雏鸡内耳器官培养的探索

选用出生后 ７～１４ ｄ的罗曼鸡 ４０只，雌雄不限；用自制的鼠尾胶原先包被２４孔板，干 燥备用；用 Ｄ－ＭＥＭ培养液，每孔加 ２００μｌ，解剖出小鸡耳蜗后（２０只），剪碎放入上述 ２４孔板中培 养。而后解剖出完整耳蜗（２０只）。同样方法培养 ７ ｄ。结果显示：自制的鼠尾胶原可以促使细胞及组 织贴壁，耳蜗组织在Ｄ－ＭＥＭ培养液中生长良好；完整的耳蜗培养 １～２ ｈ后即可贴壁，且在 ３ ｈ左 右即可出现生长晕，并渐增宽、稠密，证实了耳蜗器官在体外的存活。提示：本实验的方法可以使内 耳在体外培养中很好地存活，初步建立了内耳器官培养的模型系统。     

对体外培养鸡听壶支持细胞增殖的观察

选用出生后７－１４ｄ罗曼鸡１５只，解剖出完整耳蜗进行体培养，３ｄ后在培养液中加入氚标胸腺嘧啶核苷，分别在培养第６ｄ，第９ｄ终止培养，切片曝光观察。结果显示；加＾３Ｈ－ＴｄＲ后培养３ｄ，５ｄ的叶壶上皮均有少量支持细胞增殖，被标记的支持细胞多位于基底层及中层，少数移至表面。     

流式细胞术测定骨骼肌细胞分化中DNA合成及其细胞周期变化

目的：分析骨骼肌细胞分化中细胞周期及其对ＤＮＡ合成的影响。方法采用小鼠Ｃ２Ｃ１２骨骼肌细胞系作为体外肌细胞分化的研究模型，对照组１００ｍＬ．Ｌ＾－１胎牛血清ＤＭＥＭ培养液培养，实验组换为２０ｍＬ．Ｌ＾－１胎牛血清ＤＭＥＭ培养液培养，诱导肌母细胞分化，分别于换２０ｍＬ．Ｌ＾－１血清浓度ＤＭＥＭ培养液后的２４，４８和７２ｈ进行流式细胞术检测，分析肌母细胞分化过程中ＤＮＡ合成和细胞周期变化。结果发现肌细     

胃肠外营养与地塞米松协同调节肺癌细胞周期的初步探讨

采用胃肠外营养（ＰＮ）、地塞米松（ＤＭ）及ＰＮ＋ＤＭ对３６只人肺腺癌裸鼠模型ＬＡＸ－８３肿瘤细胞中中期细胞百分率（Ｓ％）的影响，ＰＮ组予１２．５４ｋＪ／ｋｇ＾－１．ｄ＾－１＋氮量０．２ｇ／ｋｇ＾－１．ｄ＾－１，ＤＭ组予２０μｇ／ｄ，对照组予生理盐水，分２次早晚腹腔注射，用ＦＣＭ测定Ｓ％，结果，２４ｈ，ＰＮ＋ＤＭ组的Ｓ％增加最大，显著高于对照组，提示ＰＮ＋ＤＭ的联合作用。２４ｈ后对Ｓ％增加有协同作用     

新生大鼠缺氧缺血性脑病脑组织内丙二醛及谷胱甘肽过氧化 …

利用生后７ｄＳＤ大鼠制成缺氧缺血脑病（ＨＩＥ）模型，在模型后２、１２、２４、４８、７２ｈ处死动物，检测脑组织内丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）的变化。结果：模型后２ｈＭＤＡ显著升高，１２ｈ达高峰，以后逐渐下降，７２ｈ恢复正常；ＧＳＨ－ＰＸ在模型后２ｈ显著下降，以后逐渐升高，７２ｈ虽低于正常组，但无统计学差异。提示：新生大鼠ＨＩＥ时脂质过氧化增强，抗氧化减弱。     

