CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中表达的初步研究

目的初步探讨CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中的表达情况。方法采用流式细胞术分别检测取98例急性脑梗死患者和50名健康体检者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞所占比例,并用双抗体夹心法检测各组血清TGF-B、IL-10和IL-2。结果急性脑梗死患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞水平显著高于对照组（P〈O．01）,血清中TGF-β、IL-10和IL-2显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在急性脑梗死患者外周血中表达显著升高,血清中的相关细胞因子参与诱导CD4^＋CD25^＋T细胞的生成,提示CD4^＋CD25^＋T细胞可能参与了急性脑梗死的发生、发展。     

调节性 T细胞在脓毒症中的作用研究进展

脓毒症是急诊及各大重症监护室( ICU)的常见疾病,免疫功能紊乱作为其发病机制是目前研究的热点,其中关于 T淋巴细胞的相关研究居多。病原体一旦入侵机体时,机体会同时启动固有免疫和适应性免疫系统,其中 CD4+T淋巴细胞在适应性免疫系统中起核心作用。 CD4+T淋巴细胞亚群中的调节性 T细胞( Treg细胞)作为一种负性免疫分子,在脓毒症中扮演着重要角色。该研究就 Treg细胞的来源、机制及在脓毒症中的作用展开综述,为临床上脓毒症的诊治及预后提供参考依据。     

Higher levels of HIV DNA in memory and naive CD4(+) T cell subsets of viremic compared to non-viremic patients after 18 and 24 months of HAART

The degree of infection of memory and naive CD4⁺ T cells in patients treated with HAART and with durable undetectable or detectable viral load in plasma was evaluated. The following two groups of patients were analyzed cross-sectionally: (i) patients with undetectable HIV RNA plasma levels during follow-up (responders); (ii) patients with no reduction or with rebound in HIV RNA levels during treatment (non-responders). Patients were examined following 6, 12, 18 and 24 months of HAART, respectively, by quantifying: (i) plasma HIV RNA load; (ii) CD4⁺ T cells; (iii) memory and naive CD4⁺ T cells; (iv) HIV DNA levels in memory and naive CD4⁺ T cells. HIV RNA plasma levels were significantly higher in non-responders vs responders at each time point (P<0.02), while CD4⁺ T cell counts as well as memory and naive CD4⁺ T cell levels were comparable in both viremic and non-viremic patients. However, higher HIV DNA values were observed in both memory and naive CD4⁺ T cells of non-responders vs responders after 18 and 24 months of HAART (P<0.02), suggesting an increased amount of HIV-infected naive CD4⁺ T cells and a sustained high degree of infection of memory CD4⁺ T cells. Immunological reconstitution following HAART might potentially be hampered in viremic patients despite the absolute increase in CD4⁺ T cell counts.     

TF3-H4对CD4~+CD25~+调节性T细胞和CD4~+CD25~-效应性T细胞早期活化的影响

目的观察1',2',3',7'-四氢茶黄素-3,3'-双没食子酸酯(TF3-H4)对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的影响,分析TF3-H4对两群功能相反的CD4+T细胞的作用。方法免疫磁珠分离BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞,加入ConA或PDB,和TF3-H4共同孵育12 h后收集细胞,流式细胞仪分析细胞表面早期活化标志CD69的表达。结果在ConA和PDB的作用下,两群细胞早期活化标志CD69的表达均升高。TF3-H4(20 mg.L-1)不能抑制PKC激动剂PDB激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69的表达,却能抑制ConA激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69表达;同时,TF3-H4也能明显抑制ConA激活的CD4+CD25+调节性T细胞的CD69表达。结论茶黄素衍生物TF3-H4可能经由TCR活化途径的上游抑制CD4+CD25-效应性T细胞活化;TF3-H4对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的抑制作用,可能是该类化合物发挥抗炎、抗肿瘤作用的机制之一。     

