生长因子与晶体上皮细胞

白内障在致盲眼病的发生率中占首位。随着白内障囊外摘除术及人工晶体植入术的广泛开展 ,术后患者短期内视力可提高至较可观的水平。但术后 4 0 %的成年人和几乎 10 0 %的儿童发生晶体后囊混浊 (后发性白内障 ) ,导致视力再度下降。残留的晶体上皮细胞增殖是其形成原因。近年来的研究表明生长因子在促进晶体上皮细胞增殖、迁移、分化方面发挥着重要作用〔1～ 3〕。本文就生长因子与晶体上皮细胞的关系作一综述。一、生长因子概述生长因子是机体在有丝分裂原作用下 ,由体细胞产生的 ,在体内和体外对细胞的生长具有促进或抑制作用的物质。除促…     

转化生长因子—β对角膜上皮细胞体外生长的调节作用

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一种多功能多肽，对许多类型细胞的增殖和分化，以及组织的创伤修复反应具有重要的调节作用。本实验观察了ＴＧＦ－β及其联合表皮生长因子（ＥＧＦ）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对离体兔角膜上皮细胞生长影响。结果显示：ＴＧＦ－β可降低剂量相关的上皮细胞的增殖能力：ＥＧＦ和ｂＦＧＦ可显著刺激上皮的增殖；ＴＧＦ－β可部分地对抗ＥＧＦ和ｂＦＧＦ的作用。提示：ＴＧＦ－β对角膜上     

表皮生长因子对晶体上皮细胞增殖影响的研究

目的 评价表皮生长因子对晶体上皮细胞增殖的影响。方法 在培养的牛和人晶体上皮细胞中添加ＥＧＦ,甲基噻唑基四唑法测定细胞增殖情况以及一抗体对ＥＧＦ作用的影响。结果ＥＧＦ浓度为１０＾－１－１０＾２μｇ／Ｌ对牛晶体上皮细胞增殖有促进作用,其中浓度为１０μｇ／Ｌ作用３天达到最大促增殖效果;ＥＧＦ浓度为１－１０＾２μｇ／Ｌ对人晶体上皮细胞增殖有促进作用,浓度为１０＾２μｇ／Ｌ具有最大促增殖效果。抗ＥＧＦＲ抗     

细胞生长因子对人晶体上皮细胞转铁蛋白mRNA表达的影响

目的 分析转化生长因子－β２和碱性成纤维细胞生长因子对培养的人晶体上皮细胞转铁蛋白ｍＲＮＡ表达的影响,方法 人晶体前囊膜取和于３岁以下各种原因死亡２４ｈ内的２０例（４０只眼）婴和眼球。晶体上皮细胞原代培养和传代培养,选用传代汇合后２周的细胞,分别用ＴＧＦ－β１和ｂＦＧＦ作用天,用异硫氰酸胍、酚、氯仿、异戊醇等抽提细胞总ＲＮＡ,选择转铁蛋白的核酸探针进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交,分析转铁蛋白ｍＲＮＡ的表     

人转化生长因子β诱导基因真核表达载体的构建及其对人角膜上皮细胞增生的影响

背景人转化生长因子-β诱导（TGFBI）基因是第一个被确定的角膜营养不良的致病基因,而TGFBI引起角膜营养不良的机制目前尚不清楚,研究TGFBI的功能对于揭示角膜营养不良的发病机制及了解角膜生理及病理功能都具有重要意义。目的构建人TGFBI基因的真核表达载体并将其转染于人角膜上皮细胞,探讨其对角膜上皮细胞增生及相关基因表达的影响。方法从角膜移植后剩余的供体角膜中提取人正常角膜组织总RNA,经逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）合成TGFBI cDNA,将TGFBI胶回收产物与载体pCMV—N-HA分别进行双酶切,取连接产物10μl转化100μl大肠杆菌感受态DH5α克隆入真核表达载体pCMV—N—HA,以菌落PCR和EcoRV、XhoI双酶切法测序鉴定。设置重组质粒pCMV—N—HA—TGFBI转染组、空质粒pCMV—N—HA转染组、阴性对照组及pGFP—C2转染对照组,以测定重组质粒转染率。重组质粒pCMV-N—HA—TGFBI转染人角膜上皮细胞,激光共焦显微镜下观察转染pGFP—C2后增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的表达,用细胞计数试剂盒8（CCK-8法）检测转染细胞的增生情况,SYBR荧光实时定量PCR和Western blot法检测TGFBI、基质金属蛋白酶（MMPs）、组织金属蛋白酶抑制剂（TIMP）蛋白及其mRNA在转染后角膜上皮细胞的表达。结果pCMV—N-HA—TGFBI阳性克隆质粒进行经EcoRV和XhoI双酶切鉴定测序结果显示,扩增的TGFBI cDNA以正确序列和方式插入载体,pGFP—C2载体转染人角膜上皮细胞后48h共焦显微镜下可见EGFP的表达,转染效率为70％。重组质粒pCMV—N—HA-TGFBI转染组TGFBI mRNA的表达明显高于空质粒pCMV—N—HA转染组和阴性对照组,TGFBI蛋白仅在pCMV—N-HA．TGFBI转染组表达。CCK-8法显示重组质粒pCMV—N-HA-TGFBI转染组、空质粒pCMV—N—HA转染组和阴性对照组间角膜上皮的吸光度（A450）值的差异无统计学意义（F=3．34,P〉0．05）。荧光实时定量PCR结果显示,重组质粒pCMV-N—HA-TGFBI转染组中MMP,mRNA、MMP,mRNA转录水平比空质粒pCMV—N—HA转染组和阴性对照组均升高（P〈0．05）,而TIMP,mRNA则明显下降（P〈0．05）;Western blot结果证实MMP1、MMP3、TIMP1蛋白表达规律相同（P〈0．05）。结论人TGFBI基因真核表达载体可被成功构建并在人角膜上皮细胞中呈过表达。TGFBI可能是通过MMP1、MMP3及TIMP1的表达变化来增加细胞外基质的降解,从而参与角膜的某些生理病理过程。     

