超声造影引导经皮注射治疗严重脾破裂出血

目的 探讨超声造影(CEUS)引导下经皮注射治疗脾外伤出血的临床价值.方法 8例脾外伤患者,损伤程度为Ⅲ～Ⅳ级.在CEUS引导下经皮病灶局部注射蛇毒凝血酶、α-氰基丙烯酸酯黏合胶.注射后1 d、3 d、7 d及14 d进行超声复查.记录生命体征及血红蛋白(Hb)量的变化.结果 局部注射后即刻CEUS显示无活动性出血.治疗30 min后生命体征逐渐平稳,动脉收缩压上升(P<0.05),增快的心率逐渐恢复至正常(P<0.05);而治疗后Hb测值先降低后逐渐升至正常.结论 在CEUS引导下,蛇毒凝血酶与α-氰基丙烯酸酯联合局部注射治疗严重脾破裂出血,止血效果明确、可靠.用CEUS既可以对脾外伤的疑诊患者进行诊断,又可以评价疗效.     

脂质体微泡对超声介导基因转染的增效作用研究

目的 探讨超声介导基因转染时,脂质体微泡(LM)对体内、外红色荧光蛋白基因(RFP)转染的增效作用及其安全性.方法将RFP和LM加入培养的Hela细胞后行超声辐照(US),对微泡浓度、超声强度、辐照时间进行优化研究,运用荧光显微镜、流式细胞术评估基因转染率,并对细胞损伤进行分析.在裸鼠移植瘤的体内实验中,将LM和RFP质粒(P)经尾静脉注入后予以超声辐照(P+LM+US),以单纯质粒注射(P)、P+US、P+LM作为对照,行冰冻切片,组织学检查,RFP表达检测.结果培养的Hela细胞经LM和超声辐照联合处理后,RFP基因转染率显著增加,差异有统计学意义(P＜0.01),在超声强度为1.0 W/cm2、微泡浓度为6%、辐照3 min的条件下最显著,且未发现显著的细胞损伤.P+LM+US组的裸鼠移植瘤内RFP表达显著高于P组、P+US组或P+LM组,差异均有统计学意义(P＜0.01),且未观察到明显的组织损伤.结论 LM对超声介导基因转染的体内、外转染效率有显著的增效作用,而无明显的细胞或组织损伤,为临床基因治疗提供一种新颖、高效、安全的非病毒基因转染方法.     

超声微泡对射频消融效果影响的实验研究

目的 探讨超声微泡造影剂对射频消融效果的影响及应用价值.方法 对20只活体兔肝分别以无造影剂及术中造影行射频消融术,评价气化区显示效果和消融时间,并测量气化区、术后造影缺损区及大体病理的大小,分析其相关性.结果 加入微泡造影剂不影响射频消融的范围,但气化区形态更规则稳定,而且与凝固灶范围呈高度相关,同时可使施加射频时间明显缩短.结论 射频消融中加入微泡造影剂有助于识别消融区范围,可预防消融区周围脏器及血管受损.     

超声破坏靶向VEGFR2微泡治疗皮下结肠癌移植瘤的实验研究

目的 探讨靶向VEGFR2微泡结合超声辐照治疗结肠癌的效果.方法 将17只VEFGR2高表达的结肠癌皮下种植瘤Balb/C裸鼠模型分为三组:A组5只,为对照组,仅接受超声造影检查和假照;B组6只,空白脂质微泡结合超声辐照;C组6只,载靶向VEGFR2单抗的脂质微泡结合超声辐照,所有模型均用红色荧光蛋白标记.空化治疗前和空化后1周分别行超声造影和荧光摄片检查,测量肿块大小、荧光面积、荧光强度及血管密度,并进行比较.结果 治疗前裸鼠肿瘤长径、荧光面积、荧光强度及血管密度在各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);A组假照后肿瘤长径、荧光面积、荧光强度及血管密度均比假照前增加,差异有统计学意义(P＜0.05);B组辐照后荧光强度及血管密度均较空化前减小,差异有统计学意义(P＜0.05),而肿瘤长径和荧光面积差异不显著(P＞0.05);C组辐照后肿瘤长径、荧光面积、荧光强度及血管密度与辐照前比较均明显减小,差异有统计学意义(P＜0.01);治疗后A、B、C三组各参数两两比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 靶向VEGFR2脂质微泡能增强超声空化对结肠癌的治疗效果.     

