MicroRNA-29c在单侧输尿管梗阻大鼠中的表达及意义

目的:观察microRNA-29c(miR-29c)在大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾组织中的表达变化,探讨其是否参与肾间质纤维化及其可能机制.方法:高通量测序技术和实时荧光定量PCR检测miR-29c在UUO大鼠术后1d和3d肾脏组织中的表达情况.使用生物信息学预测miR-29c靶mRNA,对其靶mRNA进行Gene Ontology和pathway分析.结果:UUO大鼠术后1 d和术后3d手术侧肾组织miR-29c表达下调,Co1 I mRNA和FN mRNA的表达升高.预测靶mRNA经分析后获得miR-29c有统计学意义的10个靶mRNA,其中6个编码细胞外基质蛋白.结论:miR-29c在大鼠UUO模型早期的肾组织中表达下调,可能通过促进细胞外基质堆积参与肾间质纤维化的发生发展.     

α-平滑肌肌动蛋白在单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中的表达

目的观察α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在单侧输尿管梗阻大鼠中的表达情况,探讨其与肾间质纤维化的关系。方法采用单侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型,将60只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,每组分别于术后7、14、21d各处死10只大鼠,取梗阻侧肾组织行HE、Masson染色观察肾间质纤维化程度,行免疫组化方法检测两组大鼠不同时间段α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平。结果假手术组中,肾小球、肾小管和间质细胞均无α-SMA,与假手术相比,模型组手术后7d,肾间质中α-SMA阳性细胞数增多,呈进行性升高趋势,其与肾间质纤维化程度呈正相关。结论α-平滑肌肌动蛋白在肾间质纤维化的进展过程中发挥重要作用。     

大鼠单侧输尿管梗阻肾间质纤维化动物模型的实验研究

目的观察单侧输尿管梗阻大鼠模型中肾功能、肾病理改变、肾组织-αSMA表达的变化,验证UUO制作RIF动物模型的可行性。方法将32只Waster大鼠随机分为假手术组、模型组,每组16只。在术后3、10、203、0 d每组各处死4只,处死前1 d测定各组大鼠24 h尿蛋白定量,处死时抽取其腹主动脉血测定血清肌酐、尿素氮水平;左肾组织行HE染色,动态观察肾病理学变化,评定各组大鼠肾间质损害程度;免疫组化方法测定肾间质-αSMA,并分析其与肾间质损伤指数的相关性。结果各组大鼠24 h尿蛋白无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠血肌酐、尿素氮在第3天时无统计学意义(P>0.05)。模型组血清肌酐、尿素氮在10 d时高于假手术组(P<0.01),20d达到高峰,继之出现下降。模型组的肾间质损伤指数及-αSMA的表达明显高于假手术组(P<0.01),-αSMA表达的相对量与肾间质损伤指数呈正相关(r=0.92,P<0.001)。结论UUO可以快速建立RIF动物模型,并作为延缓肾功能损害治疗的理想模型。     

银杏叶片对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用

目的：研究银杏叶片对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾脏的保护作用。方法：Wistar大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、苯那普利组及银杏叶片组，于给药后2周和4周分别测定各组大鼠肾脏指数、左右肾重比、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）酶活性、尿液尿素氮、尿肌酐、血尿素氮、血肌酐及24 h尿蛋白排泄量等指标。结果：给药后2周，银杏叶组大鼠NAG酶活性 ［(18.0±5.4) U•L^-1］、血尿素氮 ［(7.3±1.3) mmol•L^-1］、血肌酐 ［(35.2±8.4) μmol•L^-1］ 及24 h尿蛋白排泄量 ［(9.82±4.42) mg］ 均明显低于模型组 (P<0.05)；给药后4周，银杏叶片组大鼠NAG酶活性 ［(10.3±4.1) U•L^-1］、血尿素氮 ［(8.7±0.9) mol•L^-1］、血肌酐 ［(44.2±6.7) μmol•L^-1］ 及24 h尿蛋白排泄量 ［(10.17±8.42) mg］均较模型组明显降低 (P<0.05)；给予银杏叶片能减轻UUO大鼠肾间质纤维化程度。结论：口服银杏叶片对UUO大鼠肾功能和结构具有明显保护作用。     

