广西不同来源副溶血性弧菌毒力基因分子特征研究

目的 了解广西境内不同来源的副溶血性弧菌的血清学分型及这些分离株存在毒力基因的情况,从毒力基因的分子特征分析水产品中的副溶血性弧菌与临床分离株的相关性,为对水产品中副溶血性弧菌进行风险性评估和开展食品安全性检测研究提供理论依据. 方法以2007年广西食源性疾病监测网36株副溶血性弧菌分离株(水产品来源株和临床株)为研究对象,利用O抗标准血清分型的基础上,应用PCR的方法检测该菌tdh和trh两种毒力基因. 结果水产品分离株血清分型呈多样性,毒力基因阳性率低;临床分离株血清型集中为O1和O3,均存在tdh毒力基因. 结论广西境内的副溶血性弧菌感染主要与携带tdh毒力基因的该菌有关,监测时不仅要关注水产品中该菌的高分离率,更要关注和防范携带毒力基因的副溶血性弧菌.     

不同来源副溶血性弧菌血清群耐热直接溶血素及耐药性研究

摘要：目的　了解不同来源副溶血性弧菌血清群分布,耐热直接溶血素携带情况及耐药性状况。方法　利
用血清凝集试验进行血清群检测;利用荧光定量ＰＣＲ 仪进行耐热直接溶血素检测;采用纸片扩散法进行
１１种抗生素药物敏感试验;采用χ
２ 检验进行统计学分析。结果　副溶血性弧菌食物中毒和肠道门诊分离
株血清群以Ｏ３和Ｏ４为主,水产品分离株无优势血清群。副溶血性弧菌食物中毒和肠道门诊分离株耐热直
接溶血素检出率均达９０％以上,经χ
２ 检验差异无统计学意义（χ
２＝０．０３,ν＝１,犘＝０．８６）。副溶血性弧
菌水产品分离株耐热直接溶血素检出率为０。６２ 株副溶血性弧菌对氯霉素、四环素和复方磺胺甲 唑
１００％敏感。结论　副溶血性弧菌食物中毒和肠道门诊分离株与水产品分离株的血清群和耐热直接溶血素存
在较大差异。抗生素首选氯霉素、四环素和复方磺胺甲唑。
关键词：副溶血性弧菌;血清群;耐热直接溶血素;耐药
中图分类号：Ｒ３７８．３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０６ ０６０８ ０４     

泰州市不同来源副溶血性弧菌分离株毒力基因型和耐药性的比较研究

目的　了解泰州市水产品及腹泻病人中副溶血性弧菌的检出情况,并对检出的所有阳性菌株进行毒力基因和耐药性的比较研究。方法　对采集的水产品和腹泻病人的粪便样本进行副溶血性弧菌的分离及鉴定,运用荧光PCR技术检测副溶血弧菌的tlh(不耐热溶血素)、tdh(耐热直接溶血素)、trh(相关耐热溶血素)这3种毒力基因,采用WHO推荐的纸片扩散法(K-B法)分别对所有阳性菌株进行药敏实验。结果　泰州市2014-2017年采集的水产品和腹泻病人样本中副溶血性弧菌的检出率分别为34.3%(37/108)、1.2%(18/1548),55株阳性菌株中tlh均为阳性,trh均为阴性,水产品分离株均未检出tdh,但腹泻病人分离株tdh的检出率为94.4%(17/18)。腹泻病人分离株对头孢唑啉、氨苄西林、四环素的耐药性高于水产品分离株,其中腹泻病人分离株和水产品分离株对氨苄西林的耐药率分别达到61.1%（11/18）、54.1%（20/37）。结论　本市水产品中副溶血性弧菌的污染情况较为严重,副溶血性弧菌是导致食源性腹泻的主要致病菌之一。腹泻病人分离株的tdh携带率较高而水产品分离株均未携带tdh;腹泻病人分离株对头孢唑啉、氨苄西林、四环素的耐药性高于水产品分离株,而且两种分离株对氨苄西林均有较高的耐药率。     

舟山市不同来源副溶血性弧菌毒力基因监测及RAPD分析

目的:分析本市贝类中副溶血性弧菌分离株和部分散发腹泻病例及食物中毒分离株的分子生物学特性,了解本市副溶血弧菌的流行规律.方法:对50株贝源分离株和18株临床分离株进行部分血清分型及协、tdh、trh、orf8和toxRS/new 四种毒力基因检测,并对所有菌株进行RAPD分子分型研究.结果:50株贝源株分属于7个血清群...     