超声破坏微泡对大鼠皮肤创面愈合影响的实验研究

目的 探讨超声破坏微泡(声诺维)对大鼠皮肤创面愈合的影响.方法 96只SD大鼠建立皮肤创面模型后随机分成4组:超声破坏微泡组、单纯微泡组、单纯超声组和对照组.超声破坏微泡组经鼠尾静脉注射微泡造影剂0.5 ml,同时用声强度1 MHz、2.0 W/cm2超声辐照3 min单纯微泡组经鼠尾静脉注射微泡造影剂0.5 ml;单纯超声组经鼠尾静脉注射生理盐水0.5 ml,同样条件超声辐照3 min对照组经鼠尾静脉注射生理盐水0.5 ml.于创伤后第1、3、5、7、14、21 d利用HE染色和免疫组化方法 观察各组创面肉芽组织生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的情况.结果 HE染色:伤后第7 d,超声破坏微泡组肉芽组织明显比其他3组厚,新生毛细血管均垂直于创面生长,其他3组毛细血管排列紊乱.免疫组化观察VEGF表达变化:超声破坏微泡组在第3 d形成表达高峰,其他3组表达高峰在第5～7 d.结论 超声破坏微泡可以提高大鼠背部皮肤的创面愈合质量;新生肉芽组织成熟早,创面愈合加速.超声破坏微泡时产生的高温、高压及某些化学效应可以刺激内源性VEGF分泌,促进血管生成,从而促进创面愈合.

Abstract：

Objective To investigate the effect of microbubble(Sono Vue) destruction with ultrasound on wound healing in rats. Methods Total 96 SD rats were accepted one rounded whole-layer skin incision on back each other and randomly divided into four groups:microbubble destruction with ultrasound(US + MB),microbubble(MB), ultrasound(US) and control group. Rats in US + MB group were injected with 0.5 ml microbubble contrast agent via tail vein,and then ultrasound irradiated for 3 minutes immediately. MB group were injected with 0.5 ml microbubble contrast agent. US group were injected with 0.5 ml physiological saline,and then ultrasound irradiated for 3 minutes immediately under the same condition. Control group were injected with 0.5 ml physiological saline. Feed each rat in single cage. On day 1,3,5,7,14 and 21 after wound creation,the excised wound tissues were analyzed by histology and VEGF expression in wounds by immunohistochemistry. Results HE staining: On day 7, wounds of US + MB group displayed the most accumulation of granulation tissue and all new capillaries were perpendicular to the wound surface, but the new capillaries of other 3 groups were disordered. Immunohistochemical examination of VEGF expression:the peak expression appeared on day 3 in US + MB group, other 3 groups were on day 5 to day 7.Conclusions US + MB treatment could improve the quality of wound healing and granulation tissues were maturated earlier than MB, US treatment and control group, which could accelerate wound healing. High temperature,high pressure and some kind of chemistry effecs induced by microbubble destruction with ultrasound can stimulate the secretion of endogenous VEGF, which may be the mechanism of promoting angiogenesis and wound healing.     

脉冲式治疗超声联合微泡对犬前列腺血流灌注的影响

目的 采用超声造影评价脉冲式治疗超声联合微泡对犬前列腺血流灌注的影响. 方法 6只健康成年雄性犬开腹暴露前列腺后,经静脉持续推注微泡0.1 ml/kg的同时,予以脉冲式治疗超声直接接触辐照前列腺10 min,辐照前后行超声造影检查,分析时间-强度曲线,记录峰值强度、达峰时间、曲线下面积,治疗后光镜下观察前列腺病理改变. 结果 超声联合微泡作用于前列腺后,造影剂达峰时间由(29.7.1±11.55)s缩短至(16.57±6.16)s(P＜0.05),曲线下面积由(2 113.62±630.79) dB·s减小至(1 659.78±506.74)dB·s(P＜0.05);病理检查可见前列腺内微小血管破裂,红细胞漏出,间质广泛充血,部分腺腔内可见红细胞. 结论 脉冲式治疗超声联合微泡可以产生微小血管损伤,显著降低前列腺血流灌注量.     

