二甲基氨氯吡咪诱导HL-60细胞分化(英文)

目的:研究阿米洛利衍生物二甲基阿米洛利(DMA)对培养的HL-60细胞增殖和分化的影响。方法:MTT法测定细胞增殖,细胞染色和NBT还原试验测定细胞分化。结果:DMA以浓度依赖方式抑制HL-60细胞增殖,药物作用96小时测得半数抑制浓度(IC_(50))为31.7(95％可信限为6.3-57.1)μmol·L~(-1)。DMA诱导HL-60细胞向粒细胞系分化。加入DMA100μmol·L~(-1)作用3天,细胞分化率从6.5％升至70％。阿米洛利及阿米洛利的另二个衍生物对细胞分化无明显作用。结论:二甲基阿米洛利抑制HL-60细胞增殖和诱导HL-60细胞分化。     

Costunolide induces differentiation of human leukemia HL-60 cells

Costunolide has been reported to be a cytotoxic and chemopreventive agent. This work investigated the mechanism of the antiproliferative effect of costunolide and determined that it induced differentiation of the human leukemia cell line HL-60. Costunolide exhibited a potent antiproliferative activity against HL-60 cells. It was also found to be a potent inducer of differentiation in human leukemia derived HL-60 cells through the examination of differentiation markers, as assessed by the reduction of nitroblue-tetrazolium, the increase in esterase activities and phagocytic activity, morphology change and the expression of CD14 and CD66b surface antigens. These results, accompanied by a decline in the expression of c-myc protein, suggest that costunolide induces differentiation of human leukemia cells to granulocytes and monocytes/macrophages lineage.     

盐酸小檗碱对HL-60细胞增殖与分化的影响

目的　研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL 6 0细胞增殖与分化的影响。方法　应用生长曲线测定法、克隆形成实验检测药物对HL 6 0细胞生长抑制作用 ;细胞分化根据细胞形态、硝基蓝四氮唑 (NBT)还原能力、细胞表面标记的改变来决定 ;细胞周期变化用流式细胞仪测定。结果　HL 6 0细胞经小檗碱处理后生长明显受抑 ,呈时间和浓度依赖性。选择 1、2、4、8mg·L-1小檗碱作用于HL 6 0细胞 ,动态观察发现 ,HL 6 0细胞向成熟细胞分化 :细胞核变小 ,核浆比减少 ;NBT还原能力增强 ;CD11b表达升高。细胞周期分析发现 ,小檗碱处理后细胞阻滞于G0 /G1期 ,S期细胞明显减少。结论　盐酸小檗碱可抑制HL 6 0细胞的增殖 ,并诱导HL 6 0细胞向成熟细胞分化。     

氢醌抑制HL-60细胞分化上调过氧化物酶2-Cys过氧化物氧还蛋白表达

目的研究氢醌(HQ)对HL-60细胞向单核系、粒系分化的影响。方法 HQ 1,5和50μmo·lL-1分别与豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)20 nmol·L-1或1.25%DMSO共同处理细胞,分别于48和96 h收集细胞。通过观察细胞形态、硝基四氮唑蓝还原反应鉴定细胞分化;CCK-8检测细胞增殖,荧光定量PCR检测2-Cys过氧化物氧还蛋白(Prxs)基因表达的变化;Western印迹检测2-Cys Prxs蛋白表达的变化。结果在HQ1~50μmol·L-1作用下,HL-60细胞向单核系分化受到抑制;HQ1和5μmol·L-1对DMSO诱导的粒系分化无影响,但HQ50μmol·L-1可抑制细胞向粒系分化。HQ5和50μmol·L-1与诱导剂的共同作用可以抑制HL-60细胞增殖。与正常对照组比较,PMA和DMSO组2-Cys Prxs基因表达水平均有降低的趋势,HQ1,5和50μmol.L-1+PMA20 nmol·L-1组PrxⅠ,PrxⅢ和PrxⅣ各个基因表达水平与PMA组比较均有增高的趋势;DMSO诱导分化组中仅HQ 50μmol·L-1+1.25%DMSO组PrxⅠ和PrxⅢ基因表达水平与单独DMSO组比较显著增高(P<0.05)。结论 HQ1和5μmol.L-1可以抑制HL-60细胞向单核系分化,HQ50μmol·L-1可抑制细胞向粒系分化,并上调PrxⅠ和PrxⅢ基因的表达。     

