硬孔灵芝粗多糖的最佳提取工艺

硬孔灵芝Ganoderma duropora Lloyd属灵芝科灵芝属紫芝组真菌,现代研究发现灵芝中含有多糖、三萜类、核苷、甾醇、生物碱、氨基酸、微量元素等多种成分,具有抗肿瘤、保肝、免疫调节、抗氧化、抗病毒、抗衰老、提高耐缺氧能力、抗放射线、保护胰腺β细胞、改变人血小板信号途径等生理活性[1-4].硬孔灵芝作为灵芝替代品在福建、广东等地被广泛运用,但迄今为止有关硬孔灵芝成分的研究报道很少.灵芝多糖是灵芝中的重要化学成分之一,我们采用正交试验法研究硬孔灵芝多糖的最佳提取工艺,为硬孔灵芝多糖的提取提供实验依据.     

灵芝总三萜提取工艺研究

目的优选灵芝三萜提取工艺。方法采用正交试验法，以灵芝总三萜的含量为检测指标优选其最佳提取工艺。结果影响提取的主次因素为C〉B〉A〉D，其中C为提取次数，B为提取时间，A为提取溶剂，D为溶剂用量。结论最佳提取工艺条件为5倍量95％乙醇回流提取3次，每次1．5h。     

灵芝深层发酵产物中四环三萜酸定性分析

以甲苯－乙酸乙酯－乙酸（１２：４：０．５）为展开剂,以硫酸－甲醇（１：１）为显色剂,通过硅胶薄层层析法由灵芝发酵产物中分离得到３种四环三萜酸,命名为Ｍ１,Ｍ２和Ｍ３,其Ｒｆ值分别为０．５６,０．４９,０．１７。并对这３种物质的紫外光谱特性进行了研究。抗菌实验显示３种四环三萜酸具有抑制大肠杆菌,产气杆菌,肠炎杆菌,金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌生长的活性。     

HPLC法测定灵芝子实体和孢子粉中灵芝酸C2、灵芝酸G和灵芝酸A

目的 建立灵芝子实体和孢子粉中3种灵芝酸类成分的HPLC测定方法,为全面评价灵芝药材和孢子粉的质量提供依据。方法 采用HPLC方法测定,Diamonsil（钻石）C8色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相乙腈–0.03%磷酸（28∶72）,体积流量1.2 mL/min,检测波长250 nm;柱温35 ℃。结果 灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝酸A分别在0.40～10.06 μg（r=0.999 99）、0.40～10.00 μg（r=0.999 99）、0.40～10.00 μg（r=0.999 99）线性关系良好,平均回收率分别为101.04%、99.39%、101.22%,RSD值分别为1.64%、1.86%、2.20%（n=6）;灵芝子实体中3种灵芝酸的质量分数分别在0.06～0.29 mg/g、0.12～0.37 mg/g、0.19～0.41 mg/g,灵芝孢子粉供试品中3种灵芝酸的质量分数分别在0～0.01 mg/g、0、0～0.03 mg/g。结论 本方法简便,稳定,可用于灵芝三萜类成分C2、灵芝酸G、灵芝酸A的定量分析。     

HPLC法和UV-VIS法测定灵芝孢子粉中灵芝三萜及灵芝多糖的含量

目的建立测定灵芝孢子粉中的两个有效成分灵芝三萜及灵芝多糖含量的方法,为进一步开发和应用灵芝孢子粉提供依据。方法以灵芝酸C2为标准品,通过HPLC法对灵芝孢子粉中灵芝酸C2的含量进行测定。色谱条件为：检测波长254nm;流动相为甲醇：水=55∶45,各加1%冰醋酸;柱温40℃;流速0.7mL/min。以葡萄糖为标准品,采用硫酸-蒽酮比色法,通过UV-VIS法对灵芝孢子粉中灵芝多糖的含量进行测定。结果HPLC法测得三批灵芝孢子粉中灵芝酸C2含量约为0.129‰,0.108‰和0.094‰,灵芝酸C2在7.35～147μg/mL范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,回收率为95.9%,95.6%和96.4%。UV-VIS法测得三批灵芝孢子粉中灵芝多糖的含量约为1.152%,1.129%和1.007%,葡萄糖在14.9～119.1μg/mL的范围内,浓度和吸光度呈线性关系,r=0.9991,回收率为95.0%,95.1%和95.2%。结论方法简便、准确,可用于灵芝孢子粉中灵芝三萜和灵芝多糖的含量测定。     