超声作用下微泡携肝细胞生长因子治疗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨超声作用下微泡携肝细胞生长因子(HGF)对大鼠肝纤维化的治疗效果。方法 构建真核表达质粒pMD18-T/HGF;将实验大鼠随机分为5组：正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。建立肝纤维化模型,治疗14 d后处死大鼠,取血行检测丙氨酸转氨酶(ALT)评价肝功能,病理切片HE染色评价纤维化程度,免疫组化SABC法观察HGF蛋白,RT-PCR检测HGF mRNA。结果 治疗组治疗后血清肝功能优于模型组(P＜0.05),低剂量组与正常组间差异有统计学意义(P＜0.05),中、高剂量组与正常组间差异无统计学意义(P＞0.05)。病理切片示治疗组纤维化减轻;免疫组化见各治疗组HGF阳性表达,表达量随治疗剂量增高而增大(P＜0.05)。RT-PCR示各治疗组HGF mRNA表达高于模型组,且随治疗剂量的增大而增高(P＜0.05)。结论 超声作用下微泡携HGF可以有效抑制肝纤维化进程,其治疗效果在一定范围内随着治疗剂量的增大而增强。     

超声造影引导肝脾创伤介入性治疗的实验研究

目的 探讨超声造影引导局部注射治疗闭合性肝、脾创伤出血的价值.方法 使用健康成年杂种犬.用自制的小型生物撞击器建立肝和脾闭合性外伤模型.符合美国创伤外科协会分级(AAST)的Ⅲ～Ⅳ级的28只犬纳入实验,并随机分为治疗组与对照组,治疗组采用超声造影引导病灶内注射蛇毒凝血酶和α-氰基丙烯酸酯黏合胶,对照组于病灶局部注射等量的生理盐水.结果 两组动物注射干预后均存活.治疗组注射治疗后超声造影复查显示病灶内无活动性出血,处死动物后开腹见病灶局部被血凝块及止血胶膜覆盖,腹腔出血量明显少于对照组(P=0.000).对照组注射后病灶仍有出血.结论 超声造影引导局部注射治疗Ⅲ～Ⅳ级闭合性肝、脾创伤出血,效果明确,可实现即刻止血.超声造影既可对肝、脾外伤进行准确、迅速诊断,同时可在其引导下进行局部穿刺注射治疗.     

脉冲超声辐照微泡增强脂质体介导基因转染的体外实验研究

目的 探讨脉冲超声辐照微泡超声造影剂提高脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒在肝癌,细胞(HepG2)中转染率的可行性.方法 将HepG2接种在24孔板中,随机分为以下6组:①空白对照组;②质粒+脂质体组;③超声+质粒组;④超声+质粒+微泡组;⑤超声+质粒+脂质体组;⑥超声+质粒+脂质体+微泡组.荧光显微镜及流式细胞仪检测增强型绿色荧光蛋白表达及转染效率;MTT法检测此转染方法对HepG2生长活性的影响.结果 超声+质粒+脂质体组的转染效率最高,并对细胞活性无明显影响;而超声+质粒+脂质体+微泡组转染效率与超声+质粒+脂质体组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但细胞活性与空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脉冲超声辐照可介导基因转染,并能提高脂质体基因转染效率.同时,在一定条件下,超声微泡造影剂可提高超声介导基因转染效率,此方法可为基因转染提供新的思路.     

微泡增强非聚焦超声治疗兔肝创伤

目的 探讨微泡增强的非聚焦超声治疗肝脏创伤的价值。方法 用25只健康新西兰大白兔建立肝脏创伤出血模型,并随机分为超声(US)组、微泡(MB)组和超声微泡(USMB)组,根据不同的声功率,将USMB组分为3个亚组:USMB1(0.11 W)、USMB2(0.55 W)和USMB3(1.10 W);每组5只实验动物。评价治疗前出血量、治疗后渗血量以及视觉评分,并进行CEUS分析治疗区域的血流灌注水平,最后取肝脏标本行组织学HE染色、分析肝板和肝窦面积比例变化。结果 USMB组治疗后渗血量和视觉评分均显著低于US组(P均<0.05);3个USMB亚组治疗后即刻的CEUS峰值声学密度值(PI)均明显低于US组(P均<0.05);USMB组肝细胞明显水肿并压迫肝窦、汇管区血管和中央静脉,USMB1、USMB2亚组肝板/肝窦面积比率分别为48.75±9.91、35.66±8.43,明显高于US组的1.98±0.07(P均<0.05)。结论 微泡增强的非聚焦超声可以对肝脏创伤进行快速止血且不影响正常肝脏的血流灌注。     

