急性白血病中c-kil受体表达与染色体异常核型的关系

目的 检测c-kit R在急性白血病（acute leukemia，AL）的表达并进一步分析ANLL中c-kit R表达与染色体异常核型的关系及其意义。方法 采用流式细胞术（flow cytometry，FCM）分别检测并比较92例急性淋巴细胞性白血病（ALL）和81例ANLL初诊患者骨髓单个核细胞（BMMNC）跨膜c-kit R表达的阳性率及阳性水平，并设立20例正常人骨髓标本作为阴性对照组；采用R带显带方法对c-kit R阳性表达的ANLL进行染色体核型分析。结果 ALL患者的c-kit R表达的阳性率及阳性水平与正常人相比差异无显著性（P〉0．05）。ANLL患者的c-kit R表达率及阳性水平则均明显高于正常人和ALL患者（P值分别〈0.01）。ANLL中c-kit R阳性表达者异常核型的百分率为74．1％，明显高于c-kit R阴性组者（26．1％）（P〈0.05）。异常核型的类型有5q-、-17、＋21、del3p、t（8；21）、6p＋、t（1；8）、复杂易位、t（15；17）、t（1；12）、-7、四倍体、20q-等十余种类型。结论 c-kit R可作为髓系免疫学标记，用以协助ANLL的诊断。c-kit R阳性者伴有细胞遗传学异常，但是，c-kit R阳性与染色体异常核型的类型之间不存在特殊对应关系。c-kit原癌基因不是ANLL发病机制的唯一要素。     

193例初治急性髓系白血病细胞遗传学与FAB 分型的相关性分析

目的探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)的核型状况.方法利用短期培养法和直接法制备骨髓细胞染色体,用 R 带显带技术对151例初治的 ANLL 患者行染色体核型检查.结果该组患者中克隆性染色体异常的有98例(56.98%).异常核型主要为特异性染色体重排,t(15;17)(35例)和 t(8;21)(23例)是最常见的结构异常,各亚型的核型检出率分别为 M3(86.90%)>M2(62.10%)>M5(43.75%)>M1(37.50%)>M6(25.00%)>M4(16.67%)应用 R 显带可检测56.98%的急性髓系白血病患者的染色体异常,与 FAB 分型相关.结论细胞遗传学是诊断、分型、判断预后的一项重要指标.     

74例急性淋巴细胞白血病临床分析

目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的细胞遗传学、分子生物学特征及其与疗效的关系。方法采用细胞染色体R带或G带分析核型及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测融合基因转录,并对结果进行分析。结果 ALL患者中,异常核型以t(9;22)、复杂核型最常见。正常核型组缓解率高于t(9;22)组和复杂核型组(P<0.05)。异常融合基因中BCR/ABL最常见,且缓解率低于阴性表达组(P<0.05)。成人ALL患者染色体核型异常检出率和融合基因表达率与儿童均无差别。结论细胞遗传学特征及融合基因表达可提高ALL诊断的准确率,对患者治疗及预后的判断具有一定临床价值。     

老年急性白血病患者染色体核型异常与FAB分型及预后的关系

目的探讨老年急性白血病(AL)患者染色体核型异常与FAB分型及预后的关系。方法 80例初治老年AL患者按照FAB分型标准分为急性髓细胞白血病(AML)49例和急性淋巴细胞白血病(ALL)31例;抽取患者骨髓标本,采用R显带技术分析染色体核型,分析染色体核型异常与FAB分型及预后的关系。结果 80例AL患者中染色体核型正常20例(25.0%),核型异常60例(75.0%);其中49例AML患者中染色体核型异常28例(57.1%),31例ALL患者中染色体核型异常12例(38.7%),AML患者染色体核型异常率显著高于ALL患者(χ2=6.783,P<0.01)。28例染色体核型异常AML患者总缓解率为85.7%,21例染色体核型正常AML患者总缓解率为90.5%,二者比较差异无统计学意义(χ2=0.253,P>0.05)。12例染色体核型异常ALL患者总缓解率为58.3%,19例染色体核型正常ALL患者总缓解率为89.5%,染色体核型正常ALL患者治疗总缓解率显著高于染色体核型异常患者(χ2=4.080,P<0.05)。结论特异性染色体异常可能是导致AL的细胞遗传学特征,且与FAB分型有关。通过染色体核型分析,可为化学治疗效果及预后评估提供参考。     

