肝癌合并肝硬化患者脾脏Th1/Th2细胞因子免疫状态的研究

目的：探讨肝癌合并肝硬化患者脾脏Th1/Th2细胞因子分泌状态的变化。方法：以肝硬化患者为对照组，用酶联免疫吸附（ELISA）方法分析了31例肝癌合并肝硬化患者外周血有脾静脉血γ－干扰素（IFN－γ），白细胞介素（IL）－2，IL－10蛋白水平的表达。结果：6例Ⅰ期肝癌患者外周血IL－2，脾静脉血ITNF－γ高于肝硬化组（P＜0．01或P＜0．05），外周及脾静脉IL－10低于肝硬化组（P＜0．05）。12例Ⅱ期13例Ⅲ期肝癌患者外周血及脾静脉血IFN－γ，IL－2明显低于肝硬化组（P＜0．01或P＜0．05），而IL－10明显高于肝硬化组（P＜0．05），且脾静脉血IFN－γ，IL－2低于外周血，IL－10高于外周血水平（P＜0．05）。结论：Ⅰ期肝癌合并肝硬化患者机体免疫系统通过强势分泌Th1细胞因子发挥抗肿瘤免疫作用，而脾脏在维持Th1/Th2细胞因子平衡中起重要作用。随着肿瘤进展，机体细胞免疫功能受损，中晚期肝癌患者Th1细胞因子水平降低，Th2细胞因子水平增高，机体处于免疫抑制状态，而脾脏Th1/Th2细胞因子紊乱更为明显，呈现负性抗肿瘤免疫作用，加重了机体免疫抑制。     

休克期一次性切痂对巨噬细胞分泌细胞因子的影响

目的 了解烧伤休克期一次性切痂大鼠血浆对巨噬细胞分泌TNFα、IL-6和IL-8的作用及对血浆中炎症介质TNFα、IL-6和IL-8影响,论证烧伤休克期切痂能否抑制巨噬细胞分泌TNFα、IL-6和IL-8。方法Ⅲ度30％TBSA大鼠随机分为伤后6h切痂组(E组)和烧伤未切痂组(C组),检测两组大鼠血浆中。TNFα、IL-6和IL-8含量,并将两组大鼠血浆分别与正常大鼠腹腔巨噬细胞共同孵育6h,检测培养液中。TNFα、IL-6和IL-8含量。结果 E组和c组伤后血浆中TNFα、IL-6和IL-8均明显升高,但E组于伤后12h上述3项指标下降并明显低于C组。两组大鼠血清均能刺激腹腔巨噬细胞分泌。TNFα、IL-6和IL-8,但E组的刺激能力明显低于C组。缩论烧伤休克期一次性切痂,能降低烧伤血浆诱导细胞分泌TNFα、IL-6和IL-8的能力,减少烧伤血浆中TNFα、IL-6和IL-8含量,有利于防止严重烧伤后炎症反应综合征的发生和发展。     

绝经后激素替代治疗的妇女发生骨质疏松时某些细胞因子水平的改变

目的：旨在探讨健康和骨质疏松的激素替代治疗的绝经后妇女中全血细胞产生某些细胞因子水平的不同，论证这些细胞因子与绝经后骨质疏松的关系。对象：43名白人绝经后立即激素替代治疗的妇女，分为骨质疏松组（n＝12）和正常对照组（n＝31）。取全血，一半不作处理，作为对照组，一半加入多克隆的刺激剂，作为刺激组，培养4h或72h，使用ELISA法测定细胞因子IL－1β，IL-6，TNFα，INF-γ，GM-CSF和ILF。结果：在骨质疏松的绝经后激素替代治疗妇女中，较之无骨质疏松的同组人群，细胞因子IL－6水平升高，LFN－γ，LIF水平降低，结论：虽然同样绝经后即开始激素替代治疗，一些妇女依旧发生骨质疏松，本研究发现IL－6在这部分病人中可能是一种致病因素，而TNF－γ，LIF是一种保护因素。     