副溶血性弧菌毒力基因及耐药性检测分析

目的了解宁波市感染性腹泻病原菌中副溶血性弧菌的血清型分布、毒力基因特点和耐药性状况,为预防和控制由副溶血性弧菌引起的感染性腹泻提供科学依据。方法采用血清学试验对副溶血性弧菌进行血清分群;利用PCR扩增检测副溶血性弧菌的耐热溶血毒素基因（tdh）和耐热溶血毒素相关基因（trh）;采用K-B纸片扩散法检测抗生素敏感性。结果宁波地区引起感染性腹泻的副溶血性弧菌的89.19%是O3血清群,tdh基因携带率达到89.19%,trh基因全部阴性,对除氨苄西林外的大多数抗菌药物敏感。结论宁波地区引起感染性腹泻的副溶血性弧菌的血清群主要是O3群,且携带tdh基因,对大多数抗菌药物敏感。     

132株副溶血性弧菌毒力基因及耐药性分析

目的了解2014年-2017年桐乡市副溶血性弧菌分离株毒力基因携带与耐药性情况,为临床更为有效用药提供数据上的支持。方法利用RT-PCR技术对其分离株进行毒力(tlh、tdh、trh)检测;采用纸片扩散法操作,测定其对22种抗生素的耐药性。结果在132株副溶血性弧菌中,毒力基因tlh、tdh和trh阳性携带率分别为100.00%(132/132)、57.58%(76/132)和0.00%(0/132);对氨苄西林、头孢唑啉、哌拉西林、复方新诺明的耐药率分别为31.5%、23.5%、12.5%、12.5%,对除碳青霉烯类和喹诺酮类外的6大类抗生素均有耐药性,而其中对β-内酰胺类抗生素和叶酸代谢途径抑制剂及氯霉素的耐药性相对较高。多重耐药方面,对2种以上抗生素耐药的有15株,占11.90%。结论126株副溶血性弧菌分离株主要携带毒力基因为tlh、tdh。除氨苄西林等9类抗生素外,其余13类在副溶血性弧菌感染的治疗中可作为首选。     

一起不同血清型食物中毒副溶血性弧菌毒力基因检测

目的分析一起食物中毒患者和剩余食品来源的副溶血性弧菌的血清型及这些分离株毒力基因的情况.方法将食物中毒分离到的6株副溶血性弧菌进行分离纯化鉴定,用诊断血清进行分型,并应用PCR 方法检测其tdh和trh两种毒力基因.结果该起食物中毒分离株存在两种血清型O3:K29,O10:KUT,来自患者和剩余食品的所有分离株tdh和trh两毒力基因均为阴性.结论同一起食物中毒可分离到多种血清型的副溶血性弧菌.     

120株副溶血性弧菌的血清群和耐药性分析

目的:通过对副溶血性弧菌食物中毒菌株的血清群、耐药性检测,了解浙江省各类副溶血性弧菌主要血清群及耐药状况,为预防副溶血性弧菌食源性疾病发生,为指导临床合理用药提供依据。方法:用VITEK全自动微生物分析系统进行耐药性鉴定;血清学检测采用玻片凝集法。结果:我省副溶血性弧菌血清群主要为O3群、O4群、O1群、O5群。不同来源菌株间的血清型差异较大。从门诊病人和食物中毒事件中分离的菌株主要为O3群、O4群、O5群,从食品中分离的菌株主要为O1群、O10群、O2群、O11群。对头孢呋辛新酯、头孢呋辛、头孢噻吩和头孢唑啉有极高的耐药率,均在50%以上;对胺苄西林、羧卡西林、阿莫西林/克拉维酸的耐药性分别为49.17%、43.33%、32.50%;对头孢曲松、环丙沙星、庆大霉素、米若环素、萘啶酸、呋喃妥因、诺氟沙星、氧氟沙星、替卡西林/棒酸、妥布霉素、复方新诺明11种抗生素完全敏感。结论:要重点防治由O3群、O4群血清型的耐7种抗生素的超级耐药株引起的副溶血性弧菌食源性疾病或食物中毒。     

