胰岛素样生长因子- I与透明质酸促人关节软骨细胞增殖的作用

为了探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)和透明质酸(HA)联合培养对人关节软骨细胞增殖的影响,在人关节软骨细胞培养液中分别加入不同浓度的IGF-I、HA、IGF-I和 HA,用四氮甲基唑蓝(MTT)法及流式细胞术测定软骨细胞增殖活性的变化.结果显示,10μg/L浓度的IGF-I即可明显促进软骨细胞的增殖,IGF-I浓度为50μg/L时,其促增殖作用达最大值;单独应用HA对软骨细胞的增殖无影响; IGF-I+HA组吸光度值为0.377,较IGF-I组增加10.7%;IGF-I组促增殖的高峰时间为72h,IGF-I+HA组的高峰时间为96h,培养96h后,IGF-I+HA组吸光度值0.389,细胞的增殖指数为28.79±1.24%,较对照组升高更明显.说明IGF-I具有促软骨细胞增殖作用,与HA联合培养促增殖能力更强,具有协同效应,并能延长促丝裂作用的时间.     

胰岛素样生长因子-1诱导糖尿病性白内障晶状体上皮细胞表达MCP-1

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)诱发离体培养的白内障患者晶状体上皮分泌趋化性细胞因子(MCP-1)的作用。方法:将白内障手术中分离糖尿病性白内障患者晶状体上皮和非糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞分别离体培养。加入重组IGF-1作用后,以RT-PCR方法检测MCP-1mRNA,夹心ELISA法检测MCP-1蛋白分泌水平。进行核提取后以Westernblot检测转录因子Sp-1核转移水平。利用Sp-1特异性阻抑剂米拉霉素共同孵育后收集上清观察MCP-1水平。结果:成功建立晶状体上皮细胞体外培养体系。IGF-1诱导伴发糖尿病性白内障患者晶状体上皮分泌MCP-1水平明显高于无糖尿病组。IGF-1作用于晶状体上皮细胞后能够活化Sp-1,Sp-1的特异性抑制能够明显降低MCP-1的表达。结论:IGF-1通过Sp-1途径诱导MCP-1的分泌表达。与非糖尿病性白内障患者相比,糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞产生更多的MCP-1。     

螺旋藻对人外周血淋巴细胞增殖的作用

目的:探讨螺旋藻水提物对人外周血淋巴细胞体外增殖的影响和机制。方法:利用MTT法检测不同剂量组螺旋藻水提膜内、膜外物对人外周血淋巴细胞体外增殖的影响,同时设刀豆蛋白A(ConA)和植物血凝素(PHA)进行对照分析。结果:螺旋藻水提物对人外周血淋巴细胞具有增殖作用,并且高浓度螺旋藻水提膜内物增殖作用优于PHA。结论:螺旋藻水提物对人外周血淋巴细胞具有明显的增殖作用。     

人胰岛素样生长因子-1基因克隆及其真核表达载体的构建

目的:从胎儿肝组织中克隆人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因,并构建真核表达载体pCI-neo/hlGF-1.方法:提取胎儿肝总RNA,RT-PCR法扩增IGF-1 cDNA片段,重组于pUCM-T载体,测序正确后构建表达载体.结果:扩增得到710bp带有Kozak序列的IGF-1 cDNA片段,成功构建了真核表达载体pCI-neo/hlGF-1.结论:通过RT-PCR的方法克隆了人IGF-1 cDNA,并成功构建了真核表达载体pCI-neo/hIGF-1,为IGF-1基因治疗糖尿病创造了条件.     

胰岛素样生长因子-1对人精子氧化损伤的保护作用

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对人精子氧化损伤的保护作用。方法用H_2O_2处理人精子悬液建立氧化损伤模型,将精子悬液分为对照组、H_2O_2组、IGF-1+H_2O_2组。分别于培养后12 h、24 h,采用精子分析仪检测精子活力,Diff-Quik染色法进行精子形态学分析,精子染色质扩散试验检测精子DNA碎片率。结果在培养后12 h、24 h,与对照组相比,H_2O_2组精子活力及前向运动百分比均显著下降,DNA碎片率明显升高(P0.05);IGF-1+H_2O_2组较H_2O_2组精子活力及前向运动百分比均显著升高,DNA碎片率明显下降(P0.05);各组间正常形态精子比率无显著性差异(P0.05)。结论 IGF-1对氧化损伤的精子具有一定的保护作用。     

