重组免疫毒素EGF-TCS对荷瘤小鼠抗肿瘤效果的实验研究

目的 使用EGF-TCS重组蛋白对裸鼠的肿瘤模型进行体内抑瘤实验,观察其抗肿瘤效果.方法 分别给裸鼠右腋皮下接种人肝癌BEL-7402细胞,接种后第6天,尾静脉注射100、50和25 μg/kg EGF-TCS进行治疗,设空白对照组,停药后第2天处死小鼠,称量瘤重,计算抑瘤率;肿瘤组织做免疫组织化学实验,从而研究其抑制肿瘤生长的途径.结果 高、中和低剂量组的抑制率分别为71.3%、60.87%和45.22%,对治疗结束后各组平均瘤重进行统计学分析,结果有显著性差异(F=8.712,P=0.006);免疫组化结果显示EGF-TCS可以明显的抑制肿瘤血管的形成,高剂量组肿瘤组织未有可见血管,中低剂量组肿瘤组织血管明显少于模型组,其抑制肿瘤生长的途径可能是通过抑制肿瘤血管生长从而达到治疗目的.结论 EGF-TCS可以有效地抑制荷瘤小鼠实体瘤的生长,预示了该免疫毒素在肿瘤治疗中的潜在应用价值.     

肺积方抑制Lewis肺癌肿瘤生长及其抗移植瘤血管生成的实验研究

目的：观察肺积方对移植性肿瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法：将C57小鼠与裸鼠分别随机分为对照组及中药低、中、高剂量组。①建立C57小鼠Lewis肺癌模型,于接种后第10天开始药物干预,中药组灌胃相应浓度的肺积方,对照组予生理盐水。在给药第5、8、11、14天测量小鼠瘤径,灌胃第14天处死小鼠并称取瘤重。②采用Lewis肺癌细胞株接种于裸鼠背部视窗部位,药物干预同上。分别在给药当天及第4、9、14天静脉注射FITC-dextran以显示功能性血管,在激光共聚焦扫描显微镜下测量单位面积的平均血管数量和直径。结果：①在各观察时间节点,高剂量组瘤径均明显小于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,而低、中剂量组与对照组无明显差异（P〉0.05）;第8、11、14天高剂量组瘤径均明显小于低剂量组（P〈0.01,P〈0.05）,第8、11天高剂量组明显小于中剂量组（P〈0.01）。14 d后,高剂量组瘤重明显低于对照组（P〈0.05）;低、中剂量组均低于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。②第9、14天,中、高剂量组血管数量明显少于对照组与低剂量组（P〈0.01）,而低剂量组与对照组数量相当（P〉0.05）;第4天高剂量组血管直径明显小于低剂量组（P〈0.05）,其余时间点各组血管直径无明显差异（P〉0.05）。结论：肺积方对Lewis肺癌小鼠移植瘤的生长具有抑制作用,这种作用可能与减少肿瘤组织中功能性血管的数量,从而抑制肿瘤血管新生有关。     

黄芪-莪术配伍对Lewis肺癌生长转移及血管生成的抑制作用及机制研究

目的通过检测黄芪-莪术配伍对Lewis肺癌瘤组织微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨其通过调控肿瘤血管生成抑制肿瘤生长及转移的作用机制。方法腋下接种Lewis肺癌细胞,建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,然后随机分成模型组、顺铂组、低中高剂量黄芪-莪术配伍组,自接种后第2天起低、中、高剂量黄芪-莪术配伍组分别予4,8,16 g/(kg·d)生药灌胃1 d,连续15 d;顺铂组腹腔注射顺铂2 mg/kg,1/2 d,共8次。于接种后第16天处死小鼠,称瘤重计算抑瘤率并计数肺转移灶,免疫组化法检测肿瘤组织中微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果各中药配伍组均可抑制肿瘤生长及转移,低、中、高剂量黄芪-莪术配伍组的抑瘤率分别为20.9%、37.70%、40.42%,且瘤重和肺转移灶计数均低于模型组,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,各中药组瘤组织的MVD平均计数和VEGF蛋白平均光密度显著降低(P0.01),且高剂量黄芪-莪术配伍组降低最为显著。结论黄芪-莪术配伍应用可降低瘤组织微血管密度,抑制瘤组织VEGF表达,发挥抑肿瘤生长及转移的作用。     