不同来源副溶血性弧菌分离株的耐药性和毒力分析

目的:了解广东省副溶血性弧菌水产品分离株与食物中毒分离株携带毒力基因和耐药情况及差异。方法:对132株副溶血性弧菌用纸片扩散法进行耐药检测,对487株副溶血性弧菌以PCR方法进行毒力基因测定。结果:副溶血性弧菌菌株对14种抗生素都有耐药。同时对5种以上抗生素耐药的有60株,占45.5%。多重耐药株的构成比以海虾分离株和食物中毒株为主,占50%。耐药谱分析结果显示,副溶血性弧菌分离株对青霉素类、庆大霉素、连霉素等,普遍有较高的耐药率。487株副溶血性弧菌的tdh和trh基因检测,食品分离株毒力基因的携带率明显低于食物中毒分离株。而食物中毒分离株中以携带tdh基因为多,占93.75%。结论:为防止超级耐药株的产生,应尽快立法加强对兽药使用的监控。复合PCR基因检测能缩短检测周期,有应用前景。     

泰州市不同来源副溶血性弧菌分离株毒力基因型和耐药性的比较研究

分析上海市奉贤区不同来源副溶血性弧菌耐药性、主要毒力基因携带及分子分型情况。

对2018—2020年上海市奉贤区分离到的210株副溶血性弧菌进行17种抗生素药物敏感试验,耐热直接溶血毒素基因（thermostable direct hemolysin,tdh）、耐热相关溶血毒素基因（thermostable direct hemolysin⁃related hemolysin,trh）和不耐热溶血素基因（thermolabile hemolysin,tlh）检测以及脉冲场凝胶电泳分型分析。

药敏结果显示,共检出耐药株147株,耐药率为70.00%。其中,126株对1种抗生素耐药,以耐头孢唑啉（CFZ）为主;15株对2种抗生素耐药,以耐CFZ和氨苄西林（AMP）为主;多重耐药菌（MDR）6株,以耐AMP、复方新诺明（SXT）、CFZ、头孢噻肟（CTX）、头孢他啶（CAZ）和头孢吡肟（FEP）为主。食源性菌株AMP耐药水平高于人源性菌株（P<0.05）。210株副溶血性弧菌均携带毒力基因tlh。84株人源副溶血性弧菌菌株tdh和trh基因携带率分别为89.29%和7.14%;126株食品源副溶血性弧菌菌株trh基因携带率为1.59%,未检出tdh基因。脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析得到173种带型,菌株之间的相似度为48.80%~100.00%,存在主要流行克隆系。

上海市奉贤区副溶血性弧菌存在多重耐药现象,对β⁃内酰胺类抗生素耐药情况较为严重,人源性菌株毒力基因携带率较高。PFGE带型总体上较为分散,但人源菌株中存在主要流行克隆系。奉贤区引起食源性疾病的风险性较高,应加强防控。

     

食源性腹泻患者分离副溶血性弧菌毒力基因及药敏分析

目的 分析浙江湖州地区食源性腹泻患者分离副溶血性弧菌的毒力基因及药敏特征,为当地食源性疾病的防治提供科学依据.方法 收集浙江省湖州市第一人民医院肠道门诊就诊患者粪便中分离所得的55株副溶血性弧菌进行毒力基因和大流行群标志基因检测,以及20种抗菌药物试验.结果 55株副溶血性弧菌均携带tdh、tlh、T3SS1、T3SS...     