曲尼司特对单侧输尿管梗阻后肾间质纤维化调节作用的实验研究

目的　探讨曲尼司特 (Tranilast)对单侧输尿管梗阻 (UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用及机制。方法　将3 6只大鼠行右侧输尿管结扎 ,另 18只行假手术 (SIAM) ,结扎后大鼠随机分成模型组 (UUO)组和药物组 (Tranilast) ,用药组于术前一天开始给予Tranilast 2 0 0mg·kg-1·d-1,术后第 5、10及 15天分别处死各组大鼠中的 6只 ,用免疫组化方法测定肾间质转化生长因子 β(TGF -β) ,α 平滑肌动蛋白 (α SMA)及Ⅰ型 ,Ⅲ型胶原 (coIⅠ .coIⅢ )的表达并行HE、MASSON染色 ,并观察肾脏病理变化。结果　Tranilast可显著减少TGF -β ,α SMA ,coIⅠ ,coIⅢ的表达 (P <0 0 5 ) ,有效地改善肾脏的病理学改变。结论　曲尼司特抑制输尿管梗阻后肌成纤维细胞 (MyoF)释放TGF -β而调节胶原的合成 ,减少肾间质Ⅰ型 ,Ⅲ型胶原的沉积 ,从而改善UUO所致肾损伤 ,对实验性肾间质纤维化有一定的防止作用     

大鼠单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化与TGFβ1 mRNA表达的关系

探讨转化生长因子β１在单侧输尿管梗阻所致肾间质纤维化中的作用,方法应用原位杂交,生化分析及病理形态学观察等技术,研究ＵＵＯ术后１、３、７、１４、２１ｄ不同时相肾皮质中ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达与小管间质病变,羟脯氨酸代谢的关系。结果ＵＵＯ肾组织中羟脯氨酸含量农渐增加及间质面积增宽,伴ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达增高。结论ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达增加是ＵＵＯ致肾间质纤维化的重要原因之一。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中氧化应激的变化

目的采用单侧输尿管结扎（UUO）致肾间质纤维化大鼠模型，观察UUO后肾脏病理和肾组织羟脯氨酸（Hyp）含量及各氧化应激指标的改变，探讨氧化应激在肾间质纤维化中的作用。方法 成年健康Wistar大鼠24只，随机分为两组（n=12）：模型组（UUO组）大鼠麻醉后打开腹腔分离左侧输尿管，并于靠近肾盂段行左输尿管结扎；假手术组（Sham组）仅分离输尿管，不行结扎。两组大鼠于手术后10d处死取左侧肾脏，HE和Masson染色观察大鼠肾脏常规病理；以化学比色法测定梗阻侧肾组织匀浆中羟脯氨酸（Hyp）的含量、总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和丙二醛（MDA）的含量。组间比较采用单因素方差分析，P〈0.05为差异有统计学意义。结果 大鼠行单侧输尿管结扎10d后，梗阻侧肾脏肿大、肾实质变薄，肾间质水肿，弥漫炎细胞浸润，肾小管扩张或萎缩，部分肾小管腔内有蛋白或细胞管型，间质趋向纤维化。与Sham组相比，UUO组梗阻侧肾脏病理改变明显，且肾组织中Hyp和MDA含量增加（P〈0．01），T—AOC含量和T—SOD活性下降（P〈0．01）。相关分析显示肾组织中Hyp和MDA含量与Masson染色中胶原沉积成正相关，（r1=0.69，r2=0.66，P〈0．01）；肾组织中T—SOD活性和T—AOC含量与Masson染色中胶原沉积成负相关，（r3=-0．57，P〈0．05，r4=-0．59，P〈0．01）。结论 单侧输尿管梗阻可以诱导大鼠肾间质纤维化，氧化应激参与肾间质纤维化的形成。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质MCP-1的表达及其意义