调节性T淋巴细胞在HCV感染者病程不同阶段的表达

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在HCV感染者病程不同阶段的表达及其意义。方法收集非活动性HCV感染33例(A组)、活动性HCV感染32例(B组)、慢性丙型肝炎56例(C组)、HCV相关性肝硬化47例(D组)、HCV相关性肝癌45例(E组)和健康对照者60例(F组),采用流式细胞术检测外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+Treg的表达频率,并进行统计学分析。结果 B、C、D、E组外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+Treg的表达频率均明显高于F组(P<0.01)。组间比较,A组患者外周血的CD4+CD25+Treg细胞表达频率明显低于B、C、D、E组(P<0.01),D、E组表达频率明显高于B、C组(P<0.01)。结论 HCV感染导致CD4+CD25+Treg细胞的增殖与活化,使机体对其的免疫清除不完全,从而促进HCV感染者疾病的进展和肝癌的发生。     

同种异体大鼠小肠移植中监测CD4+ T细胞和CD8+ T细胞数比值的意义

目的 探讨CD4+T细胞数/CD8+T细胞数作为大鼠同种异体小肠移植急性免疫排斥反应指标的可行性.方法 选取健康雄性成年SD、Wistar大鼠建立同种异体小肠移植模型,于大鼠术前和术后1、3、5、7、9d共6个时间段静脉取血,应用免疫荧光染色技术及流式细胞仪检测CD4+T细胞和CD8+T细胞百分率,并计算其比值.同期取移植小肠标本做组织学检测.结果 术后CD4+T细胞数和CD8+T细胞数比值前期增高后期降低.组织病理学检测发现术后小肠移植物的排斥反应由轻到重,术后第5天始CD4+T细胞数和CD8+T细胞数比值与急性免疫排斥反应程度呈正相关.结论 CD4+T细胞和CD8+T细胞数比值作为大鼠同种异体小肠移植术后急性免疫排斥反应的监测指标的可行性较大.     

支原体肺炎儿童外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平的变化及维生素A的调节作用

目的 探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)、T细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CDs水平的变化及临床意义;探讨体外实验时维生素A体内活性代谢产物视黄酸对MPP患儿外周血淋巴细胞CD4+ CD25+ Treg细胞、T细胞亚群CD3+、CD4+表达及CD4+/CD8+比率的调节干预作用.方法 选择2012年10-12月在空军总医院儿科确诊为MPP的20例住院患儿作为研究对象,其中10例患儿作为病例试验组,另10例患儿作为病例对照组(即未与视黄酸孵育),同期10例同龄健康儿童作为正常对照组.收集患儿及正常对照儿童外周血标本,分离单个核细胞,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+ Treg细胞、T细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平,病例试验组提取其淋巴细胞在体外培养基中加入一定量视黄酸共同培养孵育,再次测定CD4+ CD25+ Treg细胞、T细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平,将上述指标进行比较分析.结果 病例组患儿外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+ Treg细胞、CD4+/CD8+、CD3+百分比分别为(4.5±1.9)％、(1.3±0.9)％、(38.9±11.4)％,正常对照组儿童分别为(13.2±2.5)％、(7.9±3.0)％、(65.1±8.8)％,病例对照组明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),而与视黄酸共同孵育后病例试验组以上指标明显升高,分别上升至(9.2±3.8)％、(5.9±2.5)％、(81.3±11.6)％,与病例对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MPP患儿外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+ Treg细胞、CD3+T细胞表达明显受抑,CD4+/CD8+亚群比例异常,T细胞亚群数量及功能明显紊乱,而体外试验时维生素A体内活性代谢产物视黄酸干预后能增强淋巴细胞CD4+ CD25+ Treg细胞、CD3+ T细胞表达,恢复CD4+/CD8+亚群比例,纠正T细胞亚群功能失衡,从而增强、协调机体免疫、抗感染能力,为维生素A辅助治疗MPP提高参考.     

