酶偶联放大法测定血清总胆汁酸

目的建立简便的酶偶联放大法,直接检测血清总胆汁酸(TBA).方法基于脱氢酶-辅酶体系的原理,用丙酮酸钠作乳酸脱氢酶(LDH)的阻止剂,在Tris-HCl缓冲溶液中,由NAD+-NBT-Brij-98组成酶偶联放大系统.用自动生化分析仪测定血清TBA.结果线性范围0～180μmol/L;精密度批内CV＜2.7%,日间CV＜4.3%,总CV＜5.4%.与日本ENZABILE.AUTO(X)比较r=0.990,Y=1.114X-2.137,与朗道BILEACIDS(Z)比较r=0.997,Y=1.032Z+0.906.LDH＜3 kU/L,乳酸＜20 mmol/L,维生素C＜0.5 mmol/L,胆红素＜300μmol/L,血红蛋白＜5 g/L时,对结果无显著干扰.结论该法简便、灵敏,试剂稳定,适用于血清TBA的常规和自动分析.     

酶偶联放大法测定血清总胆汁酸

目的　建立简便的酶偶联放大法 ,直接检测血清总胆汁酸 (TBA)。方法　基于脱氢酶 辅酶体系的原理 ,用丙酮酸钠作乳酸脱氢酶 (LDH)的阻止剂 ,在Tris HCl缓冲溶液中 ,由NAD -NBT -Brij 98组成酶偶联放大系统。用自动生化分析仪测定血清TBA。结果　线性范围 :0～ 180 μmol/L ;精密度 :批内CV <2 .7% ,日间CV <4 .3% ,总CV <5 .4 %。与日本ENZABILE .AUTO(X)比较 :r =0 .990 ,Y =1.114X - 2 .137,与朗道BILEACIDS(Z)比较 :r =0 .997,Y =1.0 32Z 0 .90 6。LDH <3kU/L ,乳酸 <2 0mmol/L ,维生素C <0 .5mmol/L ,胆红素 <30 0 μmol/L ,血红蛋白 <5g/L时 ,对结果无显著干扰。 结论　该法简便、灵敏 ,试剂稳定 ,适用于血清TBA的常规和自动分析     

酶循环法测定血清总胆汁酸

目的　建立血清总胆汁酸 (TBA)测定的酶循环法。方法　基于用脱氢酶 辅酶体系循环底物的原理 ,建立了本法。结果　本法灵敏度 5 0 μmol/L ,A40 5nm ,1cm>0 .15 ;线性达 180 μmol/L ;批内CV <1.87% ,日间CV <2 .94 % ,总CV <3 .64% ;与普通酶显色法比较 :Y =0 .92 1X - 1.4 2 6,r=0 .9982 ,n =64。胆红素 <85 0 μmol/L、血红蛋白 <5 g/L、抗坏血酸 <2 .84mmol/L、乳酸 <2 4mmol/L、乳酸脱氢酶 <10 0 0 0U/L时 ,对结果无显著干扰。结论　本法灵敏度高 ,线性、精密度好 ,几乎无干扰 ,是一种理想的TBA测定方法。     

尿素酰基裂解酶酶偶联法测定血清总钙

目的 介绍尿素酰基裂解酶酶偶联测定血清总钙的方法。方法 双试剂两点法；缓冲液为三乙醇胺（TEA，pH8.0,200mmol/L）；试剂I：含NaHCO326.0mmol/L,NADPH 0.4mmol/L,α－酮戊二酸8.0mmol/L，尿素酰基裂解酶115U／L，GLDH43．0kU/L；试剂Ⅱ：含NaCO3 26.0mmol/L,ATP6.2mmol/L。结果 方法线性范围为0．5－5．0mmol/L，批内和批间平均变异系数分别为2．13％和2．69％。平均回收率为102．7％ 。本法（Y）与邻甲酚酞络合酮法（OCPC法，X1）比较：r＝0．981，Y1＝1．02X1－0．021，与偶氮胂Ⅲ法（X2）比较：r＝0．978，Y＝0．99X2＋0．03。血清胆红素高达300μmol/L，血红蛋白4g/L，镁2.5mmol/L，NH4^ 2.0mmol/L,Trig 8.0mmol/L对本法无明显干扰。结论 本法具有简便、准确、快速，适用于自动分析等特点。     