大孔树脂纯化马兰总三萜工艺研究

目的 研究大孔树脂纯化马兰总三萜的工艺。方法 以齐墩果酸为对照品,以吸附量和解吸率作为效果评定指标,筛选出对马兰中总三萜纯化效果最好的大孔树脂,并对上样量、上样液浓度、洗脱速率、洗脱乙醇浓度及用量参数进行考察,筛选出最佳工艺条件。结果 HPD-500的吸附量为0.495 5 mg/mL,解吸率为30.47%,效果最佳;最佳上样液浓度：0.02 g/mL;流速：2 mL/min;洗脱剂：70%乙醇;洗脱体积：2倍柱体积。纯化后马兰三萜含量可达到17.81%。结论 HPD-500大孔树脂在所得工艺条件下可以对马兰中总三萜进行较好的纯化。     

RP—HPLC法测定不同部位灵芝中灵芝酸B含量

目的：测定灵芝中具有苦味的成分灵芝酸B在灵芝中不同部们的含量,方法：采用RP－HPLC法测定灵芝菌盖的表皮层,木栓层,菌柄,孢子粉,菌盖子实体等部位分中灵芝酸B的含量,结果：灵芝药材中灵芝酸B主要集中在灵芝的表皮部位,其它部位则较少,结论：为寻找灵过的有效成分分布规律提供了客观依据。     

响应曲面法提取阿里红中总三萜酸成分

目的采用响应曲面法对阿里红中总三萜酸成分进行提取。方法在单因素试验基础上,利用响应曲面法中心组合设计,采用超声波辅助萃取法对阿里红中总三萜酸提取工艺参数进行优化分析,选择超声功率、超声时间和超声温度作为优化因素,研究不同因素水平对阿里红总三萜酸得率的影响。结果通过响应面分析得到总三萜酸提取的最优条件：超声功率245．2 W、提取时间34．3 min、提取温度50．0℃。结论总三萜酸类化合物提取的实测结果与响应曲面拟合所得方程的预测值符合良好。     

灵芝三萜对卵巢癌多耐药蛋白表达的影响

目的通过观察体外培养人卵巢癌细胞在灵芝三萜干预后多耐药蛋白的表达,探讨灵芝三萜增强化疗药物疗效,减低药物不良反应的机制。方法体外培养人卵巢上皮癌细胞HO-8910,分为灵芝三萜高剂量组(200 ng/mL)、中剂量组(20 ng/mL)、低剂量组(2 ng/mL)和空白对照组,荧光定量和蛋白印迹检测细胞ABCB1mRNA和蛋白的表达。加入顺铂共培养后,MTT检测细胞凋亡率。结果 (1)ABCB1 mRNA表达灵芝三萜高剂量组为19.019 7±0.161 7,中剂量组为22.660 7±0.066 6,低剂量组为24.809 2±0.136 2,空白对照组为29.321 9±0.112 3,灵芝三萜高剂量组、中剂量组、低剂量组与空白对照组间比较,差异均有统计学意义(P=0.000)。(2)ABCB1蛋白表达灵芝三萜高剂量组为0.08±0.01,中剂量组为0.11±0.01,低剂量组为0.13±0.01,空白对照组为0.14±0.01,灵芝三萜高剂量组、中剂量组、低剂量组与空白对照组间比较,差异均有统计学意义(P=0.000)。(3)加入顺铂共培养后,细胞凋亡率灵芝三萜高剂量组为0.730 9±0.444 8,中剂量组为0.720 9±0.435 1,低剂量组为0.698 9±0.421 1,空白对照组为0.060 5±0.015 5,灵芝三萜高剂量组、中剂量组、低剂量组与空白对照组间比较,差异均有统计学意义(P=0.001)。结论灵芝三萜可能通过影响ABCB1表达增强化疗药物疗效。     