大鼠烧伤后库普弗细胞在促炎细胞因子产生中的作用

目的　观察大鼠严重烧伤后早期 ,库普弗细胞在肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL) 1β、IL 6产生中的作用。方法　观察 (1)烧伤血清对体外培养的大鼠库普弗细胞分泌TNFα、IL 1β、IL 6的刺激作用 ;(2 )烧伤后大鼠库普弗细胞的细胞因子mRNA表达变化 ;(3)应用库普弗细胞特异性抑制剂三氯化钆后 ,烧伤大鼠血浆内细胞因子含量变化。　结果　烧伤血清能刺激库普弗细胞释放TNFα、IL 1β、IL 6 ;大鼠烧伤后库普弗细胞TNFα、IL 1β、IL 6mRNA表达量显著升高 ;预先抑制库普弗细胞的活性 ,烧伤后血浆TNFα、IL 1β、IL 6水平均显著降低 ,分别为烧伤组的 34.71%、36 99%、33.70 %。结论　库普弗细胞是大鼠烧伤后血浆中TNFα、IL 1β、IL 6的主要来源     

自身免疫性甲状腺病Th1／Th2细胞因子平衡的偏离

目的探讨自身免疫性甲状腺病中Graves病和桥本甲状腺炎患者外周血Th1／Th2细胞因子平衡偏离的方向。方法应用酶联免疫吸附法分别检测50例Graves病患者，20例桥本甲状腺炎患者和20例健康献血者外周血γ干扰素（IFN-γ）和白介素-4（IL-4）。以IFN—γ/IL-4作为反映Th1/Th2细胞因子的指标。结果与正常对照组对比，Graves病和桥本甲状腺炎患者外周血IFN-γ无明显变化（P〉0．05），IL-4明显下降（P〈0．01），而IFN—γ/IL-4比值升高（P〈0．05）。结论自身免疫性甲状腺病中Graves病和桥本甲状腺炎外周血Th1/Th2细胞因子平衡显现Th2细胞因子低下型，而Th1／Th2相对升高。     

氨基胍在重度失血性休克中的应用研究

目的：研究氨基胍（AG）在重度失血性休克中的治疗效果。方法：采用兔失血性休克－复苏模型,分为休克组,AG组（复苏时应用AG）,观察休克前后血浆内毒素（ET）,肿瘤坏死因子（TNF）－α,白细胞介素（IL）－6,IL－8,一氧化氮（NO）的变化,观察动物24,48h存活率。结果：兔失血性休克后,血浆内毒素,TNF－α,IL－6,IL－8,NO水平明显升高;复苏后,AG组动物血浆中上述物质水平明显低于休克组,该组动物的存活率明显高于休克组。结论：内毒素血症,TNF－α,IL-6,IL-8,NO在失血性休克的发展过程中起着重要作用,AG作为诱导型一氧化氮合酶（iNOS)抑制剂,有助于改善重度失血性休克的预后。     

术前口服酮洛酸和可乐定对上腹部手术患者细胞因子反应的影响

目的：评价术前止痛对上腹部手术病人围手术期细胞因子反应的影响。方法：选择20例拟于全麻下全胃或胃次全切除的患者,单盲随机分成两组。（1）术前止痛组;术前1h口服桐洛酸10mg和可乐定4μg/kg;（2）对照组：术前1h口服等量安慰剂。分别于术前24h、全麻诱导后20min(术前）、诱导后90min(术中）、术后0、1、2、4、6和24h测定患者血清TNF－α、IL-1β、IL-6和IL－10的水平。结果（1）术前止痛组血清IL－6的水平于术后0h有显著上升,术后4h达高峰,而对照组于诱导后90min（术中）即有显著上升,术后2h达高峰;两用IL－6的水平于术后0、1、2h有显著性差异（P＜0．01）,且术前止痛组的峰值显著低于对照组（P＜0．05）。（2）两组TNF－α及IL－10的水平均于术中即有显著上升,术后2h达高峰,但两组TNF－α和IL－10的水平无显著性差异（P＞0．05）。（3）两组IL－1β的浓度在围手术期处于较低的水平,无统计学意义。结论（1）术前口服桐洛酸和乐定在一定程度上降低了术后患者促炎症因子IL－6的水平,对防止严重并发症的发生,具有潜在的治疗意义;（2）创伤后促炎症因子IL－6、TNF－α升同时机体启动内源性抑炎症机制。     

