2种方法制备丹参酮ⅡA-PLGA纳米粒的比较

目的：考察并优化丹参酮Ⅱ_A-PLGA纳米粒的制备工艺,比较2种制备方法对纳米粒成型及其质量的影响。方法：采用纳米沉淀法和乳化溶剂蒸发法制备纳米粒,并对制得的纳米粒进行质量评价及比较,包括粒径、形态、载药量、包封率、药物利用率、晶型及体外释放行为。结果：沉淀法和乳化溶剂蒸发法制备的纳米粒平均粒径分别为225 nm和183 nm,包封率分别为95.49%和87.99%、载药量分别为2.03%和0.16%、药物利用率分别为38.42%和17.59%。结论：沉淀法制备丹参酮Ⅱ_A-PLGA纳米粒的效果优于乳化溶剂蒸发法。     

丹参酮Ⅱ_A壳聚糖纳米粒的制备及抗肿瘤活性研究

目的采用离子胶凝法制备丹参酮ⅡA壳聚糖纳米粒,考察其对肿瘤细胞的靶向性和抗肿瘤活性。方法以壳聚糖为材料,采用离子胶凝法制备丹参酮ⅡA壳聚糖纳米粒,考察其形态、大小及分散度,测定纳米粒药物包封率及对纳米粒进行体外释放研究。以人肝癌SMMC-7721细胞为肿瘤细胞模型,通过MTT法考察纳米粒的细胞毒性,利用荧光显微镜考察纳米粒的细胞摄取情况。结果通过实验得到的纳米粒球形度好,分散均匀,平均水合粒径为(100±11)nm,多分散指数为0.09,电位为(12.3±0.56)m V。药物包封率为(82.1±5.1)%,丹参酮ⅡA壳聚糖靶向纳米粒体外释放缓慢,48 h累计释放率达到90%以上。空白纳米粒在72 h内几乎不产生细胞毒性,丹参酮ⅡA壳聚糖纳米粒相比于游离药物在72 h内显示出明显的细胞毒性。结论相比于游离药物,丹参酮ⅡA壳聚糖靶向纳米粒显示出明显的药物缓释特征,通过药物纳米化,大大提高了药物对肿瘤细胞的摄取,增加了药物对细胞的敏感性,提高了治疗效果,具有广泛的应用前景。     

CD123单抗修饰的载丹参酮Ⅱ_A免疫脂质体的制备及其体外评价

研制CD123单抗修饰的载丹参酮Ⅱ_A免疫脂质体(CD123-TanⅡ_A-ILP),以期实现对白血病细胞的主动靶向给药。采用正交试验法优化脂质体处方,薄膜分散-探头超声法制备载丹参酮Ⅱ_A长循环脂质体(TanⅡ_A-LP),以后插入法得到CD123-TanⅡ_A-ILP。流式细胞术检测NB4细胞对脂质体的摄取率,改良MTT法检测CD123-TanⅡ_A-ILP对NB4细胞的增殖抑制作用。研究结果表明,NB4细胞对CD123单抗修饰的免疫脂质体的摄取显著高于对游离药物及其载药脂质体的摄取;TanⅡ_A,TanⅡ_A-LP和CD123-TanⅡ_A-ILP与NB4细胞共培养48 h,其IC_(50)分别为20.87,11.71,7.17μmol·L~(-1)。CD123-ILP有望为AML的治疗提供新的靶向给药策略。     

响应面法优化及制备丹参酮Ⅱ_A白蛋白纳米粒

目的采用响应面法优化丹参酮ⅡA白蛋白纳米粒的制备工艺。方法以牛血清白蛋白(BSA)为材料,采用去溶剂化法制备丹参酮ⅡA白蛋白纳米粒。以包封率为指标,采用界面响应面法优选制备工艺,对纳米粒进行体外释放研究。结果最佳工艺条件为丹参酮ⅡA∶白蛋白(m/m)为0.09,乙醇与水比例为0.53,乙醇滴速为1.27mL/min。此工艺所制得丹参酮ⅡA白蛋白纳米粒的平均包封率为84.35%,模型预测值和实验观察值都比较接近,模型具有良好的预测性。丹参酮ⅡA白蛋白纳米粒具有缓释特性,体外释放符合一级释放特征。结论采用响应面法优化得到的条件准确可靠,具有实用价值。     

丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体的处方优化及其体外透皮研究

为研制丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体(Tan Ⅱ_A-NLC),并进行体外透皮研究。该文采用高压均质技术制备Tan Ⅱ_ANLC,运用Box-Behnken设计-效应面法优化处方,并对其进行表征。采用Franze扩散池法评价Tan Ⅱ_A-NLC体外透皮性能。结果显示,以最优处方:脂药比为88、固液脂质比为2、稳定剂用量为1%,制得的Tan Ⅱ_A-NLC粒径为(182±14)nm,多分散指数(PDI)为0.190 6±0.024 5,Zeta电位(-27.8±5.4)m V,包封率(EE)为86.44%±9.26%,载药量(DL)为0.98%±0.18%;体外透皮吸收实验结果显示Tan Ⅱ_A-NLC的24 h药物累积透皮量低于溶液,但其在表皮中的滞留量是溶液的3.18倍。TanⅡ_A-NLC可有效提高Tan Ⅱ_A在表皮层的滞留量,具有广阔的应用前景。     

基于网络药理学和生物信息学的丹参酮Ⅱ_A治疗冠心病的分子生物学机制分析

目的基于网络药理学和生物信息学方法分析丹参酮Ⅱ_A治疗冠心病(CHD)的分子生物学机制。方法利用Pharm Mapper数据库筛选出丹参酮Ⅱ_A的作用靶点,利用OMIM、GeneCards、CTD数据库筛选CHD疾病作用相关靶点。利用STRING数据库进行蛋白互作网络分析,利用Cytoscape构建蛋白相互作用网络,利用ClueGO插件进行GO分析和KEGG信号通路富集分析,利用Systemsdock数据库进行系统分子对接,利用i GEMDOCK软件进行分子对接来预测丹参酮Ⅱ_A对CHD作用靶点的结合性。结果筛选出丹参酮Ⅱ_A的潜在靶点173个;与CHD相关的靶点42个;信号通路49条。结论丹参酮Ⅱ_A治疗CHD具有多靶点、多通路作用的特点;其可能作用机制是通过调控CHD发展过程中的血压调节、细胞代谢、血管新生、内分泌、活性氧代谢等过程对CHD进行干预。     

丹参酮Ⅱ_A/β-环糊精包合物制备工艺优化及体外溶出性能研究

采用饱和水溶液法制备丹参酮Ⅱ_A(Tan-Ⅱ_A)与β-环糊精(β-CD)包合物,在单因素试验的基础上,以β-环糊精与丹参酮Ⅱ_A的配比、包合温度和包合时间为自变量,包合物的收率、包封率和总评"归一值"为响应值,使用Box-Benhnken设计效应面法优化丹参酮Ⅱ_A的包合工艺;采用红外光谱法(IR)、核磁共振法(NMR)对包合物进行鉴定。结果表明,丹参酮Ⅱ_A与β-环糊精包合物的最优制备工艺为:丹参酮Ⅱ_A与β-环糊精的配比为1∶7,包合温度为48℃,包合时间为3 h;采用优选的工艺条件制备丹参酮Ⅱ_A与β-环糊精的包封率为84.75%。丹参酮Ⅱ_A与β-环糊精包合物可以明显提高丹参酮Ⅱ_A溶出度。     

芹菜素与丹参酮ⅡA的协同抗肿瘤作用及机制

目的 研究芹菜素（Api）和丹参酮Ⅱ_A（Tan Ⅱ_A）联用对多种肿瘤细胞的协同抗肿瘤作用，并揭示其发生协同作用的机制。方法 以人胃癌BGC823细胞、人乳腺癌MCF7细胞、人肝癌SMMC7721细胞为研究对象，采用MTT法检测Api和Tan Ⅱ_A联用对细胞的增殖抑制作用；采用AV-PI双染法、PI染色法检测药物对BGC823细胞凋亡、细胞周期的影响；免疫印迹法检测BGC823细胞凋亡相关蛋白p53、BAX/BCL-2和周期蛋白B1、D1的表达；圆二色和DNA熔点法检测药物与DNA结合情况；S180荷瘤鼠模型检测药物的抑瘤效果。结果 Api与Tan Ⅱ_A联用对BGC823等肿瘤细胞的增殖有协同抑制作用，联用指数CI在0.28左右。两药联用显著增加了细胞凋亡（P<0.01），上调了胞内BAX/BCL-2比值（P<0.01）；周期蛋白水平发生变化，细胞周期阻滞在S期得到强化。两药与DNA以两种不同方式结合，DNA热变性曲线显著改变。体内抑瘤实验证明与单药相比，两药联用荷瘤鼠肿瘤体积和肿瘤质量均显著降低（P<0.01），抑瘤效果与环磷酰胺相当，但不良反应较小。结论 Api与Tan Ⅱ_A联用具有协同抗肿瘤作用；药物与DNA以不同的方式结合，加剧了细胞周期的阻滞，是二者产生协同作用的核心机制。     

