β-淀粉样蛋白对大鼠脑神经细胞凋亡及白介素2表达的影响

目的 研究β－淀粉样蛋白的神经毒性机制,特别是对大鼠海马和额叶皮层细胞凋亡相关基因ｂｃｌ－２表达的影响,以及尼莫的平的作用。方法 将ＳＤ大鼠随机分模型组、治疗组和对照组。在立体定位下于迈内特基底核注入Ａβ１０μｇ建立Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病模型,治疗组在建立模型后每天腹腔注射尼莫的平至实验结束。对照组ＮＢＭ注入等容积生理盐水。流式细胞仪ＤＮＡ含量分析和免疫荧光法检测来测定细胞群中细胞凋亡的比例和Ｂｃｌ     

丙泊酚对大鼠海马CA1区长时程增强的影响

目的：研究丙泊酚对大鼠海马CA1区长时程增强（LTP）表达的影响,并探讨其机制。方法：63只戊巴比妥钠麻醉大鼠分多组,分别观察腹腔注射丙泊酚20mg/kg对海马CA1区树突层兴奋性突触后膜电位（EPSP）、LTP表达的影响以及与D-2-氨基-5-磷酸戊酸（APV）和6-氰基-7-硝基喹啉-2,3-二酮（CNQX）合用时对LTP表达的影响。结果：各组基础EPSP幅值稳定;高频刺激（HFS）前应用丙泊酚引出的LTP与对照组相当（P〉0.05）,HFS后LTP幅值明显低于对照组（P〈0.01）;丙泊酚合用APV后不能引出LTP,合用CNQX后幅值一过性升高后,迅速下降并低于基线（P〈0.05）。结论：丙泊酚20mg/kg腹腔注射不影响戊巴比妥钠麻醉大鼠海马CA1区N-甲基-D-门冬氨酸（NMDA）受体依赖型LTP诱导,但可影响其维持;其机制与阻滞α-氨基-3-羟基-5-甲基恶唑-4-丙酸（AMPA）受体有关,与NMDA受体功能状态无关。     

GABA及受体拮抗剂对大鼠海马CA3区长时程增强效应的影响

目的探讨GABA在海马CA3区长时程增强(long-term potentiation,LTP)诱导和形成中的作用。方法应用在体电生理研究方法,观察局部给予GABA及GABAA受体拮抗剂bicuculline对海马CA3区LTP诱导和维持的影响;应用高效液相色谱荧光检测技术测定LTP诱导90min后实验侧海马组织GABA含量变化。结果①强直刺激PP纤维诱导LTP90min后,海马组织GABA水平(119.3±10.8)μmol.g-1protein较对照组(206.4±24.7)μmol.g-1protein降低(P<0.01);谷氨酸含量与对照组比差异无显著性(P>0.05)。②强直刺激前5min局部给予GABA200nmol,LTP诱导明显被抑制,相对PS幅值在各个时间点均低于LTP诱导组(P<0.01)而与对照组接近(P>0.05);给予GABAA受体拮抗剂甲基溴化荷包牡丹碱(bicuculline methbromide,BMB)1nmol1min再给予GABA200nmol,发现GABA对LTP的抑制作用减弱,PS幅值高于只给予GABA组(P<0.01)。③强直刺激PP纤维诱导LTP形成30min后,海马CA3区局部给予GABA200nmol,LTP效应被翻转,相对PS幅值在各时间点均低于LTP诱导组(P<0.01)而与对照组接近(P>0.05);给予BMB1nmol1min后再给予GABA200nmol,GABA对LTP效应的抑制作用减弱,PS幅值高于只给予GABA组(P<0.01)而低于LTP组(P<0.01)。④BMB1nmol可使低频测试刺激诱发的场电位PS幅值明显升高,90min内稳定在基础幅值的194.8%±3.6%水平,与强直刺激诱导的LTP组PS幅值接近(P>0.05)。结论GABA可抑制大鼠海马CA3区LTP的诱导和形成。     