IL-18对人舌癌移植瘤的抑制作用

目的：观察IL-18对人舌癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法：建立舌癌裸鼠移植瘤模型16只,随机分为IL-18治疗组、荷瘤模型组,每组8只,分别给予IL-18、生理盐水于接种第7日起腹腔注射。观察IL-18对移植瘤体积变化及瘤重的影响。结果：IL-18对小鼠健康状况无明显影响,但对小鼠移植瘤生长有明显抑制作用,肿瘤抑制率为74.7%。结论：IL-18可抑制人舌癌裸鼠移植瘤的生长,其机制值的深入研究。     

内皮抑素对卵黄囊瘤裸鼠模型血管生长的影响

目的通过动物实验验证血管生长在卵黄囊瘤裸鼠模型中的作用,以及内皮抑素对模型血管生长的影响。方法建立卵黄囊瘤裸鼠模型,分别采用1.5mg/(kg.d)及0.75mg/(kg.d)两个浓度重组人血管内皮抑制素局部注射干预,并皮下及瘤内注射生理盐水25ml/(kg.d)注射对照,共14天,每组10只。药物干预结束后,明胶-氧化铅悬浊液灌注法行肿瘤血管造影,观察肿瘤血管差异。免疫组化方法检测移植瘤AFP、VEGF、CD34。结果 (1)小儿恶性畸胎瘤裸鼠模型复制成功,AFP在移植瘤细胞胞质中有表达,肿瘤性质稳定。(2)肿瘤体积自第6天测量治疗组肿瘤生长速度明显低于对照组(P<0.05);第12天测量结果提示高剂量组与低剂量组肿瘤体积出现显著差异(P<0.01)。(3)免疫组化:VEGF表达范围及强度,治疗组均小于对照组(P<0.05),高剂量组小于低剂量组(P<0.05),两对照组之间无明显差异(P>0.05);MVD:治疗组均小于对照组(P<0.01),高剂量组小于低剂量组(P<0.01),两对照组之间无明显差异(P>0.05)。(4)肿瘤血管造影:血管分布密度内皮抑素高剂量治疗组<低剂量组<实验对照组。结论内皮抑制素通过抑制VEGF的作用,减少血管发生,从而对卵黄囊瘤裸鼠模型移植瘤的生长有抑制作用。     

胃安宁颗粒对肿瘤血管VEGF Ki-67表达影响的实验研究

目的：观察胃安宁颗粒对SGC-7901荷瘤裸鼠血管VEGF、Ki-67表达的影响。方法：将裸鼠皮下接种胃癌SGC-7901细胞后随机分为对照组、阳性药组及胃安宁颗粒大、中、小剂量组,用药后分别计算瘤重系数,并将肿瘤组织进行免疫组织化学染色,检测VEGF、Ki-67表达的情况。结果：胃安宁颗粒大、中剂量均能明显降低荷瘤裸鼠瘤重和瘤重系数（P〈0.05～0.001）,免疫组织化学染色显示,应用胃安宁颗粒后肿瘤组织VEGF、Ki-67的表达有所下降。结论：胃安宁颗粒可能通过抑制VEGF、Ki-67的表达起到抑制肿瘤血管生成的作用,从而达到抗肿瘤的目的。     

三羧氨基喹啉对人舌鳞状细胞癌Tca8113裸鼠移植瘤效应及其机制研究

目的:观察三羧氨基喹啉(Linomide)对人口腔癌裸鼠移植瘤的治疗作用,并探讨其作用机制。方法:建立人舌癌裸鼠移植瘤模型,观察Linomide对肿瘤生长的抑制作用,采用免疫组化染色检测Linomide治疗组和对照组荷瘤裸鼠的肿瘤微血管密度(MVD)的变化,用半定量RT-PCR方法研究治疗组和对照组肿瘤组织中VEGF和VEGF受体FltlmRNA表达的改变,并测定各组小鼠血清VEGF水平的变化,同时,用原位末端标记(TUNEL)法观察治疗组和对照组裸鼠瘤体内肿瘤细胞凋亡的发生情况。结果:Linomide治疗组的裸鼠皮下肿瘤生长明显受到抑制,平均瘤重低于对照组(P<0.01)。结论:Linomide可有效抑制人舌鳞状细胞癌裸鼠移植瘤的生长,降低肿瘤微血管密度,通过抑制血管形成而发挥抗肿瘤作用,Linomide可抑制瘤组织VEGF受体FltlmRNA的表达;Linomide治疗荷瘤裸鼠后可诱导肿瘤细胞发生凋亡。     

