抗大肠癌单克隆抗体3G10的制备及对大肠癌早期诊断的意义

抗大肠癌单克隆抗体３Ｇ１０对大肠癌的反应阳性率达９４％，而对正常大肠的反应呈阴性，表明３Ｇ１０具有较高的特异性。３Ｇ１０对大肠腺瘤的阳性率随着腺瘤的不典型增生程度的升高而增加，提示３Ｇ１０对腺瘤癌变的早期诊断具有重要意义。３Ｇ１０对胚胎大肠的反应也呈阳性，故其所针对的抗原为肿瘤胚胎抗原，可能为一种异常的血型抗原。     

抗人胰岛素单克隆抗体的制备及其应用

抗人胰岛素单克隆抗体的制备及其应用刘彩云孙素莲（北京市肿瘤防治研究所免疫室，北京１０００３４）人血中胰岛素的测定主要用于评估糖尿病患者胰岛细胞的分泌功能，对于选用药物和判定某些药物的疗效，以及对胰岛瘤的诊断也具有一定的意义。目前，一般应用ＲＩＡ测定人...     

抗人IL—1β单克隆抗体的制备及初步应用

白细胞介素１ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１ＩＬ１是由多种细胞分泌的细胞因子,具有广泛的免疫调节作用,同时又具有致热和介导炎症的作用,是急性期反应的主要调节因子〔１〕。正常人血中ＩＬ１β的水平很低,血中或局部含量异常升高与感染及自身免疫性疾病等密切相关〔２〕。因此,制备一套识别不同表位的抗ＩＬ１βｍＡｂ,并装备成ＥＬＩＳＡ试剂盒,可供基础和临床免疫学研究中检测ＩＬ１用。１材料和方法１．１材料重组抗人ＩＬ１β由军事医学科学院基础医学研究所凌世淦教授提供。ＩＬ１依赖的细胞株Ｄ１０由英国Ｈｏｐｅ…     

抗人甲胎蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

利用细胞融合技术建立了５株分泌抗人甲胎蛋白（ＡＦＰ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，快速酶联免疫分析法测得其亲和常数为５×１０７～２×１０９Ｍ－１之间；单抗的Ｉｇ亚类１Ｄ６和１Ｅ６为鼠ＩｇＧ２ａ（κ），３Ａ８、５Ａ７和７Ｈ１１为ＩｇＧ１（κ）。免疫组化中５株单抗均在肝癌细胞的胞浆显色，３Ａ８和１Ｄ６还能结合在肝癌细胞膜上。应用方阵配对实验初步证实，５株单抗至少针对ＡＦＰ分子上３个不同表位，并分析了单抗在ＥＬＩＳＡ反应中的特性。     

抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)的单克隆抗体(mAb).方法:利用从人工流产刮宫物中提取的HCG免疫BALB/c小鼠, 取其脾细胞同NS-1小鼠骨髓瘤细胞融合, 采用有限稀释法筛选杂交瘤细胞株, 并对mAb的亚型、亲和力及特异性进行鉴定.结果:共获得26株能稳定分泌抗HCG特异性mAb的杂交瘤细胞株.mAb的亚类均为IgG1, 亲和力介于1.14×108～2.0×108 mol/L之间, 其中4株mAb与HCG的β亚基有较强的反应, 而与黄体激素(LH)、促卵泡激素(FSH)、促甲状腺激素(TSH)均无交叉反应.结论:成功获得4株鼠抗人HCG mAb的杂交瘤细胞株, 其分泌的mAb能特异识别人HCG的β亚基, 可用于早孕、肿瘤等诊断的进一步研究.     

人醛缩酶A单克隆抗体的制备及应用

纯化并鉴定了人醛缩酶Ａ、Ｂ、Ｃ（ｈＡＬＤ－Ａ、Ｂ、Ｃ）。用ｈＡＬＤ－Ａ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，将免疫的脾细胞和Ｐ＿３－Ｘ＿（６３）－Ａｇ８．６５３骨髓瘤细胞用ＰＥＧ进行融合，用ＥＬＩＳＡ法筛选，ｈＡＬＤ－Ｂ、Ｃ作阴性对照，将阳性反应的杂交瘤细胞进行克隆，获得３株杂交瘤细胞株。其ＭｃＡｂ的亚类分别为ＩｇＧ２ｂ，ＩｇＧ１、ＩｇＭ，亲合常数分别为７．５×１０￣（１０）、３．５×１０￣９、２．３×１０￣９。３株细胞株分泌的单抗通过Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ得到证实。用亲合层析法从人肝癌细胞中提纯了ＡＬＤ－Ａ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示为单一区带，但其电泳迁移率较ｈＡＬＤ－Ａ滞后。     

