肾脏雌激素受体亚型表达分布及补肾中药防治肾损害的受体机制

目的:观察雌激素受体α和β在大鼠肾脏中的表达、分布情况,分析补肾中药防治肾损害的受体机制。方法:实验于2000-09/2002-07在河北医科大学生化实验室完成。选用健康雌性SD大鼠45只,按随机数字法分为3组,即正常对照组、肾脏损伤模型组及中药防治组,每组15只。肾脏损伤模型组和中药防治组大鼠每天腹腔注射1mL9g/L的灭菌AlCl3溶液复制肾脏损伤模型,正常对照组注射1mL灭菌生理盐水,每连续注射3d,间隔1d,共计72d。中药防治组大鼠每天灌胃1mL生药含量为2.6g/mL的补肾中药复方煎剂(由淫羊藿、熟地、制首乌、黄芪、当归、郁金、石菖蒲、茯苓和川芎9味中药组成,由石家庄乐仁堂药业有限公司提供,每付生药含量为125g),正常对照组和肾脏损伤模型组灌胃等量自来水。每连续灌胃7d,间隔1d,共计72d。应用免疫组织化学方法检测雌激素受体α和β在各组大鼠肾组织中的表达水平和分布区域,应用放射免疫分析法测定各组大鼠血清雌二醇水平。结果:45只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①雌激素受体亚型在各组大鼠肾组织中的表达和分布情况比较:正常对照组大鼠肾脏皮质和髓质的远曲小管和近曲小管上皮细胞胞浆中都有雌激素受体α和β阳性颗粒,两种受体亚型的髓质反应信号均比皮质强。肾脏损伤模型组大鼠肾脏皮质雌激素受体β反应信号减弱;髓质雌激素受体α反应信号增强。中药防治组大鼠肾水肿基本消失,皮质雌激素受体β反应信号增强至近正常水平,髓质雌激素受体α反应信号降低至近正常水平。②各组大鼠的血清雌二醇水平比较:肾脏损伤模型组大鼠血清雌二醇水平显著低于正常对照组[(19.0±0.6,40.0±0.1)pmol/L,P<0.01],中药防治组大鼠血清雌二醇水平与肾脏损伤模型组相近[(18.0±0.6)pmol/L,P>0.05]。结论:AlCl3导致肾水肿时,肾脏皮质雌激素受体β表达减弱,髓质雌激素受体α表达增强,血清雌二醇水平降低。补肾中药具有雌二醇样作用,通过拮抗皮质雌激素受体β表达减弱和髓质雌激素受体α表达增强而发挥其肾脏保护作用。     

降脂壮骨中药对食饵性高脂血症大鼠骨组织骨形态发生蛋白2、雌激素受体表达的影响

背景:研究表明活性骨形态发生蛋白2水平的降低可导致严重的类骨质疏松症状,并发现成骨细胞、破骨细胞及骨髓基质细胞上有雌激素受体的存在,认识到雌激素对骨组织具有直接作用.目的:观察降脂壮骨中药对食饵性高脂血症诱发骨质疏松大鼠骨组织骨形态发生蛋白2、雌激素受体表达的影响.方法:健康SD大鼠27只,随机分为3组:正常对照组:上午和下午灌胃生理盐水5 mL/kg;高脂血症诱发骨质疏松模型组:上午灌胃高脂饮食5 mL/kg,下午灌胃生理盐水5 mL/kg;降脂壮骨中药组:上午灌胃高脂饮食5 mL/kg,下午灌胃降脂壮骨中药水提液5 mL/kg.持续干预8周后采用免疫组织化学方法,对其骨组织中骨形态发生蛋白2、雌激素受体的表达水平进行检测,应用原位杂交方法对骨组织中雌激素受体的mRNA水平进行检测.结果与结论:与模型组比较,降脂壮骨中药组骨组织中骨形态发生蛋白2、雌激素受体表达显著增强(P＜0.01),雌激素受体的mRNA表达水平增高.证实降脂壮骨中药能够使食饵性高脂血症诱发骨质疏松大鼠成骨细胞骨形态发生蛋白2、雌激素受体的表达水平增高,起到改善骨质疏松的作用.     

