当归对高脂血清所致的内皮细胞中NO及ICAM-1表达改变的影响作用

目的 :检测高脂血清对培养的内皮细胞中一氧化氮(ＮＯ)及细胞间粘附分子 1(ＩＣＡＭ 1)表达改变的影响 ,并观察当归的作用。方法 :实验分三组 ,即 :对照组 ;高脂血清组 ;当归 高脂血清组。以培养人脐静脉内皮细胞为研究对象 ,用高脂血清损伤 ,扫描电镜观察内皮细胞形态结构的改变 ,免疫细胞化学方法观测内皮细胞表面ＩＣＡＭ 1的表达 ,用分光光度法对细胞培养液中ＮＯ的分泌量进行检测。结果 :高脂血清明显损伤内皮细胞的超微结构 ,细胞膜表面有孔隙 ,微绒毛僵直断裂 ,分布不规则。高脂血清使细胞表面ＩＣＡＭ 1的表达明显增高 ,细胞培养…     

当归抗高脂血清致内皮细胞损伤的保护作用

目的 :检测高脂血清对培养的内皮细胞中一氧化氮 (ＮＯ)及细胞间粘附分子 - 1 (ＩＣＡＭ - 1 )表达改变的影响 ,并观察当归的作用。方法 :实验分三组 ,即 :对照组 ;高脂血清组 ;当归 高脂血清组。以培养人脐静脉内皮细胞为研究对象 ,用高脂血清损伤 ,扫描电镜观察内皮细胞形态结构的改变 ,免疫细胞化学方法观测内皮细胞表面ＩＣＡＭ - 1的表达 ,用分光光度法对细胞培养液中ＮＯ的分泌量进行检测。结果 :高脂血清明显损伤内皮细胞的超微结构 ,细胞膜表面有孔隙 ,微绒毛僵直断裂 ,分布不规则。高脂血清使细胞表面ＩＣＡＭ - 1的表达明显增高 …     

043 当归及阿魏酸钠对内皮细胞中TGFβ1及bFGF表达的影响

目的: 检测高脂血清对内皮细胞中转化生长因子β1(TGFβ1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响, 并观察当归、阿魏酸钠的作用. 方法: 实验分四组, 即: 正常对照组; 高脂血清损伤组; 当归+高脂血清组; 阿魏酸钠+高脂血清组. 用培养人脐静脉内皮细胞(ECV304)为研究对象, 以高脂血清为损伤因子, 观察当归及阿魏酸钠的作用. 实验中用扫描电镜观察内皮细胞形态变化, 用免疫细胞化学方法观测培养细胞中TGFβ1及bFGF的表达改变. 结果: 高脂血清能明显使内皮细胞的超微结构受损. 细胞表面干裂, 有孔隙; 微绒毛分布不规则, 减少甚至消失. 细胞中TGFβ1的表达明显增高, 而bFGF的表达降低. 结论: 当归及阿魏酸钠对内皮细胞TGFβ1、 bFGF表达的影响可能为其抗动脉粥样硬化的机理之一; 阿魏酸钠可能为当归的有效成分之一.     

当归及阿魏酸钠对内皮细胞中TGFβ_1及bFGF表达的影响

目的 :检测高脂血清对内皮细胞中转化生长因子 β1(ＴＧＦβ1)、碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)表达的影响 ,并观察当归、阿魏酸钠的作用。方法 :实验分四组 ,即 :正常对照组 ;高脂血清损伤组 ;当归 高脂血清组 ;阿魏酸钠 高脂血清组。用培养人脐静脉内皮细胞 (ＥＣＶ3 0 4 )为研究对象 ,以高脂血清为损伤因子 ,观察当归及阿魏酸钠的作用。实验中用扫描电镜观察内皮细胞形态变化 ,用免疫细胞化学方法观测培养细胞中ＴＧＦβ1及ｂＦＧＦ的表达改变。结果 :高脂血清能明显使内皮细胞的超微结构受损。细胞表面干裂 ,有孔隙 ;微绒毛分布不…     

当归及阿魏酸钠对内皮细胞中细胞因子表达改变的影响

目的 :检测高脂血清对内皮细胞中转化生长因子 β1 (ＴＧＦβ1 )、碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)表达的影响 ,并观察当归、阿魏酸钠的作用。方法 :实验分四组 ,即 :正常对照组 ;高脂血清损伤组 ;当归 高脂血清组 ;阿魏酸钠 高脂血清组。用培养人脐静脉内皮细胞 (ＥＣＶ30 4 )为研究对象 ,以高脂血清为损伤因子 ,观察当归及阿魏酸钠的作用。实验中用扫描电镜观察内皮细胞形态变化 ,用免疫细胞化学方法观测培养细胞中ＴＧＦβ1 及ｂＦＧＦ的表达改变。结果 :高脂血清能明显使内皮细胞的超微结构受损 ,细胞表面干裂 ,有孔隙 ;微绒毛分布…     

