安息香提取物对损伤内皮细胞中乳酸脱氢酶、肿瘤坏死因子及白细胞介素-8活性的影响

目的：研究安息香提取物对损伤内皮细胞中炎性介质乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子（TNF—α）及白细胞介素-8（IL-8）活性的调节作用。探究安息香治疗动脉粥样硬化的作用机制。方法：应用补体蛋白纯品于体外在人脐静脉内皮细胞表面组装亚溶破剂量的C5b-9,建立内皮损伤模型,设立安息香提取物高、中、低剂量组,苯甲酸高、中、低剂量组,模型对照组及空白对照组,分别用不同浓度的安息香提取物及苯甲酸标准品处理细胞,应用紫外分光光度法及Elisa试剂盒测定细胞培养上清液中LDH、TNF—α及IL-8浓度。结果：安息香提取物高、中、低剂量组与模型对照组比较,LDHTLIL-8分泌水平差异均有统计学毒义（P〈0．01）;安息香提取物高剂量组中LDHY及IL-8的分泌水平与空白对照组水平接近,差异无统计学意义（P〉0．05）;与模型对照组比较,安息香提取物中剂量组TNF-α分泌水平显著降低（P〈0．01）。结论：安息香可能通过降低炎性介质LDH、TNF-α及IL-8活性,从而修复内皮细胞损伤。     

马钱子配伍苏木对关节炎大鼠抗炎及免疫机制的影响

目的:探讨马钱子配伍苏木对佐剂性关节炎(AA)大鼠的免疫分子机制及较佳配比。方法 :马钱子与苏木不同配比水煎剂连续灌胃给药32 d,取血和滑膜组织,观察滑膜组织病理变化,采用酶联免疫吸附法(Elisa)测定血清中白介素-1β、白介素-6、白介素-10(IL-1β、IL-6、IL-10)、循环免疫复合物(CIC)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、C型反应蛋白(CRP);通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,检测AA大鼠滑膜IL-1β、IL-10、TNF-αm RNA的表达情况。结果:不同配比的马钱子与苏木煎剂,能改善AA大鼠的滑膜充血、炎细胞浸润等病理变化,不同程度降低炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6、CIC、CRP的含量;降低IL-1βm RNA的表达,上调IL-10 m RNA的表达。结论 :马钱子与苏木配伍对AA大鼠具有一定抗炎作用,其机制为抑制炎性细胞因子,控制炎症反应,其较佳配比为1∶6。     

姜黄素对TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞FKN表达的干预作用

目的:观察姜黄素对TNF-α刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的不规则趋化因子(Fractalkine,CX3CL1,FKN)表达的影响。方法:MTT法筛选HUVEC的姜黄素最佳药物浓度,检测不同浓度TNF-α对HUVEC FKNmRNA表达的上调作用,比较不同时间段TNF-α0.5ng/ml对HUVEC FKNmRNA表达的影响,比较0~5μmol/L姜黄素联合TNF-α0.5ng/ml对HUVEC FKNmRNA表达的影响,荧光定量PCR和Western-blot检测FKNmRNA及蛋白质水平变化。结果:MTT法筛选出HUVEC的姜黄素最佳药物浓度为5μmol/L,0.5ng/ml TNF-α能明显提高HUVEC FKNmRNA表达,刺激16小时0.5ng/ml TNF-α能显著增加HUVEC FKNmRNA表达量,荧光定量PCR及Western-blot检测表明姜黄素2~5μmol/L联合TNF-α0.5ng/ml能明显抑制HUVEC FKNmRNA的表达量及蛋白质表达水平。结论:Cur可抑制TNF-α刺激HUVEC的FKNmRNA及蛋白表达。     

白术茯苓汤不同配比在脾气虚克罗恩病大鼠模型Th1/Th2类细胞因子免疫失衡中的作用

目的考察白术茯苓汤不同配比对脾气虚克罗恩病大鼠Th1/Th2类细胞因子的影响;初步探讨该方治疗脾气虚CD的免疫机制。方法采用破气耗气加饥饱失常法结合Morris方法复制脾气虚CD大鼠模型,以白术茯苓汤不同配比灌胃给药,酶联免疫吸附法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10的含量。结果与空白组相比,模型组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平升高(P0.05),而IL-4、IL-10水平降低(P0.05);经药物干预后,B5组(白术∶茯苓=12∶15)、B6组(白术∶茯苓=15∶12)和B7组(白术∶茯苓=18∶9)TNF-α、IL-6水平明显降低(P﹤0.05),而IL-4水平明显升高(P﹤0.05);B6组、B7组IL-1β、IL-8水平明显降低(P﹤0.05);B6组IL-10水平明显升高(P﹤0.05)。结论白术茯苓汤可调节Th1/Th2类细胞因子失衡而调控肠道炎症,B6组即白术/茯苓5∶4剂量配比组作用最佳。     