肾脏雌激素受体亚型表达分布及补肾中药防治肾损害的受体机制

目的：观察雌激素受体α和β在大鼠肾脏中的表达、分布情况，分析补肾中药防治肾损害的受体机制。方法：实验于2000-09／2002-07在河北医科大学生化实验室完成。选用健康雌性SD大鼠45只，按随机数字法分为3组，即正常对照组、肾脏损伤模型组及中药防治组，每组15只。肾脏损伤模型组和中药防治组大鼠每天腹腔注射1mL 9g／L的灭菌AlCl3溶液复制肾脏损伤模型，正常对照组注射1mL灭菌生理盐水，每连续注射3d，间隔1d，共计72d。中药防治组大鼠每天灌胃1mL生药含量为2．6g／mL的补肾中药复方煎剂（由淫羊藿、熟地、制首乌、黄芪、当归、郁金、石菖蒲、茯苓和川芎9味中药组成，由石家庄乐仁堂药业有限公司提供，每付生药含量为125g），正常对照组和肾脏损伤模型组灌胃等量自来水。每连续灌胃7d．间隔1d，共计72d。应用免疫组织化学方法检测雌激素受体α和β在各组大鼠肾组织中的表达水平和分布区域，应用放射免疫分析法测定各组大鼠血清雌二醇水平。结果：45只大鼠全部进入结果分析，无脱失。山雌激素受体亚型在各组大鼠肾组织中的表达和分布情况比较：正常对照组大鼠肾脏皮质和髓质的远曲小管和近曲小管上皮细胞胞浆中都有雌激素受体α和β阳性颗粒，两种受体亚型的髓质反应信号均比皮质强。肾脏损伤模型组大鼠肾脏皮质雌激素受体β反应信号减弱；髓质雌激素受体α反应信号增强。中药防治组大鼠肾水肿基本消失，皮质雌激素受体β反应信号增强至近正常水平，髓质雌激素受体α反应信号降低至近正常水平。②各组大鼠的血清雌二醇水平比较：肾脏损伤模型组大鼠血清雌二醇水平显著低于正常对照组[（19．0&;#177;0．6，40．0&;#177;0．1）pmol／L．P〈0．011，中药防治组大鼠血清雌二醇水平与肾脏损伤模型组相近[（18．0&;#177;0．6）pmol／L，P〉0．051。结论：AlCl3导致肾水肿时，肾脏皮质雌激素受体β表达减弱，髓质雌激素受体α表达增强，血清雌二醇水平降低。补肾中药具有雌二醇样作用，通过拮抗皮质雌激素受体β表达减弱和髓质雌激素受体α表达增强而发挥其肾脏保护作用。     

补肾通络方对SD大鼠骨性关节炎、骨质疏松症及骨性关节炎并骨质疏松症模型骨密度的影响

背景:临床上发现通过补肾通络方治疗骨性关节炎及骨质疏松症有良好的临床疗效.目的:尝试建立骨性关节炎+骨质疏松症动物模型,观察补肾通络方对SD大鼠骨性关节炎、骨质疏松症及骨性关节炎+骨质疏松症模型骨密度的影响.设计、时间及地点:随机对照观察实验,于2008-08/2009-01在新疆医科大学科研中心完成.材料:4月龄雌性SD大鼠70只,随机分为正常对照组、骨性关节炎组、骨性关节炎+补肾通络方组、骨质疏松症组、骨质疏松症+补肾通络方组、骨性关节炎+骨质疏松症组、骨性关节炎+骨质疏松症+补肾通络方组,每组10只.补肾通络方由骨碎补、杜仲、山萸肉、熟地黄、补骨脂、秦艽、寄生、独活、桃仁、红花、当归、川芎、白芍等组成.方法:取20只大鼠,采用改良Hulth法制作骨性关节炎模型,选择10只于术后1个月灌胃给予补肾通络方;取20只大鼠,采用去势法制作骨质疏松症模型,选择10只于术后1个月灌胃给予补肾通络方;取20只大鼠按上述方式同时制作骨性关节炎、骨质疏松症模型,选择10只于术后1个月灌胃给予补肾通络方.按大鼠体质量灌胃给药,根据人鼠换算出服药量为10.31 mg/(kg·d),2次/d,连续4周.正常对照组不做任何处理.主要观察指标:电镜、光镜观察大鼠左侧股骨内髁关节软骨组织形态学变化,双能X射线观察大鼠左侧股骨骨密度变化.结果:光镜下观察3组模型大鼠骨小梁局部区域变细,排列较紊乱,纵向结构受到破坏,连续性较差,出现较多的断裂点,关节软骨变薄、退变;电镜下观察3组模型大鼠模型组大鼠关节软骨细胞异形性增多,表现为细胞核形态不规则,细胞壁断裂不完整,细胞器减少,细胞核固缩,染色质分布不均匀,并有大量软骨细胞凋亡.骨性关节炎组、骨质疏松症组、骨性关节炎+骨质疏松症组大鼠骨密度较正常对照组明显下降(P<0.05),经补肾通络方干预后骨密度上升(P<0.05).结论:补肾通络方对骨性关节炎、骨质疏松症SD大鼠骨密度有上调作用,但其有效作用机制尚需进一步研究探讨.     