复合酶Ⅱ抗高脂血清致血管内皮细胞损伤的保护效应

目的和方法:以高脂血清作用于培养的血管内皮细胞,通过检测内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达及培养液中NO₂^-的含量,研究复合酶Ⅱ抗高脂血清所致细胞损伤的保护效应。结果:高脂血清可使培养的血管内皮细胞表面粘附分子ICAM-1的表达显著增加(由0.228±0.025增加到0.328±0.030,P＜0.01),细胞合成和释放NO^- ₂ 的含量明显减少(由0.433±0.144减少到0.149±0.034,P＜0.01);而复合酶Ⅱ则能显著降低ICAM-1的表达(0.229±0.065),增加内皮细胞NO₂^-的合成与释放(0.386±0.036),与高脂血清损伤组相比,差异有高度显著性(P＜0.01)。结论:复合酶Ⅱ同时具有SOD和CAT活性结构和作用特性,能更有效地清除氧自由基,对高脂血清造成的血管内皮细胞损伤具有明显的抗损伤效应。     

脱氢表雄酮对抗LDL和OX-LDL所致ECV304细胞的损伤

目的：观察脱氢表雄酮（DHEA）对抗LDL及OX-LDL所致ECV304细胞的损伤作用，探讨DHEA可能的抗AS作用机制。 方法: 采用培养的ECV304细胞, 应用硝酸还原酶、放免及SABC免疫组化等方法观察经DHEA预处理及与LDL或OX-LDL混合作用后的细胞培养液中NO2-/NO3-、ET-1水平及细胞表面ICAM-1的表达。 结果: LDL可明显地减少培养液中NO2-/NO3-的含量，增加细胞ICAM-1的表达，但不影响ET-1的分泌；OX-LDL可明显减少培养液中NO2-/NO3-的含量、升高ET-1的水平，同时上调细胞表面ICAM-1的表达； 在预处理条件下，DHEA可升高LDL作用后细胞培养液中NO2-/NO3-的含量、下调ICAM-1的表达，但在混合培养条件下无此作用；在预处理及混合培养条件下，DHEA均可升高OX-LDL作用后细胞培养液中NO2-/NO3-的含量、减少细胞ET-1分泌以及下调ICAM-1的表达。 结论: LDL和OX-LDL对ECV304细胞具有明显的毒性作用，两者作用机制不尽相同。DHEA可能通过对ECV304细胞内部结构和功能的调节或通过其对OX-LDL分子的直接作用而发挥保护作用。     

兔高脂血症与血管内皮功能的关系

目的 观察一氧化氮(NO)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在高脂血症及动脉粥样硬化(AS)动物模型中的表达,探讨高脂血症及AS与血管内皮功能和ICAM-1的关系.方法 采用高脂饮食饲养家兔建立高脂血症和AS动物模型,正常饮食组为对照组;两组动物于0、8和16周分别取静脉血,检测血清中胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、NO和ICAM-1水平,并观察TC和LDL与NO和ICAM-1的相关性;16周后处死动物,免疫组化法和RT-PCR检测ICAM-1在主动脉粥样硬化斑块中的表达.结果 饲养8周时,高脂饮食组血清TC和LDL明显增加(P＜0.01),NO和ICAM-1无明显变化;饲养16周时,NO水平明显下降(P＜0.01),ICAM-1水平明显增高(P＜0.01).TC和LDL与NO呈负相关,与ICAM-1呈正相关.结论 高脂血症及AS造成血管内皮功能失调,导致NO和ICAM-1的异常表达;NO和ICAM-1参与了AS的形成.     

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞ICAM-1及NO表达的影响

目的研究氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density liprotein,ox-LDL)对脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)及一氧化氮(nitric oxide,NO)表达的影响.方法采用细胞ELISA法测定细胞表面ICAM-l的含量,硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中NO,免疫组化法结合图象分析测定细胞一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)含量.结果 ox-LDL可明显增加脐静脉内皮细胞ICAM-l的表达,并减少NO及NOS的表达,且有浓度依赖性,但无明显的时间依赖性.结论 ox-LDL可损害内皮细胞的功能,减少内皮细胞NO、NOS的表达并增加内皮细胞ICAM-1的表达.这可能为ox-LDL促进动脉粥样硬化的机制之一.     