华蟾素诱导HL-60细胞凋亡及机制研究

目的：观察华蟾素（cinobufacini）对白血病HL-60细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡作用的机制。方法：以HL-60细胞为研究对象，采用MTT法观察细胞增殖作用；Annexin V-FITC／PI双染和吖啶橙／溴乙锭（AO／EB）荧光染色法检测细胞凋亡；罗丹明染色法检测线粒体膜电位；分光光度法检测Caspase-3活性。结果：在0．78～6．25μg&#183;ml^-1，华蟾素能明显的抑制HL-60细胞的增殖；华蟾素作用24h后，AnnexinV阳性的细胞从7．81％增加至66．02％，而且在荧光显微镜下可以明显观察到凋亡细胞；线粒体膜电位下降和Caspase-3活性升高。结论：华蟾素能够抑制HL-60细胞增殖，这种作用与其诱导细胞凋亡破坏线粒体功能和激活Caspase-3有关。     

阿霉素在人白血病敏感细胞株HL-60和多药耐药细胞株HL-60/ADR的分布和积聚变化

目的了解化疗药物阿霉素(ADR)在人白血病敏感细胞株HL-60和多药耐药细胞株HL-60/ADR细胞内的分布和积聚变化及其与耐药的关系。方法应用共聚焦激光扫描显微镜和流式细胞术研究ADR在细胞内的分布和积聚,以及维拉帕米、BSO、布雷菲尔得菌素、氯喹对细胞内ADR异常分布的影响。以3种特异染色线粒体、高尔基体和溶酶体的荧光物质Rhodamine123、NBD-ceramide和中性红作为探针,鉴定分隔储留ADR的细胞器。结果与ADR在HL-60细胞核、胞质均匀分布不同,在HL-60/ADR,ADR呈点棘状分布于细胞质,核内ADR荧光很少。这种分布方式与NBD-ceramide荧光在该细胞的分布极其相似。BSO和布雷菲尔得菌素可逆转ADR在HL-60/ADR的异常分布和积聚,而维拉帕米和氯喹无此作用。结论ADR在耐药细胞的异常分布和积聚与肿瘤细胞耐药的形成有关。     

淫羊藿甙对HL－60细胞增殖与分化的影响

为寻找新的肿瘤细胞诱导分化剂，采用ＭＴＴ比色分析法和形态定量分析技术检测了淫羊藿甙对人急性早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）增殖与分化的影响。结果表明：淫羊藿甙可以抑制ＨＬ－６０细胞的增殖，呈剂量依赖关系；选择６２．５、１２５、２５０ｍｇ·Ｌ－１进行动态观察，发现１２ｈ后即可发挥抑制作用。淫羊藿甙１００ｍｇ·Ｌ－１作用４８ｈ后ＨＬ－６０细胞ＮＢＴ还原能力明显增强（Ｐ＜０．０１），细胞核面积减小，平均光密度（ＭＯＤ）增加，积分光密度减小（ＩＯＤ）；光镜观察结果显示，淫羊藿甙作用后的ＨＬ－６０细胞发生明显变化，细胞核体积减小，细胞核呈杆状或分叶状。上述结果提示，淫羊藿甙对ＨＬ－６０细胞有诱导分化作用。     

淫羊藿甙对HL－60细胞增殖与分化的影响

为寻找新的肿瘤细胞诱导分化剂，采用ＭＴＴ比色分析法和形态定量分析技术检测了淫羊藿甙对人急性早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）增殖与分化的影响。结果表明：淫羊藿甙可以抑制ＨＬ－６０细胞的增殖，呈剂量依赖关系；选择６２．５、１２５、２５０ｍｇ·Ｌ－１进行动态观察，发现１２ｈ后即可发挥抑制作用。淫羊藿甙１００ｍｇ·Ｌ－１作用４８ｈ后ＨＬ－６０细胞ＮＢＴ还原能力明显增强（Ｐ＜０．０１），细胞核面积减小，平均光密度（ＭＯＤ）增加，积分光密度减小（ＩＯＤ）；光镜观察结果显示，淫羊藿甙作用后的ＨＬ－６０细胞发生明显变化，细胞核体积减小，细胞核呈杆状或分叶状。上述结果提示，淫羊藿甙对ＨＬ－６０细胞有诱导分化作用。     