超声造影在脾外伤保脾手术中的应用价值

目的：探讨超声造影在脾外伤保脾手术中的应用价值。方法：46例脾外伤患者行保脾手术治疗,应用常规超声与超声造影对其术前及术后进行监测。结果：46例脾外伤手术分级,Ⅱ级5例,Ⅲ级32例,Ⅳ级9例;常规超声共检出42例,漏诊4例;超声造影对46例损伤均作出诊断,其中9例可见造影剂外溢。术后常规超声发现1例腹腔积液进行性增加;超声造影发现2例并发症,1例脾动脉主干受压,1例患者术后发生感染难以控制,其脾脏术后增强体积小于原来体积的1/5。结论：超声造影能够为脾外伤保脾手术术前提供选择依据,术后进行监测和随访,对于发现并发症、伤情变化以及预后有重要作用。     

携带凝血酶原复合物的阴离子脂膜微泡造影剂联合超声治疗对兔肾创伤性出血模型的止血效果

目的 探讨携带凝血酶原复合物的阴离子脂膜微泡（PCCMB）造影剂联合超声治疗对兔肾创伤性出血模型的止血效果。方法 对24只健康新西兰大白兔建立兔肾创伤性出血模型,并随机分为3组,即单纯超声治疗组（US组）、单纯PCCMB注射组（SHAM组）及PCCMB注射联合超声治疗组（PCCMB+US组）,每组各8只。对各组均通过10 min出血量及视觉评分评价止血效果。并对SHAM组及PCCMB+US组于超声治疗前和治疗后即刻、治疗后60 min行CEUS检查,对US组于超声治疗后即刻及治疗后60 min行CEUS检查,测量兔肾造影峰值强度（PI）。结果 所有实验兔均顺利完成实验。治疗后PCCMB+US组10 min出血量低于SHAM组及US组（P均<0.05）;PCCMB+US组视觉评分明显低于SHAM组及US组（P均<0.05）。PCCMB+US组超声治疗后即刻及治疗后60 min的PI均高于超声治疗前（P均<0.05）。SHAM组及US组超声治疗前与治疗后即刻及治疗后60 min PI差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 PCCMB造影剂联合超声治疗对兔肾脏创伤性出血可起到快速、有效止血的效果。     

超声造影引导经皮注射止血剂治疗肾挫裂伤出血

目的 探讨超声造影引导注射止血剂治疗肾挫裂伤的价值.方法 超声造影诊断的56例肾损伤患者中37例Ⅱ～Ⅳ级的病例纳入本组观察.并根据损伤程度及是否存在活动性出血分为实验组17例(超声造影引导注射止血治疗)和对照组20例(临床保守治疗).结果 37例肾挫裂伤超声造影表现为肾实质低/无增强区,23例低/无增强回声内可见造影剂异常浓聚,13例患者可见造影剂向肾盂内和(或)被膜破口处溢出.治疗组17例患者中注射血凝酶后9例于治疗后30 min血尿颜色变淡,7例于24～72 h肉眼血尿转正常,1例反复出现血尿.对照组20例患者中9例24～72 h血尿逐浙变淡,其余11例反复出现血尿,于5～14 d转正常.前者血尿转淡的时间显著长于后者(P<0.05).1个月,3个月、6个月复查,肾超声、肾功能、尿常规检查均正常.结论 局部注射血凝酶治疗肾挫裂伤出血的止血效果可靠,具有创伤小、操作便捷、快速的优点,并能缩短病程,可作为Ⅱ～Ⅳ级肾创伤伴活动性出血时急诊床旁止血的可行性手段.     

长脉冲超声条件下脂质体微泡协同rt-PA溶解微血栓

目的 观察长脉冲超声(US)条件下脂质体微泡造影剂协同重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶解微血栓的疗效。方法 采集6名健康受试者全血制备200~300 μm的微血栓,根据不同干预方式分为单纯rt-PA组、rt-PA+低占空比US组(5000个循环)、rt-PA+高占空比US 组(600 000个循环),另将仅US(600 000个循环)照射但无声学微泡协同作为单纯US组。根据辐照系统内压力减低程度评价溶栓的疗效。结果 单纯rt-PA组溶栓率与rt-PA+低占空比US组比较,差异无统计学意义(P>0.05),rt-PA+高占空比US组溶栓率高于单纯rt-PA组和rt-PA+低占空比US组(P均<0.01)。结论 长脉冲US声学微泡辅助rt-PA溶栓效果良好,但此协同作用需在低声压条件下依赖一定比例的占空比才能实现。     