失血性休克大鼠血浆及腹腔巨噬细胞释放细胞因子改变

目的：研究大鼠失血性休克前后血浆及腹腔巨噬细胞释放细胞因子的变化。方法：将30只大鼠分为失血性休克组（20只）和对照组（10只）,观察大鼠休克前后血浆和腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子（TNF）－α,白细胞介素（IL）－1β,IL－6和IL－8改变。结果：失血性休克90min后大鼠腹腔巨噬细胞释放TNF－α,IL－1β,IL－6和IL－8显著减少（P＜0．01）,而血浆中这些细胞因子水平明显升高（P＜0．01）。结论：失血性休克对大鼠细胞免疫功能有抑制作用。     

伤后即行切痂对烧伤大鼠心肌损伤的防治作用

目的 探讨早期一次性切痂对烧伤后心肌损伤的防治作用。方法 建立30％ TBSAⅢ度烧伤大鼠立即切痂模型，动物随机正常对照组、未切痂组和切痂组，于伤后1，3，6，12和24h检测血浆肌钙蛋白T（TnT)和肿瘤坏死因子（TNF）等指标。结果 烧伤后3h血浆TnT即显著升高，伤后6h血浆TNF显著高于伤前，心肌组织中TNF也在伤后12h显著升高。未切痂组与切痂组比较，伤后1－3h未切且TnT、TNF略低于切痂组。TNF与TnT存在显著正相关关系。结论 TNF是引起烧伤后心肌损伤的重要因素，且与心肌损伤程度密切相关。伤后即行一次性切痂可以减少炎症介质的生成和释放，这可能是其对烧伤后并发心肌损伤具有防治作用的机理之一。     

抑肽酶对小儿体外循环术后细胞因子的影响

目的：观察小儿体外循环术中，术后细胞因子肿瘤坏死因子（TNF）－α，白细胞介素（IL）－6，IL－8的变化，评价抑肽酶对体外循环炎 反应的抑制作用。方法：19例在体外循环下行心内直视手术的先天性心脏病病儿，随机分为2组，试验组10例，于转机过程中加入凶肽酶4－5万KIU／kg；对照组9例，未用抑肽酶，分别于麻醉后，升主动脉阻断后10min，停机后10min，停机后24h共4个时点采取动脉血，酶标免疫放射法分别测定IL－6，IL－8，TNF－α。结果：对照组IL－6，IL－8，TNF－α于体外循环开始后升高，IL－8，TNF－α于术后24h恢复至基础值，试验组TNF－α各时间点升高不明显，IL－6，IL－8升高幅度低于对照组（P＜0．01，0．05），结论：抑肽酶可能降低体外循环术后IL－6，IL－8，TNF－α等细胞因子水平，从而减轻炎性反应。     