基于OPG/RANKL信号通路探讨补肾活血方改善骨质疏松大鼠动脉钙化的作用机制

目的：观察补肾活血方对骨质疏松模型大鼠胸主动脉钙化情况的影响,并基于骨保护素/核因子κB活化因子受体配体（OPG/RANKL）信号通路探讨补肾活血方改善骨质疏松大鼠动脉钙化可能的作用机制。方方法法：选择32只7月龄SD雄性大鼠,按随机数字表法分为对照组、假手术组、骨质疏松组和补肾活血组,每组8只。对照组不做处理,假手术组暴露睾丸但不切除,其余2组切除双侧睾丸建立骨质疏松大鼠模型。术后第16周开始干预,补肾活血组给予补肾活血方55 g/（kg·d）灌胃,其余3组给予等量生理盐水灌胃,1次/d,连续灌胃8周。采用双能X线吸收仪测定大鼠右后肢股骨干骨密度（BMD）;采用茜素红染色法检测大鼠胸主动脉血管壁钙沉积积分光密度（IOD）,观察胸主动脉钙化程度;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血清骨形成标志物Ⅰ型前胶原N-端前肽（PⅠNP）、骨钙素（BGP）及骨吸收标志物Ⅰ型胶原交联羧基末端肽（CTX-Ⅰ）水平;采用免疫组织化学染色检测胸主动脉OPG和RANKL蛋白表达。结果：(1)BMD、胸主动脉血管壁钙沉积IOD值：与对照组比较,假手术组BMD水平及胸主动脉钙化沉积IOD值无明显变化（P...     

补肾方药归经与靶器官雌激素受体的相关性

目的:分析补肾方药对实验性骨质疏松的归经与靶器官雌激素受体的相关性。方法:实验于2004-06/2006-04在河北医科大学中西医结合基础实验室完成。选择3月龄健康SD雌性和雄性大鼠各70只。常规喂养1周后,随机分成7组:正常对照组、模型组、补肾方药口服组、肾经外贴组、膀胱经外贴组、依普拉封口服组、非经非穴位外贴组,每组雌雄各10只。除正常对照组喂正常饲料,自由饮水外,其余各组均喂饲低钙饲料,饮用蒸馏水,每周2次在大鼠大腿内侧肌肉注射地塞米松0.1mg/100g体质量,5周后建立骨质疏松模型。造模后,正常对照组和模型组喂养条件不变;补肾中药组将补肾方药总成分按0.8g/100g体质量灌喂给药,补肾方药由地黄、淫羊藿、山药、丹参、骨碎补、独活等药物组成;膀胱经外贴组在膀胱经选肾俞、飞扬;肾经外贴组在肾经选太溪、大钟;非经非穴位外贴组在大腿内侧肌肉丰厚处选非经非穴位,具体的穴位选择参照《实验针灸学实验指导》和《大鼠穴位图谱的研制》。大鼠背部、下肢脱毛,清洗穴位,于脱毛区贴上相应的膏剂,左右交替进行。观察16周后,各组大鼠处死,股动脉放血,与口服补肾方药比较治疗骨质疏松。以血清雌二醇、睾酮、骨密度、降钙素、甲状旁腺素、降钙素/甲状旁腺素比值,Ca、P、碱性磷酸酶,各组大鼠骨组织中Ⅰ型胶原和LMP-1mRNA表达,各组雌性大鼠骨组织中雌激素受体α和雌激素受体βmRNA表达为衡量指标,观察其治疗效果。结果:140只大鼠均进入结果分析。①与正常对照组相比,模型组雌二醇、睾酮、骨密度均降低(P均<0.01);与模型组相比,补肾方药口服组、肾经外贴组、膀胱经外贴组、依普拉封口服组雌二醇、睾酮、骨密度均明显升高(P均<0.01)。②与正常对照组相比,模型组甲状旁腺素升高,降钙素、降钙素/甲状旁腺素均降低(P均<0.01);与模型组相比,补肾方药口服组、肾经外贴组、膀胱经外贴组、依普拉封口服组甲状旁腺素下降,降钙素、降钙素/甲状旁腺素均明显升高(P均<0.01)。③与正常对照组相比,模型组碱性磷酸酶升高(P<0.05),Ca、P差异均不显著;与模型组相比,补肾方药口服组、肾经外贴组、膀胱经外贴组碱性磷酸酶下降(P<0.05),Ca、P差异均不显著。④与正常对照组相比,模型组Ⅰ型胶原/β-actin和骨矿化相关蛋白/β-actin的表达均降低(P均<0.05);与模型组相比,补肾方药口服组、肾经外贴组、膀胱经外贴组Ⅰ型胶原/β-actin和骨矿化相关蛋/β-actin的表达均上调(P均<0.05)。⑤与正常对照组相比,模型组雌激素受体α和雌激素受体βmRNA的表达均降低(P均<0.05);与模型组相比,补肾方药口服组、肾经外贴组、膀胱经外贴组雌激素受体α和雌激素受体βmRNA的表达均上调(P均<0.05)。结论:补肾方药通过两种不同途径给药后发挥“归经”作用,至少在骨和性腺两个靶点起作用,使骨组织中Ⅰ型胶原和骨矿化相关蛋白表达上调,雌激素受体α和雌激素受体βmRNA表达上调,促进雌二醇、睾酮、降钙素/甲状旁腺素升高,结果抑制骨吸收,促进骨形成,逆转骨质疏松,增加骨密度。     