雄黄通过ROS依赖的线粒体途径诱导HL-60细胞分化(英文)

含砷药物在传统中药中用于治疗多种疾病,其中雄黄近年来被用于治疗急性早幼粒细胞白血病,其疗效与三氧化二砷制剂相近,但安全性相对较高。在雄黄纳米微粒诱导的HL-60细胞(人早幼粒白血病细胞)分化早期,细胞内活性氧水平降低p38MAPK抑制剂(SB202190)增强雄黄的诱导分化作用,而线粒体膜通透性转运孔抑制剂(环孢菌素A)减弱雄黄的诱导分化作用。这些实验结果表明,雄黄诱导的HL-60细胞分化与细胞内活性氧水平的降低和线粒体膜通透性转运孔的开放密切相关。该研究为探索含砷抗白血病药物的分子机制提供了新的线索。     

三丁酸甘油酯对白血病细胞株HL-60体外作用的研究

目的探讨三丁酸甘油酯(TB)对白血病细胞株HL-60细胞增殖的抑制作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法采用MTT法观察细胞增殖变化。应用免疫组化检测抑癌基因P16的表达。应用流式细胞仪观察细胞周期的改变。通过DNA电泳观察细胞凋亡。结果TB可以抑制细胞增殖。1.0 mmol/L的TB作用72 h,有典型的DNA梯形条带。细胞周期阻滞在G0/G1期。结论TB能抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调P16表达有关。     

Bcl-2 siRNA抑制HL-60细胞bcl-2基因表达

目的应用RNA干扰技术观察Bcl2siRNA对白血病细胞HL60中bcl2基因表达的影响,探讨siRNA技术在白血病治疗中的作用。方法利用化学合成法体外化学合成Bcl2siRNA,将Bcl2siRNA与HL60细胞共孵育,用MTT法、荧光染色观察细胞增殖及凋亡情况,用RTPCR检测Bcl2mRNA水平,用荧光染色测Bcl2蛋白水平。结果Bcl2siRNA与HL60细胞共孵育48h后,HL60细胞凋亡率增加,Bcl2mRNA水平下调,Bcl2蛋白表达水平降低。转染GAPDHsiRNA组的细胞对Bcl2表达无影响。结论Bcl2siRNA能够特异性降低Bcl2mRNA水平及蛋白质的表达,促进HL60细胞凋亡。     

地西他滨联合丙戊酸钠对白血病细胞株HL-60促凋亡和分化的影响

目的探讨地西他滨（DCA）和丙戊酸钠（VPA）联用对白血病细胞株HL-60促凋亡和分化诱导的协同作用。方法白血病细胞株HL-60分别与以下药物终浓度组作用48 h:对照组,DCA单药A组(1.0μmol·L^-1),DCA单药B组(4.0μmol·L^-1),VPA单药组(2.0 mmol·L^-1),联合用药A组(IDCA 1.0μmol·L^-1+VPA 2.0 mmol·L^-1),联合用药B组(DCA 4.0μmol·L^-1+VPA2.0 mmol·L^-1)。应用Annexin V-FTTC/PI标记法检测早期凋亡率,流式细胞术检测CD34、CD117平均荧光强度（MFI）以及CD11b、CD14表达率。结果联合用药A、B组的凋亡率高于其各自的单药组,差异具有高度统计学意义（P<0.01）;联合用药A、B组的CD117和CD34 MFI低于其各自的单药组,差异具有高度统计学意义（P<0.01）;联合用药A组的CD11b和CD14表达率以及联合用药B组的CD11b表达率均低于其各自的单药组,差异具有高度统计学意义（P<0.01）。结论白血病细胞株HL-60中VPA能显著增强DCA的促凋亡分化作用。     

