依那西普对大鼠切口痛和脊髓TNF-α表达的影响

目的 观察依那西普对切口疼痛模型大鼠疼痛程度、痛阈和脊髓肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 雄性 SD 大鼠 60 只随机分为模型对照组(C组)和依那西普组(E组),按术后-I(术前1 h)、4、8、16和 24 h 随机分配大鼠,每组每时间点 6 只.戊巴比妥钠麻醉大鼠后,对大鼠左足底实施手术刺激;C组大鼠鞘内注射生理盐水10 μl,E组大鼠鞘内注射可溶性 TNF-α受体依那西普 100 μg(10 μ1).用 Dynamic Plantar Aesthesiometer 和 Plantar test 7375 分别测定大鼠机械性痛阈和热痛阈;用RT-PCR方法测定腰脊髓 TNF-α mRNA的表达,用 Western blot 方法测定脊髓TNF-α蛋白的表达.结果 ①术后两组大鼠累积疼痛评分(CPS)均升高(P<0.01),E组术后各时间点 CPS 低于 C 组(P<0.05或<0.01).②术后两组大鼠机械性痛阈(HWMT)和热痛阈(HWTL)明显下降(P<0.01),术后各时间点 E组大鼠 HWMT、HWTL 均明显高于 C 组(P<0.05或P<0.01).③术后两组大鼠脊髓 TNF-αmRNA及蛋白表达均上调(P<0.01),术后各时间点 E 组大鼠脊髓 TNF-αmRNA 及蛋白表达水平均明显低于 C 组(P<0.05或P<0.01).结论 大鼠脊髓 TNF-α参与了手术后疼痛的产生和维持,可溶性 TNF-α受体依那西普可抑制大鼠切口痛和脊髓 TNF-αmRNA 及蛋白表达.     

鞘内氯诺昔康对正常大鼠痛阈的影响

目的 探讨鞘内注射氯诺昔康对正常大鼠的机械痛阈及热痛阈的影响.方法 雄性SD大鼠18只,用于机械痛阈测定,随机平均分为3组,鞘内溶剂组(S组,鞘内注射氯诺昔康注射用水20 μL)、肌注组(IM组,肌注氯诺昔康120 μg/20 μL)、实验组(IT组,鞘内注射氯诺昔康120 μg/20 μL).另取雄性SD大鼠18只,用于热痛阈测定,动物分组及处理同前.分别于注射前(痛阈基础值)和注射后10、30、60、90、120、150 min采用足底力学感觉测量仪和足底温觉测量仪对机械痛阈和热痛阈进行测定.结果 S组在鞘内注射前后的机械痛阈和热痛阈值无明显变化.IM组在肌注后30 min,机械痛阈值[(31.1±4.05) g]和热痛阈值[(20.82±2.15) s]出现高峰 (P＜0.05或P＜0.01);分别于60 min和90 min 恢复至基础水平.IT组在鞘内注射后10 min,机械痛阈值[(35.0±2.76) g]和热痛阈值[(26.72±3.75) s]均大于基础值 (P＜0.01);分别于90 min和120 min 恢复至基础水平.3组机械痛阈和热痛阈的基础值差异无统计学意义.在10、30、60 min,IT组的机械痛阈值高于S组(P＜0.01或P＜0.05);在 10、30 min,IT组高于IM组(P＜0.05).在 10、30、60、90 min,IT 组的热痛阈值均高于S组和IM组(P＜0.01或P＜0.05).结论 鞘内注射氯诺昔康可以提高正常大鼠的机械痛阈和热痛阈,与全身系统给药相比,该作用起效快,维持时间长.     

布美他尼鞘内预先注药对大鼠急性伤害刺激诱发疼痛的影响

目的 观察布美他尼鞘内预先注药对切口痛模型大鼠疼痛行为的影响.方法 健康雄性SD大鼠24只,随机分为对照组、注药组、切开组与实验组,每组各6只.对照组不作鞘内注药和切口痛模型;注药组单纯鞘内注射布美他尼100 μg;切开组按Brennan方法制成切口痛模型;实验组先鞘内注射布美他尼100 μg,然后制成切口痛模型.采用疼痛累计评分法、热辐射法及von Frey 细丝法,观察大鼠不同时间点的疼痛累计评分、热痛阈及机械痛阈的变化.结果与对照组比较,注药组大鼠的热痛阈和机械痛阈均提高(P<0.05),分别于4 h和2 h恢复正常;切开组与实验组大鼠手术后均出现疼痛累计评分升高、热痛阈及机械性痛阈降低(P<0.05),但实验组大鼠疼痛累计评分升高的幅度低于切开组(P<0.05),热痛阈值及机械痛阈值的降低幅度也低于切开组(P<0.05).结论 鞘内预先给予布美他尼能减轻大鼠急性创伤后早期疼痛程度,提高热痛阈及机械痛阈,其抗伤害作用可能与布美他尼抑制脊髓钠钾氯协同转运蛋白1活动有关.     

