富铁对HL-60细胞增生及化疗药物诱导HL-60细胞凋亡的影响

探讨铁对HL-60细胞增生及化疗药物诱导HL-60细胞凋亡的影响,采用HL-60细胞与不同浓度的三氯化铁、三氯化铁加阿糖胞苷、三氯化铁加足叶乙甙、阿糖胞苷、足叶乙甙共同体外培养6h、12h、24h、48h,用细胞生长、活力测定、形态学观察、流式细胞学检测分析和DNA电泳,免疫组化方法检测bcl-2基因等细胞凋亡指标观察三氯化铁的作用.结果显示,100μmol/L三氯化铁促HL-60细胞增生最明显,凋亡率最低,bcl-2阳性表达率最高,100μmol/L三氯化铁分别加用阿糖胞苷、足叶乙甙与HL-60细胞共同培养时凋亡率比单用阿糖胞苷、足叶乙甙低(P＜0.05).可以认为一定量的铁有促进HL-60细胞增生、抑制HL-60细胞凋亡的作用,对于白血病患者,不适当的铁剂补充可能带来不利的影响.     

富铁对HL-60细胞增生及化疗药物诱HL-60细胞凋亡的影响

探讨铁对 ＨＬ－６０细胞增生及化疗药物诱导 ＨＬ－６０细胞凋亡的影响,采用ＨＬ－６０细胞与不同浓度的三氯化铁、三氯化铁加阿糖胞苷、三氯化铁加足叶乙甙、阿糖胞苷、足叶乙甙共同体外培养６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ,用细胞生长、活力测定、形态学观察、流式细胞学检测分析和ＤＮＡ电泳,免疫组化方法检测ｂｃｌ－２基因等细胞凋亡指标观察三氯化铁的作用。结果显示,１００μｍｏｌ／Ｌ三氯化铁促ＨＬ－６０细胞增生最明显,凋亡率最低,ｂｃｌ－２阳性表达率最高,１００μｍｏｌ／Ｌ三氯化铁分别加用阿糖胞苷、足叶乙甙与 ＨＬ－６０细胞共同培养时凋亡率比单用阿糖胞苷、足叶乙甙低（Ｐ＜０．０５）。可以认为一定量的铁有促进 ＨＬ－６０细胞增生、抑制 ＨＬ－６０细胞凋亡的作用,对于白血病患者,不适当的铁剂补充可能带来不利的影响。     

阿糖胞苷诱导HL—60细胞凋亡

阿糖胞苷诱导ＨＬ－６０细胞凋亡仇志根吴马伴吟细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是一种不同于细胞坏死的死亡方式，正常细胞和肿瘤细胞均有凋亡。如何诱导肿瘤细胞凋亡是肿瘤治疗的新热点。我们以不同浓度的阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，观察了凋亡细...     

铁剥夺诱导HL-60细胞凋亡及对化疗药物诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的 探讨铁剥夺对HL－60细胞凋亡及对化疗药物诱导HL－60细胞凋亡的影响。方法 HL－60细胞与不同浓度的铁螯合剂－去铁胺（DFO）、DFO加化疗药物、化疗药物、DFO加化疗药物及三氯化铁、三氯化铁共同培养6h、12h、24h、48h。通过测定细胞活力,观察细胞形态学变化,应用流式细胞仪检测和DNA凝胶电泳等方法观察细胞凋亡;通过亲和免疫组化方法检测c-myc基因表达,从而确定DFO及DFO与化疗药物联合应用对HL－60细胞的作用。结果 DFO单用可降低HL－60细胞活力、抑制HL－60细胞增殖、诱导HL－60凋亡,并可使c-myc基因表达增加,其作用强度随培养时间延长及DFO浓度增加而增加。DFO与化疗药物联合时,可增加化疗药物诱导HL－60细胞凋亡的作用。该作用可被等摩尔的三氯化铁抵消。结论 铁剥夺可影响HL－60细胞DNA的合成,诱导其凋亡,并提高HL－60细胞对化疗药物的敏感性。因此,铁剥夺可作为临床上白血病治疗或辅助治疗的方法之一,不适当补铁或升高血红蛋白将影响化疗疗效。     