039 当归对高剪切应力致血管内皮细胞ICAM-1分布异常的逆转作用

目的: 一定程度的剪切应力对于维持血管的正常结构和功能十分重要, 但过高的剪切应力会导致血管内皮细胞ICAM-1的分布和表达异常. 当归是传统的活血化瘀中药, 对于某些血流动力学异常的心脑血管疾病具有肯定的疗效. 本实验研究当归对高剪切应力作用下血管内皮细胞ICAM-1异常分布的逆转作用. 方法: 将ECV304细胞常规培养在长方形的玻片上, 然后分别置于剪切应力为2 Pa的流场中(当归组: 在流场液体中加入当归提取液20 mg/ml), 温度37 ℃. 4 h后取出玻片, 先用鼠抗人ICAM-1单克隆抗体(1∶20)孵育20 min, PBS冲洗, 再用标记有AlexaR荧光的羊抗鼠IgG(1∶50)作为二抗标记, 1%多聚甲醛和0.5% Triton-X100渗透和固定后, 在Olympus IX70荧光显微镜下观察ICAM-1的分布状况. 结果: 高剪切应力会导致血管内皮细胞表面ICAM-1沿细胞表面呈散在分布, 而当归作用后可以使ICAM-1的分布和表达趋于正常. 结论: 当归可以有效地逆转这种异常分布, 具有显著的保护效应.     

脱氢表雄酮抑制高脂诱导的兔主动脉及人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子1的表达

目的:探讨脱氢表雄酮对高脂诱导的兔主动脉及人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,以及全反式维甲酸(ATRA)在这一过程中的作用。方法:细胞实验:将培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分为正常对照组、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)组、ox-LDL+DHEA组、ox-LDL+DHEA+ATRA组和DHEA组。各组细胞均加入相应药物作用24 h,采用RT-PCR和细胞酶联免疫吸附法检测各组细胞ICAM-1 m RNA及蛋白的表达情况。动物实验:将大耳白兔分为正常对照组、高脂组、高脂+DHEA组、高脂+DHEA+ATRA组和DHEA组。各组白兔均用相应饲料喂饲10周后处死动物,采用RT-PCR和免疫组织化学等方法检测各组白兔主动脉ICAM-1的m RNA及蛋白的表达情况。结果:细胞实验:ox-LDL组ICAM-1的表达明显高于正常对照组(P0.05);与ox-LDL组相比,ox-LDL+DHEA组ICAM-1的表达明显降低(P0.05);DHEA组与正常对照组ICAM-1的表达无显著差异(P0.05);ox-LDL+DHEA+ATRA组与ox-LDL+DHEA组ICAM-1的表达无显著差异(P0.05)。动物实验:高脂组主动脉ICAM-1的表达明显高于正常对照组(P0.05);与高脂组相比,高脂+DHEA组ICAM-1的表达明显降低(P0.05);DHEA组与正常对照组ICAM-1的表达无显著差异(P0.05);高脂+DHEA+ATRA组与高脂+DHEA组ICAM-1的表达无显著差异(P0.05)。结论:DHEA能够抑制高脂诱导的兔主动脉及人脐静脉内皮细胞ICAM-1的表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一,而全反式维甲酸对DHEA的这一作用并无明显增强作用。     

氧化修饰低密度脂蛋白对内皮细胞功能的影响

目的 观察氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）对内皮细胞NO／ET-1、t-PA／PAI-1合成、细胞表面细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响。方法 采用培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs），在分另0加入不同浓度ox-LDL（50、100、150、200mg／L）孵育24h后，观察培养液中NO、ET-1、t-PA、PAI-1水平及细胞表面ICAM-1的表达。结果 ox-LDL可显著抑制NO、t-PA的合成。ox-LDL还可明显增加ET-1、PAI-1的分泌及诱导细胞表面ICAM-1的表达。结论 ox-LDL对内皮细胞具有明显的细胞毒作用，它对NO／ET-1、t-PA／PAI-．1及ICAM-1表达的影响可能是其致动脉粥样硬化发生的重要机制之一。     

抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下血管内皮细胞的保护作用

目的:研究抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下血管内皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),设置PBS对照组、5.5 mmol/L葡萄糖组、33.3 mmol/L葡萄糖组、0.1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组、1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组和10μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组。使用MTT法检测各组细胞活力;同时检测各组细胞培养上清中丙二醛(MDA)的含量以及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的活性;流式细胞术检测各组细胞中活性氧(ROS)含量变化;ELISA检测各组细胞培养液中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的浓度变化;Western blot法检测各组细胞中核因子κB(NF-κB)蛋白的表达。结果:与PBS对照组相比,33.3 mmol/L葡萄糖能够显著降低HUVECs的细胞活力,增加细胞中ROS的含量,增加细胞培养上清中LDH活性和MDA含量,降低SOD和GSH的活性,同时降低NO分泌,诱导ET-1、ICAM-1分泌及细胞中NF-κB蛋白的表达(P0.05)。不同浓度Klotho蛋白和33.3 mmol/L高糖同时作用HUVECs时,细胞活力逐渐上升,ROS和MDA含量以及LDH活性逐渐下降,SOD和GSH活性则逐渐上升,同时NO分泌增加,ET-1、ICAM-1分泌及NF-κB蛋白表达显著下降(P0.05)。结论:抗衰老Klotho蛋白能够提升高糖作用下HUVECs的细胞活力,减少高糖诱导的ROS生成及氧化损伤,恢复HUVECs的正常分泌功能,并通过减少NF-κB蛋白表达发挥抗损伤作用。     

1-磷酸鞘氨醇在高糖诱导血管内皮细胞功能损伤中的作用

 目的: 探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)在高糖诱导血管内皮细胞功能损伤中的作用及其机制。方法: 在高糖培养的人主动脉内皮细胞模型中,分别或同时给予S1P、鞘氨醇激酶1抑制剂和Akt抑制剂处理后,观察一氧化氮(NO)、粒细胞-内皮细胞黏附率、细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达、内皮细胞迁移以及Akt/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号途径的改变。结果: S1P明显降低高糖诱导的内皮细胞培养上清液中NO含量,促进粒细胞与内皮细胞黏附,显著增加内皮细胞ICAM-1蛋白表达,抑制内皮细胞迁移和Akt/eNOS信号通路激活。鞘氨醇激酶1抑制剂减少S1P生成后上述内皮细胞功能指标得以明显改善,Akt/eNOS信号通路恢复激活。结论: S1P促进高糖培养的内皮细胞功能障碍的形成,可能与其抑制Akt/eNOS信号通路激活有关。抑制S1P生成有望成为减轻内皮细胞功能损伤的治疗策略之一。     

当归对高糖所致内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究高糖培养液对体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304的影响及当归注射液对高糖培养环境中内皮细胞功能的保护作用。方法:在RPMI1640培养液中培养内皮细胞后,分成对照组、高糖培养组、高糖+当归组、当归组,培养48h后观察各组内皮细胞形态、检测培养液中一氧化氮(NO)浓度和ECV304细胞增殖活性。结果:高糖培养ECV304细胞有肿胀现象,且数量减少;当归干预后,ECV304细胞形态与对照组相似,且数量增多。高糖培养的ECV304细胞增殖活性和NO浓度较高糖+当归组显著减少(P<0.05),而当归组与对照组无统计学差异(P>0.05)。结论:当归注射液可以预防高糖培养对内皮细胞增殖及分泌NO功能的损害,从而对糖尿病患者的血管损害可能起到一定的保护作用。     

补肾宁心方对人单核-血管内皮细胞粘附的影响

目的:探讨补肾宁心方对人单核-血管内皮细胞粘附的影响及机理。方法:以培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入氧化的低密度脂蛋白(ox-LDL)或在试验体系中加入灌服补肾宁心方的兔血清,以孟加拉玫瑰红活细胞染色法测定人单核细胞系U937与HUVECs的粘附,并用流式细胞仪检测内皮细胞表面粘附分子细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)以及E-选择素的表达。结果:ox-LDL显著增强单核U937细胞与内皮细胞之间的相互粘附,如在试验体系中加入灌服补肾宁心方的动物血清,则粘附率明显降低(P＜0.01)。流式细胞仪分析结果显示ox-LDL能明显促进内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1以及E-选择素的表达,补肾宁心方中药灌服血清可显著下调内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1以及E-选择素的表达(P＜0.01)。结论:补肾宁心方含药血清可能通过下调内皮细胞表面粘附分子的表达抑制单核-血管内皮细胞粘附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。     