当归芍药散活性部位JD-30对淀粉样β蛋白片段25-35抑制大鼠海马脑片CA1区长时程增强的改善作用

目的研究当归芍药散改善学习记忆能力的物质基础和作用机理。方法采用细胞外微电极记录技术,记录大鼠海马脑片CA1区群峰电位(PS)幅值和高频刺激诱发LTP后PS的增幅。结果用含当归芍药散活性部位JD-30(25,50和100mg.L-1)的人工脑脊液灌流大鼠海马脑片,其CA1区的PS幅值无明显变化。用相同浓度的JD-30孵育海马脑片90min以上并持续灌流,其CA1区高频刺激后的PS增幅与空白对照组相比无明显差异。而用Aβ25-35200nmo.lL-1处理的海马脑片CA1区高频刺激后的PS增幅受到明显抑制;若同时给予Aβ25-35和上述浓度的JD-30处理海马脑片,CA1区高频刺激后的PS增幅较Aβ25-35组升高,其中JD-30100mg.L-1组的PS增幅达到正常对照组水平。提示JD-30对正常海马脑片CA1区的基础突触传递和LTP没有影响,但可改善Aβ25-35所抑制的LTP。结论JD-30可改善神经突触可塑性,拮抗Aβ对LTP的抑制作用可能是其益智机制之一。     

皮质酮对大鼠海马CA1区长时程抑制的影响

目的 观察皮质酮对大鼠海马CA1区锥体神经元产生的长时程抑制(LTD)的影响.方法 断头法分离Wistar大鼠海马半脑,切片机切出400μm厚度的海马脑片.对照组不加任何药品,皮质酮组、D-APV组和D-APV 皮质酮组的脑片分别以10μmol/L皮质酮、50μmol/L D-APV和50μmol/L D-APV 10μmol/L皮质酮预孵60min.记录基础兴奋性突触后电流(EPSC)10min,然后给予低频刺激(LFS),记录LTD的表达情况.结果 对照组给予LFS后,产生LTD,LFS后EPSC值为基础值的58.2 %(P＜0.05);皮质酮组给予LFS后EPSC值为基础值的45.4 %(P＜0.05),明显低于对照组(P＜0.05);给予NMDA受体特异性拮抗剂D-APV后,D-APV组和D-APV 皮质酮组大鼠海马CA1区LFS不能诱发LTD.结论 该实验条件诱发的LTD是NMDA受体依赖型的,10 μmol/L皮质酮使大鼠海马CA1区锥体神经元LTD表达增强.     

高脂血症加重血管性痴呆大鼠海马区长时程增强的损伤

目的 血管性痴呆(VD)表现为进行性认知功能的损伤.病人多伴有血脂升高,本研究观察了VD大鼠,以及合并高脂血症的VD大鼠的海马CA3-CA1区长时程增强(LTP)的变化,评价VD大鼠LTP的改变以及高脂血症对于LTP的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为三组,即双侧颈总动脉结扎组(2-VO组)、双侧颈总动脉结扎+高脂...     

铝对大鼠海马神经细胞线粒体酶的影响

目的探讨线粒体酶在铝致大鼠凋亡神经细胞中的改变。方法健康雄性SD大鼠40只，按体重随机分为4组：生理盐水、AL^3＋ 2．5、5、10mg／kg组。腹腔注射染毒60d后处死，用TUNEL法检测细胞凋亡，电镜观察线粒体结构的改变，用试剂盒测定线粒体超氧化物歧化酶（SOD），琥珀酸脱氢酶（SDH），三磷酸腺苷（ATP）酶（总ATP、Na^＋-K^＋ATP，Ca^2＋ ATP和Mg^2＋ ATP酶）活力。结果 随染铝剂量的增高，凋亡指数（AI）逐渐升高（P〈0．05），Na^＋-K^＋ ATP酶、Ca^2＋ ATP酶、Mg^2＋ ATP酶和SOD均降低（P〈0．05）；海马神经细胞SDH均数降低，但差异无显著性（P〉0．05）。海马神经细胞凋亡指数与Na^＋-K^＋ ATP酶、Ca^2＋ ATP酶、Mg^2＋ ATP酶和SOD呈负相关（r=-0．439，-0．501，-0．530，-0．815，P〈0．05），与SDH没有相关性（r=0．287，P〉0．05）。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡，并引起线粒体结构和线粒体酶活力的改变。     