地塞米松对小鼠H22肿瘤生长及血管生成的抑制作用

目的　探讨地塞米松对小鼠H2 2 肿瘤生长及血管生成的影响。方法　BALB c小鼠皮下接种H2 2 细胞 ,分别从接种当天和第四天开始给药 ,每天测肿瘤直径。第 12天处死动物 ,称瘤重。用抗CD31单抗对肿瘤组织做免疫组化微血管计数及流式细胞分析CD31表达。结果　地塞米松对小鼠H2 2 肿瘤的生长有显著的抑制作用 ,P<0 0 5。两给药组的瘤重和最终瘤体积与对照组比较均显著减小 ,P值均 <0 0 5 ,按瘤重计算 ,接种当天和第四天开始给药组的抑瘤率分别为 31 4 8%和 35 38%。从免疫组化及流式细胞分析的结果上看 ,接种当天给药组的微血管数比对照组少 ,差异有显著意义 ,P <0 0 1,接种第四天开始给药组的微血管数与对照组相比虽有减少 ,但无显著差异。结论　地塞米松对小鼠H2 2 肿瘤生长有显著的抑制作用。地塞米松的抗肿瘤效果和抗血管生成作用有一定的相关性 ,但对已形成的肿瘤 ,地塞米松的抗血管生成作用不明显     

胃肠安方对人胃癌生长、转移及血管生成和MMP2表达的影响

目的：观察胃肠安方对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用及其对肿瘤血管生成与基质金属蛋白酶2（Matrix metalloproteinase-2,MMP2）表达的影响。方法：建立裸小鼠胃原位癌模型,随机分为胃肠安组及生理盐水对照组,观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤生长及转移灶情况,以及肿瘤生长转移相关基因MMP2表达和肿瘤血管生成情况。结果：胃肠安方能显著抑制胃癌生长与转移。免疫组化结果表明,胃肠安组肿瘤微血管密度明显低于对照组。胃肠安方同时能抑制肿瘤组织MMP2表达。结论：胃肠安方具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移作用,其作用机制可能与抑制肿瘤新生血管生成及MMP2表达有关。     

抗血管内皮生长因子抗体对人浆液性卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的研究抗血管内皮生长因子抗体(抗VEGF抗体)对浆液性卵巢癌生长的抑制作用。方法首次采用人浆液性卵巢癌组织直接接种而建立的裸鼠皮下移植瘤动物模型,观察有中和活性的抗人VEGF121单克隆抗体对肿瘤生长的影响。实验用BALB裸鼠分为两组,每组各6只,治疗组给予抗VEGF 121抗体,100μg/次;对照组给予等体积的磷酸盐缓冲液,均为腹腔内注射,自肿瘤接种后24 h起,每周2次,共9次;肿瘤接种一周起每次给药前测量肿瘤的长径及短径,并计算各时点体积;治疗结束后24 h处死动物,测量肿瘤的重量及计数肿瘤组织中的微血管密度(MVD)。结果①抗体治疗组与对照组裸鼠的体积逐渐出现差异,这种差异随时间的推移逐渐增大,接种第22天差异有显著性(P<0.05),并持续至实验结束。②用药结束后24 h处死裸鼠,治疗组平均瘤重为(0.70±0.11)g,对照组平均瘤重为(1.19±0.18)g,两组相比较有显著性差异(P<0.01)。③对照组肿瘤组织中微血管较密集,MVD值为7.60±1.14,治疗组肿瘤组织中的微血管明显减少,MVD值为4.80±0.83,两组相比较差异有显著性(P<0.05)。结论抗VEGF121单克隆抗体能够有效抑制裸鼠体内浆液性卵巢癌皮下移植肿瘤的血管形成,从而达到抑制肿瘤生长的目的。     

