我国六种常见蜚蠊的生化分析

作者应用SDS--GCGE技术对国内六种常见的蜚蠊作了蛋白质测定,发现其蛋白质带纹数目分别为B.g29条、P.j31条、P.au31条、P.f37条、P.b34条和P.am34条,并初步检测了各条蛋白带纹的分子量。通过比较发现P.j的主要蛋白带的位置与其它四种大蠊相差明显。     

正常人和精子缺乏症患者精浆的蛋白质图谱分析

采用ＳＤＳ一聚丙烯酰胺垂直板电泳和化学法分别对３２例正常人和１１例精子缺乏症患者的精浆进行了蛋白质图谱及扫描分析和总蛋白及白蛋白测定。发现受试者精桨均有分子量为约９８，９０，６７，４０ｆｏ２８ＫＤ的主要蛋白质区带，同一个体的精浆蛋白质的图谱和扫描图形基本一致，但１、体之间有差异。正常人精浆总蛋白含量为３５；５±１０．２ｇ／Ｌ白蛋白为４．９±２．０ｇ／Ｌ；精子缺乏症患者总蛋白为２９．９±１０；２ｇ／Ｌ，白蛋白为４．４±２．８ｇ／Ｌ。两组间的蛋白质均无明显差异。     

致倦库蚊发育各期蛋白质分析

应用垂直板状ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳分析致倦库蚊发育各期蛋白带谱变化，结果显示，自雌蚊卵巢发育、虫卵发育到成蚊整个生命期各期蛋白带数逐渐增多，但各期共有相同的蛋白带１２条，Ｒｆ分别为０．０３，０．１１，０．１６，０．２５，０．３３，０．３６５，０．４１，０．６０，０．６８，０．８５～０．８６，０．９６～０．９７；分子量为１０７ＫＤ，９１ＫＤ，８２ＫＤ，６７ＫＤ，５５ＫＤ，５３ＫＤ，４６ＫＤ，３４ＫＤ，３１ＫＤ，２６ＫＤ，１８ＫＤ，１４ＫＤ。卵期蛋白带数较稳定；成蚊胸肌蛋白带数较整体的少，且较清晰。     

基质金属蛋白酶活性测定的改良底物胶电泳法

基于ＳＤＳ－聚丙烯酸胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）的原理和技术方法，介绍一种改良的明胶－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法（Ｇｃｌａｔｉｎ－ＰＡＧＥ），简称底物胶电泳法，用于测定能够水解明胶的基质金属蛋白酶类（ＭＭＰｓ）的水解活性。该方法简便实用，将底物胶中明胶浓度从 １０ ｇ／Ｌ降至 ２ ｇ／Ｌ，并将分子质量标准浓度提高至≤４０μｇ／孔，较好地解决了实验过程中所遇到的有关分子质量鉴定的难题。     

一种简易制备白蛋白纯品及抗血清的方法——凝胶切割制备法

利用凝胶切割纯化法得到免疫纯人血清白蛋白（ＡＬＢ），经聚丙烯酰胺凝胶（ＰＡＣ）电泳确认为单一带，经ＳＤＳ－ＰＡＣＥ确定其相对分子质量为６７４６２．８０Ｕ，与Ｓｉｇｍａ纯品ＡＬＢ及日本产羊抗人ＡＬＢ抗血清免疫双扩散融合试验验证其为纯品ＡＬＢ。利用得到的ＡＬＢ免疫绵羊制备羊抗人白蛋白抗血清与日本产品比较，为单价特异性抗血清。     

凝胶电泳考马斯亮蓝微波染色

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)后的考马斯亮蓝 R2 5 0染色常用于观察蛋白质分离效果和定量分析 ,染色时间通常为 1～ 4 h,脱色需 8～ 12 h,笔者尝试将微波技术应用于蛋白质凝胶考马斯亮蓝的染色和脱色。1　材　料1.1　微波炉 1台 75 0 W (NN- 5 6 5 2 S,日本松下公司 ) ,分高、中、低火等六档。1.2　洗液 A　甲醇 4 5 m L 和等量双蒸水混合后加冰醋酸10 m L。1.3　洗液 B　无水酒精 75 m L和冰醋酸 2 5 m L混合后加双蒸水至 10 0 0 m L。1.4　考马斯亮蓝染液的配制　考马斯亮蓝 0 .2 5 g溶液于洗液 A10 0 m L。2　方　法2 …     