人胰岛素样生长因子-1的真核表达及其生物学功能研究

目的：构建人胰岛素样生长因子1（IGF-1）分泌型真核表达载体，并检测表达产物的生物活性。 方法：用RT-PCR法从人肝细胞克隆IGF-1基因，并将其连入Psec Tag/FRT/V5-His载体，用脂质体法转染CHO细胞，将转染细胞上清培养骨髓基质干细胞，用MTT法测定骨髓基质干细胞的增殖情况。 结果：成功扩增210 bp的IGF-1基因，表达产物经SDS-PAGE分析及Western blotting检测具有7.7 kD特异性条带。骨髓基质干细胞的增殖随转染细胞上清的浓度、转染细胞上清培养时间的增加而增加。 结论：成功构建分泌型IGF-1真核表达载体，其表达产物对骨髓基质干细胞具有促增殖作用。     

表皮生长因子、胰岛素样生长因子-1体外诱导胎儿骨髓间充质干细胞分化

目的:研究表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)体外诱导胎儿骨髓间充质干细胞(BMSCs)向上皮细胞的分化,及其对种植于羊膜上BMSCs的影响.方法:不同浓度EGF、IGF-1体外诱导第3代BMSCs培养7 d后,检测各组细胞角蛋白(CK)及上皮膜抗原(EMA)的阳性细胞率.检测去上皮羊膜有无EGF或IGF-1表达情况;观察生长因子对种植于羊膜七BMSCs的分化影响.结果:EGF 30 ng/ml或IGF-1 50 ng/ml组的CK及EMA阳性细胞率高于其余剂量组;两因子联合诱导组的CK及EMA阳性细胞率均高于各单因子组;30 ng/ml EGF和50 ng/ml IGF-1联合组的阳性细胞率最高;去上皮羊膜表达EGF,不表达IGF-1;BMSCs在羊膜上生长不受外源性生长因子影响.结论:EGF和IGF-1在体外均有诱导BMSCs向上皮细胞分化的作用;以30 ng/ml EGF和50 ng/ml IGF-1联合组的协同作用最强;种植于羊膜上的BMSCs可生长为复层上皮结构,羊膜中的EGF可能是其诱导作用的内源性因素.     

人胰岛素样生长因子1的真核细胞表达及其鉴定

目的 构建人胰岛素样生长因子１（ＩＧＦ－１）的真核细胞表达质粒。方法 用ＰＣＲ方法从人的肝细胞ｃＤＮＡ文库中克隆出ＩＧＦ－１ｃＤＮＡ,然后定向插入真核细胞表达载体ｐｃＤＮＡ３中,并用脂质体方法转染ＣＯＳ７细胞。用ＥＬＩＳＡ法和人胚肺纤维母细胞以及ＮＩＨ３Ｔ３纤维细胞增殖法分别测定转染细胞上清液中ＩＧＦ－１的含量和生物活性。结果 重组的真核细胞表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＩＧＦ－１所含的ＩＧＦ－１ｃＤＮＡ序列和插入方向均正确,其转染的ＣＯＳ７细胞分泌较高浓度的ＩＧＦ－１,并且具有明显促进纤维细胞增殖的能力。结论 本实验所构建的重组真核细胞表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＩＧＦ－１能够高效表达有活性的ＩＧＦ－１,对进一步研究ＩＧＦ－１体内表达的生理和病理作用有一定意义。     

转化生长因子β1和胰岛素样生长因子Ⅰ及其协同作用对人皮肤成纤维细胞增殖的影响

背景:皮肤成纤维细胞注射移植为颜面部皱纹及微小凹陷等治疗提供了一种全新的方法,然而成纤维细胞的获取及体外快速扩增往往需要较长时间,以至于不能满足临床需要。目的:观察转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ及两者协同作用对体外培养人皮肤成纤维细胞增殖的影响。方法:人皮肤成纤维细胞原代培养,取第3代细胞种入96孔板,加入不同质量浓度的转化生长因子β1或胰岛素样生长因子Ⅰ作用于细胞,分别作用3,6,9d采用MTT法检测细胞增殖情况。同法设4个组,分别为:阴性对照组、转化生长因子β1最佳效应浓度组、胰岛素样生长因子Ⅰ最佳效应浓度组、两者最佳效应浓度联用组,作用3,6,9d采用MTT法检测增殖情况。结果与结论:作用6d和9d,10.0μg/L转化生长因子β1、50.0μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ组与对照组相比均有促细胞增殖效应(P0.05),此即为各生长因子最佳效应浓度。作用6d和9d,转化生长因子β1与胰岛素样生长因子Ⅰ各浓度实验组与相应对照组相比,差异均有显著性意义(P0.05)。10.0μg/L转化生长因子β1与50.0μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ联合作用9d可显著促进细胞增殖,与其他组相比,差异有显著性意义(P0.05)。提示转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ均可体外促进人皮肤成纤维细胞增殖,最佳效应浓度联用促增殖效果优于各自单独使用。     