对体外培养鸡听壶支持细胞增殖的观察

选用出生后７～１４ｄ罗曼鸡１５只，解剖出完整耳蜗进行体外培养，３ｄ后在培养液中加入氚标胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ），分别在培养第６ｄ、第９ｄ终止培养，切片曝光观察。结果显示：加３ＨＴｄＲ后培养３ｄ、６ｄ的听壶上皮均有少量支持细胞增殖，被标记的支持细胞多位于基底层及中层，少数移至表面。提示：启动或刺激支持细胞增殖的因素可能在分离出来的耳蜗上皮中。     

人脐静脉内皮细胞的体外培养,鉴定及形态观察

目的：建立血管内皮细胞培养模型，为体外研究血管内皮细胞重要的实验手段。方法：Ｅ和０．２５％的胰蛋白酶静脐内皮细胞，种植在培养板中，观察其生长情况，且用间接酶免法及电下进行内皮细胞鉴定。结果：种植在培养板中的内皮细胞４ｈ开始贴壁生长，。４８￣７２ｈ生长最快，７￣１０ｄ呈多角形。内皮细胞胞浆中有ＶＷＦ相关抗原和电镜下可见胞浆中有Ｗ－Ｐ步体外可确定培养的细胞为血管内皮细胞，结论：有胰酶灌注脐静脉消化内皮     

新生大鼠缺氧缺血性脑病脑组织内丙二醛及谷胱甘肽过氧化物酶的动态变化

利用生后７ｄＳＤ大鼠制成缺氧缺血脑病（ＨＩＥ）模型,在模型后２、１２、２４、４８、７２ｈ处死动物,检测脑组织内丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）的变化。结果：模型后２ｈＭＤＡ显著升高,１２ｈ达高峰,以后逐渐下降,７２ｈ恢复正常;ＧＳＨ－ＰＸ在模型后２ｈ显著下降,以后逐渐升高,７２ｈ虽低于正常组,但无统计学差异。提示：新生大鼠ＨＩＥ时脂质过氧化增强,抗氧化减弱。     

血流切应力变化对血管壁平滑肌细胞合成胶原的影响

目的：观察血流切应力变化对血管壁胶原含量的以探讨循环血管局部血流环境变化对血管结构的影响。方法：体外培养内皮细胞（ＥＣ）和平滑肌细胞（ＳＭＣ）,建立平行平板流动腔模型模拟产生切应力作用于ＥＣ,测定不同大小切应力作用后的内皮细胞条件培养液（ＥＣ－ＣＭ）中ＳＭＣ的胶原合成量。结果：在０,０．１０,０．１５,０．２５ｍＮ／ｃｍ＾２切应力作用后的ＥＣ－ＣＭ中培养２４ｈ后,每１０＾３ＳＭＣ合成２,３－＾３Ｈ     

小肠粘膜上皮细胞原代培养最适条件的研究

本文定量研究了小肠粘膜上皮细胞原代培养方法的最适条件。Ｗｉｓｔａｒ系胎鼠小肠备成小肠绒毛细胞团悬液。接种于处理后的２４孔培养板，采用ＭＴＴ显色法定量研究影响小肠上皮细胞贴壁生长的各种因素。结果显示培养液质量、培养时间、ＣＯ２浓度、肠绒毛细胞团接种浓度、胎牛血清浓度和加药时间是影响肠上皮细胞贴壁生长的主要因素，并得到了上述因素的最适培养条件。上述研究结果可为体外探讨细胞生长因子和肠营养素对肠上皮细胞结构、功能、生长和分化的影响提供了一种可靠、定量的研究手段。     

大鼠下丘脑培养中β—内啡肽神经元的免疫细胞化学研究

应用神经细胞培养、免疫细胞化学和图像分析技术，研究新生大鼠下丘脑β－内啡肽（β－ＥＮＤ）神经元的形态及其体外发育规律。β－ＥＮＤ神经元多为梭形双极，可见细胞间接角。培养１ｄ，β－ＥＮＤ神经元甚少，３￣７ｄ其生长迅速，细胞数量、胞体大小、染色强度和突起长度均达最高峰。培养１４ｄ，β－ＥＮＤ神经元基本维持在７ｄ时的水平。结果提示，下丘脑β－ＥＮＤ神经元在体外培养的第一周内迅速发育趋于成熟，并可维持到第     