抗rhEPO单克隆抗体的制备及初步应用

目的 :研制抗人促红细胞生成素的特异性单克隆抗体 (mAb) ,对其生物学特性进行初步鉴定 ,并用于转基因羊乳中重组人促红细胞生成素 (rhEPO)的提纯。方法 :以自制的rhEPO粗品免疫BALB/c小鼠 ,制备抗rhEPO的mAb。以Westernblot和间接ELISA法 ,对所获mAb进行初步鉴定。以纯化的mAb同预活化的Sepharose 4B偶联 ,制得mAb亲和层析柱 ,并用于转基因羊乳中rhEPO的提纯。结果 :获得两株可分泌特异性抗rhEPO的mAb的杂交瘤细胞株 (1E7和 2E6 )。Ig亚类 (型 )的鉴定分别为IgG1和IgG2b ,轻链均为κ型。用Westernblot证实 ,获得的mAb可特异性地识别rhEPO。用自制的免疫亲和层析柱用于转基因羊乳中rhEPO的提纯 ,具有很好的吸附作用 ,回收率达 70 %。结论 :成功地获得两株可分泌特异性抗rhEPO的mAb的杂交瘤细胞。用自制的免疫亲和层析柱提纯转基因羊奶中的rhEPO具有较高的吸附效率     

抗人RKIP单克隆抗体的制备及鉴定

目的：制备抗人RKIP（hRKIP）的单克隆抗体（mAb）并进行特性鉴定。方法：自行构建表达人RKIP重组蛋白（reRKIP）,纯化的reRKIP免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。采用有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株,用免疫荧光和Western blot鉴定mAb的特异性。结果：成功构建RKIP原核表达载体,转化BL21后可高效表达reRKIP,成功地获得4株（EC1,ED2,ED5和8B3）分泌抗人reRKIP mAb的杂交瘤细胞株,杂交瘤细胞培养上清分泌的mAb在免疫荧光和Westernblot试验中均可与细胞中RKIP蛋白反应。结论：成功地制备了4株抗hRKIP mAb,为进一步研究RKIP生物学功能奠定了基础。     

抗结肠癌单抗CL—4对应抗原性质及决定簇的初步分析

本文对本室制备抗结肠癌单克隆抗体CL-4的对应癌相关抗原进行了初步分析,证明该抗原的性质为糖脂和糖蛋白;其抗原决定簇为一种含涎酸的碳水化合物结构,可能是结肠癌细胞膜上的神经节苷酯和癌细胞内的粘液性大分子糖蛋白,其分子量分别为115-205KD和256KD。并研究了CL-4和CA19-9两种单抗所作用的对应抗原决定簇是否相同。根据添加指数为28％,此值稍大于25％,表明这两种单抗所识别抗原决定簇不完全相同。该抗原可能是一种新的含涎酸的结肠癌标志物。     

抗NPM1单克隆抗体的制备

目的 制备并鉴定NPM1单克隆抗体.方法 利用纯化的NPM1融合蛋白作为抗原,通过常规的细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法筛选能出产生抗NPM1单克隆抗体的阳性细胞株,对抗NPM1单克隆抗体的特性进行分析.结果 筛选出1株产生抗NPM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,产生的抗体为IgGl亚类,效价达1∶720000;纯化后经SDS-PAGE显示两条蛋白条带,纯度达95％以上,相对分子质量约为50000和25000,与单一抗体重链、轻链分子大小相符.免疫组化证实,纯化的2G7抗NPM1单克隆抗体可检测出NPM1在结直肠癌表达,阳性位点为细胞核.结论 制备的抗NPM1单克隆抗体可用于NPM1蛋白功能的研究与临床检测.     