尼莫地平对阿糖胞苷诱导的HL-60细胞凋亡影响的研究

有研究表明 ,Ｃａ2 + 是细胞凋亡中一个重要的信使 ,钙通道拮抗剂 (ＣＣＢ)可通过抑制钙内流 ,从而抑制细胞凋亡[1 ] 。但也有研究表明 ,ＣＣＢ能增强某些实体瘤的化疗效果[2 ] 。有学者将ＣＣＢ———维拉帕米 (异搏定 )作为耐药逆转剂用于难治性白血病的治疗 ,其作用机制不甚清楚。因异搏定主要作用于心血管系统 ,而抗肿瘤药物往往有程度不同的心脏损害 ,因此我们选用另一种ＣＣＢ———尼莫地平 (ＮＭＤＰ)作为耐药逆转剂用于白血病的研究 ,即以人早幼粒细胞性白血病的细胞株 (ＨＬ 60 )为研究对象 ,体外观察ＮＭＤＰ对ＨＬ 60细胞凋亡的…     

rhTNF—α对HL—60细胞凋亡其bcl—2基因表达的影响

目的：探讨重组人肿瘤死因子－α（rhTNF-α）对白血病细胞的作用及其机制,寻求白血病免疫疗法的理论依据。方法：以早幼白血病细胞株HL－60细胞为研究对象,利用苏木素染色及免疫细胞化学的方法,观察rhTNF-α对HL－60细胞凋亡其bcl-2基因表达的影响。结果10U/ml、100U/ml和500U/mlrhTNF-α与HL－60细胞共同培养2－24h,除10U/ml培养2h组外余各组凋亡细胞均明显高于空白对照组（P＜0．05）,bcl-2基因阳性表达细胞数均明显低于空白对照组（P＜0．05）,二者呈明显负相关。随rhTNF-α浓度增高,其作用增强,8h为作用的高峰时间。结论：rhTNF-α能促进HL－60细胞的凋亡;抑制凋亡调控基因bcl-2的表达可能是TNF-α促进HL－60细胞凋亡的机制之一。     

去铁胺诱导HL—60细胞凋亡及对c—myc基因表达的影响

目的 探讨去铁胺（DFO）对HL－60细胞凋亡的诱导作用及对c-myc基因表达的影响。方法 HL－60细胞与不同浓度的去铁胺培养6、12、24、48h。分别测定细胞活力,观察形态学变化,用流式细胞学检测和DNA凝胶电泳等观察细胞凋亡及免疫组化方法检测c-myc基因表达等指标。结果 DFO可降低HL－60细胞活力、抑制HL－60细胞增殖、诱导其凋亡,并使c-myc基因表达增加,其作用随培养时间延长及DFO浓度增加而明显。结论 DFO可影响HL－60细胞DNA的合成,诱导其凋亡,c-myc的表达增加可能是铁剥夺诱导HL－60细胞凋亡的机制之一。DFO可作为治疗或辅助治疗白血病的药物用于临床,将有重要的临床实用价值。     

一氧化氮供体诱导HL—60细胞分化的研究

目的探讨一氧化氮(NO)供体对急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞分化的作用。方法NO供体SNP,SNAP以不同终浓度与HL-60细胞体外培养5d，以无血清培养液及铁氰化钾(PFC)为对照，观察细胞形态，酯酶染色及细胞表面抗原表达的变化。结果1.0mmol/LSNP可诱导(79.2％±5.5％)HL-60细胞向成熟粒系方向分化；细胞生长明显受抑；酯酶染色阳性率与空白及PFC对照无显著差别(P＞0.05)，氟化钠抑制率14.6％;CD14表达低于空白对照(P＜0.05)。同浓度SNAP及PFC均无分化作用。结论NO体外可诱导HL-60细胞向成熟粒系方向分化，但与其种类浓度有关。     

Bcl—2 Bax基因在高三尖杉酯碱诱导HL—60细胞凋亡中的作用

探讨高三尖杉酯碱诱导ＨＬ－６０白血病细胞凋亡的机制。方法 应用细胞形态学，ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳，免疫组织化学，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交等方法。结果 ＨＬ－６０白血病细胞在高三尖杉酯碱的作用下，出现典型的凋亡特征，形态学表现出细胞核裂解，染色质聚集，核碎裂，胞浆浓缩，有空泡形成，琼脂糖电泳出现典型ＤＮＡ梯带。     