脑肿瘤患者胰岛素样生长因子-1水平的研究

目的探讨血清胰岛素样生长因子（IGF）-1水平与脑肿瘤的关系,垂体瘤、颅咽管瘤手术与血清IGF-1水平变化是否存在联系。方法检测193例脑肿瘤患者血清及61例术后相应患者血清IGF-1水平,用SPSS16．0统计软件进行分析。结果①恶性脑肿瘤组与良性脑肿瘤组间的差异有统计学意义（P〈0．05）,侵袭性垂体瘤组与非侵袭性垂体瘤组间差异有统计学意义（P〈0．05）;②颅咽管瘤手术前后血清IGF-1水平差异有统计学意义（P〈0．05）,侵袭性与非侵袭性垂体瘤手术前后血清IGF-1水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论①IGF-1在良性脑肿瘤和恶性脑肿瘤患者血清中表达的水平存在差异,可帮助临床对肿瘤的恶性程度作出早期的判断;②颅咽管瘤患者手术前后血清IGF-1水平存在差异,对患者的预后判断具有参考价值。     

人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达和活性检测

目的 克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型(hIGF-1)，构建真核表达载体并进行表达及活性检测，为IGF-1基因治疗糖尿病奠定基础。方法 提取胎儿肝脏总RNA，RT-PCR法扩增IGF-1cDNA片段，重组于pUCM-T载体，测序正确后构建表达载体，转染猴肾成纤维细胞系COS-7，用原位杂交和免疫组织化学检测表达，收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定。结果 扩增得到710bp带有Kozak序列的IGF-1cDNA片段；成功构建了真核表达载体pCI-neo／hIGF-1；IGF-1在COS-7细胞得到了表达，并具有刺激胰岛素分泌的活性。结论 新构建的载体pCI-neo／hIGF-1能在COS-7细胞中表达、分泌，且所分泌的IGF-1具有生物活性。     

胰岛素样生长因子1对早孕滋养细胞增殖的作用及机制研究

目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)对体外培养的早孕滋养细胞增殖的影响,以及滋养细胞增殖的细胞内信号转导机制。方法取原代培养传代后生长良好的滋养层细胞,加入不同浓度的IGF-1继续培养,用四唑盐(MTT)比色法测定细胞的增殖活性,并且以ERK(细胞外信号调节蛋白激酶)通路的特异性抑制剂U0126处理细胞,间接反映ERK通路的作用。结果①与对照组相比,IGF-1浓度≥1nM时,其促进滋养细胞增殖效果有显著性意义(P<0.05),且在0.1-100nM范围内,此种作用与浓度呈正相关。②ERK通路阻滞剂U0126可抑制滋养细胞的增殖(P<0.05),并且可显著抑制IGF-1对滋养细胞的促增殖作用(P<0.05)。结论①IGF-1对滋养层细胞的增殖活性具有促进作用。②ERK通路可能是滋养细胞增殖过程中的主要信号转导通路之一。     

胰岛素样生长因子-1与PTCA术后再狭窄

经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty，PTCA)是目前冠心病血管重建治疗的重要手段。但术后30％～50％的血管再狭窄(restenosis，RS)发生率极大地限制了其远期疗效。再狭窄的形成是一个血管损伤反应的新生内膜增生与血管重构的过程。这一过程与血管活性物质、细胞生长因子等因素的刺激有关。是多种细胞分子生物学机制作用的结果。     

胰岛素样生长因子-1对白介素-1体外诱导家兔椎间盘髓核细胞凋亡的影响

目的:利用白介素-1(IL-1)诱导培养的家兔椎间盘髓核细胞凋亡,用胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对凋亡进行干预,探讨IGF-1对髓核细胞凋亡的抑制作用.方法:分离健康家兔椎间盘髓核,Ⅱ型胶原酶消化法分离椎间盘髓核细胞.Ⅱ型胶原免疫组织化学显色和甲苯胺蓝染色对髓核细胞鉴定.培养第1代髓核细胞分为空白组、IGF-1组和IL-1组.利用Giemsa染色、原位末端标记(TUNEL)、流式细胞仪观测各组髓核细胞凋亡情况.结果:IL-1组可见大量髓核细胞凋亡,IGF-1组可见少量细胞凋亡,空白组罕见凋亡征象.原位末端标记显示,与IL-1组比较,IGF-1组细胞凋亡率明显降低.流式细胞仪检测显示IGF-1组细胞凋亡率明显降低.IL-1组与空白组比较,凋亡率明显增高.IGF-1组、IL-1组和空白组晚期凋亡百分率差异均有统计学意义.结论:IGF-1对IL-1体外诱导的髓核细胞凋亡具有抑制作用.     