枇杷叶三萜酸研究进展

枇杷叶三萜类主要有熊果酸、齐墩果酸、科罗索酸和山楂酸等多种生理活性物质,具有较高的药用价值。该文对枇杷叶三萜酸的药理作用、提取分离和分析检测等方面的研究作了归纳与论述,为枇杷叶三萜酸在食品和医药上的进一步研究开发提供理论依据。     

灵芝合剂对乳鼠星形胶质细胞组织因子表达的影响

目的观察灵芝合剂(GJLM)对脂多糖(LPS)诱导大鼠星形胶质细胞表达组织因子(TF)的影响。方法培养Wistar乳鼠星形胶质细胞,用抗神经胶质纤维酸性蛋白单克隆抗体确认星形胶质细胞。细胞冻融液TF活性检测采用一期血浆复钙时间法。结果与对照组相比,LPS使星形胶质细胞表达TF明显增加(591±33 mU/mL vs382±25 mU/mL,n=12,P<0.01),并呈剂量依赖性(r=0.993);GJLM能明显地抑制LPS诱导星形胶质细胞表达TF(108±19 mU/mL vs 591±33 mU/mL,n=12,P<0.01)。结论LPS促进星形胶质细胞表达TF,而GJLM能抑制LPS诱导星形胶质细胞表达TF。     

藤黄中新藤黄酸提取分离工艺改进

目的改进从中药藤黄中提取、分离新藤黄酸的工艺。方法按正交试验法优选提取工艺,以乙醇为提取溶剂,并采用AB-8大孔树脂富集,硅胶柱湿法上样,流动相(石油醚∶乙醇=20∶1)洗脱,分离得到纯化的金黄色化合物。运用熔点测定、紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振技术,通过与文献数据比较来确证化合物结构。结果金黄色化合物的熔点、紫外光谱、红外光谱、质谱、1 H-核磁共振谱(nuclear magnetic reso-nance,NMR)、13C-NMR数据与文献中新藤黄酸的相应数据一致。结论运用改进的工艺从藤黄中提取分离新藤黄酸是可行的,更利于工业化生产。     

藤黄中新藤黄酸提取分离工艺改进

目的 改进从中药藤黄中提取、分离新藤黄酸的工艺.方法 按正交试验法优选提取工艺,以乙醇为提取溶剂,并采用AB-8大孔树脂富集,硅胶柱湿法上样,流动相(石油醚∶乙醇=20∶1)洗脱,分离得到纯化的金黄色化合物.运用熔点测定、紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振技术,通过与文献数据比较来确证化合物结构.结果 金黄色化合物的熔点、紫外光谱、红外光谱、质谱、1H-核磁共振谱(nuclear magnetic resonance,NMR)、13C-NMR数据与文献中新藤黄酸的相应数据一致.结论 运用改进的工艺从藤黄中提取分离新藤黄酸是可行的,更利于工业化生产.     

灵芝活性多糖的提取工艺研究

目的确立水提醇沉法与超声提取法相结合提取灵芝活性多糖的最佳工艺。方法以脾细胞代谢MTT活力为评价指标,采用正交试验对超声时间、水提温度和水提时间等因素进行考察,寻求最佳的提取工艺。结果各因素对灵芝多糖脾细胞代谢MTT活力的影响大小排列为：超声时间〉水提温度〉水提时间,超声时间对灵芝多糖活性影响显著。提取最佳工艺为：超声提取时间20min,水提取温度80℃,水提取时间2h。结论本工艺为提取活性灵芝多糖提供了一定的参考。     