丹参酮ⅡA固体脂质纳米粒的制备及质量评价

[目的]以山嵛酸甘油酯和单硬脂酸甘油酯为载体材料制备丹参酮IIA固体脂质纳米粒(TA-SLN)并评价其质量。[方法]采用乳化固化法制备TA-SLN,以包封率为指标,通过单因素考察法对处方进行优化,激光粒径测定仪测定其粒径、电位,并用差示扫描量热仪(DSC)表征其性质。[结果]制备的TA-SLN平均粒径为(110±4)nm,Zeta电位为-34.4 mV,包封率为79.08%。DSC表明其理化性质稳定可靠。[结论]采用乳化固化法制备的TA-SLN粒径和包封率较适宜,理化性质稳定,为开发其新制剂奠定了实验基础。     

丹参酮ⅡA静脉乳剂的制备与质量评价

目的：研制丹参酮Ⅱ_A静脉乳剂，并对其进行质量评价。方法：以大豆磷脂与帕洛沙姆188为混合乳化剂，油酸为助乳化剂，甘油为等渗调节剂，高速剪切法制备初乳，再采用高压匀质机对初乳进行匀化，制成丹参酮Ⅱ_A静脉乳剂。结果：自制丹参酮Ⅱ_A静脉乳剂的平均粒径为211 nm，Zeta电位为-32.1 mV，载药量为1 mg·mL^-1；25 ℃条件下避光放置1年，其粒径、Zeta电位、pH、含量及外观性状等指标均未见明显变化。结论：研制的丹参酮Ⅱ_A静脉乳剂理化性质稳定。     

丹参酮Ⅱ_A聚乳酸载药纳米粒体内药物分布初步研究

目的:建立测定兔体内丹参酮ⅡA的HPLC方法,并考察丹参酮ⅡA聚乳酸载药纳米粒(TS-PLA-NP)兔体内药代动力学特征。方法:家兔耳缘静脉注射TS-PLA-NP和丹参酮ⅡA溶液,在设定时间点从颈静脉取血制样,以吉非罗齐为内标,采用HPLC-MS法测定丹参酮ⅡA在兔体内的血药浓度及药物组织分布,药动学参数采用DAS2.0进行统计。结果:吉非罗齐和丹参酮ⅡA在该条件下的保留时间分别为10.5、14.5 min。TS-PLA-NP在家兔体内的t1/2由丹参酮ⅡA的2.573 h延长到4.117 h;MRT0～∞由2.585 h延长到6.033 h,峰浓度由0.21 mg/L减少到0.134 mg/L。静脉给药后2 h,丹参酮ⅡA纳米药物组肝脏和肿瘤中的浓度均高于丹参酮ⅡA组;丹参酮ⅡA以纳米的剂型给药后2 h,肝脏中的药物浓度提高了5倍以上,肿瘤中的药物浓度提高了近9倍;心、肾、脾、肺等组织中药物浓度均明显降低;血液中浓度下降了近10倍。结论:丹参酮ⅡA聚乳酸载药纳米粒在兔体内具有良好的缓释和肝靶向特征。     

丹参酮Ⅱ_A对缺血性心脏病中细胞凋亡与自噬的调控机制研究进展

缺血性心脏病是全球发病率和致死率最高的疾病,严重地威胁着人类健康。丹参酮Ⅱ_A是从丹参的根部提取的主要亲脂性成分,研究表明,丹参酮Ⅱ_A具有多种抗心血管疾病的作用,其作用机制与调节心肌细胞的凋亡和自噬有关。论述了缺血性心脏病中细胞凋亡和自噬相关的信号通路及其相互关系,总结了近年来丹参酮Ⅱ_A通过调控细胞凋亡和自噬治疗缺血性心脏病的研究进展,探讨了其通过调控细胞凋亡和自噬从而产生心血管保护作用的机制,为深入研究缺血性心脏病以及药物的开发利用提供依据。     