抑制应激对严重烧伤大鼠炎症反应的影响

目的　观察冬眠药物对严重烧伤大鼠应激和炎症反应的影响。方法　SD大鼠 30 %TBSA深Ⅱ度烧伤 ,分为烧伤立即复苏组 (A组 ,30只 )、烧伤立即复苏冬眠合剂组 (B组 ,30只 )、烧伤延迟复苏组 (C组 ,30只 )、烧伤延迟复苏冬眠合剂组 (D组 ,2 5只 )、对照组 (假烧伤 ,E组 ,6只 )。高效液相色谱法检测伤后 3、6、12、2 4和 4 8h大鼠血浆中去甲肾上腺素 (NE)、肾上腺素 (E)和多巴胺 (DA)含量 ,ELISA和RIA法测定血浆IL 1α和PGE2 水平 ,激光共聚焦显微镜定位分析单个核细胞 (PBM Cs)中核因子 κB(NF κB)活性。　结果　血浆NE水平于伤后 6h达高峰 ,同一时相B组最低。血浆E水平亦于伤后 6h达高峰 ,B组峰值较其他组低。血浆DA水平在各组间和各时相点差异无统计学意义。伤后血浆IL 1α和PGE2 水平持续上升 ,同一时相B组低于A组 ,D组低于C组 ;同一时相B、D两组比较 ,B组低于D组。E组NF κB位于PBMCs胞浆中 ,A组伤后 6hNF κB以胞核浓度为高 ;B组胞浆和胞核中均有NF κB ,但以胞浆浓度为高 ;C或D组NF κB浓集于胞核内。　结论　冬眠药物能减少严重烧伤大鼠应激激素的分泌 ,可调节PBMCs的NF κB核移位和降低血浆炎症细胞因子水平     

烧伤后清洁肠道与肠源性高代谢的实验研究

目的探讨烧伤后是否存在"肠源性高代谢”.方法在建立严重烧伤加清洁肠道动物模型基础上,将88只Wistar大鼠随机分为烧伤对照(B)组和烧伤加清洁肠道(D)组.观察了大鼠伤后0～10d静息能量消耗(REE)的变化,同时检测了伤后1、3、5、7、10d血中内毒素、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素1(IL-1)的含量,并进行相关分析.结果烧伤后两组大鼠的REE、TNF、内毒素和IL-1均明显高于伤前.两组相比,D组的REE、TNF、内毒素和IL-1较B组均有不同程度的降低.相关分析显示,REE同内毒素、TNF和IL-1呈显著正相关(r1=0.77,P＜0.05;r2=0.81,P＜0.05;r3=0.90,P＜0.01).结论清洁肠道可降低烧伤大鼠高代谢反应,大鼠血中炎症介质的含量也下降,提示烧伤后存在肠源性高代谢.     

严重烧伤休克期大面积切痂对休克复苏的影响

目的 评价休克期大面积切痂对休克复苏的影响。方法 采用40％TBSAⅢ度烫伤犬模型,随机分为切痂组(E组)和非切痂组(C组)。两组动物于伤后1h按parkland公式补充复方乳酸钠溶液复苏,E组在伤后3h切除全部焦痂,立即植以新鲜异体皮。动态观察血流动力学、血液流变学、氧供、氧耗和血乳酸的变化。结果两组犬烫伤后30min均立即发生严重休克,心排出量(CO)、心脏指数(CI)、左心作功指数(LVWI)显著降低,全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数、血浆乳酸含量明显增加。E组动物伤后3h切痂,CO、CI、血液流变学和乳酸含量较术前及C组均有明显改善。结论 烧伤后单纯补液不能较快纠正休克,休克期大面积切痂是安全可行的,并能有效纠正休克。     

大鼠严重烫伤早期血浆游离氨基酸浓度的变化

目的 探讨烫伤早期大鼠血浆游离氨基酸含量的变化规律,为研究烧伤后骨骼肌代谢机制异常提供依据。方法 以30％TBSAⅢ度烫伤大鼠为模型,随机分为正常对照组和烧伤后2、6、12和24h共5组,每组8只。用氨基酸自动分析仪的生理体液柱测定血浆游离氨基酸含量,同时测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）浓度、皮质醇、TNFα和IL－6含量。结果 烫伤后24h内各时相点血浆总氨基酸含量虽然无显性变化,但有不同程度降低趋势;支链氨基酸（BCAA）2h显降低,12h显升高;芳香族氨基酸（AAA）在12和24h显升高;BCAA／AAA比值无显性变化;苯丙氨酸／酪氨酸（Phe/Tyr)比值除伤后2h外,其余各时相点均显升高（P＜0．01）,伤后12h达峰值;血浆TNFα和IL－6含量均显上升（P＜0．01）;IL－6和皮质醇与3－MH和Phe/Tyr呈显正相关。结论 烫伤大鼠因浆氨基酸发生明显变化,其原因可能与早期炎性介质过度释放以及骨骼肌蛋白降解增强和肝功能受损有关,其机制有待进一步研究。     

Recombinant human growth hormone alters acute phase reactant proteins, cytokine expression, and liver morphology in burned rats.