脲酶结合邻甲酚酞络合剂显色检测血清及尿液尿素含量

目的　建立一种实用的血清和尿液中尿素含量的比色测定方法。方法　脲酶水解尿素产生氨(NH3),使溶液pH升高,以邻甲酚酞络合剂(OCPC)作为pH指示剂,波长570nm吸光度变化与尿素浓度成正相关。结果　该法线性范围血清1.00～200mmol/L,尿液10.0～1000mmol/L;检测界限血清0.36mmol/L,尿液2.19mmol/L。精密度分析血清批内CV1.13%～2.78%,批间CV1.81%～3.91%,总CV2.13%～4.80%。尿液批内CV0.68%～1.72%,批间CV0.96%～2.24%,总CV1.17%～2.82%。平均回收率血清100%,尿液102%。该法(Y)与酶速率法(X)比较相关性良好(血清Y＝1.048X+0.511,r＝0.998,S     

用pH指示剂测定血清尿素

目的 建立用pH指示剂测定血清尿素的方法.方法 用脲酶水解尿素释放氨引起pH升高,从而引起邻甲酚酞络合酮的颜色改变.最佳试验条件:波长570 nm,脲酶浓度为45 kU/L,pH 7.4、30 mmol/L Tirs-Cl缓冲液,5 mmol/EDTA·Na4,反应时间5 min.结果 尿素浓度在0～100mmol/L内呈线性.批内CV为3.98%,2.64%,1.74%;批间CV为2.01%,2.57%;平均回收率为99.85%.与酶法相关性好,r=0.9902.结论 本法操作简便,实用性强,结果准确,抗干扰性强,显色稳定性好.     

胆固醇脱氢酶测定血清胆固醇方法的建立

目的　评价胆固醇脱氢酶测定法在临床应用的可行性。方法　胆固醇酯在胆固醇酯酶的作用下 ,水解为游离胆固醇 ,后者被胆固醇脱氢酶还原为胆烷 4 烯 3 酮 ,同时 β NAD+ 还原为 β NADH +H+ 。联胺能清除其反应产物胆烷 4 烯 3 酮 ,使反应完全。结果　回收率为 99.9%和 10 0 .1% ,在 1.1～ 2 0 .2 8mmol/L内为线性 ;批内CV为 0 .2 9%～ 0 .39% ,批间CV为 0 .4 2 %～ 0 .4 5 % ;乳酸脱氢酶无影响 ;与化学比色法 (X1)和胆固醇氧化酶法 (X2 )比较 ,回归方程分别为Y =0 .992X1- 0 .0 0 6 ,r =0 .997;Y =0 .989X2 - 0 .0 4 8,r =0 .999。结论　本法结果准确、可靠、易自动化。     

液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳的实验对比

目的　评价液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳 (TCO2 )的可靠性。方法　依据美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS)有关文件对 2种试剂测定血清TCO2 进行相关性比较并对其线性、精密度进行评价。结果　液体试剂与干粉试剂相关良好 (r =0 .976 0 ) ,预期相对偏差在 15mmol/L时为 0 .0 7% ,在 2 5mmol/L时为 0 .16 % ,在 5 0mmol/L时为 0 .2 2 %。 2种试剂的线性范围均较宽 ,线性回归方程分别为Y =0 .995 9X - 1.4 2 92和Y =0 .9787X - 0 .5 74 8,r分别为 0 .9998和 0 .9997。 2种试剂的精密度均很好 ,其批内不精密度及总不精密度 (CV)均 <6 .1%。结论　液体试剂与干粉试剂测定血清中的TCO2 的相关性、线性、精密度均很好 ,具有可比性 ,而液体试剂使用更为方便。     

尿液和脑脊液蛋白测定自动比浊法的评价

目的评估和证实尿液和脑脊液蛋白测定自动比浊法的性能.方法用罗氏公司的苯索氯铵试剂,以比浊法进行尿液和脑脊液蛋白测定,并对方法的检测限、病人结果可报告范围、精密度和准确度等作了实验观察.结果方法的检测低限为0.04 g/L,可定量报告的检测限为0.08 g/L,病人结果可报告范围为0.08～2.0 g/L,批内CV为1.5%,此间CV为2.2%;传统磺柳酸蛋白测定与之比较,二法间尿液Y1=0.85X+0.068,r=0.972;脑脊液Y2=0.86X+0.056,r=0.980.结论本法简便、快速、准确且样本用量少(5～15 μl),适合临床实验室推广应用.     