维生素A酸诱导分化的人早幼粒白血病细胞系HL-60的呼吸爆发功能

借助于自旋捕集剂DMPO,用电子自旋共振波谱仪直接定量检测了经维生素A酸(RA)诱导的人早幼粒白血病细胞HL—60受12—O—十四烷酰—佛波醇13—醋酸酯(TPA)刺激引起氧消耗爆发性增加(呼吸爆发)时主要产生的活性氧—羟基自由基(·OH).诱导分化的细胞产生·OH的量随刺激剂TPA在反应体系中量的增加(50～400 ng)而增高,并和RA诱导时间相关,在诱导d3达峰值,和硝基蓝四氮唑(NBT)还原反应及细胞生长曲线的时间过程一致.同时用自旋探针CTPO和TEMPOL及加宽剂Crox现察到RA诱导分化的HL—60细胞呼吸爆发过程中消耗细胞外介质中的氧.同样实验条件下,未经诱导的HL—60细胞不具有呼吸爆发功能,而人多形核白细胞(PMN)呼吸爆发时也消耗细胞外介质中的氧,检测到的活性氧自由基主要为超氧化物阴离子(O_2)。     

雷公藤内酯醇体内外对HL-60细胞作用的研究

目的探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)在体内外对人髓系白血病细胞株HL-60的作用。方法运用MTT比色法检测TPL对HL-60细胞的增殖抑制作用,采用TdT酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测TPL对HL-60细胞的诱导凋亡作用;建立HL-60裸鼠异种移植瘤模型,观察经TPL治疗后的肿瘤抑制率。结果在体外,TPL对HL-60细胞的增殖具有明显的抑制及诱导凋亡作用,呈时间和剂量依赖性;在体内,TPL可抑制HL-60细胞裸鼠异种移植瘤生长,抑制率最高可达53.5%。结论TPL在体内外均可抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。     

Patensin-induced apoptosis is accompanied by decreased bcl-2 expression and telomerase activity in HL-60 cells

The present study aimed to investigate the effect of telomerase activity in patensin-induced apoptosis and the regulation of B cell leukemia/lymphoma 2 (bcl-2) gene expression in human leukemia HL-60 cells. Apoptosis of HL-60 cells was induced by patensin (100 μmol L_-1) for 3, 6, 12 and 24 h. Apoptosis and bcl-2 were determined by flow cytometry analysis. A polymerase-chain-reaction-based telomeric repeat amplification protocol assay was used to detect the telomerase activity. Patensin induced growth arrest and apoptotic cell death in HL-60 cells. The telomerase activity was inhibited in a time-dependent manner during the patensin-induced apoptosis of HL-60 cells, and the expression of bcl-2 was progressively down-regulated by patensin. Inhibition of the telomerase activity of HL-60 cells was closely related to the patensin-induced apoptosis. The present results indicate that inhibition in telomerase and reduced bcl-2 gene expression may play a role in the patensin-induced apoptosis of HL-60 cells.     

Effects of benzene metabolite treatment on granulocytic differentiation and DNA adduct formation in HL-60 cells

 Reactive metabolites of benzene (BZ) play important roles in BZ-induced hematotoxicity. Although reactive metabolites of BZ covalently bind to DNA, the significance of DNA adduct formation in the mechanism of BZ toxicity is not clear. These studies investigated the covalent binding of the BZ metabolites hydroquinone(HQ) and 1,2,4-benzenetriol(BT) using the DNA [³²P]postlabeling method and explored the potential relationship between DNA adduct formation and cell differentiation in human promyelocytic leukemia (HL-60) cells, a model system for studying hematopoiesis. Maturation of HL-60 cells to granulocytes, as assessed by light and electron microscopy, was significantly inhibited in cells that were pretreated with HQ or BT prior to inducing differentiation with retinoic acid (RA). The capacity of RA-induced cells to phagocytose sheep red blood cells (RBC) and to reduce nitroblue tetrazolium (NBT), two functional parameters characteristic of mature, differentiated neutrophils, was also inhibited in cells pretreated with HQ or BT. These BZ metabolite treatments induced DNA adduct formation in HQ- but not in BT-treated cells. These results indicate that whereas HQ and BT each block granulocytic differentiation in HL-60 cells, DNA adducts were observed only following HQ treatment. Thus DNA adduct formation may be important in HQ but not in BT toxicity. Received: 24 April 1995 / Accepted: 5 July 1995     