乳结消散片中丹参酮ⅡA的含量测定

 目的建立高效液相色谱法测定丹参酮Ⅱ_A含量的方法。方法C₁₈柱以甲醇-水(70:30)作为流动相,检测波长269nm。结果丹参酮ⅡA浓度在0～33ng·Ml^-1范围内,峰面积与进样量线形关系良好,回归方程Y=9725X-2584,r=0.9997。平均回收率为98.29%,RSD=1.86%。结论本法重现性好,准确快速,可作为质量控制指标。     

丹参酮Ⅱ_A对乳腺癌细胞阿霉素化疗敏感性的影响及相关机制研究

目的探讨丹参酮IIA对乳腺癌细胞阿霉素化疗敏感性的影响及相关机制。方法分别用丹参酮IIA、阿霉素、阿霉素+丹参酮IIA干预人乳腺癌MCF-7和阿霉素耐药的MCF-7(MCF-7/dox)细胞,采用MTS法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,划痕实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测腺瘤样结肠息肉易感蛋白(APC)、β-catenin、钙黏附蛋白E(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白的表达。结果丹参酮IIA能明显增强阿霉素对MCF-7和MCF-7/dox细胞的增殖抑制、迁移抑制和诱导凋亡作用;与阿霉素敏感的MCF-7细胞比较,MCF-7/dox细胞中APC蛋白表达水平显著降低(P0.05),β-catenin蛋白表达水平显著提高(P0.05);与单用阿霉素比较,阿霉素与丹参酮IIA联合使用能明显上调MCF-7及MCF-7/dox细胞内APC及E-cadherin表达水平(P0.05),下调β-catenin、MMP-2及MMP-9蛋白表达水平(P0.05)。结论 APC/β-catenin信号通路参与了乳腺癌细胞阿霉素耐药的发生;丹参酮IIA能够通过调控APC/β-catenin信号通路增强乳腺癌细胞对阿霉素化疗的敏感性。     

2种方法制备丹参酮ⅡA-PLGA纳米粒的比较

目的:考察并优化丹参酮ⅡA-PLGA纳米粒的制备工艺,比较2种制备方法对纳米粒成型及其质量的影响.方法:采用纳米沉淀法和乳化溶剂蒸发法制备纳米粒,并对制得的纳米粒进行质量评价及比较,包括粒径、形态、载药量、包封率、药物利用率、晶型及体外释放行为.结果:沉淀法和乳化溶剂蒸发法制备的纳米粒平均粒径分别为225 nm和183 nm,包封率分别为95.49%和87.99%、载药量分别为2.03%和0.16%、药物利用率分别为38.42%和17.59%.结论:沉淀法制备丹参酮ⅡA-PLGA纳米粒的效果优于乳化溶剂蒸发法.     

丹参酮ⅡA诱导白血病细胞凋亡过程中端粒酶活性的改变

目的观察丹参酮Ⅱ_A(TanⅡ_A)对HL60,K562细胞端粒酶活性的抑制作用和对凋亡相关基因的影响,探讨丹参酮Ⅱ_A对造血细胞的作用机理。方法以HL60,K562为靶细胞,应用细胞培养技术,流式细胞术,透射电镜观察TanⅡ_A对HL60,K562细胞的作用,利用PCRTRAP方法检测TanⅡ_A处理前后HL60,K562细胞端粒酶活性的改变。结果经05μg·mL^-1TanⅡ_A作用6d后,HL60,K562细胞生长明显受到抑制,生长抑制率分别为756%和563%。经丹参酮诱导后,HL60,K562细胞发生凋亡,出现亚二倍体峰;同时显著下调HL60及K562细胞的cmyc,bcl2基因表达,上调cfos基因表达。HL60,K562细胞在TanⅡ_A作用后,端粒酶活性受到抑制,端粒酶活性抑制率分别为308%,508%。结论TanⅡ_A可明显抑制HL60和K562细胞的增殖和细胞端粒酶活性,并诱导细胞凋亡。     