新城疫弱病毒对人肺腺癌细胞系A549多细胞球体的作用

用人肺腺癌细胞系Ａ５４９多细胞球体研究了新城疫弱病毒（ＮＤＶ）的抗癌细胞增殖作用。实验证明使用各种ＮＤＶ稀释液（１／２０、１／１００、１／５００）作用于球体３ｄ，均能使球体延缓生长，与对照组相比差异显著（Ｐ＜０．０５）。球体表面生长单层细胞能力的测定证实，用ＮＤＶ１／２０、１／１００稀释液处理后的球体，可以在２４孔盘中贴壁，但不能向外生长细胞，球体萎缩。ＮＤＶ１／５００稀释液作用后的球体能贴壁，但只向外生长部分细胞。对照组球体接种后立即贴壁，并向外生长大片细胞，形成较大的生长晕。     

鼠胚神经上皮细胞原代培养的形态学观察

应用倒置相差显微镜、扫描电镜、透射电镜和免疫细胞化学技术，对原代培养的神经细胞进行形态学观察。结果显示：接种后１０ｈ，少数细胞开始贴壁；２４ｈ时，大部分细胞贴壁，突破延长并互相连接，部分细胞ＮＳＥ免疫染色呈阳性；３ｄ时，胞体增大，突破互相连接成神经网络，胞核大，形态规则，胞质内含较多的粗面内质网和线粒体，高尔基复合体发达；７ｄ时神经细胞晕光明显，胞体饱满，ＮＳＥ免疫阳性细胞增多；１４ｄ时，神经细胞     

老年大鼠听力与耳蜗组织化学,免疫组织化学变化实验观察

自然老年大鼠（２８月龄）和成年鼠（３月龄），用７Ｓｌｌ－Ａ型电反应测试仪确定听阈并记录Ｉ波潜伏期和Ｉ－Ｖ波间期，耳蜗琥珀酸氢酶（ＳＤＨ）、ＰＡＳ、坚牢蓝组化染色和神经特异性和烯醇化酶（ＮＳＥ），Ｓ－１００的免疫组化当色（ＡＢＣ）法，分别观察耳蜗毛细胞、神经节细胞、听神经纤维及鞘膜变化。结果：老年大鼠听性脑干反应阈值升高，ＳＤＨ活性减弱，节细胞人可见多个脂褐素颗粒，神经纤维排列稀疏，节细胞内ＮＳＥ免     

免疫后再感染大鼠下丘脑弓状核ACTH样和β-内啡肽样免疫阳性细胞的相关变化

取经福氏痢疾杆菌免疫后的Ｗｉｓｔａｒ大鼠，老龄鼠（２０个月）１０只，壮龄鼠（８个月）１１只，雌雄兼用。通过腹膜腔注入致病量福氏痢疾杆菌Ｆ１ｂ，２４ｈ后，处死取材；常规脱水，低度石蜡包埋、切片；ＡＢＣ法染色，ＤＡＢ显色。光镜下观察下丘脑弓状核促肾上腺皮质激素样免疫反应（ＡＣＴＨ－ｉｒ）和β－内啡肽样免疫反应（β－ＥＮＤ－ｉｒ）阳性细胞的形态、分布和计数。图像分析仪测其灰度值。结果：光镜下计数下丘脑弓状核ＡＣＴＨ－ｉｒ和β－ＥＮＤ－ｉｒ阳性细胞，老龄鼠明显低于壮龄鼠。多数鼠第三脑室室周层出现许多β－ＥＮＤ－ｉｒ强阳性细胞。再感染老龄鼠弓状核ＡＣＴＨ－ｉｒ阳性细胞灰度值显著高于再感染壮龄鼠；其β－ＥＮＤ－ｉｒ阳性细胞灰度值显著低于再感染壮龄鼠。提示：再感染老龄鼠虽经人工主动免疫，当受细菌攻击时，有呈高ＡＣＴＨ低β－ＥＮＤ趋势；或许与其免疫功能衰退密切相关。     