转化生长因子β及其对晶体上皮细胞的作用

本文综述转化生长因子β（TGF－β）在细胞中的表达和激活过程，TGF－β具有的生物学功能，及其在眼内不同细胞的分布。特别介绍了TGF－β对晶体上皮细胞的作用。     

转化生长因子β诱导晶状体上皮细胞凋亡

目的 探讨转化生长因子β（ＰＧＦ－β）对体外培养的牛眼晶状体上皮细胞凋亡的作用。方法 ＭＴＴ法测定细胞经不同浓度ＴＧＦ－β作用后的增殖情况;以ＴＵＮＥＬ技术研究ＴＧＦ－β作用不同时间后细胞凋亡的变化。结果 ＴＧＦ－β可显著抑制晶状体上皮细胞的增殖,抑制率高达３５％。原位凋亡测定显示ＴＧＦ－β作用３０ｍｉｎ至８小时可明显诱导晶体上皮细胞凋亡,阳性细胞核由边缘着色逐渐变为整个核均匀 以。结论 转化生长     

碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-I及其协同作用对牛晶体上皮细胞增殖的影响

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）、胰岛素样生长因子Ｉ（ｉｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒＩ,ＩＧＦⅠ） 及二者的共同作用对体外牛晶体上皮细胞（ｂｏｖｉｎｅ ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ,ＢＬＥＣ）增殖的影响。方法　ＢＬＥＣ原代培养,取第４ 代细胞种入２４ 孔板,加入不同浓度的ｂＦＧＦ、ＩＧＦⅠ、ｂＦＧＦ＋ ２０ μｇ／ＬＩＧＦⅠ,２０ ｈ 后加入３ＨＴＤＲ,１６ ｈ 后作液闪计数。结果　一定浓度的ｂＦＧＦ（１～１００ μｇ／Ｌ） 、ＩＧＦⅠ（２０～１００ μｇ／Ｌ） 在体外有促进ＢＬＥＣ 增殖的作用（ Ｐ＜ ０－０１ ） ,２０ μｇ／Ｌ的ＩＧＦⅠ可增加ｂＦＧＦ的促ＢＬＥＣ增殖作用。结论　生长因子及它们之间的协同作用在促进晶体上皮细胞异常增殖的过程中起重要作用。     

卡巴胆碱对人视网膜色素上皮细胞转化生长因子β_2表达的调控

目的研究卡巴胆碱对人视网膜色素上皮（RPE）细胞株D407表达转化生长因子β2（TGF-β2）的调控,进而阐明胆碱能药物在近视眼巩膜重塑中的作用。方法常规培养D407细胞,药物干预前换用无血清培养基培养24h。将传代细胞分为实验组和空白组,实验组分别加入1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L卡巴胆碱,空白组不加药物。于处理后2、4、8、16、24、48h分别采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Westernblot法检测细胞中TGF-β2mRNA及TGF-β2蛋白的表达,分析时效与量效关系。结果空白组细胞TGF-β2mRNA、蛋白质表达水平恒定。实验组D407细胞中TGF-β2mRNA的表达随卡巴胆碱作用时间的延长而逐渐升高,差异有统计学意义（F=4455.148,P〈0.01）;且随卡巴胆碱浓度的升高逐渐增加,各组的总体比较差异有统计学意义（F=1102.240,P〈0.01）。卡巴胆碱浓度与干预时间对TGF-β2mRNA表达的影响存在交互作用（F=249.609,P〈0.01）。实验组D407细胞中TGF-β2蛋白的表达随时间延长而逐渐升高,各时间点的总体比较差异有统计学意义（F=2619.21,P〈0.01）,不同浓度卡巴胆碱组TGF-β2蛋白的表达总体比较差异有统计学意义（F=2918.62,P〈0.01）,卡巴胆碱浓度与干预时相TGF-β2蛋白表达的影响存在交互作用（F=186.02,P〈0.01）。结论 RPE细胞可表达TGF-β2,卡巴胆碱可以浓度和时间依赖的方式调控RPE细胞中TGF-β2的表达。     