前列腺激素受体亚型的表达及在前列腺内外带的分布

目的;研究雄激素受体（AR）亚型在前列腺组织中的表达及内外带分布。方法：采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳（IEF）技术,检测了前列腺组织标本20例。结果：前列腺组织有3种AR亚型,等电点（PI）分别在6．5、6．0和5．3,3种亚型均表达13例,占65％,所有标本均表达PI6．5亚型;前列腺内带和外带均有3种亚型表达,个体间存在差异;定量分析表明,前列腺内外带AR含量,外带高于内带,但无统计学意义（P＞0．05）,PI6．0亚型浓度在外带明显高于内带（P＜0．05）。结论：前列腺AR存在亚型并且具有带性分布特征。     

基质金属蛋白酶活性测定的改良底物胶电泳法

基于ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）的原理和技术方法,介绍一种改良的明胶－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法（Ｇｅｌａｔｉｎ－ＰＡＧＥ）,简称底物胶电泳地,用于测定能够水解明胶的基质金属蛋白酶类（ＭＭＰｓ的水解活性。该方法简便实用,将底物胶中明胶浓度从１０ｇ／Ｌ降至２ｇ／Ｌ,并将分子质量标准浓度提高至≤４０μｇ／孔,较好地解决了实验过程中所遇到的有关分子质量鉴定的难题。     

两种样品制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳分离效果的影响

目的 评价两种样品制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响,建立高分辨率、高重复性的血清2-DE图谱,为鉴定疾病相关血清蛋白质奠定基础.方法 分别用热SDS法和直接溶解法处理大肠癌血清样品,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离总蛋白质,图像软件分析后,对其中3个差异蛋白质点行基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱鉴定.结果 应用热SDS法处理血清总蛋白质进行双向电泳,可获得分辨率高、重复性好的人血清双向电泳图谱.对直接溶解和热SDS法处理的蛋白样品进行3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数为675±46和702±49,平均匹配点数为573±42和623±52,匹配率为85.3%和89.6%,分析3块不同胶间蛋白质点在IEF方向的位置偏差为(0.85±0.30)mm和(0.81±0.28)mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为(1.02±0.18)mm和(0.97±0.12)mm.热SDS处理的2-DE胶蛋白质点质谱可获得高质量质谱图,并可以检测到相对低丰度的血清蛋白质.结论 热SDS法是一种更有效的血清蛋白质样品制备方法,我们利用热SDS法处理血清样品建立了分辨率较高且重复性好的人血清蛋白质双向凝胶电泳图谱.     

介绍一种聚丙烯酰胺平板凝胶电泳凝胶的原态快速干燥成膜新方法

此聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶成膜方法,采用生化实验常备仪器,工序工艺简便,易于掌握。其应用价值:①可提供理想的能使聚丙烯酰胺凝胶样本保持原态,并可长期保存的制膜方法。②由于凝胶样本膜化,带内物质相对密集,若应用于放射自显影技术中,可提高精度,敏感性.     

日本血吸虫肝门型童虫蛋白质SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳的分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对日本血吸虫肝门型童虫蛋白组分进行了分析，结果显示：１４ｄ肝门型雌雄童虫出现３３条蛋白区带，主带８条；２１ｄ肝门型雌雄童虫出现３４条蛋白区带，主带８条；２１ｄ雄性童虫出现３１条蛋白区带，主带７条。各组童虫与成虫比较，有２７～２８茶共同蛋白区带，提示日本血吸虫不同时期的肝门型童虫与成虫的蛋白组分在质与量方面虽然存在着某些差异，但总体上两者的蛋白组分有很大的相似性。     