目的：探讨肾间质纤维化中单核细胞趋化因子-1（MCP-1）的表达及其与肾间质巨噬细胞浸润的关系。方法：60只SD雌性大鼠随机分成假手术（SOR）组、单侧输尿管梗阻（UUO）组,于术后第1,4,7,10,14 d分别处死各组大鼠。用HE和MASSON染色法观察UUO大鼠术后不同时间点肾脏病理改变,用免疫组化法检测肾小管间质MCP-1表达和巨噬细胞浸润。结果：UUO组肾小管-间质MCP-1,单核巨噬细胞抗原ED-1表达较SOR组明显增多（P<0.05）,MCP-1表达与巨噬细胞浸润呈正相关（r =0.865,0.928,0.858,0.893,0.873,均P<0.05）;MCP-1表达和巨噬细胞浸润分别与肾间质胶原相对面积呈正相关（分别为r =0.856,0.896,0.686,0.820,0.867和r =0.942,0.898,0.920,0.914,0.829,均P<0.05）。 结论：随UUO大鼠病程进展,肾小管间质MCP-1表达增多,可能在肾间质纤维化中起重要作用。MCP-1可能通过介导巨噬细胞浸润参与肾间质纤维化,MCP-1可成为治疗肾间质纤维化的新靶点。     

单侧输尿管梗阻法制作大鼠肾间质纤维化模型的改进

目的建立改良的大鼠肾间质纤维化模型。方法用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型,动态观察4周。治疗的第12、、3周末检测血肌酐、尿素氮含量等指标,观察肾功能变化;4周末采用HE染色、六胺银(periodic acid-silver methenamine,PASM)染色和丽春红染色观察肾组织病理变化。结果模型组大鼠血肌酐、尿素氮均有明显上升;模型组大鼠大部分肾小球呈玻璃样变,硬化的肾小球周围所属肾小管萎缩、基底膜增厚,部分肾小管消失;少数残存的肾小球肥大并周围肾小管扩张严重;肾间质胶原纤维增生和大量炎细胞浸润。结论该模型有明显的肾间质纤维化特征,且死亡率低,适合肾间质纤维化的实验研究。     

Notch1，Jagged1和VEGF蛋白在非小细胞肺癌的表达及其意义

目的:检测Notch1,Jagged1和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织的表达及其临床病理学意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测65例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中Notch1,Jagged1和VEGF蛋白的表达并分析它们与临床病理参数间的关系.结果:Notch1,Jagged1和VEGF蛋白在非小细胞肺癌中表达的阳性强度分别为81.5%(53/65),83.1%(54/65)和93.8%(61/65),均明显高于正常支气管上皮组织的阳性强度(P＜0.05);NSCLC中Notch1和VEGF蛋白表达与患者临床分期和淋巴结转移密切相关(P＜0.05);Jagged1蛋白表达与患者病理类型和淋巴结转移有关.Notch1,Jagged1和VEGF蛋白的表达三者两两间均呈显著正相关.结论:Notch1,Jagged1和VEGF蛋白可能在肺癌发生发展中起重要作用;其高表达有可能作为预测NSCLC侵袭、转移的重要指标.     

Notch1受体和配体分子Jagged1蛋白在肝癌组织中的表达及意义

目的 探讨Notch1及Jagged1蛋白在肝脏肿瘤中的表达特点及其与肝癌的临床病理学特点的关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测65例肝癌组织及其相应癌旁正常组织中Notch1和Jagged1蛋白的表达.结果 在肝癌和癌旁正常组织中,Notch1的阳性表达率分别为16.9％和90.8％;Jagged1的阳性表达率分别为10.9％和86.2％,两组间差异均有显著性(P=0.000).Notch1受体和Jagged1配体分子的表达与患者年龄、性别,肿瘤大小无关;Notch1受体表达与肝癌组织学分型、Edmondson分级及有无淋巴结转移无关(P＞0.05);而Jagged1配体表达则与肝癌组织学分型、Edmondson分级及有无淋巴结转移有关(P＜0.05);在肝癌组织中Notch1与Jagged1的表达呈正相关(r1=0.301,P =0.005).结论 Notch1蛋白和Jagged1蛋白可以作为诊断肝癌的特异性指标,也有望成为肝癌基因治疗的新靶点.     