BACKGROUND: The effects of exogenous recombinant human growth hormone (rhGH) on hepatic acute phase reactant proteins, cytokine expression, and liver morphology were studied in thermally injured rats to define whether rhGH alters the acute phase response. MATERIALS AND METHODS: Sprague-Dawley rats (56 males) receiving a 60% TBSA third-degree scald burn were randomly divided into two groups to receive either 2.5 mg/kg/day sc rhGH or saline. Rats were sacrificed on Postburn Days 1, 2, 5, and 7. Serum acute phase reactant proteins and cytokines TNF-alpha, IL-1alpha, IL-1beta, and IL-6 were measured. Hepatocyte proliferation, hepatic cytokine gene expression, and liver protein concentrations were determined. RESULTS: Recombinant hGH increased serum albumin on Days 5 and 7 after burn (P < 0.05). Serum haptoglobin and alpha1-acid glycoprotein levels decreased at 2, 5, and 7 days after burn compared to saline (P < 0.05). In rats treated with rhGH, serum IL-1beta decreased 1 day postburn, while serum TNF-alpha increased 5 days after burn compared to saline (P < 0.05). Serum IL-6 and IL-1alpha did not change. Hepatic RNA levels for TNF-alpha were significantly elevated on Day 1 postburn compared to saline (P < 0. 05). Hepatic protein content increased on Days 2, 5, and 7 postburn compared to saline (P < 0.05). Hepatocyte proliferation in rhGH-treated rats increased on Day 5 after burn (P < 0.05). CONCLUSION: Data indicate that rhGH alters the hepatic acute phase response by decreasing type I acute phase proteins and modulating IL-1-like cytokine expression. These changes are associated with increased hepatocyte mitosis and serum and total liver protein concentrations.     

烧伤早期营养对大鼠降钙素基因相关肽影响的实验研究

目的观察烧伤早期不同营养途径对肠道的复苏效应,及其与降钙素基因相关肽(cal-citoningene-relatedpeptide,CGRP)的关系方法30%TBSAⅢ度烧伤Wistar大鼠,随机分为灌喂组(EF组,30只)及早期静脉营养组(EPN组,30只).此外,6只大鼠不烧伤,作对照组(C组).伤后6、12、24、48、72h观察大鼠一般情况、肠黏膜血流量、血浆CGRP免疫活性物质浓度、CGRP染色阳性物质在肠道的变化.结果烧伤后大鼠肠黏膜血流量下降,EF组下降程度明显低于EPN组(P＜0.05～0.01);烧伤后血浆CGRP升高,EF组血浆CGRP在伤后72h明显低于EPN组(P＜0.01);肠道CGRP阳性染色物质在烧伤后明显减少(P＜0.05～0.01),EF组在伤后24、48h明显多于EPN组(P＜0.05);肠黏膜血流量下降和肠肌间丛CGRP下降呈正相关(r=0.72,P＜0.05).结论肠道营养在烧伤早期肠道的复苏效应方面较静脉营养优越,伤后肠道CGRP免疫活性物质减少,血浆CGRP免疫活性物质过度增高可能是烧伤后肠道血供减少的重要机制之一,早期肠道营养可能通过调节CGRP而发挥复苏作用.     