乳酸氧化酶法测定血浆中乳酸

采用乳酸氧化酶氧化乳酸产生丙酮酸和H2 O2 ,然后偶联Trinder显色反应测定血浆中乳酸。方法线性可达 13 2mmol/L ,批内变异系数 (CV)为 0 86 %～ 1 5 6 % ,回收率为 98 9%～ 10 1 5 % ,与LD NBT法比较具有良好的相关 ,r =0 989,Y =0 989X 0 0 3 ,5 0例健康人血浆乳酸参考值为 0 6 1～ 2 5 1mmol/L (x± 2s)。本法简便 ,可靠 ,适合作为乳酸的常规测定方法。     

低密度脂蛋白胆固醇的直接测定法

目的　建立直接测定血清低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)的方法。方法　基于选择性水解法的原理 ,通过对多聚体和表面活性剂的筛选和测定条件的优化实验确定了方法。结果　本法反应达终点的时间为 180s ,线性达 11 7mmol/L ,批内CV <1 6 4% ,日间CV <2 6 5 % ,总CV <3 38% ,回收率平均为 99 7%。和日本一化试剂比较 :Y =0 94X 0 0 32 ,r =0 975 ,n =5 2。本法的特异性好 ,加入LDL C达 3 9mmol/L ,VLDL Trig达 19 5mmol/L ,抗坏血酸 <2 84mmol/L、血红蛋白<5g/L和胆红素 <340 μmol/L时无显著干扰。 结论　本法的总误差 <7 40 % ,达到NCEP提出的 <12 %的分析目标 ,标本无需预处理 ,适合全自动分析     

双试剂酚红比色法测定血清碳酸氢根

目的　建立一种能适合各级实验室常规和急诊检测血清HCO3 -的方法。方法　应用自配双试剂建立了两步终点测定法 ,可同时满足全自动和半自动手工测定 ,用日立 70 6 0生化仪对本方法进行方法学评价。结果　比色液吸收峰为 5 5 8nm ,线性范围可达 5 0mmol/L ,批内CV3.4 5 % ,批间CV4 .88% ,平均回收率 10 2 .3% ,与血气分析仪 (X)相关良好 ,Y =1.0 0 5 9X -0 .10 38,r =0 .9813(n =6 0 ) ,黄疸、脂血、溶血标本对结果无影响 ,健康人静脉血HCO3 -浓度 2 1.2～ 31.2mmol/L。结论　本法操作简便、灵敏准确、试剂稳定、成本低廉     

肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐在CX9分析仪上的应用

目的建立肌氨酸氧化酶-PAP法测定血清肌酐的自动分析方法.方法根据测定条件的优化实验采用肌氨酸氧化酶法直接测定.结果本法300s达反应终点,线性达8840μmol/L(Y=0.9835X+0.124,r=0.9997),批内CV＜1.87%,日间CV＜3.56%,总CV＜4.19%,回收率平均100.3%,加入,BIL＜456μmol/k;Hb＜200g/L;抗坏血酸2.48mmol/L时无显著干扰.结论本法适合全自动分析.     

血清钙的偶氮氯膦I测定法

目的　建立一种简便、灵敏、试剂稳定的分光光度法测定血清钙。方法　用国产试剂偶氮氯膦Ⅰ作显色剂测定血清钙。结果　显色络合物最大吸收波长为 5 80nm ,线性范围达 4 5mmol/L ,摩尔吸光系数为 7 72× 10 3 L·mol 1·cm 1。回收率为98 3%～ 10 1 3%,批内变异系数和批间变异系数分别为 1 87%与 2 13%,与原子吸收分光光度法Y比较具有良好的相关性 ,Y =1.0 75X - 0 .12 0 ,r =0 .984.Mg2 + 3mmol/L、Cu2 + 、Fe3 + 、Zn2 + 各 10 0 μmol/L、胆红素 2 80 μmol/L甘油三酯 4 8mmol/L、血红蛋白 2 5 g/L以下对本法测定结果无影响。 结论　该方法具有快速、简便、灵敏可靠等优点 ,适合于临床应用。     

血清氯化物酶法测定

目的　建立血清氯化物的α 淀粉酶及其底物 2 氯 4 硝基苯 α D 麦芽三糖苷 (CNP G3)直接测定方法。方法　根据氯离子是α 淀粉酶的激动剂原理建立氯化物测定方法 ,并做方法学评价。结果　测定结果的平均偏差率为 0 4 6 % ;线性范围 5 0～1 5 0mmol/L ;平均回收率为 1 0 0 6 2 % ;批内CV <1 2 4 % ,日间CV <1 86 % ,总CV1 4 5 %～ 2 2 4 % ;加入高浓度的维生素C、葡萄糖、蔗糖、果糖、α 淀粉酶、三酰甘油、血红蛋白、胆红素、钙离子、溴离子、碘离子、氟离子、硫氰酸钾、对硝基酚、叠氮钠和硫酸铵均未显示干扰。与硫氰酸汞比色法 (MTC) ( x±s)比较 :MTC法 (X) :(95 6 6± 1 4 .4 5 )mmol/L ,酶法 (Y) :(95 6 2± 1 4 .93)mmol/L ,t=0 .0 78,P >0 5 ,Y =1 .0 1 6X - 1 .5 87,r=0 .984 ,n =93,P <0 .0 0 1 ;与离子选择电极法 (ISE) ( x±s)比较 :ISE法 (X) :(99.0 0±1 3.1 1 )mmol/L ,本法 (Y) (98.6 1± 1 2 .70 )mmol/L ,t=0 .1 4 0 ,P >0 .5 ,Y =0 .96 2X +3.375 ,r=0 .993,n =4 4 ,P <0 .0 0 1。溶解的工作试剂 (R1、R2 ) 2～ 8℃冷藏至少可以稳定 1 4天。结论　该方法测定成本低 ,准确、精密、线性范围宽 ,稳定性好 ,在抗卤族元素溴、碘及硫氰酸等阴离子的干扰方面 ,显著优于其他方法     