佐剂关节炎大鼠肺功能变化与Notch1、Notch2/Jagged1、Jagged2通路的相关性

目的观察佐剂关节炎(AA)大鼠肺功能降低与肺组织Notch1、Notch2、Jagged1、Jagged2的关系。方法将40只大鼠随机均分为正常组和模型组,模型组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(CFA)0.1 ml致炎,复制成AA模型。致炎30 d后,观察两组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数、肺功能、肺组织形态学变化,RT-PCR法检测肺组织Notch1、Notch2及Jagged1、Jagged2的表达。结果模型组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数升高,肺功能参数用力肺活量(FVC)、50%肺活量的最大呼气流量(FEF50)、75%肺活量的最大呼气流量(FEF75)、用力最大呼气流量(PEF)降低,肺组织Notch1、Jag-ged1、Jagged2的表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。相关分析显示,模型组大鼠肺功能参数FVC与Jagged1呈正相关,1s内平均呼气流量(FEV1/FVC)与Notch1呈正相关,FEF50与Jagged2呈正相关,FEF75与Notch1、Notch2呈正相关,与Jag-ged1呈负相关(P<0.05,P<0.01)。结论 AA大鼠在发生关节炎症的同时出现肺功能降低,而肺功能降低与Notch受体/配体呈高度相关,提示致炎后形成的免疫复合物沉积于肺组织,激活肺组织Notch信号通路,通过级联放大效应进一步导致肺功能降低。     

Jagged1与肿瘤的研究进展

Jagged1是存在于哺乳动物细胞膜上Notch受体的主要配体之一,参与调控许多组织的生长发育。研究表明,它对肿瘤发生有很大影响,能单独或通过激活Notch信号通路调控细胞的增殖、分化及凋亡。Jagged1还参与肿瘤新生血管化,在肿瘤的内皮组织中通过活化Notch信号通路促进肿瘤血管形成。     

Notch/Jagged1信号通路与内皮祖细胞的增殖分化

目前对Notch配体和受体之间的信号转导已有大量的研究。它分布广泛,在无脊椎动物和脊椎动物中起重要作用。近年来,在对血管增殖分化的研究中,Notch/Jagged1的研究颇为热门,它对血管增殖分化的双重调节作用对临床治疗心脏和血管疾病是一大进展。     

Brucine Inhibits Bone Metastasis of Breast Cancer Cells by Suppressing Jagged1/Notch1 Signaling Pathways

Objective: To examine the effects of brucine on the invasion, migration and bone resorption of receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand(RANKL)-induced osteoclastogenesis. Methods: The osteoclastogenesis model was builded by co-culturing human breast tumor MDA-MB-231 and mouse RAW264.7 macrophages cells. RANKL(50 ng/m L) and macrophage-colony stimulating factor(50 ng/m L) were added to this system, followed by treatment with brucine(0.02, 0.04 and 0.08 mmol/L), or 10 μmol/L zoledronic acid as positive control. The migration and bone resorption were measured by transwell assay and in vitro bone resorption assay. The protein expressions of Jagged1 and Notch1 were investigated by Western blot. The expressions of transforming growth factor-β1(TGF-β1), nuclear factor-kappa B(NF-κB) and Hes1 were determined by enzyme-linked immunosorbent assay. Results: Compared with the model group, brucine led to a dose-dependent decrease on migration of MDA-MB-231 cells, inhibited RANKL-induced osteoclastogenesis and bone resorption of RAW264.7 cells(P 0.01). Furthermore, brucine decreased the protein levels of Jagged1 and Notch1 in MDA-MB-231 cells and RAW264.7 cells co-cultured system as well as the expressions of TGF-β1, NF-κB and Hes1(P0.05 or P0.01). Conclusion: Brucine may inhibit osteoclastogenesis by suppressing Jagged1/Notch1 signaling pathways.     