JNK信号通路参与Aβ毒性对大鼠海马神经元的损伤

目的探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)毒性对大鼠海马神经元的损伤以及JNK信号转导通路在此过程中的作用。方法应用Aβ1-40注射大鼠双侧海马CA1区建立毒性损伤模型,通过HE染色、Nissl染色、TUNEL染色、免疫组化法、透射电镜并结合图像分析技术研究海马的病理学变化以及神经元的存活与凋亡、超微结构及p-JNK阳性细胞率。结果与对照组比较,大鼠注射Aβ后,海马CA1区锥体细胞排列松散,数目减少,神经元固缩、浓染,胶质细胞明显增生,超微结构可见明显凋亡特征,TUNEL阳性细胞数明显增多(P<0.01),p-JNK阳性细胞比例明显升高(P<0.01)。结论 Aβ可明显诱导海马神经元凋亡,JNK信号转导通路参与了Aβ的神经毒性损伤作用。     

大鼠海马CAl神经元对外周传入信号的编码作用

通过外周电刺激坐骨神经，采用单个神经元细胞外记录的方法，观察大鼠海马CAl神经元对外周电刺激信号的编码作用。结果发现，多串电刺激后，大鼠海马CAl神经元爆发式放电数量明显增加，且动作电位个数大于3的爆发式放电数目也明显增多。实验结果说明大鼠海马CAl神经元对外周传人信号具有编码作用，参与对信号的调制。     

alpha7 Nicotinic acetylcholine receptor as a target to rescue deficit in hippocampal LTP induction in beta-amyloid infused rats

Continuous intracerebroventricular infusion of beta-amyloid peptide 1-40 (Abeta(1-40)) in animal models induces learning and memory impairment associated with dysfunction of the cholinergic neuronal system, which has been considered to be a pathological model of Alzheimer's disease [Nitta, A., Itoh, A., Hasegawa, T., Nabeshima, T., 1994. Beta-amyloid protein-induced Alzheimer's disease animal model. Neurosci. Lett. 170, 63-66.]. Here, using a real-time optical recording technique, we demonstrate that basal synaptic transmission and several forms of synaptic plasticity, including long-term potentiation (LTP), post-tetanic potentiation (PTP) and paired-pulse facilitation (PPF) are deficient at the Schaffer collateral-CA1 synapse in hippocampal slices from Abeta-infused brain. Throughout this study, an effort was made to address whether the alpha7 nicotinic acetylcholine receptor (alpha7nAChR), which is believed to be a primary target of Abeta [Wang, H.Y., Lee, D.H., Davis, C.B., Shank, R.P., 2000a. Amyloid peptide Abeta (1-42) binds selectively and with picomolar affinity to alpha 7 nicotinic acetylcholine receptors. J. Neurochem. 75, 1155-1161.], is responsible for the deficits in synaptic plasticity observed in the Abeta-infused rats. First, we found that Abeta-infusion markedly depressed the response of alpha7nAChR to a selective alpha7nAChR agonist [3-(2,4-dimethoxybenzylidene)-anabaseine] (DMXB). Second, blockade of alpha7nAChR with either methyllycaconitine (MLA) or alpha-bungarotoxin (alpha-BTX) in control rats inhibited LTP induction, suggesting that the activation of alpha7nAChR is required for LTP induction. Finally, pre-treatment of the slices from Abeta-infused rats with 10 microM DMXB rescued CA1 synapses from the deficit in LTP and PPF. These results suggest that Abeta-impaired LTP and PPF arise as a consequence of dysfunctional alpha7nAChR, and that alpha7nAChR may be an important target to help ameliorate AD patient cognitive deficits.     