胰岛素样生长因子对神经干细胞增殖分化的影响

神经干细胞 (ｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ ,ＮＳＣｓ)能增殖成恰当数量的细胞 ,在脑部各个区域按正确顺序排列组合 ,分化为神经元 ,星形胶质细胞、少突胶质细胞 ,这是发育过程中必不可少的过程。众多研究提示细胞外因子参与此过程的调控并影响ＮＳＣｓ的分化启动和分化方向。在这些细胞外因子中有着显著影响作用的是众多的生长因子 ,如ＥＧＦ (表皮生长因子 )、ＦＧＦ (成纤维细胞生长因子 )、ＩＧＦ(胰岛素样生长因子Ｉｎｓｕｌｉｎ -ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ)等。深入了解生长因子对神经发生的作用有助于进一步认识细胞增殖…     

胰岛素样生长因子-Ⅰ与乳腺癌

胰岛素样生长因子Ⅰ(insulinlikegrowthfactor,IGF)对细胞增殖和凋亡具有双重调节功能。在临床上,它的异常伴随着多种慢性疾病或肿瘤倾向;在乳腺癌的发生发展过程中,其作用也异常重要。深入研究其功能及相关影响因素,将为临床乳腺癌的诊疗提供新思路和新办法。     

胰岛素样生长因子-1与急性冠脉综合症的关系

目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)与急性冠脉综合症的关系.方法 采用酶联免疫吸附法(ELIsA)分别对急性心肌梗死(AMI),不稳定型心绞痛(UAP),稳定型心绞痛(SAP)患者及正常对照组,进行血清IGF-1水平测定.结果 AMI和UAP组中IGF-1明显高于SAP和对照组(P＜0.01).SAP组IGF-1明显低于对照组(P＜0.01).结论 IGF-1参与动脉硬化粥样斑块的发生发展过程.可作为预测斑块稳定性的标志物.     

CD_3McAb对PHA和TPA诱导人胚胸腺细胞增殖反应调节作用的研究

本文观察了CD3 McAb 对PHA 和TPA 诱导的20～36周龄人胚胸腺细胞增殖反应的调节作用。结果表明:CD3McAb 不能单独诱导人胚胸腺细胞增殖反应,但却能显著地促进TPA 诱导的人胚胸腺细胞增殖和抑制PHA 诱导的人胚胸腺细胞增殖,并呈剂量依赖关系;加入外源性rHulL—2能促进人胚胸腺细胞对CD3McAb 诱导的应答反应,而rHuIL—1则无此作用。此结果对于了解人胚胸腺表达CD_3抗原细胞的功能水平及CD_3分子的生物学作用有一定的意义.     

胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)研究进展

胰岛素样生长因子结合蛋白 - 1(IGFBP- 1)参与生长、发育、生殖及血糖等生理过程 ,它是一个多功能蛋白 ,主要通过与 IGF- 1结合发挥作用。在 IGFBP- 1蛋白质结构中 ,N端是与 IGF- 1结合的重要区域 ;中心区决定了IGFBP的特异性 ;C端部分参与了与 IGF- 1结合并与细胞粘附相关。 IGFBP- 1是否磷酸化对其生物学作用有着重要影响。 IGFBP- 1基因转录受到多种转录因子共同调控 ,其中胰岛素是其主要的调控因子。     

CRF患者红细胞促外周血淋巴细胞增殖反应的实验研究

目的 :探讨慢性肾功能衰竭 (CRF)患者红细胞 (RBC)促外周血淋巴细胞 (PBL)增殖能力 ,了解CRF患者RBC免疫调控功能状况。方法 :CRF患者 (检测组 )和正常人 (对照组 )的RBC为效应细胞 ,正常人淋巴细胞为靶细胞 ,采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法 ,检测红细胞调控淋巴细胞增殖反应的能力。结果 :健康人RBC促PBL增殖的作用明显 ,其增殖率为5 7 3%± 10 2 % ,而CRF患者RBC促PBL增殖作用较健康人明显低下 ,增殖率为 32 7%± 7 8% (P <0 0 0 1) ,透析后有较明显的改善 ,增殖率为 4 0 6 %± 11 6 % ,但仍低于健康人。结论 :CRF患者红细胞免疫调控功能低下。