山茱萸多糖的抗肿瘤作用及其免疫机制

目的:研究山茱萸多糖的抗肿瘤作用及其免疫机制。方法:采用S180肉瘤小鼠模型作为研究对象,观察山茱萸多糖的体内外抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞、白细胞介素IL-2和白细胞介素IL-4的调节作用,并与阴性对照组进行比较。结果:山茱萸多糖对S180有明显的瘤抑制作用(P<0.01),可以使外周血CD4+T细胞表达增加,CD8+T细胞表达降低,提高白细胞介素IL-2水平、降低白细胞介素IL-4水平,且与剂量和浓度呈正相关。结论:山茱萸多糖通过调节荷瘤小鼠异常的免疫状态而发挥抗肿瘤作用。     

Nanocarriers for ocular delivery for possible benefits in the treatment of anterior uveitis: focus on current paradigms and future directions

Introduction: Many therapeutic strategies have been adopted in the treatment of anterior uveitis, and it includes corticosteroids and NSAIDs. But, the successful delivery of these drugs is restricted due to limitations of conventional formulation. This review emphasizes on the possible benefits and strategies for development of various novel nanocarriers.

Areas covered: The article explores the various polymers involved in the preparation of novel nanocarriers like polymeric nanoparticles, micelles, microemulsion, liposomes and cubosomes. Reported clinical experimental findings are screened and also discussed in this review.

Expert opinion: The principle behind the development of different nanocarriers is to overcome the limitations imposed by conventional formulations. Several efforts have been made by the researchers in achieving these objectives, but the major challenge with nanosystems remains the requirement of excipients that have unknown or objectionable toxicity profile and are not approved by regulatory authorities. This review is an attempt to provide comprehensive information for the scientists working in the concerned research area.     

SIVmac239对猕猴B淋巴细胞增殖的抑制机制

目的：探讨SIVmac239感染CD4^＋T淋巴细胞后,能否产生某些可抑制B淋巴细胞生长的活性因子,及其抑制作用的机制,为HIV／AIDS进一步的病原学研究和控制提供有益的线索。方法：用MTT实验观察不同时间收集的SIVmac239感染的CD4^＋T淋巴细胞上清和未感染SIVmac239的CD4^＋T淋巴细胞的上清对猕猴B淋巴细胞生长的抑制作用,用3Hthymidine uptake ashy判断这些上清是否抑制B淋巴细胞的DNA合成,用凝胶电泳方法检测DNA合成被抑制是否为凋亡的机制,用Western blot方法检测Cyclin D1的表达情况。结果：SIVmac239感染的CD4^＋T淋巴细胞上清含有抑制猕猴B淋巴细胞生长的因子,并且,其抑制效果随着作用时间的延长而增加。这些因子可较强的抑制CD4;T淋巴细胞的DNA合成,最高抑制率可达81％。凝胶试验结果未见DNA梯状条带。Western blot试验发现CyclinD1表达被抑制。结论：SIVraac239感染CD4^＋T淋巴细胞可产生抑制B淋巴细胞生长的因子。此因子可较强的抑制猕猴B淋巴细胞DNA的合成,但并不引起B淋巴细胞凋亡。其主要机制为抑制猕猴B淋巴细胞的细胞周期蛋白D1的产生,使B淋巴细胞停止在G1期．即抑制作用的主要的机刺为细胞被捕获在细胞周期的G1期。本研究结果发现一个新的现象,即猕猴B淋巴细胞虽然不被SIVmac239感染．但可被SIVmac239感染的CD4^＋T淋巴细胞产生的细胞因子所捕获,抑制其细胞DNA合成,从而可导致该细胞的功能发生障碍和影响机体体液免疫作用。     