Bcl-2反义寡核苷酸对多药抗性HL-60/HHT细胞耐药性逆转的研究

目的探讨bcl-2基因在急性白血病细胞凋亡及耐药性中的作用及Bcl-2反义寡核苷酸（ASON）逆转耐药性的效果。方法细胞耐药性测定采用MTT法,Bcl-2和Bax蛋白含量测定采用单克隆抗体标记技术在流式细胞仪上测定,细胞凋亡率采用流式细胞仪测定。结果（1）Bcl-2水平在HL-60/HHT细胞系明显高于HL-60细胞系（P＜0.01）;（2）Bcl-2ASON可逆转HL-60/HHT的耐药性（P＜0.01）;（3）HL-60/HHT细胞系的凋亡百分率经ASON作用明显升高（P＜0.05）,经ASON+HHT作用后升高更加显著（P＜0.01）;（4）Bcl-2ASON可明显降低Bcl-2表达水平（P＜0.01）。结论在HL-60/HHT细胞系中,Bcl-2的高度表达是造成其耐药的重要原因;反义技术可以通过下调Bcl-2/Bax比值,部分逆转它的耐药的发生。通过进一步的深入研究,反义技术将有可能应用于难治及耐药的急性白血病。     

白细胞介素6对阿糖胞苷诱导的急性髓性白血病及正常骨髓细胞凋亡的影响

新近的研究资料表明 ,白细胞介素 6 (ＩＬ 6 )可以抑制白血病细胞的凋亡 ,促进其增殖。我们选择ＩＬ 6、ＩＬ 6加阿糖胞苷 (Ａｒａ Ｃ)与白血病细胞作用 ,测定细胞凋亡指标 ,探讨ＩＬ 6及ＩＬ 6加Ａｒａ Ｃ对白血病细胞凋亡作用的影响。对象急性髓性白血病 (ＡＭＬ)细胞取自初治、未化疗的急性粒细胞性白血病患者的骨髓 ,共 11例 ,男 9例 ,女 2例 ;年龄7～ 18岁。正常骨髓细胞取自正常志愿者的骨髓 ,共 2 5例 ,男 18例 ,女 7例 ;年龄 4～ 14岁。常规细胞培养。ＩＬ 6购自华美生物有限公司。ＩＬ 6组 :选择 3种剂量 (0 5ｎｇ/ｍｌ、5ｎｇ/ｍ…     

全反式维甲酸对抗肿瘤药物促进HL-60细胞凋亡作用的影响

目的 观察诱导分化剂对抗肿瘤药物促进ＨＬ－６０细胞凋亡的影响。方法 采用苏木精染色,流式细胞仪及ＤＮＡ电泳的方法,研究全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）分别与阿糖胞苷,长春新碱,鬼乙叉甙,柔红霉素４种抗肿瘤药协同作用后ＨＬ－６０细胞凋亡的发生情况。结果 当先以ＡＴＲＡ作用ＨＬ－６０细胞３天后再分别给予抗肿瘤药物,发现各个药物经起的凋亡细胞的数量减少６０％以上,反之先以抗肿瘤药作用后再以ＡＴＲＡ处理ＨＬ－６０     

阿糖胞苷体外对人白血病细胞株HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡的相关性研究

目的 　研究阿糖胞苷 (Ara -C)在体外对人白血病细胞株HL - 6 0增殖抑制和诱导凋亡的剂量 -时间 -效应关系。通过对Ara -C在不同剂量和疗程时抗白血病的机理研究 ,验证大剂量阿糖胞苷 (HD -AraC)治疗血液肿瘤的优越性。方法 　在体外设定的浓度梯度和作用时间下应用Ara -C处理人白血病HL - 6 0细胞 ,采用四氮唑盐还原法 (MTT法 )检测Ara -C对HL - 6 0细胞增殖抑制的剂量 -时间 -效应关系 ,荧光染色观察凋亡细胞形态学改变 ,琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯带 (DNA ,Lad der) ,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化。结果　荧光染色观察到特异性的凋亡小体形成 ,DNA琼脂糖凝胶电泳显示出典型的电泳条带变化 ,流式细胞仪检查见明显的凋亡峰形成 ,细胞周期主要阻滞在sub -G1期。MTT法显示阿糖胞苷作用于HL - 6 0细胞的半数抑制浓度 (IC50 )分别是 2 .4 1 μM和 1 1 .81 μM。统计分析表明 :随着药物浓度的增加和作用时间的延长 ,Ara -C对细胞的增殖抑制和诱发凋亡作用逐渐增强 (P <0 .0 5)。结论　诱导白血病细胞凋亡可能是Ara -C抗白血病的机理之一 ,通过诱导HL - 6 0细胞凋亡从而对其产生明显的增殖抑制作用 ,且与剂量、时间相关。提示应用HD -AraC治疗白血病 ,可以明显提高疗效。     