槲皮素对转化生长因子β1介导的视网膜色素上皮细胞上皮-间质转化过程的影响

目的 探讨槲皮素对转化生长因子β1(TGF-β1)介导的视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖、迁移、I型胶原蛋白含量、上皮-间质转化相关标志物表达以及Smad信号通路的影响.方法 取人RPE细胞系(ARPE-19细胞)进行培养,依据干预药物浓度筛选结果设置4个组:对照组、10.0 mg·L-1 TGF-β1组、10.0 m...     

ALK5抑制剂对转化生长因子-β1（TGF-β1）致视网膜色素上皮细胞纤维化的干预作用

目的　探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-beta1，TGF-β1）对人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial，RPE）细胞向成纤维细胞转化的影响，及活化素受体样激酶5（activated receptor kinase 5，ALK5）抑制剂（SB-431542）对这一影响的干预作用。方法　体外培养人RPE细胞，随机分为对照组、TGF-β1处理组、TGF-β1+SB-431542处理组、SB-431542处理组。对照组不做任何处理，其余三组分别用10 μg·L^-1 TGF-β1、10 μg·L^-1 TGF-β1+30 μmol·L^-1 SB-431542、30 μmol·L^-1 SB-431542处理细胞24 h。MTT法检测各组RPE细胞增殖率；划痕实验观察各组处理后0 h、12 h、24 h RPE细胞迁移情况；免疫荧光法检测各组细胞ALK5蛋白的分布和表达；Western blot法检测各组ALK5、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、Ⅰ型胶原（collagen typeⅠ，ColⅠ）以及纤维粘连素（fibronectin，FN）蛋白的表达。结果　与对照组相比，TGF-β1作用于RPE细胞24 h后，可改变RPE细胞表型，使其呈成纤维细胞样外观，并明显促进RPE细胞增殖和迁移。10.0 g·L^-1 TGF-β1作用24 h后RPE细胞增殖率为对照组的（1.33±0.08）倍，30 μmol·L^-1 SB-431542作用24 h后RPE细胞增殖率为10.0 g·L^-1 TGF-β1处理组的（67.77±6.78）%。经TGF-β1作用24 h后RPE细胞内ALK5、VEGF、α-SMA、ColⅠ及FN蛋白的表达显著上调，分别是对照组的（3.69±0.37）倍、（1.76±0.05）倍、（2.58±0.18）倍、（1.86±0.11）倍、（1.74±0.08）倍；SB-431542可逆转TGF-β1诱导的ALK5、VEGF、α-SMA、ColⅠ及FN蛋白表达上调，分别是TGF-β1处理组的（67.73±5.15）%、（71.71±3.50）%、（79.87±0.05）%、（63.59±3.16）%、（83.07±2.31）%，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　TGF-β1可促进RPE细胞增殖、迁移，向成纤维细胞转化，并能显著上调RPE细胞内ALK5、VEGF、α-SMA、ColⅠ及FN蛋白的表达；SB-431542可通过抑制TGF-β1的作用而抑制RPE细胞的纤维化。     

碱性成纤维细胞生长因子及其对晶体上皮细胞增殖的促进作用

本介绍了碱性成纤维细胞生长因子的分布和来源，阐述其基本特性及主要的生物学功能。探讨ｂＦＧＦ对眼晶体上皮细胞的增殖促进作用和后囊混浊的发病机理以及ｂＦＧＦ的作用机制。     