4种糖皮质滴眼液治疗急性前葡萄膜炎的成本-效果分析

目的:比较4种糖皮质滴眼液治疗急性前葡萄膜炎的成本-效果。方法:将195例急性前葡萄膜炎患者分为A(复方新霉素多粘菌素滴眼液)、B(氟米龙滴眼液)、C(醋酸泼尼松龙滴眼液)、D(妥布霉素/地塞米松滴眼液)4组,4组患者都使用相同剂量的同种散瞳药与抗生素滴眼液作为辅助用药,各组结果运用药物经济学原理进行成本-效果分析。结果:在平均疗程内,A、B、C、D组成本分别为42.10、45.40、73.80、80.00元;有效率分别为93.1%、94.0%、96.8%、90.6%;在有效率不变的情况下分别下调各组药品成本价格10%,对最终结果无影响;B、C、D组药品价格需要分别下调6.83%、40.96%、49.04%,方可获得与A组相同的成本-效果比。结论:从药物经济学角度考虑,A方案较佳。     

尿毒症维持性血液透析患者T细胞亚群监测的临床意义探讨

目的观察尿毒症维持性血液透析患者不同透析阶段各T淋巴细胞亚群的分布状况。方法通过流式细胞术(FCM)检测20例尿毒症维持性血液透析患者不同透析阶段外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+T细胞亚群的水平,16例正常外周血作为对照。结果透析前患者外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞亚群的比例均明显低于正常对照,透析后各T细胞亚群均较透析前明显上升(P<0.05),达到正常水平,而各透析阶段之间的分布情况未能显示出统计学差异。并且不同透析阶段的CD4/CD8比值均保持平衡状态。不同透析阶段患者CD4+CD25+T细胞均低于正常对照,而透析1年后的CD4+CD25+T细胞比率明显减低(P<0.05)。患者首次透析前体内的低白蛋白、高尿素氮水平与各T细胞亚群低下明显相关。结论尿毒症患者透析前存在严重的T细胞亚群低下,透析后CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞水平得到提高,但不能改善CD4+CD25+T细胞的低下。监测患者T细胞亚群的变化,一定程度上反映了患者体内的T细胞免疫功能状态。     

凉血解毒方药对原发免疫性血小板减少症患者外周血CD4＋CD2＋5调节性 T 细胞水平的影响

目的：观察原发免疫性血小板减少症（ ITP）患者治疗前后外周血CD4＋CD2＋5调节性T细胞水平变化,探讨凉血解毒方药对ITP患者CD4＋CD2＋5调节性T细胞的作用。方法选取56例ITP患者,男12例,女44例;年龄18～62岁,中位年龄29岁。给以凉血解毒方药治疗（地黄止血胶囊2‘．0 g,3次／d,口服,凉血解毒中草药煎剂升板汤,1剂／d）。患者于治疗前、治疗后90 d分别采取外周静脉血,采用流式细胞术检测CD4＋CD2＋5调节性T细胞水平。20例健康体检者为正常对照组。结果治疗后第90天,总有效率为73．2％。56例ITP患者治疗前外周血 CD4＋CD2＋5调节性T细胞表达水平低于正常对照组[（1．01±0．67）％,（2．81±0．52）％],差异有统计学意义（ P ＜0．05）;重症ITP患者CD4＋CD2＋5调节性 T细胞水平低于非重症患者[（0．71±0．23）％,（1．48±0．64）％],差异有统计学意义（ P ＜0．01）;患者治疗后90 d CD＋4 CD2＋5调节性T细胞水平高于治疗前[（1．93±0．53）％,（10．1±0．67）％],与治疗前比较差异有统计学意义（ P ＜0．05）;治疗后有效组CD4＋CD2＋5调节性T细胞水平高于无效组,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论 ITP 患者外周血CD 4＋CD 2＋5调节性 T 细胞水平低于正常对照组（ P ＜0．05）;凉血解毒方药提升CD4＋CD2＋5调节性T 细胞水平可能是治疗ITP的疗效机制。     