恩度联合奥沙利铂对裸鼠胃癌种植瘤的抑制作用研究

目的:探讨恩度联合奥沙利铂对裸鼠胃癌种植瘤的抑制作用。方法:将人胃癌细胞SGC-7901注射于裸鼠腋下皮下,裸鼠腋下均出现瘤块即造模成功。将成模裸鼠32只随机分空白组、奥沙利铂组、恩度组和恩度+奥沙利铂组,每组各8只。给药方式均为腹腔注射,持续给药14 d。给药期间,每72 h称重1次,游标卡尺测量肿块的最长径、最短径,计算肿瘤相对体积。用药完成后,处死裸鼠,取瘤组织,称瘤重用于计算抑瘤率。对肿瘤组织和可疑淋巴结进行免疫组织化学染色,检测血管内皮生长因子(VEGF-C)的表达,并应用podoplanin蛋白作为淋巴管标记物,计算各组淋巴结转移阳性率及微淋巴管密度(LVD)。结果:恩度和奥沙利铂均能抑制肿瘤生长,但两者联合应用的效果优于单独应用;使用恩度组的淋巴转移阳性率、转移淋巴结数目及LVD均明显低于空白组与奥沙利铂组,差异具有统计学意义(P<0.01);奥沙利铂组与空白组之间差异无统计学意义(P>0.05);恩度组和奥沙利铂+恩度组VEGF-C表达的光密度值显著低于空白组和奥沙利铂组(P<0.01)。结论:恩度联用奥沙利铂明显抑制裸鼠皮下种植肿瘤的生长和淋巴结的转移,产生了协同抗肿瘤作用。     

十全大补汤对小鼠原发性肝癌的生长及血管生成的影响

目的：研究十全大补汤对小鼠原发性肝癌生长以及其血管生成的影响。方法通过小鼠肝癌细胞CT-26接种小鼠,构建荷兰裸鼠原发性肝肿瘤模型,随机分为对照组和研究组,其中对照组给予生理盐水治疗,研究组给予十全大补汤治疗。治疗10 d后取小鼠血液分析其中小鼠血清中血管内皮生长因子、血管抑素和内皮抑素水平,并测量2组小鼠的肿瘤大小和质量,免疫组织化检测转移瘤微血管密度及细胞增殖。结果与对照组相比,研究组小鼠血清中血管内皮生长因子表达降低（P<0.05）,血管抑素和内皮抑素表达上调（P<0.05）,肿瘤组织Ki 67明显降低（P<0.05）,转移瘤微血管密度明显降低（P<0.05）,并且研究组小鼠的肿瘤质量和尺寸均小于对照组（P<0.05）。结论十全大补汤能够抑制小鼠原发性肝癌肿瘤的生长,扰乱小鼠血清内血管内皮生长因子、血管抑素和内皮抑素的表达水平,抑制肿瘤血管的生成,对原发性肝癌小鼠的治疗具有一定的临床价值。     

Ad-Flk1-Fc抗膀胱肿瘤血管生成作用研究

目的：研究Ad-Flk1-Fc对膀胱肿瘤血管生成的抑制作用.方法：建立膀胱肿瘤皮下移植瘤模型,对照组及肿瘤组随机瘤内注射PBS及Ad-Flk1-Fc（2×10^9PFU）,2次/wk,共2wk.观察瘤内注射Ad-Flk1-Fc后肿瘤体积变化,并采用免疫组化法测定微血管密度（MVD）.结果：治疗组与对照组的肿瘤体积、质量、MVD值两组间差异有统计学意义.结论：Ad-Flk1-Fc能够有效抑制膀胱肿瘤的血管生成,并抑制肿瘤生长.     

大蒜素对裸鼠胃癌移植瘤生长和端粒酶活性的抑制作用

目的:探讨大蒜素对裸鼠胃癌移植瘤生长和端粒酶的活性抑制作用。方法:将SGC-7901胃癌移植瘤裸鼠随机分5组,N组为PBS处理组,P组为氟尿嘧啶组(250mg/L),L组为低剂量大蒜素组(600mg/L),M组为中剂量大蒜素组(800mg/L),H组为高剂量大蒜素(1 000mg/L)。观察荷瘤鼠的生长状态,量取肿瘤的大小绘制肿瘤的生长曲线,应用人端粒酶酶联免疫法测定端粒酶的活性。结果:与N组相比,大蒜素和氟尿嘧啶均对荷瘤鼠的肿瘤有抑制作用,各组对端粒酶活性均有抑制作用,大蒜素剂量越大抑制作用越强,H组与N组相比端粒酶的活性抑制作用有统计学意义(P=0.000)。结论:大蒜素对胃癌裸鼠移植瘤和端粒酶活性有抑制作用。     