丹参酮ⅡA固体脂质纳米粒的制备及大鼠在体肠吸收研究

 目的制备丹参酮ⅡA固体脂质纳米粒(TA-SLN),并考察其性质及大鼠在体肠吸收特性。方法 以乳化蒸发法制备丹参酮ⅡA固体脂质纳米粒,透射电镜观察其形态,建立测定纳米粒和肠回流液中丹参酮ⅡA的HPLC。结果纳米粒平均粒径为119.7nm,Zeta电位为-31.6mV,载药量为3.8％,包封率为87.7％。肠吸收实验表明,随给药剂量的增加,TA-SLN吸收速率常数Ka呈下降趋势,吸收半衰期t_1/2延长,TA-SLN的大鼠小肠吸收优于丹参酮ⅡA溶液。结论TA-SLN能够促进丹参酮ⅡA在大鼠小肠的吸收,其转运机制可能为主动转运或促进扩散。     

丹参酮ⅡA的心血管药理作用研究进展

目前,心血管疾病如冠心病、心肌梗死是全世界死亡率较高的疾病之一.研究认为中药对防治心血管疾病具有良好的临床效果.作为活血祛瘀,安神宁心的传统中药,丹参常配伍于治疗心脑血管疾病例如冠心病、脑梗死的处方中.丹参酮Ⅱ_A是从丹参的根中提取的主要亲脂性成分,具有抗动脉粥样硬化、抗心室肥厚、抗氧化、抗心律失常等作用.该文将对丹参酮Ⅱ_A的心血管保护机制研究现状作一综述.     

SPG膜乳化法制备丹参酮ⅡA聚乳酸-羟基乙酸微球的工艺优化

目的：优选SPG膜乳化法制备丹参酮Ⅱ_A-聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）微球的工艺条件。方法：采用SPG膜乳化法制备丹参酮Ⅱ_A-PLGA微球。在单因素试验基础上,以载药量、包封率及多分散系数（PDI）的综合评分为因变量,通过响应面法考察PLGA质量浓度、流动相流速、聚乙烯醇（PVA）质量浓度及油水相体积比等自变量对处方工艺的影响。结果：最佳处方工艺为PLGA质量浓度44.29 g·L^-1,流动相流速825.68 r·min^-1,PVA质量浓度2.5 g·L^-1,油水相体积比1：7.86;制备的丹参酮Ⅱ_A-PLGA微球表面光滑圆整且粒径均一,平均粒径2.338 μm,PDI指数0.328,载药量1.20%,包封率89.57%,与预测值相对误差较小。结论：采用SPG膜乳化法制备微球的工艺简单、方便,可用于提高丹参酮Ⅱ_A的生物利用度。     

丹参素和丹参酮ⅡA对大鼠肠系膜微循环障碍的影响

目的:探讨丹参素和丹参酮ⅡA对肠系膜微循环障碍的影响。方法:将SD大鼠40只,随机分成5组,分别为正常组、模型组、阳性药酚妥拉明组(10 mg·kg-1),丹参素组(30 mg·kg-1)和丹参酮ⅡA组(30 mg·kg-1)。通过向肠系膜滴加去甲肾上腺素(NA)造成局部微循环障碍,一次性经舌下静脉注入药物(丹参素、丹参酮ⅡA和酚妥拉明或者生理盐水),10 min后向将近回盲部的20 cm的肠系膜区域滴加0.05 g·L-1的NA溶液100μL,观察滴加NA后1,3,5,10,20,30 min时的大鼠肠系膜微动脉管径,并记录肠系膜微动脉血液流态镜下血液流态、毛细血管开放率和血流恢复时间。结果:与正常组比较,模型组NA对肠系膜微动脉有明显的收缩作用,血液流态分数明显增加,毛细血管开放率明显降低,血流恢复时间明显升高,均具有明显统计学意义(P0.01);与模型组比较,丹参素和丹参酮ⅡA能在一定程度减轻NA对肠系膜微动脉的收缩作用,改善血液流态,提高肠系膜毛细血管网交点开放率,缩短微循环障碍的恢复时间(P0.05,P0.01)。结论:丹参素和丹参酮ⅡA能改善NA引起的大鼠肠系膜微循环障碍。