重组L-门冬酰胺酶前体脂质体对HL-60细胞生长的影响

目的:研究L-门冬酰胺酶(L-ASNase)脂质体对体外培养的人早幼粒细胞白血病(HL-60)细胞活性的影响.方法:实验分3组:对照1组加入新鲜RPMI1640培养液倍比稀释的空白脂质体;对照2组加入L-ASNase(终浓度分别为2.5,5,10,20和40 μg·mL-1);实验组加入L-ASNase脂质体(前体脂质体水合而得,终浓度分别为2.5,5,10,20和40 μg·mL-1).MTT法测定细胞存活率,电镜观察细胞形态学,流式细胞仪检测肿瘤细胞周期的改变.结果:L-门冬酰胺酶脂质体(经前体脂质体水合而得)组HL-60细胞的G0/G1期细胞量明显增加,S期的细胞明显减少;增殖指数(PI)显著下降;HL-60细胞凋亡比例显著增多.结论:L-门冬酰胺酶脂质体抑制HL-60细胞的繁殖,可能与抑制细胞的S期有关.     

Inhibition of ERK and activation of p38 are involved in diallyl disulfide induced apoptosis of leukemia HL-60 cells

We investigated the effects of diallyl disulfide (DADS) on the induction of apoptosis in human Leukemia cell line HL-60 and explored the roles of mitogen-activated protein kinase (ERK and p38 MAPK) pathways in the growth inhibition and apoptosis induced by DADS. MTT assay was used to determine the DADS induced cell growth inhibition in HL-60 cells. Flow cytometry and DNA fragmentation were used to examine the roles of apoptosis in DADS-mediated cell death. Western blot analysis of the expression of phospho-MAPKs (ERK and p38) was employed to elucidate the possible mechanisms of DADS induced apoptosis. We found that growth inhibition of HL-60 cells treated with DADS exhibited a dose-dependent response (P<0.05) and DADS induced significant apoptosis. DADS at the concentration of 10 mg/L persistently activated p38 and simultaneously reduced ERK activity. PD98059, an inhibitor of ERK upstream activators MAPK kinase MKK1 and MKK2, promoted cytotoxicity and apoptosis in HL-60 cells treated with DADS. In contrast, SB203580, an inhibitor of p38, decreased cytotoxicity and apoptosis induced by DADS. Therefore, DADS can effectively inhibit the proliferation and induce apoptosis of human leukemia cell line HL-60. Inhibition of ERK signaling pathways and activation of p38 signaling pathways are likely involved in DADS induced apoptosis in HL-60 cells.     

孤啡肽对HL-60细胞增殖及凋亡的影响

目的研究孤啡肽对白血病细胞株HL-60细胞增殖及凋亡的影响。方法选择人急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60为实验模型,应用MTT比色法、形态学观察及流式细胞术(FCM)等方法对孤啡肽诱导其凋亡情况进行研究。结果孤啡肽能显著抑制HL-60细胞增殖,使细胞周期阻滞于G_0/G_1期,细胞凋亡率增加,FCM DNA直方图上G_0/G_1峰前有明显的亚二倍体凋亡峰,表明孤啡肽能明显抑制HL-60细胞的生长,诱导其发生凋亡,且存在时间依赖性,而剂量依赖性不明显。结论孤啡肽对HL-60细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用。     

Shp-2和LIF在影响HL-60细胞增殖分化中的相关性研究

目的探讨酪氨酸蛋白磷酸酶Shp-2和白血病抑制因子(LIF)影响HL-60细胞增殖与分化过程中的相互关系。方法采用Shp-2(c>s)作为对照,将Shp-2和Shp-2(c>s)分别转染白血病细胞HL-60,给予LIF刺激,用免疫组化、RT-PCR、免疫印迹和流式细胞术等方法检测其增殖细胞核抗原(PCNA)和CD15的表达水平。结果在胞质内Shp-2加强表达的情况下,PCNA表达明显下降;在LIF的刺激后,PCNA表达下降更加明显;然而,Shp-2、Shp-2(c>s)转染细胞之间无明显差别。同时,Shp-2和Shp-2(c>s)转染细胞都有CD15表达升高的现象;在LIF刺激后各组CD15表达均有增加,但以Shp-2转染细胞增幅为最高。结论Shp-2和LIF两者在HL-60细胞增殖抑制作用方面无关联,而Shp-2的大量表达可以协同LIF的促白血病细胞分化作用,其中Shp-2的N-SH2结构域参与了LIF激活白血病细胞分化的信号传递。