小鼠机体炎症反应促进纤维肉瘤生长的作用

目的   探讨小鼠机体炎症反应促进纤维肉瘤生长的作用及可能机制。方法   C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(PBS组)、脂多糖组(LPS组)、纤维肉瘤组(PC组)、脂多糖+纤维肉瘤组(LC组)、脂多糖+纤维肉瘤+塞来昔布组(Cele组),PBS组小鼠腹腔注射PBS缓冲液,其余各组小鼠给以脂多糖(LPS)建立炎症模型,实验第5天处死LPS组、PBS组小鼠,其余组小鼠皮下接种纤维肉瘤细胞,同时Cele组小鼠给予塞来昔布,接种肿瘤第21天处死小鼠。比较各组小鼠的一般状况及肿瘤体积,处死小鼠后取肺组织观察外形改变及组织病理学特点,应用CD31染色比较PC组及LC组小鼠肿瘤的血管形态及微血管密度(MVD)。结果   与PBS组相比,LPS组小鼠肺组织血管通透性增高,组织液渗出增多,肺泡腔内可见大量红细胞、炎症细胞;与PC组相比,LC组小鼠肿瘤生长速度快,肿瘤MVD增加,血管紊乱。结论   炎症反应对纤维肉瘤的生长有促进作用,其机制可能与促进肿瘤血管生成有关,抗炎治疗可抑制纤维肉瘤的生长。     

人参皂苷Rg1与Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下的作用研究

目的:观察三七总皂苷主要成分人参皂苷Rg1和Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下的作用,并通过研究血管新生探索其可能的作用机制。方法:采用小鼠经皮下移植LLCs肿瘤细胞及腹腔注射异丙肾上腺素的方法制备肿瘤复合心肌缺血动物模型,再随机分为模型组、人参皂苷Rg1组、人参皂苷Rb1组;另设正常对照组。Rg1组和Rb1组分别予腹腔注射Rg1、Rb1(50 mg/kg);正常组与模型组给予等体积生理盐水。连续干预15 d后,比较各组小鼠的肿瘤生长情况、心肌组织病理形态学变化及通过免疫组织化学的方法检测心肌和肿瘤组织中CD34、vWF的蛋白表达。结果:人参皂苷Rg1及Rb1治疗组小鼠移植肿瘤生长显著受到抑制,其平均瘤重显著低于模型组(P0.05);两组心肌组织缺血损伤显著改善,胶原含量明显减少(P0.05,P0.01);同时心肌组织中CD34和vWF蛋白表达量显著升高,而肿瘤组织中CD34和vWF蛋白表达量显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:三七总皂苷主要活性成分人参皂苷Rg1和Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下显著抑制LLCs肿瘤生长,并显著改善心肌缺血损伤,其双向作用的机制可能与对血管生成双向调节作用有关。     

Inhibitory effect of a new gossypol derivative apogossypolone （ApoG2） on xenograft of human prostate cancer cell line PC-3

Objective： To investigate the inhibitory effect of apogossypolone （ApoG2） on prostate cancer cell line PC-3 in vivo, and explore its mechanism. Methods： The models of transplantation tumors in Balb/c nu/nu mice were established via subcutaneous injection of PC-3 cells and the tumor-transplanted mice were divided into 4 groups： control group and three ApoG2 treatment groups, with 10 mice in each group. Volumes of the tumor were estimated every 2 d and the morphology of tumor tissues was observed. Immunohistochemistry was employed to observe the expression of Bcl-2, PCNA, CD31, caspase-3 and caspase-8 in tumor tissues. Results： ApoG2 （2.5 mg/kg-10 mg/kg） given intraperitoneally once a day can obviously inhibit the growth of subcutaneous prostatic carcinoma implant. The tumor volume decreased obviously when the treatment dosage was bigger than 5.0 mg/kg （P〈0.01）. Meanwhile, ApoG2 decreased the expression of PCNA and CD31, and enhanced the expression of caspases-3, caspase-8 in tumor tissues. Conclusion： ApoG2 exert an inhibitory effect on prostatic carcinoma possibly by inducing apoptosis and inhibiting tumor angiogenesis.