当归补血汤不同配比组方抗动脉血管内皮细胞凋亡作用

目的:研究当归补血汤不同配比组方的抗动脉血管内皮细胞凋亡的作用。方法:不同配比的当归补血汤及黄芪、当归提取液作用于血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠动脉内皮细胞(RAOEC)凋亡模型,观察作用前后RAOEC凋亡率的变化。结果:不同配比的当归补血汤作用于Ang II诱导的RAOEC凋亡细胞后,凋亡率均有不同程度下降,其中3∶1组、5∶1组和黄芪单方组分别为(6.25±2.05)%、(8.69±0.69)%和(7.13±1.53)%,与模型组(14.45±1.87)%相比,差异有统计学意义(均为P<0.05)。结论:当归补血汤不同配比组方均具有抗动脉血管内皮细胞凋亡的作用,但以黄芪当归5∶1和3∶1配比较为显著。     

小檗碱对LPS、IL-4诱导的小鼠RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-10的影响

目的 观察小檗碱（Berberine,Ber）对脂多糖（LPS）以及白介素-4（IL-4）诱导的RAW264.7细胞株分泌炎症因子中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、抑炎因子白介素（IL-10）的影响,初步探讨Ber对巨噬细胞极化的影响。方法 噻唑蓝（MTT）法测定小檗碱对RAW264.7细胞增殖的影响,选取半数抑制浓度（IC50）以下的小檗碱浓度作为干预剂量;酶联免疫法（ELISA）检测小檗碱对LPS以及IL-4不同诱导状态下RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-10的影响。结果 小檗碱对RAW264.7细胞的IC50在400～800 μmol·L-1之间。LPS作用下RAW264.7细胞促炎因子TNF-α分泌量明显升高,Ber（剂量分别为5,10,20 μmol·L-1）有显著的抑制作用,并有剂量依赖关系（均P＜0.01）;而LPS刺激下细胞IL-10分泌量也明显升高（P＜0.05）,而Ber仅在20 μmol·L-1剂量下表现抑制作用。在IL-4作用下,RAW264.7细胞抗炎因子IL-10分泌量明显升高,Ber（剂量分别为5,10,20 μmol·L-1）有显著的抑制作用,并呈现剂量依赖关系（均P＜0.01）;IL-4作用下TNF-α分泌量明显降低（P＜0.05）,Ber对TNF-α分泌量的影响无剂量依赖性。结论 Ber对LPS刺激下促炎因子TNF-α的分泌具有抑制作用,对IL-4诱导下IL-10分泌量的升高也有抑制作用,提示Ber在巨噬细胞极化过程中有调节作用。     

甘草次酸对UVB诱导HaCaT细胞光老化的保护作用及相关细胞因子的影响

目的:研究甘草次酸对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T)细胞光老化的保护作用及相关炎症因子影响。方法:用不同浓度的甘草次酸作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖率,筛选出药物最佳有效浓度;用30 m J·cm-2的UVB照射Ha Ca T细胞,建立光老化模型,用3个不同浓度的甘草次酸作用于光老化细胞,MTT比色法检测光老化Ha Ca T细胞增殖率;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT)和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒分别检测甘草次酸对光老化Ha Ca T细胞中GSH-Px,CAT和LDH活性的影响;蛋白免疫印记法(Western blot)检测甘草次酸对光老化Ha Ca T细胞中白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达量的影响。结果:筛选出1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草次酸为最佳有效浓度。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P0.01),GSH-Px,CAT活性显著降低,LDH活性显著升高(P0.01),IL-1β,IL-6,TNF-α蛋白表达量显著升高(P0.05,P0.01)。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草次酸+UVB组细胞增殖率显著上升(P0.01),GSH-Px,CAT活性显著上升,LDH活性显著降低(P0.01),IL-1β,IL-6,TNF-α蛋白表达量显著降低(P0.05,P0.01)。结论:甘草次酸可通过提高GSH-Px,CAT活性,降低LDH活性,减少炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-α的表达,从而抑制UVB诱导Ha Ca T细胞光老化。     