补肾活血饮对帕金森病大鼠酪氨酸羟化酶及孤儿核受体mRNA的影响

目的 探讨补肾活血饮治疗帕金森病(PD)的作用机制.方法 应用脑右侧黑质中注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)的方法制备大鼠偏侧PD模型.将120只SD大鼠随机分为正常对照组(n=20),模型组(n=58),补肾活血饮治疗组(n=42):每日灌胃补肾活血饮,按成人(60 kg)每公斤体重剂量10倍计算.治疗8周后断头处死取脑,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定大鼠脑黑质孤儿核受体(Nurr1)的mRNA表达;免疫组化检测大鼠黑质内酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞计数.结果 与正常对照组比较,模型组脑黑质Nurr1 mRNA表达明显下降(0.22±0.03比1.10±0.27,P<0.01),TH阳性细胞计数明显减少[(5.4±2.6)个比(104.3±26.4)个,P<0.01].补肾活血饮组脑黑质Nurr1 mRNA表达(0.97±0.15)较模型组增高(P<0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义;黑质内可见大量TH免疫阳性细胞[(49.4±14.7)个],显著多于模型组,但较正常对照组显著减少(P均<0.01).结论 补肾活血饮可能通过增加PD模型大鼠脑组织内Nurr1及TH含量起到治疗PD的作用.     

补骨脂水煎剂对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢的影响

背景:采用雌激素替代疗法可以缓解绝经后妇女骨质疏松症状,但长期应用会出现明显的毒副作用;具有雌激素活性的补骨脂在治疗骨质疏松症方面有明显效果,且可避免使用雌激素带来的副作用.目的:观察补骨脂水煎剂对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢和血清细胞因子的影响.设计、时间及地点:随机对照,动物体内实验,于2008-04/07在山西医科大学生理学实验动物中心实验室完成.材料:100 mL含100 g生药的100%浓度的补骨脂水煎剂由山西省第二人民医院中药房鉴定制备.肿瘤坏死因子α试剂盒为北京晶美生物工程有限公司产品,骨钙素、1,25-二羟基维生素D3、雌二醇试剂盒为上海卓康生物科技有限公司产品.QDR型4500A双能X射线骨密度仪为美国HOLOGIC公司产品.方法:选用健康雌性鼠龄4个月的Wistar大鼠22只,随机将22只大鼠分为假手术组7只、模型组7只,补骨脂组8只,后2组采用切除双侧卵巢的方法制备骨质疏松模型,假手术组不切除卵巢.补骨脂组在造模后灌胃补骨脂水煎剂每天早晚各3mL,其余组灌胃等量生理盐水,共12周.主要观察指标:给药结束后,分别按试剂盒操作说明测定血清雌二醇,骨钙素,1,25-二羟基维生素D3,肿瘤坏死因子α水平.利用QDR 4500A型DEXA骨密度仪测量大鼠股骨密度.结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清雌二醇、1,25-二羟基维生素D3水平和骨密度显著降低(P<0.01),血清肿瘤坏死因子α水平、骨钙素水平升高(P<0.05).与模型组比较,补骨脂组大鼠血清雌二醇仍处于较低水平,骨密度、血清1,25-二羟基维生素D3、骨钙素水甲明显升高(P<0.05～0.01),血清肿瘤坏死因子α水平显著降低(P<0.01).结论:补骨脂水煎剂可改善去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢指标和血清细胞因子水平.     

双酚A和邻苯二甲酸二丁酯暴露对雌性幼鼠青春期发育的影响

目的 研究双酚A(BPA)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对雌性幼鼠青春期发育的影响.方法 将64只21日龄SD雌性幼鼠用随机数字表法分为BPA干预组(BPA 0.25 mg/kg灌胃10 d)、DBP干预组(DBP 50 mg/kg灌胃10 d)、BPA+DBP干预组(BPA 0.20 mg/kg+DBP 40 mg/kg灌胃10 d)、雌二醇(E2)组(E20.1 mg/kg灌胃10 d)、BPA空白对照组(10 mL/kg不含BPA的玉米油溶液灌胃10 d)、DBP空白对照组(10 mL/kg不含DBP的玉米油溶液灌胃10 d)、正常对照组(不做任何处理)和溶剂组(10 mL/kg玉米油溶液灌胃10 d),每组8只.观察幼鼠阴道开口时间(VOD),收集子宫、卵巢进行病理学检查,采用酶联免疫吸附试验检测血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和Kisspeptin水平,采用实时荧光定量PCR检测下丘脑KISS-1、G蛋白偶联受体54(GPR54)和卵巢雌激素受体(ER)α、ERβmRNA表达水平.结果 与正常对照组和溶剂组相比,BPA干预组和E2组VOD提前,差异有统计学意义(P<0.05).BPA干预组血清LH、FSH、LH/FSH、E2、Kisspeptin水平明显高于BPA空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).E2组血清LH、FSH和Kisspeptin水平明显低于正常对照组和溶剂组,差异有统计学意义(P<0.05).BPA干预组下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA表达水平明显高于BPA空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).E2组下丘脑KISS-1和卵巢ERβmRNA表达水平明显低于正常对照组和溶剂组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BPA暴露可致雌性幼鼠性早熟,其致病机制可能与下丘脑Kisspeptin-KISS-1/GPR54-促性腺激素释放激素信号传导和下丘脑-垂体-性腺轴提前激活有关.     