通心络超微粉对高脂饮食兔主动脉内皮保护机制的实验研究

目的： 探讨通心络超微粉对高脂饮食兔主动脉内皮损伤的干预作用及其可能机制。方法： 健康雄性新西兰白兔32只随机分为空白对照组、模型组、阿托伐他汀组、通心络组4组。空白对照组饲以普通饲料；模型组饲以高脂饲料；阿托伐他汀组饲以高脂饲料同时阿托伐他汀3 mg·kg^-1·d^-1灌胃；通心络组饲以高脂饲料同时通心络超微粉0.31 g·kg^-1·d^-1灌胃，连续给药，于6周末酶法检测各组血脂水平，比色法检测各组血清NO、MDA水平及SOD活性，免疫组织化学染色法检测主动脉内皮细胞NF-κB核转位情况及ICAM-1 蛋白表达，RT-PCR法检测ICAM-1 mRNA表达。结果：模型组血清TC、TG、LDL-C、HDL-C及MDA水平均显著高于空白对照组(P<0.01)，NO水平及SOD活性低于空白组(P<0.01)；主动脉内皮细胞NF-κB核转位、ICAM-1基因及蛋白表达明显多于空白组（P<0.01）。两药物干预组TC、TG、LDL-C及MDA水平均显著低于模型组(P<0.01)，NO水平和SOD活性则高于模型组（P<0.05, P<0.01），主动脉内皮细胞NF-κB核转位、ICAM-1基因及蛋白表达亦明显少于模型组（P<0.05，P<0.01），通心络组HDL-C显著高于模型组（P<0.05），且通心络组对上述指标的作用均优于阿托伐他汀组（P<0.05，P<0.01）。结论： ① 高脂血症可使血管内皮细胞受损，其机制可能与氧化应激、NF-κB的激活及ICAM-1基因与蛋白的表达异常有关。② 通心络超微粉可在一定程度上减轻上述病理损伤，可能与其抗氧化、抑制NF-κB核转位进而降低ICAM-1基因及蛋白表达有关。     

丹皮酚通过抑制NF-κB信号通路下调高脂血清诱导的人脐静脉内皮细胞黏附分子的表达

目的：观察丹皮酚对高脂损伤人脐静脉内皮细胞（HUVECs）核因子-κB（NF-κB）的活化及细胞黏附分子表达的影响,探讨丹皮酚抗动脉粥样硬化的分子机制。方法：以培养HUVECs作为靶细胞,用高脂血清制备损伤模型。采用MTT法检测细胞活性;RT-PCR法检测NF-κB p65 mRNA的表达;Western blotting法检测κB 抑制蛋白α（IκB-α）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和E-选择素的蛋白表达。结果：丹皮酚能使高脂损伤的HUVECs存活率增加,形态趋于正常;降低NF-κB p65 mRNA的表达,提高IκB-α的表达;下调ICAM-1和E-选择素的蛋白表达。结论：丹皮酚通过抑制血管内皮细胞NF-κB/IκB通路,下调ICAM-1和E-选择素的表达,减少炎症反应,这可能是丹皮酚抗动脉粥样硬化的机制之一。     

高脂饮食对大鼠胸主动脉瘤形成过程中细胞黏附分子表达的影响

目的 探讨高脂饮食对胸主动脉瘤形成过程中细胞黏附分子包括血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响.方法 将30只成年雄性Wistar大鼠随机分为3组,即对照组、手术组和高脂饮食组,采用氯化钙(CaCl2)诱导法制备胸主动脉瘤模型,于术后4周取外敷CaCl2段胸主动脉.采用地衣红染色和HE染色观察胸主动脉形态学改变;免疫组织化学技术检测CD45、VCAM-1和ICAM-1的表达.结果 高脂饮食组动脉管径较手术组扩张明显,动脉管壁破坏更广泛,伴有更多的炎性细胞浸润;VCAM-1、ICAM-1较手术组表达升高.结论 高脂饮食可促进胸主动脉瘤管壁VCAM-1和ICAM-1的表达.     

肺炎衣原体对血管内皮细胞的感染及其对ICAM-1表达的影响

目的:观察肺炎衣原体对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的感染及其对细胞分泌和表达细胞间粘附分子1(ICAM-1)的影响,探讨C.pneumoniae感染在动脉粥样硬化形成中的作用及其可能机制。方法:用人喉表皮癌(HEP-2)细胞培养C.pneumoniae,以C.pneumoniae感染HUVE细胞,经透射电镜及PCR检测有无感染。用流式细胞仪检测感染前后HUVE细胞表面ICAM-1蛋白的表达的变化,用荧光定量RT-PCR检测ICAM-1mRNA的变化。结果:C.pneumoniae能感染体外培养的HUVE细胞;感染后12h,细胞表面ICAM-1蛋白的表达即增加,其峰值约在感染后24h;荧光定量RT-PCR结果显示其增加在mRNA水平。结论:C.pneumoniae能感染体外培养的人脐静脉内皮细胞并增加ICAM-1的表达,提示C.pneumoniae感染可能是动脉粥样硬化的始动因子之一,其致动脉粥样硬化机制可能与感染后血管内皮细胞粘附分子表达的增加有关。