小檗碱通过JNK通路降低内脏脂肪素诱导人脐静脉内皮细胞分泌IL-6和TNF-α的研究

目的研究c-Jun氨基端激酶(JNK)信号转导通路对内脏脂肪素(内脂素)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的调控作用及小檗碱的干预作用。方法体外培养HUVEC,用内脂素不同质量浓度(0、50、100、200μg/L)及不同时间(0、6、12、24、48 h)作用HUVEC,MTT法检测HUVEC增殖;流式细胞仪检测HUVEC凋亡;ELISA法检测HUVEC上清液中IL-6及TNF-α的量;Western blotting法检测HUVEC中p-JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达;并用小檗碱(50μmol/L)及JNK通路特异性抑制剂SP600125(10μmol/L)干预HUVEC,检测小檗碱的干预作用。结果与对照组相比,100μg/L内脂素可显著抑制HUVEC增殖,诱导HUVEC凋亡,诱导HUVEC分泌IL-6及TNF-α的量显著增高,并可显著增加HUVEC内p-JNK及Bax蛋白表达,减少HUVEC内Bcl-2蛋白表达;与内脂素组相比,小檗碱及SP600125均可显著减轻内脂素对HUVEC增殖的抑制及其诱导的HUVEC凋亡,降低内脂素诱导HUVEC上清液中IL-6及TNF-α的量并能降低HUVEC中p-JNK及Bax蛋白的表达,增加HUVEC内Bcl-2蛋白表达。结论小檗碱可减少IL-6及TNF-α的分泌,减轻内脂素诱导的HUVEC损伤,其机制可能与抑制JNK信号转导通路有关。     

山葵提取物对小鼠巨噬细胞的体外活化作用

目的:探讨山葵使巨噬细胞活化的机制。方法:将山葵粉(头)提取物按1∶20、1∶200、1∶2000浓度稀释后分别加入体外培养的小鼠巨噬细胞中,于6hr、12hr、24hr、36hr后分别收集细胞培养上清,采用ELISA方法检测细胞因子NO、IL-6、IL-12及TNF-α的含量。结果:山葵提取物(浓度≥5mg/ml)作用于小鼠巨噬细胞后6hr、12hr、24hr、36hr培养上清NO的含量显著高于对照组(P<0.05),而IL-6、IL-12及TNF-α的含量与对照组之间无显著差异(P>0.05)。结论:山葵提取物可使小鼠巨噬细胞大量产生NO,而对IL-6、IL-12及TNF-α影响较小。     

含溶栓颗粒血清对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞VEGF及ICAM-1影响的研究

目的:探讨溶栓颗粒对TNF-α损伤血管内皮细胞VEGF及ICAM-1表达的影响。方法:用TNF-α(40ng/mL)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)造模,用含大、中、小剂量溶栓颗粒的大鼠血清干预受损HUVEC,应用HE染色观察细胞形态变化,免疫组化法观察血管内皮细胞生长因子(VEGF)以及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果:TNF-α可以造成HUVEC损伤,表现细胞数量下降、皱缩、分裂相细胞明显增加;受损细胞的VEGF、ICAM-1表达明显增多;含大、中剂量溶栓颗粒的大鼠血清能减少VEGF、ICAM-1表达,减少细胞有丝分裂。结论:溶栓颗粒可以减少因炎性介质TNF-α增加而受损的血管内皮细胞VEGF、ICAM-1表达,或许可以减缓动脉粥样硬化形成,并对稳定动脉粥样斑块稳定性有积极作用。     

滋阴利水复方对肾小球系膜细胞中细胞因子产生及其胶原合成的影响

目的:探讨滋阴利水复方对肾小球系膜细胞增殖的抑制作用。万法:采用复方血清给药和免疫学方法测定滋阴利水复方对内毒素诱导的肾小球系膜细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNT-α)及其上清中羟脯氨酸含量的影响。结果:IL-6、TNF-α在正常系膜细胞中分泌量极微,而内毒素诱导的系膜细胞中IL-6、TNF-α及其上清中羟脯氨酸产生增加,与血清对照组相比有显著性差异(P<0.05),滋阴利水复方对IL-6、TNF-α、羟脯氨酸产生有明显的抑制作用,并呈剂量依赖关系。结论:该方能抑制系膜细胞中IL-6、TNF-α及羟脯氨酸的产生,从而抑制肾小球系膜细胞的增生及细胞外胶原的合成。     