大麻素CB1受体和纹状体多巴胺D2受体参与电针镇痛机制

目的:研究大麻素CB1受体和多巴胺D2受体是否参与单次或反复电针镇痛机制。方法:以完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)造成佐剂性关节炎大鼠模型,分别对单次及反复电针后的大鼠进行痛阈和纹状体D2受体mRNA表达水平检测。同时用CB1受体拮抗剂或激动剂干预。结果:①单次和反复电针后痛阈均升高,且关节炎痛+电针+拮抗剂组的镇痛效果弱于关节炎痛+电针组(P<0.01);关节炎痛+激动剂组与关节炎痛+电针组镇痛效果比较,差异无统计学意义。②无论是单次或反复电针,关节炎痛+电针+拮抗剂组大鼠纹状体D2受体mRNA表达水平显著低于电针组(P<0.01)。③在反复电针观察组中,关节炎痛+激动剂组大鼠纹状体D2受体mRNA表达水平与关节炎痛组相比,差异无统计学意义,显著低于关节炎痛+电针组(P<0.01)。结论:在本实验条件下,单次和反复电针产生的镇痛作用可能部分通过大麻素受体CB1介导,纹状体D2受体可能也参与其中。     

Expression of steroid receptors in intact rat uterus, mammary gland, and liver treated with selective estrogen receptor modulators and conjugated equine estrogens

The aim of the present study was to determine the effects of conjugated equine estrogens (CEE) and selective estrogen receptor modulators (SERM) (tamoxifen [TAM] and raloxifene [RAL]) on the expression of steroid receptors—estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR)—in intact rat uterus, mammary gland, and liver. A total of 24 female rats weighing 250 to 300 g were randomized into 4 groups. Groups 1, 2, 3, and 4 were respectively given conjugated equine estrogen, tamoxifen, raloxifene, and vehicle for a 28-day period. ER and PR expression was detected in tissues of the uterus, mammary gland, and liver. Uterine wet weight and serum estradiol levels were established for all groups. No statistical difference was observed between groups in the ER expression of mammary gland and liver and in the PR expression of uterus, mammary gland, and liver, but differences were noted in serum estradiol levels and uterine ER expression. Serum estradiol levels were lower in the TAM-treated group; differences between the TAM-treated group and the other groups were statistically important (P > .05). Uterine ER expression was greater in the CEE-treated group; differences between the CEE-treated group and theTAM and RAL-treated groups were statistically important (P > .05). CEE or SERM versus vehicle treatment in controls did not seem to result in statistically important differences in ER and PR expression in intact rat uterus, mammary gland, and liver. Only ER expression in the uterus was found to be greater in the CEE-treated group than in SERM-treated groups.     

痹肿消汤对关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子表达水平及关节症状的影响

目的:观察痹肿消汤对实验性关节炎大鼠滑膜组织血管内皮生长因子(vscularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达水平的影响,探讨痹肿消汤治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:75只SD大鼠按随机数字表法分为4组(正常对照组,模型对照组,甲氨蝶呤治疗组,痹肿消汤治疗组),皮下注射Ⅱ胶原诱导实验性关节炎模型,用免疫组化法检测各组不同时间点大鼠滑膜组织VEGF的表达,同时采用关节指数积分法评价其关节炎症状。结果:免疫大鼠88.57%出现关节炎症状;模型组的关节炎指数逐渐增加,而痹肿消汤组和甲氨蝶呤组关节炎指数则在35d后逐渐下降。正常组滑膜组织未见明显VEGF表达,模型组VEGF表达犤(30.6±6.2)%于25d起就明显高于痹肿消汤组犤(16.2±4.4)%犦(P<0.001)和甲氨蝶呤组犤(24.4±3.6)%犦(P<0.001);随着时间的延长,模型组VEG表达逐渐升高,痹肿消汤组与甲氨蝶呤组的VEGF表达逐渐降低,于45d模型组更明显高于痹肿消汤组(P<0.001)和甲氨蝶呤组(P0.001),且痹肿消汤组又低于甲氨蝶呤组(P<0.001)。结论:VEGF参与了RA疾病滑膜炎的形成和发展过程;其VEGF表达的高低与关节炎症状的轻重有关。痹肿消汤可能通过阻断VEGF的表达来阻抑关节炎滑膜血管翳的形成或骨质侵袭。     