人端粒重复序列结合因子在急性白血病细胞中的表达及与端粒酶活性的关系

目的:研究人端粒重复序列结合因子(TRF1)在30例急性白血病细胞中的表达,了解TRF1表达与急性白血病分型的关系,以及与端粒酶活性的关系.方法:用荧光定量RT-PCR定量检测30例急性白血病细胞中TRF1 mRNA表达情况,同时检测hTERT mRNA的表达,并分析两者之间的相关性.结果:TRF1在急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)细胞中的表达0.0126(0.0127～0.0546)明显低于正常人骨髓单个核细胞中的表达0.0457(0.00839～0.262)(P<0.001),但在急性淋巴细胞性白血病(ALL)细胞中的表达0.0745(1.92×10-6～0.193)与正常人骨髓单个核细胞比较差异无显著性,且在ANLL细胞中的表达明显低于ALL细胞中的表达(P=0.001).TRF1和hTERT在急性白血病细胞和正常人骨髓单个核细胞中的表达无显著相关性(r=-0.173,P=0.207).结论:TRF1 mRNA在ANLL细胞中表达明显降低,而在ALL细胞中表达无显著改变,提示ANLL细胞中TRF1可能通过调控端粒长度对端粒酶起间接负调控作用.     

急性白血病病人黏着斑激酶的表达及临床意义

目的观察黏着斑激酶(FAK)在急性白血病(AL)病人白血病细胞中的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测50例AL病人白血病细胞FAK mRNA的表达水平,以10例健康人作为正常对照。收集病人骨髓细胞,用24h常规培养方法制备染色体,采用R显带技术分析其染色体核型。结果正常对照组FAK mRNA阳性表达率为20.0%,AL病人为66.0%,差异有显著性(χ2=5.49,P<0.05)。其中急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)病人FAK mRNA阳性表达率和表达水平均高于正常对照组(P=0.04,χ2=4.44,t=7.98、5.60,P<0.05),但ALL和ANLL比较差异无显著性(P>0.05)。初诊和复发AL病人白血病细胞FAK mRNA阳性表达率和表达水平比较差异无显著性(P>0.05),但均高于正常对照组(χ2=9.38,P=0.02,t=8.79、7.58,P<0.05)。缓解组病人FAK mRNA阳性表达率和表达水平明显低于初诊组和复发组(χ2=10.26,P=0.02,t=4.43、7.82,P<0.05),与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。AL病人异常核型检出组FAK mRNA的表达率和表达水平均明显高于未检出组(χ2=5.82,t=6.72,P<0.05)。结论 FAK mRNA在AL中存在较高的表达,且与疾病的转归相关,可能为白血病的治疗提供新靶点。     

65例急性白血病形态学、免疫学和细胞遗传学分型诊断

对65例急性白血病(AL)进行了形态学、免疫学和细胞遗传学综合分型,其中ALL41例,包括B系ALL21例、T系ALL18例、T/B杂合型2例;ANLL19例中具有粒或单核系免疫表型者11例,8例结合形态学分型与核型分析定为ANLL;另有5例免疫表型及核型等不具有亚型特异性,暂定为急性未定型白血病。检出的特异性染色体异常包括ph、6q~-、12p~-、t(8;21)、t(15;17)、inv(3q)等。形态学检查是AL诊断分型的基本方法,但单纯依靠形态学诊断可能造成分型的偏差;免疫分型有助于ALL的正确诊断与分型,是对ALL形态学诊断的有力补充,而对ANLL的分型目前尚有局限性;核型分析对AL尤其是ANLL的分型诊断有重要意义。     

急性淋巴细胞白血病MICM分型分析

目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的骨髓细胞形态学(M)、细胞免疫学(I)、细胞遗传学(C)和分子生物学(M),即MICM的关系及其临床意义.方法 采用细胞形态学检查、染色体R带核型分析、流式细胞仪细胞免疫表型检测和套式逆转录酶链反应(RT-PCR)检测bcr/abl融合基因等方法.结果 以FAB分型为基础的形态学诊断L1型ALL占25.0%,L2型ALL占71.88%,L3型ALL占3.12%;免疫表型检测出B-ALL 25例(78.13%),T-ALL 3例(9.38%),还有4例患者同时表达髓系和B系,为急性杂合性白血病(HAL),占12.49%;染色体异常患者中,以t (9;22)(q34;q11)频率最高(87.50%).bcr/abl融合基因检测,有9例(28.13%)阳性.结论 在形态学基础上结合免疫表型、细胞遗传学特征及融合基因表达可以对ALL进行准确的分型,对治疗方案的选择及预后的判断均具有临床价值.     