人支气管上皮细胞体外炎症模型建立初探

目的:在体外建立人支气管上皮细胞(16HBE)的炎症模型,为研究中药组方抗炎机制提供实验模型。方法:采用完全培养液在体外培养人支气管上皮细胞,加入1mg/L的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用细胞不同时间(3、6、12、24h)后,测定细胞增殖活性,ELISA法检测上清液中IL-8和TNF-α含量。结果:脂多糖刺激12h后人支气管上皮细胞的增殖活性好、速度快,且炎性细胞因子TNF-α、IL-8分泌量与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:1mg/L脂多糖刺激12h可以成功建立体外人支气管上皮细胞炎症模型。     

烤瓷冠修复对20～59岁不同年龄组患者龈沟液分泌及炎性因子的影响

目的探讨烤瓷冠修复对20~59岁不同年龄组患者龈沟液分泌及炎性因子的影响。方法将172例行烤瓷单冠修复的患者根据年龄分组:20~30岁组(A组)、30~40岁组(B组)、40~50岁组(C组)和50~59岁组(D组)。分别于患者修复前和修复后1个月时收集基牙龈沟液(GCF),利用酶联免疫吸附试验(ELISA法)对GCF中IL-1β、IL-6、TNF-α和ALP含量进行检测。结果与修复前相比,A组和B组修复1个月GCF分泌量明显增加(P均0.05),且分泌量均大于C组和D组(P均0.05);不同年龄组修复1个月时GCF中IL-1β、IL-6、TNF-α和ALP含量均较修复前明显升高(P均0.05);A组和B组GCF中IL-1β、IL-6和ALP含量均高于C组和D组,A组、B组和C组GCF中TNF-α含量高于D组,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论 20~59岁患者行烤瓷冠修复会导致GCF分泌量增加,引起GCF中IL-1β、IL-6、TNF-α和ALP含量增加,其强度受年龄因素影响。     

益气滋阴、活血通络方干预动脉粥样硬化相关炎性因子的表达

目的:探讨益气滋阴、活血通络方(简称中药复方)防治动脉粥样硬化的临床疗效及作用机制。方法:将符合诊断标准的150例患者,随机分为阿托伐他汀对照组(30例),中药复方小、中、高剂量观察组(各40例)。治疗0,4,8周后,观察各组颈动脉中内膜厚度(intima media thickness,IMT),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的变化情况。结果:与阿托伐他汀对照组相比较,中药复方小剂量组IMT,IL-6,TNF-α,MMP-9均显著升高(P0.05),而中药复方中、高剂量组均无显著性差异;中药复方小剂量组组内比较,IMT,IL-6,TNF-α,MMP-9均无显著性差异,中、高剂量组组内比较均有显著性差异(P0.05)。结论:中药复方具有防治动脉粥样硬化的作用,可能是通过抗炎来完成,且量效、时效分别呈正相关。     

补肾壮骨胶囊对骨性关节炎患者关节液IL-1β和TNF-α水平的影响

目的:探讨补肾壮骨胶囊对骨性关节炎(OA)患者关节液中IL-1β和TNF-α水平的影响。方法:50例患者随机分为两组,每组25例,A组给予补肾壮骨胶囊和硫酸氨基葡萄糖胶囊口服,B组给予硫酸氨基葡萄糖口服,同时选择25名健康对照者(C组)。分别检测患者在用药前及用药1个疗程后IL-1β和TNF-α的水平,以及C组IL-1β和TNF-α的水平。结果:用药前A、B两组患者IL-1β和TNF-α水平与C组比较均增高,有显著性差异(P<0.05),A组与B组之间无显著性差异(P>0.05)。用药1个疗程后,A、B两组患者IL-1β和TNF-α的水平均有所下降,A组较B组下降明显(P<0.05)。结论:补肾壮骨胶囊能有效降低OA患者关节液中IL-1β和TNF-α水平,提高疗效。     

马钱子与白术配伍对关节炎大鼠免疫机制研究

目的:探讨马钱子与白术配伍(简称马术)防治佐剂性关节炎(AA)大鼠的免疫机制。方法:建立AA大鼠模型,将马钱子与白术不同配比水煎剂连续灌胃给药32 d,取血和滑膜组织观察滑膜组织病理形态学变化,血清中风湿因子(RF)、白介素-1β、-6、-10(IL-1β、IL-6、IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、循环免疫复合物(CIC)、C型反应蛋白(CRP)和滑膜组织中前列腺素E2(PGE2)、皮质醇(Cor)的变化。结果:配伍组能不同程度地改善滑膜组织充血、坏死、炎细胞浸润、纤维组织增生,降低RF、IL-1β、IL-6、CIC、CRP、Cor的含量。结论:马术防治AA的免疫机制为抑制炎性细胞因子和Cor,控制炎症反应,其较佳配比为1∶6。     