子宫肌瘤蛋白质组研究中二维电泳方法的建立

目的:建立并优化用于子宫肌瘤蛋白质组分析的二维电泳技术,提高其分辨率和重复性.方法:以固相pH梯度等电聚焦为第一向,采用垂直十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向,并对关键步骤如样品的溶解、上样量、电泳参数和染色方法进行一系列的优化.结果:获得质量较好的子宫肌瘤和正常肌层的二维电泳图谱.结论:采用蛋白溶解度增强的裂解液分步提取组织的蛋白质,有利于二维电泳图谱的完整性;RC DC蛋白定量方法是二维电泳较为理想的蛋白定量方法,直接关系到上样量;质谱兼容银染法并不降低蛋白斑点的分辨率;窄范围(pH 4～7)的IPG胶条较宽范围(pH 3～10)的IPG胶条具有较高的分辨率.     

金钱白花蛇可溶性蛋白凝胶电泳图谱的研究

对金钱白花蛇进行几种凝胶电泳研究,根据聚丙烯酰胺胶电泳（ＰＡＧＥ）谱带的位置和数目进行品种鉴别;用改进的十二烷酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）测定其主要蛋白质成分分子量;用等电聚焦电泳（ＩＦＥ）测定其主要蛋白质成分的等电点（ＰＩ）。清晰的电泳谱带及相应数据为商品蛇真伪鉴别提供了科学依据。     

穿心莲种子蛋白质电泳鉴定的初步研究

目的探讨SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对穿心莲种子进行鉴别的可行性,为穿心莲种子鉴别及育种研究提供科学依据。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对广东省几种不同来源和不同采收期的穿心莲种子进行可溶性蛋白质电泳研究。结果不同产地的穿心莲种子蛋白质电泳图谱之间在谱型和谱带的强弱、蛋白质相对含量上均有一定的差异,不同采收期穿心莲种子蛋白质电泳在蛋白质谱带的强弱上有一定差异。结论聚丙烯酰胺凝胶电泳技术可用于穿心莲种子鉴定。     

先兆子癎患者胎盘组织滋养层细胞差异表达蛋白初步研究

目的：分析先兆子癎患者胎盘组织滋养层细胞差异表达蛋白,探讨差异蛋白与疾病发生的可能关系,为研究先兆子癎发病机制奠定基础.方法：分离、纯化、鉴定5例正常妊娠妇女和5例先兆子癎患者胎盘组织滋养层细胞,液氮反复冻融研磨提取细胞总蛋白.双向电泳技术对总蛋白进行分离,银染显色,获得蛋白质图谱.用PDQuest软件进行图像分析,寻找差异蛋白.结果：正常妊娠及先兆子癎患者胎盘组织滋养层细胞总蛋白双向电泳各重复3次,得到重复性好的蛋白图谱.PDQuest软件进行图像分析发现,先兆子癎患者胎盘滋养层细胞有34种蛋白在质或量上存在表达增高或减少.结论：先兆子癎患者胎盘组织滋养层细胞中存在差异蛋白,这些蛋白在先兆子癎的发生过程中可能有重要作用.     

地龙药材蛋白质电泳鉴定的初步研究

目的 探讨聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对地龙药材进行鉴别的可行性,为地龙的品种鉴定以及药材品质评价提供参考依据.方法 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对不同来源、不同品种、不同加工方法的地龙药材进行可溶性蛋白质电泳研究.结果 电泳图谱中广地龙在分子质量66.2～14.4 ku之间存在5条清晰、稳定的条带,可初步认定其为广地龙的特...     

TritonX-100酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳改良法和应用

对凝胶和TritonX-100浓度进行了双因素优选调整,省略尿素液过柱去离子的繁琐步骤,胎儿血红蛋白电泳实验,结果获得区带清晰整齐,分辨力高,定量准确,重复性好的结果。同时,缩短电泳时间约11小时。所用试剂基本上为国产,易于推广。     

诺氏疟原虫抗原的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉分析

本文用十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了诺氏疟原虫裂殖子可溶性抗原(Ⅲ号抗原)。该抗原有22条带,其中有2条带可能为来源于宿主细胞的污染物。动物实验表明诺氏原虫裂殖子Ⅲ号抗原无明显的保护作用。