霉酚酸酯对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血CD4~+ CD25+T细胞的影响

目的研究霉酚酸酯(MMF)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的治疗作用及血CD4+CD25+T细胞的影响。方法用豚鼠全脊髓匀浆和完全弗氏佐剂制成的完全抗原免疫Wistar大鼠制作EAE大鼠模型,以生理盐水和完全弗氏佐剂注射的Wistar大鼠作为对照。造模成功且存活的大鼠为25只,随机分为4组:MMF大剂量组(30 mg.kg-1.d-1,n=6只),MMF小剂量组(20 mg.kg-1.d-1,n=6只),甲基强的松龙组(30 mg.kg-1.d-1,n=6只),模型组(生理盐水,n=7只),对照组(n=6只)。给予相应药物治疗14 d,每天观察记录神经功能评分,14 d后流式细胞术观察各组血CD4+CD25+T细胞百分数,HE染色观察脑、脊髓组织病理变化。结果 EAE大鼠的造模成功率为0.721。与对照组相比,EAE模型大鼠脑脊髓组织病理学变化主要表现为血管周围有大量炎细胞浸润,神经功能评分明显增加,血CD4+CD25+T细胞百分数明显减少(P<0.01);与模型组相比,用MMF及甲基强的松龙治疗的各组大鼠神经功能评分下降,病理表现有不同程度的减轻,血CD4+CD25+T细胞百分数增加(P<0.01),且大剂量MMF组疗效优于小剂量MMF组和甲基强的松龙组(P<0.01);小剂量MMF组和甲基强的松龙组疗效差异无显著性。结论 MMF可能通过上调CD4+CD25+T细胞比例发挥免疫抑制作用。     

幽门螺杆菌感染与儿童支气管哮喘患儿循环CD4+CD25+调节性T细胞的相关性分析

目的 探究幽门螺杆菌感染与儿童支气管哮喘患儿循环CD4+CD25+调节性T细胞的相关性.方法 选取本院2015年1月至2016年6月期间收治的支气管哮喘患儿共160例,根据患儿哮喘的发作情况将这160例患儿分为发作组和缓解组,同期选取80例健康儿童作为对照组,检测哮喘儿童的幽门螺杆菌感染情况,比较3组患者CD4+CD25+调节性T细胞的情况.结果 发作组患儿幽门螺杆菌阳性率显著高于缓解组(42.50％比22.50％),差异有统计学意义(x2=12.266,P＜0.05);幽门螺杆菌阴性组患儿CD4+CD25+调节性T细胞水平显著高于阳性组(8.01±2.43)比(5.38±2.16)],差异有统计学意义(F=5.554,P＜0.05).结论 发生幽门螺杆菌感染时,感染加重导致免疫功能异常,使CD4+CD25+调节性T细胞水平降低,从而可能导致了支气管哮喘的发生.     

Osteopontin exacerbates the progression of experimental autoimmune myasthenia gravis by affecting the differentiation of T cell subsets

Osteopontin (OPN) is a multifunctional extracellular matrix phosphoprotein that has a specific and complicated structure, and contributes to numerous physiological and pathological activities. The mechanism of OPN in many diseases has been confirmed; however, the role of OPN in myasthenia gravis (MG) remains unclear. In this study, we recombined rat OPN protein in vitro, and assessed how OPN affects the development of autoimmunity using an experimental autoimmune myasthenia gravis (EAMG) rat model. The results showed that the concentration of OPN in serum was up-regulated. Both mRNA and protein levels in splenocytes increased in the EAMG model. OPN treatment in vitro strongly promoted the differentiation of Th1 cells, and inhibited the differentiation of Treg cells. Intraperitoneal injection of OPN revealed the early incidence of EAMG, and more serious disease. This effect was accompanied by an increased percentage of Th1 cells. In conclusion, OPN likely exacerbates the pathogenesis of EAMG by promoting the differentiation of Th1 cells and inhibiting the differentiation of Treg cells.     