49例急性白血病细胞遗传学分析

目的 应用细胞遗传学分析方法研究急性白血病染色体异常特征,结合临床探讨细胞遗传学对急性白血病诊治的价值.方法 采用短期培养法制备骨髓细胞染色体,以G显带对49例急性白血病患者进行染色体核型分析,并观察30例接受联合化疗患者的临床转归.结果 49例初诊为急性白血病患者中,细胞核型异常检出率73%(36/49).联合化疗30例中,首次住院达完全缓解者19例(63%).核型正常及典型t(15;17)易位者疗效较好,核型异常如t(9;22)、t(5;17)等易位者疗效较差.结论 半数以上急性白血病患者可检出克隆性染色体异常,其中,特异性染色体重排与特定的白血病亚型相关.细胞遗传学改变是影响白血病预后的因素.     

儿童急性淋巴细胞白血病染色体异常与预后关系研究

目的研究ALL患儿染色体异常核型与疗效及预后的关系。方法对155例ALL患儿的骨髓/外周血细胞进行染色体核型分析,观察临床疗效。结果 1)155例ALL患者中,正常核型63例(40.65%),异常核型92例(59.35%),其中结构异常48例(52.17%),数目异常者39例(42.39%)。2)t(9;22)易位的发生率为3.87%,它是预后不良的标志。3)t(12;21)易位染色体异常占18.71%,其预后良好。4)高二倍体核型是预后良好的标志,而具有其他数目和结构异常核型的白血病,则预后不良。结论 ALL患者染色体核型异常发生频率较高,染色体核型分析对ALL的指导治疗及预后判断具有重要作用。     

儿童急性白血病骨髓细胞PCNA和Bcl-2基因表达及其意义

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)及原癌基因Bcl- 2在儿童急性白血病 (AL)骨髓细胞的表达及临床意义。方法　应用S -P免疫组化法检测 41例儿童AL骨髓标本PC NA和Bcl- 2。结果　急性淋巴细胞白血病 (ALL)组及急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)组PC NA表达率与对照组比较均有显著差异 (P <0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,ALL标危组显著高于高危组 (P <0 .0 5 ) ;ALL及ANLL组的Bcl- 2表达率高于对照组 (P <0 .0 1) ,标危组显著低于高危组 (P <0 .0 5 )。PCNA高表达者缓解率显著高于低表达者 (P <0 .0 1) ;Bcl- 2阳性表达者 3年无病生存率显著低于阴性表达者 (P <0 .0 1)。结论　PCNA、Bcl- 2基因在儿童AL中存在表达异常 ,二者均参与发病过程 ,但其作用机制可能是独立的 ,联合检测有助于判断预后。     

小儿急性白血病骨髓细胞Bcl-2和P~(53)蛋白的表达

目的　探讨小儿急性白血病骨髓细胞Bcl- 2、P53 蛋白的表达状态。方法　以SP免疫组化法对 41例患者及 11例对照骨髓细胞Bcl- 2、P53 蛋白进行检测 ,高倍镜下计数 5 0 0个细胞 ,P53 阳性细胞≥5 %为阳性病例 ,Bcl- 2≥ 10 %为阳性病例。结果　Bcl- 2蛋白表达率在小儿ALL、ANLL及ALL高危型中均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 1,P <0 .0 1) ,ALL标危型与对照组相比无差异 (P >0 .0 5 ) ,但ALL高危型高于标危型 ,ANLL高于ALL(P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。P53 蛋白表达率在ALL、ANLL、ALL高危型及标危型均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 ) ,ALL高危型与标危型及ALL与ANLL之间无差异 (P >0 .0 5 )。结论　P53 突变及Bcl- 2表达增强参与了小儿急性白血病骨髓细胞的恶性转化 ,但其作用机制可能是相互独立的。     