脲酶传导速率法测定血清尿素

目的 了解脲酶传导速率法测定血清尿素的实验特点。方法 采用脲酶传导速率法测定血清尿素，并与酶偶联法进行比较。结果 批内精密度为2.67%,2.06%和1.17%，批间精密度分别为3.02%，2.19%和1.82%，线性范围达46.80mmol/L，平均回收率100.71%，脲酶法（Y）与酶偶联法（X）比较：Y=1.0872X-0.4893,r=0.9995，且两者差异无显著意义（P＞0.05)。结论 脲酶传导速率法测定尿素特异、快速、干扰因素少，适合临床应用。     

液体单试剂酶法测定血清碳酸氢根

目的建立一种稳定的单试剂酶法测定血清碳酸氢根(HCO3-)。方法利用自配单试剂建立了两点法的检测方法,可满足全自动和手工测定,用Bayer 1650生化仪对本方法进行方法学评价。结果本法的线性范围可达50 mmol/L,批内变异系数(CV)为2.48%,批间CV为3.24%,平均回收率102.8%,与血气分析仪(X)相关良好,Y=1.019X-0.745,r=0.990 3,黄疸、脂血、溶血标本对结果几乎无影响,健康人静脉血HCO3-浓度为21.5~32.3 mmol/L。结论本法操作简便、反应特异、灵敏准确、试剂较稳定,适用临床检测。     

对钒酸氧化法测定血清中胆红素的评价

目的 :评价钒酸氧化法测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法 :钒酸氧化法的精密度、准确度实验及其重氮法相关和干扰因素实验。结果 :批内 CV总、直接胆红素分别为 0 .8%与 1 .3%。日间 CV为1 .8%与 1 .7% ,平均回收总胆红素为 1 0 1 .1 % ,直接胆红素 1 0 0 .1 %。与重氮试剂法相关 ( J- G法 )总胆为 Y(本法 ) =1 .0 1 5X(重氮法 ) - 0 .1 1 9,r=0 .998,直接胆红素为 Y(本法 ) =1 .1 0 1 x(重氮法 ) 0 .81 ,r=0 .952。相关良好 ,血红蛋白浓度和脂血分别高达 3g/L和 9.0 mmol/L不干扰。结论 :该法简单、快速、稳定 ,而且对溶血、乳糜等干扰因素的影响比重氮法小     

邻苯二甲醛双试剂法测定血清尿素的探讨

目的 对邻苯二甲醛双试剂自动分析测定血清尿素的方法进行探讨。方法 用优选法对试剂成份进行优化组合。以含邻苯二甲醛67 mmol/L、硫酸1.6 mol/L和磷酸1.6 mol/L的混合溶液作为第一试剂;以含偏钒酸铵4.3 mmol/L,安替比林0.21 mmol/L的混合溶液为第二试剂测定血清尿素。结果线性范围0-35 mmol/L,回收率98.1％-101.1％,平均回收率为99.6％;批内CV:低尿素含量血清为1.32％,高尿素含量血清为0.91％。批间CV:低尿素含量血清为2.04％,高尿素含量血清为1.08％。与UV-GLDH法比较,r=0.992,回归方程Y=1.02X+0.127,P>0.05;脂肪乳糜和溶血标本对测定结果无影响。结论 该法线性范围宽,精密度好,回收率高,试剂配制方便、稳定,易于保存,适用于手工操作和自动化分析。     

尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶自动化测定

目的建立用对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷自动化测定尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的方法.方法采用两点终点法,无需做尿样空白,用自动生化分析仪直接测定.结果线性范围0～90U/L,精密度批内CV2.3%,批间CV2.8%,与手工终点法比较,Y(本法)=0.7831X(手工法)+0.5238,r=0.9719.结论该法简便,试剂稳定,适用于尿液NAG活力的自动分析.