大鼠海马CA1神经元对外周传入信号的编码作用

通过外周电刺激坐骨神经,采用单个神经元细胞外记录的方法,观察大鼠海马CA 1神经元对外周电刺激信号的编码作用。结果发现,多串电刺激后,大鼠海马CA 1神经元爆发式放电数量明显增加,且动作电位个数大于3的爆发式放电数目也明显增多。实验结果说明大鼠海马CA 1神经元对外周传入信号具有编码作用,参与对信号的调制。     

Aβ寡聚体与阿尔采末病及其靶点药物研究进展

Aβ在阿尔采末病(AD)中起着重要的作用,寡聚化的Aβ分子被认为是AD发病的原发性因子,能够通过不同的机制发挥神经毒性作用,引发记忆损伤和神经元丢失,以Aβ为作用靶点的药物开发和应用也已初露端倪。该文对Aβ寡聚体在AD中的毒性作用和以Aβ为作用靶点的药物开发现状作一综述。     

Enhancement of LTP in Aged Rats is Dependent on Endogenous BDNF

Long-term potentiation (LTP), considered the neurophysiological basis for learning and memory, is facilitated by brain-derived neurotrophic factor (BDNF), an action more evident when LTP is evoked by weak θ-burst stimuli and dependent on co-activation of adenosine A_2A receptors (A_2AR), which are more expressed in aged rats. As θ-burst stimuli also favor LTP in aged animals, we hypothesized that enhanced LTP in aging could be related to changes in neuromodulation by BDNF. The magnitude of CA1 LTP induced by a weak θ-burst stimuli delivered to the Schaffer collaterals was significantly higher in hippocampal slices taken from 36 to 38 and from 70 to 80-week-old rats, when compared with LTP magnitude in slices from 4 or 10 to 15-week-old rats; this enhancement does not impact in cognitive improvement as aged rats revealed an impairment on hippocampal-dependent learning and memory performance, as assessed by the Morris water maze tests. The scavenger for BDNF, TrkB-Fc, and the inhibitor of Trk phosphorylation, K252a, attenuated LTP in slices from 70 to 80-week-old rats, but not from 10 to 15-week-old rats. When exogenously added, BDNF significantly increased LTP in slices from 4 and 10 to 15-week-old rats, but did not further increased LTP in 36 to 38 or 70 to 80-week-old rats. The effects of exogenous BDNF on LTP were prevented by the A_2AR antagonist, {"type":"entrez-protein","attrs":{"text":"SCH58261","term_id":"1052882304","term_text":"SCH58261"}}SCH58261 (7-(2-phenylethyl)-5-amino-2-(2-furyl)-pyrazolo-[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]pyrimidine). These results indicate that the higher LTP magnitude observed upon aging, which does not translate into improved spatial memory performance, is a consequence of an increase in the tonic action of endogenous BDNF.     

黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马神经元形态学和Apaf-1表达的影响

【摘要】目的观察黄芪注射液对脑缺血再灌注大鼠海马神经元形态学和Apaf-1表达的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组（再灌注组）和黄芪注射液处理组（实验组）。采用Pulsinelli四血管阻断法建立大鼠脑缺血再灌注模型,实验组于术前30min腹腔注射黄芪注射液6mL/kg,每24h注射1次,各组于再灌注后24h断头取脑。采用HE染色,光镜下观察海马组织病理学改变;透射电镜下观察海马神经元超微结构变化;免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠海马组织凋亡蛋白酶激活因子-1（Apaf-1）蛋白表达的变化。结果与假手术组比较,再灌注组大鼠海马神经元出现胞核及线粒体损伤,并且Apaf-1蛋白的表达明显升高（免疫组化：0.024±0.001vs0.109±0.011;Western blot法：0.270±0.018vs0.894±0.072,均P＜0.01）,与再灌注组比较,实验组大鼠海马神经元胞核及线粒体损伤明显减轻,而Apaf-1蛋白的表达明显降低（免疫组化：0.048±0.005;Western blot法0.392±0.046,均P＜0.01）。结论黄芪注射液可减轻脑缺血再灌注大鼠海马神经元的损伤,其作用机制可能与抑制Apaf-1蛋白表达有关     