向急性白血病转归的骨髓增生异常综合征临床与形态学研究

[目的]对转归急性白血病的骨髓增生异常综合征患者的临床与形态学研究。[方法]78例MDS患者做一般资料分析,对22例转归AL患者的MDS阶段及MDS转归白血病临床及血液学特征,进行回顾性分析。[结果]78例MDS患者中22例转归为急性白血病,占28.2%,其中20例转为急性非淋巴细胞性白血病(ANLL),2例转化为急性淋巴细胞性白血病(ALL),转归时间随MDS分型不同而长短不一,且转归白血病时间长短与血及骨髓中原始细胞数目有相关性,血液学特征主要表现为外周血一系二系或三系细胞减少,粒、红、巨三系血细胞的病态造血伴不同程度的临床症状,12例接受染色体检测患者中4例有异常核型的改变。[结论]对转归白血病的骨髓增生异常综合征的临床与形态学研究有助于对MDS的诊断分型研究。     

Study of heat shock protein HSP90α, HSP70, HSP27 mRNA expression in human acute leukemia cells

Summary The expression of three heat shock proteins (HSPs)-HSP90α, HSP70, HSP27 in cells obtained from 22 patients with leukemia, K562 erythroleukemia cell line, and normal blood cells was observed by means of RNA dot blot analysis. The results showed that the expression of the HSP27 gene was enhanced in 4 cases of acute lymphoid leukemia (ALL), 7 cases of acute nonlymphoid leukemia (ANLL) and 2 cases of myelodysplastic syndrome. (MDS) as compared with that of the normal blood Cells, yet there was no significant difference in the HSP27 expression between the ALL and ANLL cells. The expression of HSP70 in all the 5 ALL and ANLL patients was much lower than that of the normal subjects, except 1 case of ALL and 1 case of MDS, in which the expression was obviously enhanced. All the cases including 11 ANLL, 5 ALL and 1 MDS had higher HSP90α expression than the normal subjects. The enhanced expression pf HSP90α in leukemia cells may be associated with the active and indefinite proliferation of leukemia cells. Our results also suggest that the high expression of the HSP27 gene may not be confined to a specific type of acute leukemia.     

细胞周期蛋白D1、D3、E的表达与儿童急性白血病关系的研究

目的:探讨细胞周期蛋白(cyclin) D1、D3、E的表达与儿童急性白血病(AL)的关系.方法:采用超敏SP免疫组化法,检测50例AL (AL组)、26例完全缓解AL(AL-CR组)和23例对照组患者骨髓细胞中cyclin D1、D3、E的表达情况.结果:cyclin D1、D3、E阳性率在AL组分别为56%、54%和46%,均明显高于AL-CR组和对照组(P＜0.01);在高危型急性淋巴细胞白血病(HR-ALL)中cyclin D1、D3阳性率分别为91.87%、83.33%,明显高于标危型ALL(SR-ALL)(P＜0.01).16例AL化疗前cyclin D1、D3、E阳性率分别为68.75%、56.25%、56.25%,化疗缓解后无阳性表达.cyclin D1、D3、E在AL组中的表达呈正相关性.结论:cyclin D1、D3、E与儿童AL发病有关,可作为疗效观察的指标;cyclin D1、D3与儿童AL不良预后有关; cyclin D1、D3、E过度表达存在相关性,在AL发生发展过程中可能有协同作用.     

急性白血病患者P-糖蛋白的表达及功能分析

目的:研究P-糖蛋白(P-gp)在急性白血病(AL)患者中的表达及功能.方法:用免疫组化检测CD34、P-gp的表达,用流式细胞术检测P-gp的表达、功能.结果:CD34表达与P-gp表达、功能呈正相关(P=0.001,r=0.475;P=0.003,r=0.429),P-gp表达与功能呈正相关(P=0.031,r=0.341).初治急性早幼粒细胞白血病(APL)组中无P-gp表达 、P-gp功能 ,明显低于初治急性髓细胞白血病(AML)组(41.1%,35.3%,P＜0.05).初治急性淋巴细胞白血病(ALL)组中P-gp表达 28.6%,P-gp功能 28.6%,与初治AML组无差异(P＞0.05).初治AL组P-gp表达 25%,复发/难治组中P-gp表达 33.3%,两组无差异(P＞0.05);P-gp功能 22.7%,低于复发/难治组P-gp功能 66.7%(P＜0.05).＜50岁初治AL组P-gp表达 26.3%,与≥50岁初治AL组无差异(P＞0.05);P-gp功能 15.8%,低于≥50岁初治AL组(P＜0.05).结论:P-gp功能的检测对AL的化疗更有临床指导意义.     