橙皮苷调控Jagged1/Notch1通路对巨噬细胞极化及细支气管炎小鼠肺损伤的影响

目的 探究橙皮苷对呼吸道合胞病毒(RSV)细支气管炎模型小鼠肺损伤的影响及可能的作用机制。方法 构建RSV细支气管炎小鼠模型,采用随机数字表法将60只BALB/c小鼠分为对照组、模型组、低剂量橙皮苷组(18 mg/kg)、高剂量橙皮苷组(36 mg/kg)、高剂量橙皮苷(36 mg/kg)+Jagged1(1 mg/kg)组,每组12只,给予相应剂量的药物进行干预,对照组和模型组给予等量生理盐水。收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),并分离肺泡巨噬细胞;ELISA检测BALF中白细胞介素(IL)-4、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10的水平;流式细胞术检测巨噬细胞M1/M2型极化;qRT-PCR、Western blot检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、Jagged1和Notch1的mRNA和蛋白表达水平。结果 与对照组相比,模型组小鼠BALF中IL-4、IL-6、TNF-α、M1型巨噬细胞比例、肺组织炎症评分和黏液分泌评分以及iNOS、Jagged1、Notch1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P均<0.001),而IL-1...     

Notch1、Jagged1在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Notch1、Jagged1在肝细胞癌组织中的表达及临床意义。方法选择2010年3月～2012年6月手术治疗并经病理证实为肝细胞癌的患者35例,每例患者均取癌组织及癌旁组织（距癌组织2～3 cm处）,其中肝细胞癌组织35例,癌旁肝硬化组织13例,癌旁正常肝组织22例。采用实时荧光定量PCR法检测Notch1mRNA、Jagged1 mRNA在肝细胞癌组织、癌旁肝硬化组织及癌旁正常肝组织中的表达;免疫组织化学染色法检测Notch1、Jagged1蛋白的表达,并分析两种蛋白的表达与肝细胞癌临床病理特征的关系。结果①肝细胞癌组织中Notch1 mRNA、Jagged1 mRNA的表达分别为（4.58±0.77）、（4.96±0.87）,显著高于癌旁正常肝组织,差异有统计学意义（P〈0.05）;与癌旁肝硬化组织[（1.16±0.37）、（1.42±0.58）]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;而癌旁正常肝组织与癌旁肝硬化组织比较差异无统计学意义（P〉0.05）。②肝细胞癌组织中,Notch1、Jagged1的阳性表达率分别为71.4%（25/35）、68.6%（24/35）;癌旁正常肝组织中,Notch1、Jagged1的阳性表达率分别为36.4%（8/22）、40.9%（9/22）;癌旁肝硬化组织中,Notch1、Jagged1的阳性表达率分别为30.8%（4/13）、30.8%（4/13）。Notch1、Jagged1的阳性表达率在肝细胞癌组织中明显高于癌旁正常肝组织（χ^2otch1=6.81,χ^2agged1=4.24,P〈0.05）及肝硬化组织（χ^2otch1=6.55,χ^2agged1=5.57,P〈0.05）。Notch1、Jagged1的阳性表达率在癌旁正常肝组织与肝硬化组织间差异无统计学意义（P〉0.05）。Spearman相关分析显示,肝细胞癌组织中Notch1的表达与Jagged1的表达呈正相关（r=0.38,P〈0.05）。③Notch1、Jagged1蛋白的阳性表达率与患者的年龄、性别、肿瘤直径、数目、有无癌栓形成无关（P〉0.05）;与有无淋巴结转移、病理分级密切相关。有淋巴结转移者Notch1、Jagged1阳性表达率高于无淋巴结转移者;低分化癌组织Notch1、Jagged1的阳性表达率明显高于中高分化癌组织,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Notch信号通路中Notch1、Jagged1对肝细胞癌的发生发展起促进作用,可为判断临床预后提供参考价值。