消旋丁苯肽对血管性痴呆大鼠认知功能的影响

目的:观察消旋丁苯肽(dl-NBP)对血管性痴呆(VD)大鼠海马CA3-CA1区长时程增强(LTP)以及大鼠在Morris水迷宫(MWM)中表现的影响。方法:30只Wistar大鼠随机分为对照组、血管性痴呆组(VD组)、血管性痴呆+消旋丁苯肽干预组(VD+dl-NBP组)。使用双侧颈总动脉结扎结合高脂喂养的方法建立VD大鼠模型。建模后VD+dl-NBP组大鼠给予dl-NBP灌胃,40mg/kg,1次/d。VD组和对照组自由摄食水。30d后进行MWM测试,而后记录大鼠海马CA3-CA1区LTP。结果:定位航行阶段,3组大鼠的逃避潜伏期的组间差异有统计学意义(F组间=11.361,P<0.01)。VD组低于对照组和VD+dl-NBP组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。空间搜索阶段,对照组、VD组及VD+dl-NBP组的目标象限百分比分别为(51.1±2.87)%,(37.03±3.50)%和(54.42±3.06)%,差异有统计学意义(F=12.03,P<0.01)。VD组低于对照组和VD+dl-NBP组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、VD组和VD+dl-NBP组的LTP幅值分别为(133.4±10.1)%,(108.4±16.9)%和(120.5±7.3)%,差异有统计学意义(F=94.21,P<0.01)。VD组低于对照组和VD+dl-NBP组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论:dl-NBP对VD大鼠的空间学习能力具有改善的作用,其机制可能与海马区的LTP的改善有关。     

小胶质细胞表达的受体与阿尔采末病

阿尔采末病(Alzheimer's disease,AD)是一种老年神经退行性疾病,其病因十分复杂,其中β-淀粉样蛋白(Aβ)毒性学说、tau蛋白过度磷酸化学说、基因突变、中枢胆碱能损伤学说等已得到普遍认可。近年来,由小胶质细胞介导的炎症学说也越来越受到重视。小胶质细胞是脑内先天性免疫反应的主要部位,在外源因子的刺激下可以表达大量受体,如TLRs、NLRs、RAGE等,这些受体在AD的发展过程中起重要作用。该文就由小胶质细胞激活所表达的受体与阿尔采末病的关系做一综述。     

应用酵母双杂交筛选系统从药用植物中发现Aβ聚集抑制剂(英文)

研究证据表明,β淀粉样肽即Aβ的自我聚集是阿尔兹海默病（AD）重要的发病因素。因此,Aβ聚集抑制剂被认为是潜在的AD治疗候选药物。在本研究中,我们建立了一个基于酵母双杂交技术的Aβ聚集抑制剂筛选系统。通过采用拼接PCR技术（assembly PCR）,克隆了人源Aβ42的cDNA并将其插入到分别含有酵母转录因子GAL4转录激活区(GAL4_AD)与DNA结合区(GAL4_BD)的两个表达载体中。通过以上两个载体的共转化实现了两个融合蛋白GAL4_AD-Aβ42与GAL4_BD-Aβ42在AH109酵母菌株中的共表达。由于Aβ42片段在酵母中的自我相互作用使GAL4转录因子的活性在酵母中得到重建,从而激活了依赖于GAL4活性的四个报告基因HIS3,ADE2,lacZ与MEL1的转录与表达。以上报告基因的正常表达使具有多种营养缺陷表型的AH109酵母获得了在缺乏组氨酸与腺嘌呤的合成选择培养基上正常生长的能力。通过采用生长抑制作为筛选标记,应用本系统对红景天属植物的Aβ聚集抑制活性进行了分析,进而发现本属植物很可能成为Aβ聚集抑制剂发现的重要资源。     

美洛昔康对铝负荷致大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的:观察美洛昔康对铝负荷致海马神经元损伤的保护作用。方法:离体培养新生SD大鼠海马神经元7d,分成空白对照组(200μmol·L-1NaCl)、铝模型组(200μmol·L-1AlCl3)、美洛昔康小、中、大剂量(10-8、10-7、10-6mol·L-1)组,给药24h后,检测各组神经元光密度值、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并观察神经元形态。结果:与空白对照组比较,铝模型组光密度值降低、LDH漏出率升高、SOD活性减弱、MDA含量升高(P<0.01),神经元形态发生明显损伤;与铝模型组比较,美洛昔康各剂量组光密度值升高、LDH漏出率降低、SOD活性增强、MDA含量降低(P<0.01或P<0.05),神经元形态出现明显改善。结论:美洛昔康对于铝负荷致离体海马神经元损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制炎症反应和氧化应激有关。