八探针间期荧光原位杂交技术联合染色体核型分析比较成人与儿童急性淋巴细胞白血病患者的细胞遗传学差异

目的应用八探针间期荧光原位杂交技术(FISH)联合染色体核型分析观察急性淋巴细胞白血病(ALL)成人患者与儿童患者的细胞遗传学差异。方法对125例ALL患者(成人86例、儿童39例)全部行八探针FISH(MYC、P16、E2A、TEL/AML1、BCR/ABL、MLL、IGH、多倍体的DNA探针)检测并染色体核型分析。结果八探针FISH检测结果显示,成人ALL患者与儿童ALL患者的TEL/AML1融合基因、BCR/ABL融合基因与多倍体阳性率之间的差异有统计学意义(P<0.05);染色体核型分析成人ALL患者与儿童ALL患者的(t9;22)易位、多倍体阳性率之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论成人ALL患者与儿童ALL患者融合基因表达各有侧重,不同的细胞遗传学特征与其预后密切相关。FISH多探针诊断系统检测ALL患者常见遗传学异常省时、准确、高效,与染色体核型分析形成很好的互补。     

The effects of IL-10 on acute leukemic immune evasion

Objective：To explore the effects of IL-10 on acute leukemic immune evasion. Methods： Plasma concentrations of IL-10 were measured by ELISA in 56 first-visit acute leukemic patients. And expressions of IL-10 on leukemic cells in 30 patients were measured by indirect immunofluorescence technique.Results： Compared with those in control group,IL-10 concentrations increased significantly in first-visit acute leukemic patients. And there was a slight but not significant decrease of IL-10 in patients with acute lymphocytic leukemia(ALL) compared with those with acute non lymphocytic leukemic(ANLL). After intensive chemotherapy,there was a significant decrease of IL-10 in completely remitted (CR) patients ,especially in those with ANLL,but there was still a significant increase compared with those in control group.The positive rate of cells giving out yellow-green bright fluorescence on membranes was 10%-80% ;there were 18 patients expressing IL-10(18/30,60%) positively:among them 11 with ANLL(11/19,58%) and 7 with ALL(7/11,64 %) respectively while that of peripheral mononucleate cells in control group was 13%.Compared with that in control group,there was a significant increase of positive rate in ANLL and ALL but with no significant difference between ANLL and ALL. Conclusion： Probably as one of important mechanisms of acute leukemic immune evasion,IL-10 secreted by leukemic cells,contributing to the immunosuppressive state at the tumor site ,increase significantly in acute leukemic patients.     

Expressions of IL-10 on leukemic cells in acute leukemic patients and its significance

Objective: To explore the expressions of IL-10 on leukemic cells in acute leukemia patients and its significance.Methods :The expressions of IL-10 on leukemic cells in thirty patients was measured by indirect immunofluorescence technique. Results:Observed yellow-green bright fluorescence on leukemic cells membrane, the positive rote of cells was 10-80%, there were 18 patients expressing IL-10 (18/30, 60% ) positively, among them 11 with ANLL (11/19, 58% ) and 7 with ALL (7/11, 64% ) respectively while that of peripheral mononucleate cells in control group was 13%. Compared with that in the control group, there was a significant increase of positive rote in ANLL and ALL but with no significant difference between ANLL and ALL. Conclusion: IL-10 secreted by leukemic cells, contributed to the immunosuppressive state at the tumor site. This is probably one of the important mechanisms of acute leukemic escape.     

Neuropilin-1基因在急性非淋巴细胞白血病骨髓基质细胞中的表达

目的 :了解neruophlin 1(NP 1)基因在急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)骨髓基质细胞中的表达情况。方法 :收集 12例ANLL和 2 0例正常对照骨髓标本 ,分离单个核细胞。进行体外长期培养 ,收集贴壁细胞 (骨髓基质细胞 )。利用逆转录 -聚合酶链反应扩增两组骨髓基质细胞中的cDNA ,了解NP 1基因表达情况。结果 :建立了ANLL和正常人骨髓基质细胞培养方法 ,NP 1基因在ANLL骨髓基质细胞中的表达率为 (4 7.1% ) ,明显低于正常对照 (85 % )P <0 .0 5。结论 :参与调控骨髓基质细胞的NP 1基因可表达于部分ANLL和大部分正常人的骨髓基质细胞中 ,NP 1在ANLL患者骨髓基质细胞中的低表达 ,可能与其调节造血功能异常有关。