针灸百会穴对束缚应激模型大鼠血清TNF-α及IL-1含量变化的影响

目的:对比电针与艾灸百会对束缚模型大鼠血清1肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素(IL-1)含量的变化,探讨其变化的规律.方法:以束缚模型大鼠为研究对象,电针、艾灸百会穴,采用放射免疫法测定大鼠血清中TNF-α及IL-1的含量变化.结果:与正常组比较,模型组、针刺百会组血清中TNF-α及IL-1的含量均降低趋势,而艾灸百会组的含量有升高趋势,各组间未见无统计学意义(P＞0.05).与束缚模型组比较,针刺百会组TNF-α及IL-1的含量有降低趋势,艾灸百会组的含量有升高趋势,各组间比较无统计学意义(P＞0.05).与针刺组比较,艾灸组TNF-α及IL-1的含量均升高,其中2组间IL-1含量的比较有统计学意义(P＜0.05).结论:针刺和艾灸作为不同的治疗介入方法,对束缚模型大鼠血清TNF-α及IL-1的含量均有不同程度的影响,以艾灸百会穴的调节作用较为明显.束缚模型大鼠血清IL-1、TNF-α含量均有所降低,而艾灸组TNF-α及IL-1的含量明显升高.相关研究结果表明:IL-1和TNF-α可以诱生IL-2,而IL-2又可以通过自分泌效应对机体发挥正向调节作用,从而启动机体内源性自稳机制,调整紊乱的免疫功能,最终达到提高机体内在应变能力.     

Z-藁本内酯对人脐静脉内皮细胞保护作用及其机制研究

目的 通过观察Z-藁本内酯对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及核因子-κB (NF-κB)表达的影响,探讨其对炎性因子损伤内皮细胞的保护作用及其机制.方法 向体外培养的HUVEC中加入TNF-α10 ng/mL造成细胞损伤,同时加入不同浓度(5、10、20 μmol/L)的Z-藁本内酯,共同孵育24 h,MTT法检测各组细胞活力,ELISA法测定细胞培养液中 ICAM-1和VCAM-1的量,Westernblotting法检测各组细胞NF-κB蛋白表达.结果 与对照组比较,TNF-α可造成HUVEC明显损伤(P＜0.05、0.01),显著增加HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的表达(P＜0.01).与模型组比较,Z-藁本内酯可以剂量相关地降低ICAM-1 (P＜0.01)和VCAM-1 (P＜0.05)的表达,显著减少细胞NF-κB蛋白 的表达(P＜0.05).结论 Z-藁本内酯可减轻TNF-α对HUVEC的损伤,其作用机制可能与通过抑制NF-κB的激活,进而减少ICAM-1和VCAM-1的表达有关.     

维糖平对糖尿病大鼠外周血肿瘤坏死因子-α、白介素-1和白介素-6的影响

目的:观察维糖平对糖尿病大鼠外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)的影响。方法:设立模型对照组、二甲双胍对照组及维糖平大、小剂量组。第12周末测定各组大鼠外周血中TNF-α、IL-1、IL-6的水平。结果:模型组IL-1、IL-6、TNF-α水平均明显高于正常组;维糖平大剂量组的IL-1、IL-6、TNF-α水平均显著低于模型组,维糖平小剂量组的IL-1水平显著低于模型组,而IL-6水平和模型组比较无显著性差异。结论:维糖平能显著降低实验性大鼠外周血中IL-1、IL-6、TNF-α的水平。     

荨麻疹汤对女性慢性荨麻疹患者血瘦素、IL-1、TNF-α含量的影响

目的:探究血瘦素、IL-1、TNF-α与女性慢性荨麻疹的关系;观察荨麻疹汤对慢性荨麻疹女性患者血瘦素、IL-1、TNF-α含量的影响。方法:比较慢性荨麻疹女性患者与健康女性血瘦素、IL-1、TNF-α水平。测定荨麻疹汤或咪唑斯汀治疗前后患者血瘦素、IL-1,TNF-α含量,并作比较。结果:慢性荨麻疹女性患者IL-1、TNF-α水平较高,而瘦素水平较低。荨麻疹汤能降低患者血IL-1,TNF-α水平;提高血瘦素含量,而咪唑斯汀作用不显著。结论:荨麻疹汤可能是通过提高血瘦素水平,降低IL-1、TNF-α含量来调节细胞免疫和体液免疫从而对慢性荨麻疹起到治疗作用。