抗人肺癌单克隆抗体(3D3)的研制及其特性鉴定

本文用人肺腺癌组织免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,获得1株单克隆抗体(McAb 3D3)。Ig类测定为IgG_1型。杂交瘤培养上清液和腹水的效价分别为1∶10~3～10~4和1∶10~6。采用间接免疫荧光法(IFA)观察到McAb3D3主要与肺腺癌细胞株A549和L342反应,与其它组织肿瘤细胞株没有反应。ABC免疫酶染色试验显示McAb3D3主要与肺腺癌组织反应,与正常肺组织没有反应。     

人催乳素单克隆抗体制备及其临床应用研究

为获得人脑垂体催乳素单克隆抗体,用ＰＲＬ粗制品免疫了ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。利用杂交瘤技术,将免疫小鼠的脾淋巴细胞与ＮＳ－１骨髓瘤细胞融合,产生杂交瘤细胞株,经过筛选,选出了２株能分泌催乳素单克隆抗体的杂交瘤细胞株ＰＲＬＨ６和ＰＲＬＡ２。     

抗利尿激素单克隆抗体的制备及初步应用

应用B淋巴细胞杂交瘤技术,成功地建立了分泌抗抗利尿激素(ADH)的单克隆抗体细胞株。新获的细胞株分泌的单克隆抗体类型属IgG2a。具诱生腹水抗体滴度可达1.2×10~4稀释度,灵敏度为2.5ng/ml。抗体的亲和常数为3.11×10~9L/mol,亲和力受温度影响明显。ADH McAb与催产素等11种神经肽进行竞争抑制试验均无交叉反应,静脉注射McAb可使新西兰白免尿量明显增加。用PAP免疫组化的方法对人和大鼠下丘脑神经细胞进行ADH定位检测,视上核及室旁核的神经细胞及神经纤维均有明显清晰的染色颗粒。应用放射免疫方法检测大鼠垂体,下丘脑组织ADH含量分别为186.46±53.23ng/mg,3.32±1.69ng/mg。因此,抗ADH McAb在八DH的组织学定位,组织含量的测定,以及作为中和剂应用在各种疾病的研究上都有重要的意义。     

抗DESMOPLAKIN I单克隆抗体的制备

作者从水牛鼻表皮中分离桥粒,提取桥粒中的Desmoplakin I(DPI)。用DPI作免疫原,免疫BALB/C小鼠,建立了一株分泌抗DPI单抗的细胞AD-1。免疫组化染色证实,该单抗与上皮组织呈阳性反应,与非上皮性组织呈阴性反应。提示该单抗可作为区分上皮性肿瘤与非上皮性肿瘤的免疫组化探针。     

Monoclonal Antibody to Human Cytotrophoblast

ABSTRACT: A monoclonal antibody (18B/A5) has been generated against human first trimester trophoblast membranes which, unlike others so far reported in the literature, reacted only with cytotrophoblast and not with syncytiotrophoblast. Although the identity of the target antigen has not yet been established, the antibody could be a valuable tool for the identification and eventual separation and purification of human cytotrophoblast cells.     

PC-1蛋白单克隆抗体制备和鉴定

为获得高效价PC-1蛋白的鼠单克隆抗体(mAb),用于PC-1功能的实验,采用纯化的PC-1蛋白与GST的融合蛋白(GST-PC-1)为抗原,免疫小鼠和骨髓瘤细胞进行细胞融合,用直接ELISA法进行克隆化筛选,mAb的染色体分析及亚类鉴定及初步应用.结果表明细胞融合和ELISA筛选后,获得2株抗鼠PC.1蛋白mAb,两株PC-1 mAb效价分别为1:25600,1:13600,抗体亚型为IgG1,Western blot证实其特异性识别PC-1蛋白.该mAb可以用于测定PC-1蛋白.     

Wu T_(11)(CD2)-小鼠抗人绵羊红细胞受体杂交瘤细胞系的建立

本文报道用T细胞系JMN1免疫BALB/c小鼠,然后取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系X 63Ag8.653融合。用扁桃腺冰冻切片免疫酶染色法,筛选出一株稳定分泌IgG1亚类的抗绵羊红细胞受体(ER)单扰(McAb)的杂交瘤—WuT11。通过E玫瑰花结形成抑制试验,膜抗原抽提物对WuT11的间接免疫荧光阻断试验,对外周血单个核细胞(PBMC)及其E~ 、E~-层细胞,T、B和非T非B细胞系的反应特征以及FACS的反应曲线等,证明WuT11与OKT11和anti-CCT3相类似,竞争抑制试验证明WuT11与anti-CCT3识别同一表位。用WuT11进行亲和层析,提取的相应抗原经SDS-PAGE,测得分子量为50KDa的糖蛋白,证明WuT11属CD_2,为识别人ER的单抗。