肾MDA含量显著升高。结论NAC和亚硒酸钠对急性染镉所致肝损伤具有一定的保护作用，其机制可能与NAC或亚硒酸钠预处理后改变体内GSH含量或GSH-Px活性有关。     

亚硒酸钠对小鼠睾丸精原细胞及减数分裂影响

硒作为人体必需的微量元素，其营养价值和毒性作用早已知道。本实验室已对亚硒酸钠的细胞毒性、遗传毒性、生殖毒性以及胚胎毒性。为了解硒的生殖毒性作用，本文进一步观察亚硒酸钠对小鼠生精细胞的影响。     

补充不同水平亚硒酸钠和硒蛋氨酸对大鼠硒代谢的影响

目的　研究各组织在硒代谢中的作用。方法　将断乳Wistar大鼠随机分为成 9组 ,每组 14只 ,雌雄各半。其中一组为对照组 ,另外 8组给予亚硒酸钠或硒蛋氨酸分别为Se 3、6、10、15mg kg饲料 ,饲养 12周。取组织进行硒测定。结果　补充亚硒酸钠组大鼠硒主要分布于肝脏、肾脏、红细胞和骨等组织 ,而补充硒蛋氨酸组大鼠体内硒主要分布在肌肉 ,其次为肝脏、肾脏、骨和红细胞等组织中。结论　硒蛋氨酸组比亚硒酸钠组大鼠更易发生硒蓄积。雌雄大鼠组织器官中的硒含量有差异。骨、毛和红细胞等组织的硒含量和饲料硒水平具有较好的相关性。     

亚硒酸钠和硒蛋氨酸的毒性比较

目的　比较亚硒酸钠和硒蛋氨酸毒性差异以及探讨硒中毒的指标。方法　将断乳Wistar大鼠随机分为 7组 ,每组 14只 ,雌雄各半。其中一组为对照组 ,另外六组分别给予含硒 3、6、10mg kg的亚硒酸钠或硒蛋氨酸饲料 ,于第 12周将其处死。结果　当饲料硒水平达到 3mg kg时 ,动物肝脏出现病理变化 ,在Se6mg kg时 ,体重才出现下降。饲料硒水平为 6、10mg kg时 ,同一饲料硒水平的亚硒酸钠组大鼠体重小于硒蛋氨酸组。饲料硒水平为 3、6mg kg时 ,硒蛋氨酸组大鼠的肝脏病理改变轻于亚硒酸钠组 ,雄性大鼠轻于雌性。亚硒酸钠组较硒蛋氨酸组或雌性大鼠较雄性大鼠在肝脏体重比方面变化更为明显。除雌性大鼠肝脏谷胱甘肽过氧化物酶 (GPX)活性随硒水平升高而降低外 ,其它补硒各组肝、红细胞、血浆GPX活性具有随硒水平的升高而升高的趋势。结论　大鼠硒中毒的剂量为Se 3mg kg,硒蛋氨酸的毒性小于亚硒酸钠 ,雌性大鼠对硒毒性更为敏感     

不同形态硒对结肠癌Lovo细胞粘附及迁移功能的影响

目的探讨L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-SeMSC)和亚硒酸钠(SS)对结肠癌Lovo细胞粘附及迁移能力的影响。方法采用MTT法、划痕实验、粘附实验分别检测不同形态硒对Lovo细胞增殖、迁移、粘附能力的影响;采用Western blot检测CDC37、MMP2和MMP9蛋白的表达。结果两种硒具有抑制Lovo细胞增殖作用,且随着药物浓度的增加,抑制作用增强,相同浓度下,L-SeMSC对细胞抑制作用更强(P<0.05)。两种硒均能缩短Lovo细胞的迁移距离、降低细胞粘附率,与SS相比,在中(0.1 mg/L)、高(0.2 mg/L)浓度组,L-SeMSC的抑制Lovo细胞迁移和粘附的能力更强。不同浓度L-SeMSC均能抑制CDC37和MMP2的表达,且具有浓度依赖性;高浓度(0.2 mg/L)SS能抑制CDC37、MMP2和MMP9的表达,但作用弱于相同浓度L-SeMSC。结论 L-SeMSC和SS均能通过降低CDC37、MMP2和MMP9的表达抑制结肠癌Lovo细胞的粘附和迁移能力,相同浓度L-SeMSC作用强于SS。     

L-半胱氨酸合剂对氯乙烯致瘤作用的影响

氯乙烯对人体的致癌作用业已肯定。由于氯乙烯很难从生产环境中完全清除,除应不断改进和研制新的防护设施外。寻求一种能抑制其致癌作用的预防药物也可能是很有效的预防措施。为此目的,我们选用了L-半胱氨酸等几种自由基清除剂配伍,组成复方合剂(下称半胱氨酸合剂),对氯乙烯致瘤作用的预防效果进行了动物实验,结果报告如下: 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物选用成年健康Wi     

矽尘,亚硒酸钠对人肺腺癌细胞株生长的影响

本文通过细胞培养分析了亚硒酸钠、二氧化硅法对人肺腺癌细胞株ＳＰＣ－Ａ－１的作用，结果表明：（１）在培养液中加入不同剂量的亚硒酸钠，μｍｏｌ／Ｌ对细胞株生长无影响，５μｍｏｌ／Ｌ、１０μｍｏｌ／Ｌ对细胞株的生长有明显抑制作用（Ｐ〈０．０５），４０μｍｏｌ／Ｌ有明显毒性，且随着培养时间的延长，其抑制程度增加。（２）随着ＳｉＯ２剂量的增加，二氧化硅法对人肺腺癌细胞株生长的影响越大。生理盐水对细胞株生长无     

亚硒酸钠染毒对小鼠免疫功能的影响

[目的]观察实验性硒染毒对小鼠免疫功能的影响,为进一步揭示硒免疫损伤过程和机制提供科学依据。[方法]取昆明种健康成年小鼠72只,分为阴性对照组和亚硒酸钠0.28mg/kg(1/100LD50)、1.40mg/kg(1/20LD50)2个剂量组,每组雌雄各半,腹腔注射染毒,每周一次,共56d,分别于染毒后第7、28、56d采用断头断尾取血法采血,测定α-醋酸萘脂酶(acidα-naphthylacetateesterase,α-ANAE)阳性率、淋巴细胞转化率、脾胸腺系数、半数血清溶血素(hemolysin,HC50)数值。[结果]0.28、1.40mg/kg剂量组,α-ANAE阳性率、淋巴细胞转化率、脾脏系数和胸腺系数、半数血清溶血素值均有降低,呈免疫抑制现象,且与硒离子剂量及作用时间均具有相关性。[结论]染毒剂量亚硒酸钠对小鼠具有免疫毒性作用,且呈明显剂量-效应关系。