Elevated cytokine levels in peritoneal fluid from burned patients with intra-abdominal hypertension and abdominal compartment syndrome

BACKGROUND: Burn patients with intra-abdominal hypertension (IAH) and abdominal compartment syndrome (ACS) undergo vigorous resuscitation and accumulate peritoneal fluid (PF) that is a plasma ultra-filtrate. This study compared antithrombin (AT) and cytokine levels in burn patient plasma and peritoneal fluid (PF). METHODS: Twenty-nine patients were studied: 22 developed IAH and 9 progressed to ACS. Burn + inhalation injury was present in 22 patients; 5 had burn only and 2 had inhalation only. Sixteen patients died: of these, 9 survived less than 48 h due to the severity of their injuries. Flow cytometry utilized the Cytometric Bead Array kit for Human Th1/Th2 cytokines. AT levels were determined by the Accucolor method spectrophotometrically. RESULTS: All cytokine levels were significantly elevated in burn plasma and PF compared to normal plasma, p < 0.001. AT plasma levels were decreased compared to normal. AT and cytokines were present in peritoneal fluid of burn patients with IAH and ACS. Patients who died had decreased plasma levels of AT and increased IFN-gamma, IL-10, IL-6, IL-4, IL-2 peritoneal fluid levels compared to survivors. CONCLUSIONS: Peritoneal fluid may be a reservoir for cytokines during initial resuscitation and contributes to homeostatic perturbations in burn patients.     

抑制应激反应措施对严重烧伤大鼠早期创面侵袭性感染的影响

目的　观察严重烧伤大鼠早期创面遭受侵袭性感染后,抑制应激反应措施对大鼠生存率、脏器损害及其辅助性T淋巴细胞(Th)1 /Th2细胞因子格局的影响。　方法　建立30%TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,随机分为对照组(未用冬眠合剂)和冬眠合剂组,每组36只。两组大鼠背部痂下注射1×108 集落形成单位(CFU) /ml铜绿假单胞菌菌液0. 1ml,观察两组大鼠痂下组织细菌定量、注射细菌后96h的生存率、脏器损害情况及白细胞介素(IL)2、IL 4、IL 10、γ型干扰素(IFN γ)的mRNA表达水平。　结果　两组大鼠痂下注菌后5h每克组织细菌数量>1×105 个,两组比较,差异有统计学意义(P<0. 01).冬眠合剂组大鼠生存率(66. 7±2. 6)%,明显高于对照组( 33. 3±1. 7 )% (P<0.01).冬眠合剂组大鼠脏器炎性细胞浸润和病理损害程度较对照组轻。冬眠合剂组注射细菌后即时(0h)IL 2mRNA表达水平低于对照组(P<0. 01),但注射细菌后48、96h其表达增强,对照组表达减弱(P<0. 05);对照组IFN γmRNA的表达水平低于冬眠合剂组(P<0. 01);冬眠合剂组IL 4、IL 10mRNA表达水平低于对照组(P<0. 05或0. 01)。　结论　抑制大鼠严重烧伤后早期应激反应水平对创面细菌的侵袭有保护作用,这一保护作用可能与抑制应激反应水平的同时Th1 /Th2细胞因子格局发生改变有关。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路在严重烧伤大鼠枯否细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β产生中的作用

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在严重烧伤大鼠枯否细胞(KCs)促炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)产生中的作用。方法 健康成年的雄性SD大鼠32只,随机分为：假烫组;假烫 SB203580组;烧伤对照组;烧伤 SB203580组,每组8只。假烫或烧伤24h后分离出肝脏KCs,培养18h后加入50ng／ml的LPS进行刺激,18h后取上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定TNF-α和IL-1β的含量,并收集KCs,实时逆转录聚合酶链反应检测KCs内TNF-α和IL-1β mRNA表达的改变,蛋白印迹(Western blot)法检测KCs中p38MAPK和JNK活性的变化。结果 烧伤大鼠分离出的KCs培养上清液中TNF-α和IL-1β含量、KCs中TNF-α和IL-1β mRNA的表达均较假烫组的明显增强,同时KCs中p38 MAPK活性和JNK活性升高,SB203580能显著抑制大鼠KCs上清液中TNF-α和IL-1β含量、KCs中TNF-α和IL-1β mRNA的表达和p38MAPK活性的升高,对JNK活性无影响。结论p38MAPK信号转导通路介导了严重烧伤大鼠KCs促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的产生。