SLE患者外周血单个核细胞产生IL-1及lL-2的检测

本文对31例系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)产生 IL-1及 IL-2进行了检测。结果显示,与正常人对照组比较,SLE 患者 PBMC 产生 IL-2显著减少(P<0.01),IL-1的产生有降低趋势,但无统计学意义(P>0.05)。提示 SLE 患者存在淋巴细胞功能明显异常,IL-2产生缺陷在其发病机制起中重要作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中IL-6与TNF-α的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）中某些具炎症介质作用细胞因子的自然表达。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０例正常人和１５例活动期ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）ｍＲＮＡ表达的水平。结果：与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－６和ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的表达水平均增高（均Ｐ〈０．０１）。结论：ＳＬＥ患者中ＩＬ－６与ＴＮＦ－α的表达上调,可能在发病机制中起一定作用。     

系统性红斑狼疮患者肿瘤坏死因子和可溶性白细胞介素2受体的研究

目的：探讨肿瘤坏死因子和可溶性白细胞介素2受体在系统性红斑狼疮发病中的意义。方法：采用单抗,多抗双抗体夹心ELISA法测定了35例系统性红斑狼疮（SLE）患和20例正常人血清肿瘤坏死因子α（TNF－α）和可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R)水平,并对其相关性进行了分析。结果：与正常人群比较,活动期SLE及非活动期SLE患血清sIL-2R水平均明显增高（P＜0．01）,且活动期高于非活动期（P＜0．01）;活动期SLE患血清TNF－α水平高于非活动期及正常对照组（P＜0．01）,活动期SLE患血清TNF－α与sIL-2R水平呈正相关。结论：检测SLE患血清TNF－α与sIL-2R水平,可作为监测SLE患病情活动的指标。     

白细胞介素10在系统性红斑狼疮发病机制中的意义

白细胞介素(IL)-10在系统性红斑狼疮(system ic lupus erythem atosus,SLE)患者体内异常升高,其基因与SLE易感性相关。它既是B细胞的刺激因子,又是Th1细胞的抑制因子,同时与SLE细胞凋亡异常有关,参与SLE的发病过程。在SLE的不同时期,它对炎症反应发挥着不同的效应。本文综述IL-10在系统性红斑狼疮发病机制中作用的最新研究进展,旨在阐明它在SLE发生发展中的重要作用和临床价值。     

系统性红斑狼疮患者外周血白介素2和白介素6及其受体的研究

目的 探讨白介素2(IL-2)、白介素6(IL-6)及其受体在系统性红斑狼疮(SLE)患者治疗前后的变化及其意义.方法 采用酶联免疫吸附法和免疫荧光标记流式细胞仪检测技术对SLE患者治疗前后和正常人外周血IL-2和IL-6及其受体水平进行测定分析.结果 ①SLE患者IL-2水平显著低于正常人对照(P<0.05),而sIL-2R、IL-6、sIL-6R均显著增高;②SLE患者sIL-2R、IL-6、sgp80与SLE病情活动指数(SLEDAI)呈显著正相关;③SLE患者治疗后sIL-2R和sgp80水平与治疗前相比,差异均有显著性.结论 IL-2、IL-6及其受体是参与SLE免疫病理机制的重要细胞因子,其中sIL-2R、IL-6及sgp80与病情活动性密切相关,sIL-2R、sgp80对判断疗效可能具有重要意义.     

SLE患者T细胞亚群和白细胞介素2水平测定

目前的研究表明,SLE患者外周血T细胞产生白细胞介素2(IL2)的能力降低,但关于T细胞亚群数目各家报道很不一致.本研究的目的在于进一步探讨SLE患者外周血T细胞产生IL2的能力及其亚群数目的变化,同时,分析两者之间的相互联系.     