生长因子对角膜上皮细胞损伤修复的作用

角膜上皮细胞是维持角膜正常生理功能的重要细胞。角膜上皮缺损,一般修复较快,但也有些角膜疾患可导致持续性角膜上皮缺损,从而此起一系列并发症,一些生长因子可促进角膜上皮的修复,开创了治疗角膜上皮持续缺损的新方法,本着重介绍与角膜上皮细胞关系密切的表皮生长因子（EGF）、血小板源性生长因子（PDGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、转化生长因子（TGF）、肝细胞生长因子（HGF）和角质细胞生长因子（KGF）的结构及其在角膜上皮细胞修复中的作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对牛眼晶体上皮细胞的促增殖作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对牛眼晶体上皮细胞的作用。方法首先进行牛眼晶体上皮细胞原代与传代培养；在第２代培养细胞中添加ｂＦＧＦ，浓度１０－２～１０２ｎｇ／ｍｌ，借助甲基噻唑基四唑（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）测定方法观察ｂＦＧＦ对晶体上皮细胞增殖的影响。结果牛眼晶体上皮细胞体外具有易于贴附、细胞融合较快以及生长迅速等特点。添加ｂＦＧＦ后，可促进晶体上皮细胞的增殖，尤其是１０２ｎｇ／ｍｌ显示出明显的促增殖作用。结论ｂＦＧＦ在促进白内障术后晶体上皮细胞的增殖及后囊混浊上起了重要作用。     

转化生长因子β受体在不同年龄大鼠晶状体上皮细胞中的表达

目的探讨转化生长因子β（transforming growth factor-β，TGF—β）受体在不同年龄SD大鼠晶状体上皮细胞中的表达变化及意义。方法按1、3、6个月鼠龄分为3组。采用晶状体前囊膜铺片方式。应用荧光免疫组化技术进行TGF—β受体TGF-βR1和TGF-βR2的荧光免疫组化染色，检测其蛋白水平的表达：采用剥取晶状体囊膜组织方法。应用RT—PCR技术检测TGF—βR1和TGF—βR2在转录水平的表达。结果在蛋白水平，TGF-βR1和TGF—βR2于1个月鼠龄组表达最强．IOD分别为478001±44417和778338±62596；3个月鼠龄组表达减弱。分别为360343±33196和360343±33196：6个月鼠龄组表达最弱。分别为225858±23483和274648±29801，组间差异有显著性（P〈0．05）。在转录水平，TGF—βR1和TGF-βR2mRNA表达量在1个月龄组分别为3．0±0．9和3．4±1．1；3个月龄组分别为2．1±0．6和2．6±0．8；6个月龄组分别为1．3±0．3和1．6±0．5．随着年龄的增加而减弱（P〈0．05）。结论大鼠晶状体上皮细胞中TGF—βR1和TGF-βR2的表达随年龄的增长而减弱，提示对TGF—β的敏感性与年龄呈负相关。     

转化生长因子β在白内障发生中的作用

转化生长因子β在白内障发生中的作用华西医科大学附一院眼科（成都６１００４１）孙静综述杨兰芬审校白内障，因为晶体混浊，可严重影响患者视力，甚至致盲。是眼科的一种常见病、多发病。目前在临床上大多通过外科手术（晶体囊外摘除术）摘除晶体，但疗效并不理想。有１...     

转化生长因子β及其受体与白内障发生的关系

随着对晶状体上皮细胞形态学及分子水平的研究,人们发现生长因子,尤其是转化生长因子β(transforming growthfactor β,TGF-β)对白内障的发生、发展起重要作用,并有望对其治疗提供新的线索.本文拟对这一方面的研究进展作一综述.     

晶体上皮细胞单克隆抗体的动物实验研究：第一部分晶体上皮细胞…

试图以免疫学方法制备特异性晶体上皮细胞膜单克隆抗体来抑制晶体上皮细胞的生长，以探索防止后发障的发生。共分四部分：１。晶体上皮细胞的培养；２，晶体上皮细胞膜单克隆抗体的制备；３，抗体的免疫学检测，４，所制备的单克隆抗体对动物和人的晶体上皮细胞的抑制作用。报告家兔晶体上细胞的原代和继代培养的方法并进行讨论。     

转化生长因子β与白内障

在众多的生长因子和细胞因子中，以转化生长因了β（ＴＧＦ－β）与白内障的关系最为密切。眼内介质存在着无活性的潜活ＴＧＦ－β和有活性的成熟ＴＧＦβ，在一定条例上潜活ＴＧＦ－β可活化为成熟ＴＧＦ－β受全，体外在ＴＧＦ－β作用下可发生白内障样改变，而ＴＧＦ－β的抑制物如α２－巨球蛋白可以防止这种改变，可见ＴＧＦ－β的白内障的发生和发展过程中起着重要的作用。本文对ＴＧＦ－β与白内障关系作一简要综述，供有关研     

人工晶体植入术后晶体上皮细胞的增殖和反应

人工晶体植入术后晶体上皮细胞的增殖和反应天津医学院世界人工晶体中国天津培训中心李筱荣，张惠敏，袁佳琴日本藤田保健卫生大学病院眼科张永品白内障是目前致盲的首要病因，囊外摘除和人工晶体植入无疑是现代白内障治疗的主要方法。尽管手术技巧、医疗器械和医学材料科...