麻黄桂枝组方对豚鼠银屑病样模型的影响

目的 观察麻黄桂枝组方对豚鼠银屑病样模型的影响.方法 健康豚鼠50只随机分为空白组模型组、麻桂组、甲氨蝶呤组和犀角地黄汤组,以5％普萘洛尔乳膏外涂豚鼠耳部外侧皮肤,连续造模2周后各组给药.结果 模型组和各给药组豚鼠耳部均出现银屑病样皮损,给药2周后麻桂组和甲氨蝶呤组显著好转;各给药组皮损病理积分较模型组均有不同程度下降,其中麻桂组与甲氨蝶呤组显著低于模型组和犀角地黄汤组（P＜0.01）;麻桂组汗腺空泡发生率较其他各组显著增加（P＜0.01）.结论 麻黄桂枝组方可显著改善普萘洛尔诱发的豚鼠银屑病样皮损,这可能与其促进排汗相关.     

高压氧对脑缺血再灌注损伤后Cx37表达及血脑屏障的影响

目的:研究高压氧(HBO)对大鼠脑缺血再灌注(CIR)损伤后缝隙连接蛋白Cx37表达及血脑屏障(BBB)通透性的影响。方法:选用240只雄性Wistar大鼠,随机分成假手术组、模型组、模型+HBO组、HBO组各60只。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,并于再灌注1h、9h、21h、45h、69h进入HBO舱,期间行0.25MPa HBO治疗5次。在处死动物前1h经尾静脉注射2%伊文思兰(EB),采用比色法、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western Blot法分别检测CIR后0h、4h、12h、24h、48h、72h脑组织EB的含量、Cx37mRNA及蛋白的表达变化。结果:CIR损伤后不同时间点模型组与假手术组相比较脑组织EB的含量显著增高(P<0.01),其中EB的含量以CIR损伤后4h最为明显。模型+HBO组脑组织中EB的含量与同时间的模型组相比较显著降低(P<0.01),HBO组与同时间假手术组相比较脑组织中EB的含量变化不明显。Cx37mRNA及蛋白的表达与CIR损伤后0h相比于CIR损伤后4h、12h、24h、48h、72h表达显著增高(P<0.01),以CIR损伤后24hCx37mRNA及蛋白的表达增高最明显。CIR损伤后24h模型+HBO组与模型组相比较脑组织中Cx37mRNA及蛋白的表达水平明显减少(P<0.01);CIR损伤后24hHBO组与假手术组相比脑组织中Cx37mRNA及蛋白的表达变化差异无统计学意义。结论:高压氧可以降低脑缺血再灌注后BBB通透性,其保护作用与抑制缝隙连接蛋白Cx37的表达有关。     

Functional role of estrogen in pituitary tumor pathogenesis

Pituitary hyperplasia and lactotroph replication are induced by estrogen. The product of the pituitary tumor transforming gene (PTTG) exhibits in vitro and in vivo transforming activity and induces basic bFGF secretion, thereby modulating pituitary angiogenesis and tumor formation. We demonstrated previously that pituitary pttg is induced by estrogen and bFGF, the latter being expressed in a concordant fashion with pttg in experimental and human pituitary adenomas. We now elucidate the role of estrogen in paracrine regulation of pituitary tumorigenesis by PTTG. Coincident with the circulating rat estradiol surge and maximal pituitary proliferation, pituitary pttg mRNA, bFGF, and VEGF expression increased approximately threefold during proestrus and estrus. Osmotic mini-pump coinfusion of estrogen and antiestrogen abrogated estrogen-induced pituitary pttg expression in vivo, suppressed serum PRL concentrations by 88%, and attenuated prolactin-secreting pituitary tumor growth by 41% in rats. Antiestrogen treatment of primary human pituitary tumor cultures reduced PTTG expression approximately 65%. Pituitary pttg, bFGF, and VEGF are cyclically expressed during the rat estrus cycle, concordantly with estrogen levels. Because anti-estrogens reduced PTTG expression in human pituitary tumors in vitro and suppressed experimental tumor growth in vivo, concomitantly with reduced PRL secretion, these results indicate a role for selective antiestrogens in treating pituitary tumors.     