诊断超声联合微泡对大鼠移植瘤血管通透性影响的实验研究

目的 研究诊断超声联合微泡对大鼠移植瘤血管通透性的影响.方法 将48只已建立Walker-256皮下移植瘤模型的SD大鼠随机分为4组:空白对照(A)组、单纯微泡剂(B)组、单纯超声(C)组和超声联合微泡(D)组.以伊文思蓝(Evens blue,EB)为指示剂,选择频率为1.75 MHz、机械指数为1.4的诊断超声持续照射肿瘤区5 min,经大鼠尾静脉注射/不注射微泡造影剂.使用分光光度计和标准曲线法测量大鼠肿瘤组织内EB含量变化,激光共聚焦显微镜观察EB外溢情况.结果 超声联合微泡可增加肿瘤组织微血管通透性.D组瘤内EB含量较A、B、C组明显增加(P＜0.05),血管周围EB外溢明显.A、B、C组EB含量比较差异无统计学意义(P＞0.05),血管周围均未见明显EB渗出.结论 在一定条件下,诊断超声联合微泡可明显提高辐照肿瘤组织血管通透性,这对临床肿瘤化疗患者具有潜在的应用意义.     

体外治疗性超声辅助尿激酶溶栓的实验研究

目的评价体外治疗性超声（ＥＴＵＳ）辅助尿激酶（ＵＫ）溶栓的效果和安全性。方法选用日本大耳白兔,共２４只建成双侧股动脉血栓模型。随机分组接受不同方法（对照、ＥＴＵＳ、ＵＫ、ＥＴＵＳ＋ＵＫ）溶栓,超声频率０．８ＭＨｚ、声强１．２Ｗ／ｃｍ２、占空比１００％。ＵＫ分１５０００／ｋｇ与３００００μ／ｋｇ两种剂量,经耳缘静脉于３０ｍｉｎ内给入。结果单用ＥＴＵＳ组无明显溶栓,血管未出现再通。ＥＴＵＳ＋ＵＫ组与对应的ＵＫ组比较,溶栓量增加（Ｐ＜０．０１）,血管再通率提高（Ｐ＜０．０５）,血管再通所需时间缩短（Ｐ＜０．０１）。组织学检查显示ＥＴＵＳ应用组血管结构无损伤。结论０．８ＭＨｚ、１．２Ｗ／ｃｍ２连续波超声辅助ＵＫ溶解在体血栓安全有效     

紫杉醇微泡超声空化增强乳腺癌化疗的实验研究

目的 制备性能稳定的亚微米级紫杉醇微泡超声造影剂,观察脉冲式超声激励下其在肿瘤局部的释放。方法 用三醋酸甘油酯溶解紫杉醇,加入脂质冻干粉,制成亚微米级的载紫杉醇超声微泡,对其进行形态学及质量检测。建立兔VX2乳腺癌模型,将24只模型兔随机分成4组,经耳缘静脉注射紫杉醇微泡或紫杉醇后,采用或不用脉冲超声于体表定点辐照,10 min后即刻剖取瘤块,用反相高效液相色谱法检测肿瘤组织中的紫杉醇含量。结果 载紫杉醇脂膜微泡的粒径为299.8~2383.5 nm,平均(1.07±0.38)μm,浓度9×10⁹~10×10⁹/ml,表面电位为(19.10±0.32)mV,包封率为(95.00±1.22)%,载药量(5.60±0.11)%。超声释放实验显示紫杉醇微泡加超声辐照组肿瘤组织内的紫杉醇含量明显高于其他各组的药物含量(P＜0.05)。结论 在低能量超声激励下,亚微米级紫杉醇载药微泡能实现在肿瘤局部高浓度释放紫杉醇,增强疗效并减少全身不良反应。     

肝移植术后脾动脉窃血综合征的超声造影诊断价值

目的 探讨超声造影在肝移植术后脾动脉窃血综合征中的诊断价值.方法 应用彩色多普勒超声对311例肝移植患者术后常规进行肝实质及管道结构检查.对显示微弱或无明确肝动脉血流信号的移植肝进行超声造影,了解肝动脉增强情况,同时运用彩色多普勒检测脾动脉血流动力学.结果 7例移植肝肝动脉血流信号微弱、2例未显示肝动脉;超声造影此9例移植肝肝门处均能较清晰显示肝动脉的内径、走行,但灌注微弱.彩色多普勒显示脾动脉内径明显增粗、血流信号丰富,超声造影考虑肝移植术后脾动脉窃血.经腹腔干插管造影证实超声造影所见.结论 超声造影对肝移植术后脾动脉窃血综合征具有一定的诊断价值.