2011-2014年北京市副溶血性弧菌血清型 及毒力基因特征分析

摘要:目的　了解2011-2014年北京市引起腹泻的副溶血性弧菌血清分型及主要毒力基因特点。方法　对561株副溶血性弧菌进行生化鉴定和血清学分型试验,应用实时荧光PCR方法检测毒力基因tlh、tdh和trh。结果　561株副溶血性弧菌有9个O群和23个K型,共34个血清型,以O3∶K6血清型为主,占67.6%（379/561）。2011-2014年血清型分布存在差异。561株副溶血性弧菌tlh、tdh和trh基因阳性率分别为100.0%（561/561）,97.1%（545/561）和1.1%（6/561）。3种毒力基因分成4种类型,tlh+tdh+trh-为优势基因型,占96.4%（541/561）。结论　2011-2014年北京市引起腹泻的副溶血性弧菌有多种血清型,多为产毒株,以携带tlh 和tdh基因的O3∶K6为优势血清型。通过对生化、血清分型和毒力基因检测结果进行综合分析,有助于提高副溶血性弧菌鉴定的正确性。     

副溶血弧菌毒力基因和保守基因研究进展

对副溶血弧菌的毒力基因及其保守基因的研究现状进行综述,可从分子水平对鉴定副溶血性弧菌和确定菌株的毒力提供参考。     

深圳市龙岗区副溶血性弧菌检出情况及血清型分析

目的了解深圳市龙岗区水产品、外环境水体及食物中毒样品中副溶血性弧菌的污染状况、血清型分布及携带耐热直接溶血素(tdh)毒力基因情况。方法于2009年6—10月间采集深圳市龙岗区水产品、外环境水体及期间发生的5起食物中毒病人粪便样品共548份,通过实时荧光PCR法对副溶血性弧菌初筛后进行常规分离培养,并对分离株进行血清学分型及携带tdh产毒基因情况进行分析。结果 548份样品分离到223株副溶血性弧菌,其中42份食物中毒样品中分离到35株且均携有tdh产毒基因,21株血清型为O3∶K6,其余14株为O4∶K8。506份水产品和外环境水体中分离到副溶血性弧菌188株,其血清群呈多样化,最主要的为O2(25.0%),其次为O3(10.1%)、O1(6.4%)、O10(6.4%)。结论在深圳市龙岗区引起食物中毒的主要病原体是带有tdh基因的O3∶K6或O4∶K8血清型的副溶血性弧菌。该区水产品和外环境水体中副溶血性弧菌的带菌率较高且血清型呈现多样性,并与食物中毒分离株血清型存在差异。     

象山地产海产品副溶血性弧菌污染状况研究

目的了解象山地产海产品中副溶血性弧菌污染状况及其动态变化,探讨其与食物中毒的相关性,为食品安全预警提供监测数据。方法按不同季节分批从本地水产销售市场采集鱼类、甲壳类、贝类样品,采用MPN法进行副溶血性弧菌的定量检测,并对阳性菌株进行血清学分型及毒力基因检测。结果全年海产品副溶血性弧菌平均检出率为54.2%,最高含量≥24000MPN/100g;检出率及污染量以第3季度为最高;各类海产品中以贝类受污染程度最严重;分离到的副溶血性弧菌血清型分布以O11、O4、O5为主,其中3株携带TDH基因。结论象山地产海产品中副溶血性弧菌污染较严重,具有明显的季节性,与本地食物中毒的发生相一致,是引起食源性疾病的主要危险因素,应予以重视。     

舟山市副溶血性弧菌分子流行病学特征研究

目的研究舟山市副溶血性弧菌分子流行病学特征,分析两种不同来源菌株的相关性,了解舟山市副溶血性弧菌的流行规律。方法对50株贝类样品分离株以及18株本市散发性腹泻患者和食物中毒的临床分离株进行血清分型,应用PCR技术对tdh、trh、off8和toxRS／new毒力基因进行检测,并进行PFGE分子分型分析。结果贝源分离株tdh、toxRS／new和orf8检测结果均为阴性,只有冬季检出的2株汕阳性。临床分离株中有14株tdh、toxRS／new和orf83种毒力基因为阳性,1株trh阳性,其余3株4种毒力基因均为阴性,说明这18株中有14株（77．78％）属于流行株,其中13株（92．86％）为03：K6型,1株为01：KUT型;而PFGE分型结果显示：53株菌株分属9种不同血清群的副溶血性弧菌,但经NotI酶酶切可分成多种不同PFGE酶切图谱,仅少部分相同血清型／不同血清型有相同酶切图谱（按相似度100％分）。多数菌株PFGE酶切图谱差异明显。结论舟山市副溶血性弧菌贝类分离株与临床分离株在血清型分型、致病因子和分子特征等方面存在一定差异;初步建立了舟山市副溶血性弧菌基因指纹图谱库。     