实验性家兔脑出血MDA,GSH—Px,SOD,Cat含量的变化

应用立体定位内囊非肝素化自体血注血法制做家兔脑出血模型，观察其术后２ｈ、２４ｈ、３ｄ、７ｄ、１４ｄ各时相点外周血的丙二醛（ＭＤＡ），谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（Ｃａｔ）含量及活性变化情况。结果显示，脑出血后ＭＤＡ含量迅速升高，ＧＳＨ－ＰＸＳＯＤ及Ｃａｔ水平也相应增高，３天后抗氧化酶水平下降至正常以下，Ｇ／Ｍ比值呈明显下降趋势，说明抗经能力明显下降。     

鼠胚神经上皮细胞原代培养的形态学观察

应用倒置相差显微镜、扫描电镜、透射电镜和免疫细胞化学技术，对原代培养的神经细胞进行形态学观察。结果显示：接种后１０ｈ，少数细胞开始贴壁；２４ｈ时，大部分细胞贴壁，突起延长并互相连接，部分细胞ＮＳＥ免疫染色呈阳性；３ｄ时，胞体增大，突起互相连接成神经网络，胞核大，形态规则，胞质内含较多的粗面内质网和线粒体，高尔基复合体发达；７ｄ时神经细胞晕光明显，胞体饱满，ＮＳＥ免疫阳性细胞增多；１４ｄ时，神经细胞数目减少，有些神经细胞开始退化；２１ｄ时，神经细胞数目明显减少，突起萎缩，出现碎解。     

大鼠脑缺血淋巴细胞浸润的免疫组化研究

目的 探讨脑缺血后淋巴细胞浸润情况。方法 用免疫组化方法检测了３０只大鼠大脑中动脉局部脑缺血１２ｈ、２４ｈ、３ｄ、７ｄ和１０ｄ后损伤区ＣＤ３、ＣＤ４和ＣＤ８阳性淋巴细胞。结果 缺血１２～２４ｈ即可见ＣＤ３阳性和ＣＤ８阳性细胞浸润，３ｄ和７ｄ组阳性细胞最多。这些浸润的淋巴细胞位于反应带以及坏死中心和反应带的交界处。位于坏死区周围的ＣＤ３阳性和ＣＤ８阳性细胞主要为圆形，有大细胞和小细胞两种形态；位于反     

Tc—99m标记抗AFP抗体在人肝癌裸鼠模型中的定位显像研究

目的：揭示锝（Ｔｃ）－９９ｍ标记的单克隆抗体在肿瘤定位中的应用。方法：通过ＳＭＣ－７７２１－ＣＳ细胞株诱导原发性肝癌实体瘤裸鼠模型，将Ｔｃ－９９ｍ标记抗ＡＦＰ单克隆抗体（ＡｎｔｉＡＦＰ－ＭｃＡｂ）和正常鼠免疫球蛋白（ＮＭＩｇＧ）通过尾静脉注射荷瘤裸鼠，分别在１５ｍｎ、１２ｈ、２４ｈ作单光子发射计算机断层显像（ＳＰＥＣＴ），结果：在注射标记抗体２４ｈ能得到清晰的肿瘤显像，对照组无肿瘤显像，其中靶与非     

强噪声损伤后小鸡耳蜗毛细胞再生及听功能恢复的观察

为了解噪声损伤后小鸡耳蜗结构与功能的改变，并探讨毛细胞再生与听功能恢复的关系，将６０只７～９ｄ龄小鸡随机分为噪声损伤组（３６只）和年龄对照组（２４只），将噪声损伤组小鸡暴露于１５００Ｈｚ，等效声压级１２０ｄＢ的纯音中连续刺激２４ｈ后，分别于即刻、３ｄ、７ｄ、１４ｄ、２１ｄ及３５ｄ同年龄对照组一起处死，处死前测试耳蜗神经动作电位（ＡＰ），应用扫描电镜观察耳蜗基底乳头感觉上皮表面毛细胞、支持细胞以及盖膜的损伤与修复情况，并与年龄对照组相比较。结果表明强噪声损伤后小鸡听阈明显提高（Ｐ＜０．００１），阈…