灵芝酸A对癫痫样放电海马神经元的影响

目的：旨在验证灵芝酸A对海马神经元异常放电的影响。方法分离24h新生Wistar大鼠原代海马神经元。正常对照组：将培养9d的海马神经元全液换成正常细胞外液处理3h,然后恢复正常培养24h;无Mg2＋诱导组、灵芝酸A组、紫杉醇组、γ－氨基丁酸组、丙戊酸钠组分别将培养9d的海马神经元全液换成无镁细胞外液或添加相应的50μg／mL的灵芝酸A、50μmol／L的紫杉醇、100μmol／L的γ－氨基丁酸、100mg／L的丙戊酸钠混悬液处理3h,然后恢复正常培养,MTT法检测细胞存活率;分光光度计检测超氧化物歧化酶活性;流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的变化。结果50μg／mL灵芝酸A可提高海马神经元细胞存活率;能升高癫痫样海马神经元细胞SOD活性、升高线粒体膜电位。结论灵芝酸A可通过抑制细胞氧化损伤、抑制凋亡而保护异常放电的海马神经元。     

变异白色红花总黄酮提取工艺研究

目的:对变异白色红花总黄酮的提取工艺进行优化。方法:在单因素实验的基础上,以总黄酮含量为指标,采用正交实验设计考察渗漉法和回流法最佳工艺。结果:确定回流法提取效果优于渗滤法,回流提取的最佳工艺参数为:乙醇浓度60%,料液比1:15,回流提取2次,每次30 min,在此条件下白花提取液总黄酮含量达到18.51%。结论:回流提取工艺条件简单、稳定、可行,为变异白色红花黄酮的提取提供依据。     

SFE技术对山银花中绿原酸转移率的影响

目的研究超临界流体萃取法（SFE）处理山银花后对其所含绿原酸转移率的影响。方法采用HPLC对SFE处理后的山银花水提液中绿原酸含量进行测定,同时与酶解法进行对比。结果经过SFE处理过的山银花,水提取绿原酸的转移率（95.1%）高于酶解法处理过的山银花中绿原酸的转移率（90.5%）,高于未做任何处理的山银花中绿原酸的转移率（72.5%）。结论 SFE技术处理有利于提高山银花水提液中绿原酸的转移率,为SFE应用于山银花中绿原酸的提取提供实验依据。     

乳癖康胶囊提取工艺研究

目的：筛选研究乳癖康胶囊的最佳提取工艺。方法：采用正交设计试验法,以橙皮苷含量和干膏得率为指标,以HPLC为测定方法。结果：乳癖康胶囊最佳提取工艺条件是：加10倍量水,提取2次,每次2h。结论：该工艺稳定可靠,符合传统中医药理论和实际生产情况。     

溶剂萃取法提取富马酸

通过对萃取剂的筛选，确定了一个以三烷基氧化磷（ＴＲＰＯ）为萃取剂，提取富马酸（ＦＡ）的萃取体系。采肜双对数法，红外图谱和水分分析对萃合物的研究表明：ＴＲＰＯ萃取ＦＡ的可能萃合物结构式为ＦＡ．２ＴＲＰＯ．Ｈ２Ｏ。对萃取过程中的各影响因素进行了考察，从而得到了最佳操作条件，并提出了一条采用溶剂以法从水溶液中提取ＦＡ的流程。     

一种从丹参中提取丹酚酸B的新工艺

为开发从丹参中提取高纯度丹酚酸B的新工艺,采用水提-壳聚糖絮凝-过滤-浓缩-醇沉-萃取工艺制得丹酚酸B含量在80%左右的丹酚酸提取物EB80。用硅胶柱层析法精制EB80,得到丹酚酸B含量为96%的提取物EB96。EB96的IR、M S1、H-NMR测试结果表明:其分子结构特征、相对分子质量与丹酚酸B相同。本工艺便于工业化实施。