同种移植排斥反应中T细胞间接识别途径作用的研究

目的　CD+ 4T细胞通过间接识别途径识别MHC Ⅰ类移植抗原而活化已在离体实验中得到证实 ,但体内实验尚未见报道。方法　bml小鼠 (H 2Kbm1∶Kbm1,Db,Ⅰ Ab)的皮肤片分别移植到①B6小鼠 (H 2 b∶Kb,Db,Ⅰ Ab,n =8) ;②B6CD / 8小鼠 (H 2 b∶Kb,Db,Ⅰ Ab,CD / 8,n =8) ;③用抗CD4 抗体处理的B6CD / 8小鼠体上 (n =8)。观察移植皮肤的生长时间 ;用流式细胞仪 (FACScan)观察各组小鼠内T细胞亚群的变化。各组数据用分组或配对t检验进行数据统计。结果　尽管CD / 8小鼠体内未发现CD+ 8T细胞存在 ,但很快排斥了bm1皮肤移植片 (2 1 9d± 1 9d) ;而用抗CD4 抗体处理的B6CD / 8小鼠却长时间接受bm1皮肤移植片 (>47 5d± 3 8d) ;用流式细胞仪发现CD+ 4T细胞明显增殖活化并被抗CD4 抗体抑制。结论　CD+ 4T细胞通过间接识别途径活化并导致同种相异MHC Ⅰ类移植物的排斥。     

血液CD3＋CD4＋／CD3＋CD8＋T细胞水平对肺部真菌感染的影响

目的探讨血液CD3＋CD4＋／CD3＋CD8＋T淋巴细胞水平对非HIV感染患者发生侵袭性肺部真菌感染的影响。方法根据入选标准及诊治规范,入选IPFI组患者61例,非IPFI肺炎组患者47例及同期健康对照组体检者30例。收集记录上述患者的临床资料,观察3组病例CD3CD;T淋巴细胞百分比,CD3＋CD8＋T淋巴细胞百分比及CD3＋CD4＋／CD3＋CD8＋T淋巴细胞比值情况。结果白色念珠菌仍是最常见的致病真菌,占总检出菌株数的46．03％,同时本研究曲霉菌（30．16％）感染也占有相当高的比例。CD3＋CD4＋T淋巴细胞百分比及CD3＋CD4＋／CD3＋CD8＋T细胞比值水平,IPFI组较非IPFI肺炎组（t=5．910,P〈0．05;t=7．395,P〈0．05）及健康对照组（t=6．443,P〈0．05;t=7．428,P〈0．05）均明显下降。结论血液CD4＋／CD8＋T淋巴细胞水平测定有助于早期发现肺部真菌感染的发生。     

Role of the appendix in the pathogenesis of ulcerative colitis

Although human appendix has been considered as a vestigial remnant, recent observations have focused attention on the role of the appendix in the pathogenesis of ulcerative colitis (UC). Many case-control studies suggest that previous appendectomy is rare in UC patients. This inverse relation is limited to patients who undergo appendectomy before the age of 20 years. Moreover, several investigators reported the improvement of UC after appendectomy, especially in young patients. In the appendix of UC patients, the CD4/CD8 ratio is significantly increased, and the proportion of CD4+CD69+ (early activation antigen) T cells, but not of CD4+HLA-DR+ (mature activation antigen) T cells, is also significantly increased. These findings suggest that the appendix may be a priming site in the development of UC. Further studies including analysis of CD4+ and CD8+ T cells are necessary to clarify the role of the appendix in the pathogenesis of UC. Received 18 July 2006; accepted 23 August 2006 This study was supported by Grant-in-Aid for Scientific Research (C) from the Ministry of Culture and Science of Japan (16560645); Grant-in-Aid for “Research for the Future” Program from The Japan Society for the Promotion of Science (JSPS-RFTF97I00201); Supporting in Research Founds from The Japanese Foundation for Research and Promotion of Endoscopy (JFE-1997); Shimidzu Immunology Foundation, 2000; Tenri Foundation for Medical Research, 1997-2000; Health and Labour Science Research Grants from the Japanese Ministry of Health, Labour and Welfare, and Research on Measures for Intractable Disease (Inflammatory Bowel Disease); a Grant from the “The 21st Century Center of Excellence (COE)” Program of the Ministry of Education, Culture, Sports, Science and Technology.