系统性红斑狼疮患者血清白介素 10水平与外周血单一核细胞分泌白介素 12水平的关系

在 Th细胞向 Th1/Th2细胞分化过程中,白介素 12(IL－ 12)是决定免疫反应的性质和功效的关键性细胞因子 [1,2],它甚至可以使1已建立的 Th2型为主的反应向 Th1型转变 [3]。我们的实验表明系统性红斑狼疮 (SLE)患者 IL－ 12水平降低主要由单一核细胞分泌能力下降引起,而 IL－ 10对单一核细胞功能有很强的抑制作用。有报道 SLE患者单一核细胞和活化的 B细胞分泌 IL－ 10的能力都是增强的,且 IL－ 10在 SLE的发病中起一定作用 [4]。我们检测了 SLE患者血清 IL－ 10水平,并分析其与体外 IL－ 12分泌水平的关系。同时,在体外予…     

人纤维介素在系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞中的表达及意义

目的 探讨人纤维蛋白原样蛋白/人纤维介素(HFGL2)与SLE中存在的凝血功能障碍之间的关系。方法 采用免疫组化方法检测32例SLE患者和15例正常人外周血单一核细胞(PBMC)中HFGL2蛋白的表达情况,并用高清晰度彩色医学图文分析系统对SLE患者PBMC中HFGL2的表达进行半定量分析。结果 与正常人对照组相比,活动期SLE患者PBMC中HFGL2的表达明显增高,并与疾病活动性呈正相关。结论 PBMC中HFGL2的表达可能与SLE的发病和疾病的活动有关。     

Suppressor activity of peripheral blood mononuclear cells in patients with chronic discoid lupus erythematosus

Summary Significantly increased suppressor activity of peripheral blood mononuclear cells was demonstrated in patients suffering from chronic discoid lupus erythematosus.This work was supported by the Scientific Research Council, Ministry of Health, Hungary (Code No. 421 030401 1/S)     

活动性系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞白介素6信使RNA（IL－6mRNA）表达水平的研究

应用反转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）方法检测了２１例ＳＬＥ患者及１４例正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中白介素６信使ＲＮＡ（ＩＬ－６ｍＲＮＡ）表达水平，结果表明活动性ＳＬＥＰＢＭＣｓ中ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达明显高于非活动性患者及正常对照，而非活动期ＳＬＥ与正常组比较无显著统计学差异，提示ＩＬ－６可能参与活动性ＳＬＥ的发病机制。     

SLE患者外周血白细胞B7-H1分子的表达

目的 探讨B7-H1分子在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞的表达.方法 心用荧光抗体染色技术,经流式细胞仪检测30例SLE患者和20例正常人对照者外周血白细胞表面B7-H1的自然表达水平,同时收集SLE患者的实验室检查指标,并用SLE疾病活动指数(SLEDAI)来判定患者疾病活动程度.结果 活动期SLE组单核细胞、淋巴细胞和粒细胞上B7-H1表达水平均明显高于正常人对照组(P<0.01);SLE患者单核细胞和淋巴细胞B7-H1表达水平与SLEDAI呈正相关(r₁=0.42,P₁<0.05;r₂=0.52,P₂<0.05);抗dsDNA抗体阳性患者组淋巴细胞表面B7-H1分子数较抗dsDNA抗体阴性组明显增高(t=3.20,P<0.01).治疗后SLE患者外周血单核细胞、淋巴细胞和粒细胞B7-H1表达均明显下降,t值分别为10.00、6.75和4.33,P<0.01.结论 活动期SLE患者外周血白细胞B7-H1表达增加,且与SLEDAI成正相关,B7-H1可能与SLE的发病机制有关.     

Th17在SLE的组织定位和外周血单一核细胞中的比例

目的 探讨产生IL-17的CD4+T细胞(Th17)在SLE患者组织中的定位,以及与狼疮活动的关系.方法 共聚焦显微镜、免疫荧光双标技术、免疫组化和HE染色,分析Th17细胞业群在4例活动期SLE患者和2例正常人外周血单一核细胞中、皮损组织和肺组织中的定位.流式细胞仪检测50例SLE患者和15例正常人对照外周血Th17的比例,RT-PCR检测相关细胞因子基因表达,用ELISA检测血清中IL-17的分泌水平.结果 在活动期狼疮患者外周血单一核细胞中可见有Th17细胞,其IL-17的荧光强度为(127.6±20.5),明显高于正常人IL-17荧光强度,其值为(40.6±11.1),P＜0.001.在活动期SLE患者受损的皮肤组织和肺组织中可见有Th17细胞的浸润,而正常人皮肤未见有Th17细胞的浸润.活动期SLE患者外周血中Th17比例明显增加,且与SLE活动指数(SLEDAI)呈正相关.相关细胞因子IL-17A和IL-17F mRNA表达明显增加,血清中的不IL-17水平分泌增加,活动期SLE患者中Th17增加与血管炎的发病呈正相关,经过治疗后Th17随病情缓减而减少.结论 Th17细胞亚群在活动期SLE患者体内扩增,其扩增与SLE活动密切相关,可能参与SLE 血管炎的发生.     