去铁胺联合阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡作用的实验研究

目的：探讨铁螯合剂联合阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡的作用。方法：实验分为5组：空白对照组、去铁胺组、阿糖胞苷组、去铁胺+ 阿糖胞苷组、去铁胺+阿糖胞苷+三氯化铁组。上述各组与HL-60细胞共同培养6,12,24,4 8 h。通过测定细胞活力、形态学变化、流式细胞仪检测和DNA凝胶电泳等观察细胞凋亡等方法观察诱导HL-60细胞的作用。结果：去铁胺+阿糖胞苷可协同降低HL-60 细胞活力、抑制HL-60细胞增殖、诱导HL-60细胞凋亡,其作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论：铁螯合剂协同阿糖胞苷具有增强诱导HL-60细胞凋亡 的作用。     

化疗药物外诱导白血病细胞凋亡的研究

目的 研究化疗药物诱导白血病细胞凋良的作用及其与Ｒｃｌ－２表达,临床预后指标及临床疗效的关系。方法 利用形态学观察、ＤＮＡ琼脂糖凝胶电凉、凋亡指示抗体ＡＰＯ２,７结合流式细胞仪检测法,研究临床治疗相关剂量的化疗药物诱导急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞,急性混合性白血病（ＨＡＬ）细胞的凋亡及其Ｒｃｌ－２表达率。结果 （１）用临床治疗相关剂量的长春新碱（ＶＤＲ）、地塞米松（Ｄｅｘ）、柔红霉素（ＤＮＲ）     

bcl-2及fas基因表达的变化对细胞色素C诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的观察bcl-2、fas基因表达的变化对细胞色素C诱导急性早幼粒白血病细胞株(HL-60细胞)凋亡的影响,探讨细胞色素C诱导HL-60细胞凋亡的机制。方法将体外培养的HL-60细胞分成六组,细胞色素C终浓度分别为0(对照组)、9.375mg/L、18.75mg/L、37.5mg/L、75mg/L、150mg/L,用流式细胞仪检测细胞色素C对HL-60细胞的凋亡效应,用RT-PCR、westernblotting检测以凋亡为主的HL-60细胞中bcl-2、fas的表达水平。结果流式细胞仪检测表明细胞色素C终浓度分别为0、9.38mg/L、18.75mg/L、37.50mg/L时HL-60细胞是以凋亡效应为主,bcl-2基因的mRNA和蛋白的表达随着细胞色素C浓度的增高而降低,fas基因的mRNA和蛋白的表达随着细胞色素C浓度的增高而增高,当细胞色素C浓度为75mg/L、150mg/L时HL-60细胞是以坏死效应为主。结论细胞色素C能够下调bcl-2 mRNA及其蛋白的表达,上调fas mRNA及其蛋白的表达,从而可以诱导HL-60细胞的凋亡。     

钙及钙加足叶乙甙在诱导人T淋巴细胞细胞株（CEM）细胞凋亡的作用

探讨 钙及钙加化疗药物足叶乙甙在诱导CEM细胞凋亡中的作用,采用CEM细胞与不同浓度的钙、足叶乙甙、钙加足叶乙甙共同培养,分别测定细胞内钙变化和凋亡细胞,并作DNA凝胶电泳凋亡的存在。结果显示：各组不同时间点均有细胞凋亡发生,同时伴有细胞内钙增加。因而,钙可诱导CEM细胞凋亡,并可协同化疗药物促进细胞凋亡;细胞凋亡发生与细胞内钙浓度有关。     

K562、HL—60细胞端粒酶催化亚单位的表达

目的 探讨RT－PCR法分析肿瘤细胞人端粒酶逆转录酶（hTERT)-mRNA表达水平的临床应用价值。方法 以β-actin为内对照,采用RT－PCR法测定K562、HL－60细胞及正常人外周血的hTERT-mRNA表达水平。结果 K562、HL－60细胞hTERT表现出高的表达水平,相反,正常人外周血无或低表达。结论 RT－PCR分析hTERT-mRNA表达的方法具有特异性、敏感性高,易定量,操作简单,快速等特点,可应用于临床。     

去铁胺诱导白血病细胞HL-60凋亡线粒体膜电位变化的研究

近年来国外的研究发现，铁螯合剂可抑制多种肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡，有望成为一种新的治疗肿瘤的药物，而国内相关研究较少。新近对铁螯合剂——去铁胺(deferoxamine，DFO)诱导白血病细胞凋亡的作用及其凋亡机理进行了探讨。