补阳还五汤及拆方影响脑缺血再灌注大鼠细胞凋亡与Bcl-2、Bax蛋白的表达

背景:补阳还五汤是一种临床上常用的治疗缺血性脑血管疾病的中药,其作用机制还有许多不明之处。目的:观察补阳还五汤及拆方对脑缺血再灌注SD大鼠模型细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响及其作用机制,并研究方剂配伍的意义。设计:随机对照的动物实验。单位:河南中医学院第一附属医院神经内科。材料:实验在河南省中医药研究院国家中医管理局三级实验室进行。选择上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供的清洁级SD大鼠60只,月龄4～5个月;雌雄各半,雌性260～310g,雄性280～330g。活血组药物选用当归120g,桃仁60g,川芎60g,加水1440mL,提取挥发油,备用。药渣及提取液加入赤芍120g,地龙60g,红花60g,再加入1440mL水,煎煮1h,滤过,药渣再加入2880mL水,煎煮1h,滤过,合并两次煎液,浓缩至1200mL,加入挥发油及吐温-803mL,混匀,即得。黄芪组药物选用黄芪1200g,加水7200mL,煎煮两次,每次1h,滤过,合并煎液,浓缩至600mL,加入吐温-802mL,即得。补阳还五汤组选用当归60g,桃仁30g,川芎30g,加水720mL,提取挥发油,备用。药渣及提取液加入黄芪1200g,赤芍60g,地龙30g,红花30g,再加入920mL水,煎煮1h,滤过,药渣再加入8640mL水,煎煮1h,滤过,合并两次煎液,浓缩至600mL,加入挥发油及吐温-803mL,混匀,即得。(黄芪组和补血组药物为补阳还五汤的拆方。)活血组药物每毫升相当生药0.4g,黄芪组药物每毫升相当于生药2g,全方组药物相当于生药2.4g。方法:将60只清洁级SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、活血组、黄芪组、总方组,每组分别为12只。每只SD大鼠分别通过灌胃给药:活血组8g/kg、黄芪组40g/kg、总方组48g/kg,假手术组及模型组分别给予生理盐水20mL/kg。通过四血管结扎法制作脑缺血再灌注模型。采用缺口末端标记法原位检测凋亡细胞(TUNEL),应用免疫组化法测定Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达。主要观察指标:①各组SD大鼠脑组织神经元细胞凋亡水平的比较;②各组SD大鼠脑组织神经元Bcl-2、Bax阳性细胞表达水平的比较。结果:①各组SD大鼠脑组织神经元细胞凋亡水平比较:与假手术组相比,其他各组细胞凋亡明显增加(t=6.07～11.70,P<0.01);与模型组相比,活血组、黄芪组细胞凋亡减少(t=2.71,2.06,P<0.05),总方组减少明显(t=5.34,P<0.01)。②各组SD大鼠脑组织神经元Bcl-2、Bax阳性细胞表达水平的比较:与假手术组相比,活血组、黄芪组、总方组Bcl-2染色阳性细胞的表达增多(t=4.59～8.82,P<0.01),Bax阳性细胞表达更加明显(t=4.59～8.55,P<0.01);与模型组相比,活血组、黄芪组、总方组Bcl-2染色阳性细胞的表达增多(t=3.48～7.75,P<0.01),Bax阳性细胞的表达降低(t=3.83～5.88,P<0.01)。活血组药物作用与黄芪组差异无显著性(P>0.05),总方组药物作用与黄芪组、活血组差异极具显著性(P<0.01)。结论:补阳还五汤及拆方通过抑制细胞凋亡的作用,达到抗脑缺血再灌注损伤的作用。黄芪组和活血组即拆方的协同作用,使总方组发挥最大的疗效。     

雌激素干预去势骨质疏松症大鼠血清白细胞介素8、10的表达

背景：绝经后妇女骨质疏松症患病率高,雌激素能否通过调控细胞因子表达防治骨质疏松？目的：观察雌激素对血清细胞因子白细胞介素8、白细胞介素10表达水平影响,以及骨密度与细胞因子表达水平的相关性。方法：健康雌性SD大鼠30只随机数字表法均分为正常对照组、模型组、雌二醇组。正常对照组行开关术,其余两组行双侧卵巢切除。造模后第3周正常对照组和模型组大鼠每天灌服生理盐水1．5mL/只;雌二醇组给予戊酸雌二醇1mg／（kg·d）,以1.5mL生理盐水混悬液形式灌服,共12周。双能X射线骨密度仪测量股骨和胫骨骨密度;ELISA方法定量测定血清白细胞介素8、白细胞介素10及雌二醇表达水平。结果与结论：模型组和雌二醇组两组血清雌二醇表达水平较正常对照组明显降低,差异有显著性意义（P〈0．05）,表明大鼠去势手术制作成功。模型组血清白细胞介素8表达水平明显高于正常对照组和雌二醇组（P〈0．01）,血清白细胞介素10表达水平明显低于两组（P〈0．01）;正常对照组血清白细胞介素10表达水平与雌二醇组比较,差异无显著性意义（尸〉0．05）。股骨骨密度和胫骨骨密度与血清白细胞介素8表达水平均呈显著负相关（P〈0．001）,而与血清白细胞介素1O表达水平均呈显著正相关（P〈0．05）。雌激素能够下调白细胞介素8的表达水平,上调白细胞介素10的表达水平。提示雌激素通过调节细胞因子表达水平可能成为防治绝经后妇女骨质疏松症的又一作用机制。     