性激素对SLE患者外周血单一核细胞凋亡的影响及其意义

研究脱氢表雄酮(DHEA)和(或)雌二醇(E2)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)凋亡的影响。应用吖啶橙(AO)染色法检测SLE患者、健康献血员PBMC与生理、病理浓度的DHEA和(或)E2培养48h的凋亡百分率。SLE患者PBMC凋亡率高于健康献血员(P<0.01)。不论生理或者病理浓度的E2对SLE患者、健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05)。生理浓度的DHEA及DHEA+E2对健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05),但可显著抑制SLE患者PBMC凋亡(P<0.05);病理浓度的DHEA及DHEA+E2可显著促进SLE患者、健康献血员PBMC凋亡(P<0.05)。DHEA及DHEA+E2对PBMC凋亡的影响,两者间无显著差异(P>0.05)。结果提示,DHEA对SLE患者PBMC凋亡起重要作用;DHEA浓度降低可能导致凋亡加快。     

氮杂胞苷对SLE患者外周血T细胞Th2细胞因子基因表达的影响

目的探讨DNA甲基化抑制剂氮杂胞苷对SLE患者和正常人外周血T细胞DNA甲基转移酶1和细胞因子IL-4，IL-6，IL-10表达的影响。方法分离活动期SLE患者（n=15）、非活动期SLE患者（n=13）以及正常人对照（n=14）外周血T细胞，经PHA刺激1天后，分为甲基化抑制组和非抑制组进行培养，分别加入或不加氮杂胞苷继续培养3天；用RT—PCR方法测定各组外周血T细胞IL-4，IL-6，IL-10和DNA甲基转移酶1（Dnmt1）mRNA的表达水平。结果①非抑制组内，活动期、非活动期SLE患者的IL-4，IL-6，IL-10mRNA表达均高于正常人对照，Dnmt1mRNA表达显著下降，差异有统计学意义（P值均〈0．05）；并且，活动期、非活动期SLE患者DNA甲基转移酶1的表达与IL-4，IL-6，IL-10mRNA水平呈负相关（P值均〈0．05）。②与非抑制组比较，甲基化抑制组中的正常人T细胞IL-4，IL-6，IL-10mRNA表达增加，而Dnmt1表达则明显降低，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。甲基化抑制组中的活动期、非活动期SLE患者与非抑制组比较，T细胞表达Th2细胞因子、DNA甲基转移酶1表达差异无统计学意义（P值均〉0．05）。结论T细胞表达Th2细胞因子与基因组的DNA甲基化程度相关。     

SLE患者外周血单一核细胞淋巴细胞功能相关抗原1表达的检测

目的 研究SLE患者外周血单一核细胞（PBMC）淋巴细胞功能相关抗原1（LFA-1）的表达,探讨LFA-1与SLE的发病及病情变化的关系及其临床意义。方法 提取30例SLE患者（SLE组）和24例正常人（对照组）的PBMC,用抗人CD3-FITC和抗人CD11a-PE对其进行标记后,采用流式细胞术检测其CD11a的表达率。结果 PBMC CD11a的表达率对照组为68.21% ± 4.58%,SLE组为73.74% ± 7.89%,活动期组为77.11% ± 7.46%,稳定期组为69.33% ± 6.27%,SLE组PBMC CD11a的表达率显著高于对照组（P ＜ 0.05）,且活动期组亦显著高于对照组（P ＜ 0.05）,而稳定期组与对照组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。活动期组与稳定期组比较,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。相关性分析显示,SLE患者CD11a的表达率与其采血时的SLEDAI呈正相关（r = 0.64,P ＜ 0.01）。结论 LFA-1的过表达参与SLE的发病,并与疾病活动相关。     

SLE患者外周血单个核细胞IL—13mRNA的表达

探讨IL-13在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用及其意义,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PGR)检测了34例活动期SLE患者和30名正常人外周血单个核细胞(PBMC)中IL-13mRNA的表达水平.结果表明,活动期SLE患者IL-13的阳性表达率与正常人对照组相比无明显差异(P＞0.05);活动期SLE患者PBMC中IL-13mRNA的平均表达水平(0.8983±0.1153)明显高于正常人对照组(0.6085±0.0903),差异非常显著(P＜0.001).提示高水平的IL-13表达可能与SLE患者外周血T细胞高度活化、功能异常有关,其通过刺激B细胞活化、分化与增殖或激活B细胞旁路,参与SLE的发病过程.     