副溶血性弧菌食物中毒菌株的血清型、耐药性及基因检测

〔目的〕副溶血性弧菌是常见的食物中毒病原菌,通过对副溶血性弧菌食物中毒菌株的血清型、耐药和tdh（耐热溶血素）trh（耐热相关溶血素）、基因检测,了解本省的副溶血性弧菌食物中毒菌株的主要血清型及相关生物学特征。〔方法〕利用17种不同的抗生素药敏纸片,采用平皿法进行耐药检测;用PCR扩增法,以检测菌株的tdh和trh基因;采用血清凝集试验对菌株进行血清型分型。〔结果〕经检测的50株菌株,显示对β-内酰胺族（如青霉素及头孢等）部分或完全耐药,对氨基糖苷族（如庆大霉素及妥布霉素）、酮诺喹族（如环丙沙星）以及氯霉素等抗生素为敏感反应;对50株菌株其血清型分布于6个O群抗原,而血清型有15个以上。中毒菌株血清型由80年代的O1、O4、O5为主,到90年代以O3、O1、O4为主的变化,其中O3:K6血清型菌株引起的食物中毒有所增加。〔结论〕所检测的50株菌株均有tdh基因,未检到trh基因。     

2016-2019苏州市副溶血性弧菌的毒力基因和耐药性及分子分型研究

目的了解2016-2019年苏州市副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)分离株毒力基因携带情况,耐药性及分子分型。方法利用荧光定量PCR技术对154株分离自苏州各区、县级市的VP的3种毒力基因(tlh、tdh、trh)进行检测。采用微量肉汤稀释法测定其对14种抗生素的耐药性。采用脉冲场凝胶电泳(Pulsed-Field Gel Electrophoresis, PFGE)进行分子分型。采用卡方检验对统计结果进行分析(α=0.05)。结果 154株VP分离株tlh基因均为阳性;trh基因阳性4株,阳性率为2.60%,均为病患分离;tdh基因阳性107株,阳性率为69.48%,其中病患分离株阳性106株,食品及环节(用具)分离株阳性1株。154株VP仅对氨苄西林耐药,总体耐药率为80.52%(124/154),其中病患分离株耐药率为88.98%(105/118)高于食品及环节分离株耐药率52.78%(19/36),差异具有统计学意义(P<0.001)。154株VP经PFGE分子分型显示带型相似性为45%～100%,按相似度85%为判读标准可分为73个带型...     

宁波地区海产品中副溶血性弧菌分布与研究

目的了解宁波地区海产品中副溶血性弧菌的分布,菌株血清型、PFGE型别及产毒基因等特征,为防控副溶血性弧菌引起的食源性疾病提供依据。方法用PCR筛检与GB法相结合方法分离细菌;用标准血清和PFGE对菌株进行分群和基因分型;用PCR方法检测tdh和trh毒力基因;用K-B法进行耐药性测定。结果从3 525份海产品中检出1460株副溶血性弧菌,检出率为41.42%;象山、宁海检出率分别为73.72%和70.69%,与其他县(市)区差异有统计学意义(χ2=42.694,P<0.01);560株副溶血性弧菌分出10个血清群,0∶6群和0∶5群为流行优势血清群;菌株对氨苄西林耐药率达92.64%,但对常用抗生素均敏感;450株副溶血性弧菌检出5株带tdh的,阳性率为1.11%,未检出trh毒力基因。依据PGFE带型差异将330株副溶血性弧菌分为29个型。结论在海产品中副溶血性弧菌带菌率较高,是引发疾病的高危食品;菌株的流行优势群型较分散;可用常用抗生素治疗;菌株带tdh和trh毒力基因较低,根据该特征可将副溶血性弧菌分为致病的和非致病两类。