高渗盐水对脑缺血大鼠Notch信号通路的影响

目的：探讨高渗盐水（ hypertonic saline, HS）对大鼠脑缺血后小胶质细胞Notch信号通路的影响。方法 SPF级-雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为假手术组,脑缺血组,生理盐水（ NS）组,10％高渗盐水（10％HS）组。除假手术组外,其他各组采用线栓法复制右侧大脑中动脉栓塞脑缺血模型,缺血2 h后实施再灌注24 h, NS组和10％HS组按0.3 mL／h经尾静脉分别匀速泵入NS和10％HS治疗24 h。然后采用免疫荧光法、 RT-PCR、 Western blot检测各组大鼠脑缺血灶周围Notch1及Notch受体的胞内片段NICD的表达。数据采用单因素方差分析,用LSD法进行组间两两比较,以P＜0.05为差异具有统计学意义。结果免疫荧光表明与假手术组比较,脑缺组和NS组缺血灶周围小胶质细胞Notch1与NICD的表达明显增加;10％HS组与脑缺血组及NS组比较,缺血灶周围小胶质细胞Notch1与NICD的表达明显减少。 RT-PCR表明脑缺血组及NS组与对照组比较, Notch1 mRNA的表达明显增加（对照组：1.000±0.076;脑缺血组：2.203±0.283; NS组：1.616±0.185; P＜0.01）;10％HS组与脑缺血组及NS组比较, Notch1 mRNA的表达均明显减少（脑缺血组：2.203±0.283; NS 组：1.616±0.185; HS 组：1.202±0.177; P ＜0.05）。 Western blot表明脑缺血组和 NS 组与对照组相比,脑缺血灶周围 Notch1蛋白表达明显增加（对照组：0.290±0.079;脑缺血组：0.750±0.029; NS 组：0.765±0.182; P ＜0.01）;10％HS 治疗后, Notch1蛋白表达较脑缺血组和NS组明显减少（脑缺血组：0.750±0.029; NS组：0.765±0.182;HS组：0.390±0.195; P＜0.05）。脑缺血组和NS组与对照组比较,大鼠脑缺血灶周围NICD蛋白表达明显增加（对照组：0.401±0.196;脑缺血组：0.906±0.359; NS组：0.847±0.153; P＜0.01）;10％HS治疗后, NICD蛋白表达较脑缺血组和NS组明显减少（脑缺血组：0.906±0.359;NS组：0.847±0.153; HS组：0.561±0.165; P＜0.05）。结论 HS可抑制大鼠脑缺血后小胶质细胞上Notch信号通路的激活。     

大豆异黄酮干预去势大鼠骨密度及成骨细胞雌激素受体α的表达

背景：大豆异黄酮是一类植物雌激素,对绝经后骨质疏松症治疗具有重要意义。目的：进一步验证大豆异黄酮对去势大鼠骨密度和成骨细胞雌激素受体α表达的影响。方法：将12月龄去势雌性SD大鼠随机分为3组,大豆异黄酮组和对照组大鼠摘除双侧卵巢,假手术组只进行手术入路,不切除卵巢。大豆异黄酮组切除卵巢后,每日灌胃大豆异黄酮,连续40d。对照组喂等量生理盐水。结果与结论：喂饲40d后对照组大鼠左侧股骨骨密度值显著低于假手术组（P〈0.05）,提示骨质疏松模型成功。大豆异黄酮组大鼠左侧股骨骨密度高于对照组（P〈0.05）;大豆异黄酮组雌激素受体α的表达量高于对照组（P〈0.05）。提示大豆异黄酮可增加去势大鼠骨密度,提高去势大鼠成骨细胞雌激素受体α的表达,促进成骨细胞增殖。     

桂枝茯苓胶囊对子宫肌瘤大鼠子宫系数和激素水平的影响相关机制研究

目的探讨桂枝茯苓胶囊对子宫肌瘤大鼠的保护作用及其机制是否与腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)-核因子E2相关因子2 (Nrf2)通路有关。方法选择50只无特定病原体(SPF)级健康雌性未孕SD大鼠为研究对象,由西安交通大学提供,体重180～220 g。按照随机数字表法均分为5组:对照组、模型组、桂枝茯苓胶囊低、中、高剂量组,各10只。对照组不建模,前肢腋下皮下注射0.9%氯化钠溶液1 mL 30 d,再灌胃0.9%氯化钠溶液1 mL 42 d。模型组、桂枝茯苓胶囊低、中、高剂量组通过前肢腋下皮下注射己烯雌酚0.2 mg·kg^-1·d^-1,30 d,建立子宫肌瘤模型。模型组再灌胃0.9%氯化钠溶液1 mL 42 d,桂枝茯苓胶囊低、中、高剂量组分别再灌胃桂枝茯苓胶囊0.8、1.6、3.2 g·kg^-1·d^-1,42 d。观察各组大鼠子宫系数的变化,苏木精和伊红染色观察子宫肌瘤大鼠子宫平滑肌形态,酶联免疫分析测定血清雌二醇和孕酮水平,实时荧光定量PCR检测AMPK、Nrf2、Bcl-2和Bax的mRNA表达...