circ-PTPN22在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的翻译及意义

【摘要】 目的 探讨circ-PTPN22的翻译能力及其与系统性红斑狼疮（SLE）的关系。方法 2019年5月10日至2019年9月30日分别于西南医院中西医结合风湿免疫科和体检中心收集6例SLE女性患者和9例健康女性对照全血样本,分离外周血单个核细胞（PBMC）,其中3例SLE和3例健康对照PBMC采用磁珠分选为T、B、NK细胞。通过circRNADb网站预测出circ-PTPN22内部核糖体进入位点（IRES）序列及蛋白序列,制备针对circ-PTPN22剪接位点处特异氨基酸序列的兔抗circ-PTPN22pro多克隆抗体,Western印迹法检测健康对照和SLE患者PBMC以及T、B、NK细胞亚群中circ-PTPN22pro的表达。将circ-PTPN22-FLAG、circ-PTPN22-NC-FLAG、circ-PTPN22-shRNA-FLAG、circ-PTPN22-shRNA-NC-FLAG重组慢病毒分别转染培养的Jurkat细胞,以正常培养的细胞作为细胞对照组,Western印迹法检测Jurkat细胞中circ-PTPN22pro蛋白表达,流式细胞仪检测circ-PTPN22对细胞活化和凋亡的影响。采用两因素重复测量方差分析和两独立样本t检验进行统计分析。结果 circRNAD数据库预测显示,circ-PTPN22具有翻译能力,且Western印迹显示circ-PTPN22pro蛋白相对分子质量为20 000。转染48 h后,circ-PTPN22-FLAG组circ-PTPN22pro表达明显高于circ-PTPN22-NC-FLAG组和细胞对照组。转染24、48、72 h,circ-PTPN22组白细胞介素2（IL-2）表达（22.20% ± 8.92%、31.10% ± 5.88%、53.20% ± 10.25%）均低于circ-PTPN22-NC组（30.90% ± 11.00%、51.23% ± 10.70%、69.67% ± 9.00%;F = 284.881,P = 0.003）;circ-PTPN22-shRNA组IL-2表达（35.57% ± 8.79%、78.10% ± 10.08%、88.63% ± 3.89%）均高于circ-PTPN22-shRNA-NC组（26.73% ± 4.92%、41.03% ± 10.45%、41.33% ± 4.96%;F = 293.818,P = 0.003）。转染48、72、96 h后,circ-PTPN22组、circ-PTPN22-shRNA组细胞凋亡率均分别高于circ-PTPN22-NC组（F = 81.287,P = 0.012）、circ-PTPN22-shRNA-NC组（F = 111.813,P = 0.009）。SLE组PBMC中circ-PTPN22pro表达低于健康对照组,几乎不表达。SLE组T、B细胞中circ-PTPN22pro表达均显著低于健康对照组（t =3.047、4.806,P < 0.05）,两组NK细胞中circ-PTPN22pro表达差异无统计学意义（t = 0.582,P > 0.05）。结论 circ-PTPN22可翻译circ-PTPN22pro蛋白,具有抑制Jurkat细胞活化功能,SLE患者PBMC中circ-PTPN22pro表达低于健康对照,提示其与SLE发生发展可能存在一定关系。     

HAX-1在SLE患者外周血单一核细胞中的表达及其亚细胞定位

目的 检测活动期SLE患者PBMC中抗凋亡基因HAX-1的表达水平，并进行亚细胞定位分析。方法 分别采用半定量PCR以及Western印迹试验从mRNA和蛋白水平上检测活动期SLE患者及正常人对照组PBMC中HAX-1的表达，并通过激光共聚焦显微镜观察HAX-1在SLE患者PBMC中的亚细胞定位。结果 活动期SLE患者PBMC中HAX-1在mRNA水平以及蛋白水平的表达均明显高于健康正常人（P值分别 = 0.000、0.007），且其相对表达水平与SLEDAI之间呈线性正相关；HAX-1在SLE患者PBMC中主要分布于线粒体内及内质网。结论 HAX-1可能通过抗凋亡机制抑制SLE患者体内淋巴细胞凋亡而导致其过度活化，从而参与SLE疾病发生发展过程。