鞘内注射肿瘤坏死因子-α对大鼠痛阈的影响

目的观察鞘内注射不同剂量TNF-α对大鼠机械痛阈和热痛阈的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为C组、T1组、T5组和T10组,每组6只。麻醉后分别鞘内注射生理盐水、TNF-α1、5ng和10ng,容积均为10μl。测量各组大鼠鞘内注射后-1（鞘内注射前1h）、4、8、16h及24h机械痛阈和热痛阈。结果鞘内注射TNF-α后4～8h,大鼠机械性痛阚和热痛阈下降（P〈0．05或P〈0．01）;鞘内注射TNF-α后16h,T5组和T10组大鼠机械性痛阈和热痛阈下降（P〈0．05或P〈0．01）;鞘内注射TNF-α后24h,T10组大鼠机械性痛阈和热痛阈下降（P〈0．05）。结论鞘内注射TNF-α可导致中枢痛觉过敏,使大鼠机械性痛阈和热痛阈降低,随着注射剂量增加,机械痛阈和热痛阈下降幅度增加并且维持时间延长。     

鞘内靶向沉默5-HT5A受体基因对化疗痛的影响

目的:观察鞘内注射5-羟色胺5A受体(5-hydroxytrptamine 5A receptor,5-HT5AR)的小干扰RNA重组腺病毒载体(Ad-5-HT5A-siRNA)前后,化疗痛大鼠脊髓5-HT5AR表达和痛觉过敏的变化情况,探讨5-HT5AR在化疗痛中的作用.方法:第一部分雄性成年SD大鼠随机分为模型组(n=10)和对照组(n=10),模型组腹腔注射长春新碱,对照组腹腔注射生理盐水,定期测定大鼠的机械痛阈及RT-PCR检测建模结束时大鼠脊髓L4.5段5-HT5AR的mRNA表达.第二部分30只已成功建立化疗痛模型大鼠随机分为3组(n=10),实验组鞘内注射Ad-5-HT5A-siRNA,阴性对照组鞘内注射阴性对照腺病毒(Ad-X-HK),空白对照组鞘内注射生理盐水.鞘内注射后3、7 d检测各组脊髓L4.5段5-HT5AR的表达,并分别在鞘内注射前及注射后3、5、7 d测定机械痛阈.结果:腹腔注射长春新碱可引起模型组大鼠机械痛阈下降(P＜0.01)和脊髓5-HT5AR的mRNA表达增高.而鞘内注射Ad-5-HT5A-siRNA后7 d,实验组大鼠5-HT5AR的mRNA表达下降,同时该组大鼠的机械痛阈降低(与阴性对照组、空白对照组比较,P＜0.05).结论:5-HT5AR参与了化疗痛的调控过程,其表达增强时可能有减轻化疗痛的作用.     

鞘内注射神经生长因子对大鼠痛阈、脊神经节脊髓后角CGRP免疫反应的影响

目的：研究鞘内注射神经生长因子（NGF）后，对大鼠痛阈、脊神经节及脊髓后角降钙素基因相关肽（CGRP）免疫反应的影响。方法：将36只大鼠分为实验组及对照组，分别进行鞘内注射NGF和生理盐水。测定大鼠痛阈，同时采用免疫组化方法，比较两组脊神经节及脊髓后角CGRP的反应强度。结果：实验组的痛阈低于对照组，CGRP免疫反应强度强于对照组。结论：鞘内注射神经生长因子后，可引起大鼠痛阈降低，脊神经节及脊髓后角CGRP免疫反应增强。     

鞘内注射BN50730对神经病理痛大鼠痛阈及脊髓TNF-α表达的影响

目的观察鞘内注射BN50730对神经病理痛大鼠痛阈及脊髓TNF-α表达的影响,探讨脊髓血小板活化因子（PAF）及其受体参与痛觉信号调节的可能机制。方法鞘内置管后的SD大鼠24只随机等分为4组：假手术组（Sham组）,坐骨神经分支选择损伤模型（SNI）组,SNI＋二甲基亚砜（DMSO）组和SNI＋BN50730组,建立SNI疼痛模型,手术后1、3、5、7、10和14d鞘内给药并测痛阈,第14天取大鼠腰段脊髓,冷冻切片,免疫组化法检测脊髓TNF-α表达。结果SNI神经损伤大鼠机械缩爪阈明显降低（P〈0．05）,同侧脊髓背角TNF-α表达增强（P〈0．05）;鞘内应用BN50730降低脊髓背角TNF-α的表达,同时伴有大鼠痛行为的改善。各组大鼠辐射热缩爪潜伏期无明显差异。结论BN50730对SNI神经病理痛有治疗作用,TNF-α的表达下调可能与其镇痛机制有关。     

鞘内注射TRESK-shRNA慢病毒对大鼠痛阈及脊髓JNK磷酸化的影响

目的 评价鞘内注射TRESK-shRNA慢病毒对大鼠痛阈及脊髓JNK磷酸化的影响.方法 健康雄性SD大鼠,体质量200～ 250 g,进行鞘内置管术.取鞘内置管成功的大鼠36只,采用随机数字表法分为3组(n=12):空白对照组(C组)、TRESK-shRNA慢病毒组(TRESK组)和阴性慢病毒组(V组).TRESK组和V组分别鞘内注射TRESK-shRNA慢病毒和阴性慢病毒,10 μL慢病毒,病毒滴度为1×108 IFU/mL,1次/d,连续7 d;C组于相同时点鞘内注射10 μL生理盐水.各组大鼠分别于鞘内注射前1d(T0)及鞘内注射1 d(T1)、3 d(T2)、5d(T3)、7 d(T4)测定机械刺激缩足阈(MWT)和热刺激缩足潜伏期(TWL).鞘内注射7d疼痛行为学测定结束后处死大鼠,取L4-5段背根神经节(DRG)和脊髓组织,realtime PCR检测背根神经节TRESK mRNA表达,Westem blot 检测脊髓JNK磷酸化水平.结果 TRESK组T3、T4时的MWT明显低于C组(P＜0.05).与C组相比,TRESK组L4～5术侧DRG的TRESK mRNA表达明显降低(P＜0.05).与C组相比,TRESK组L4-5脊髓的JNK磷酸化水平明显增高(P＜0.05).结论 鞘内注射TRESK-shRNA慢病毒可降低大鼠的机械痛阈,可能与激活脊髓JNK磷酸化有关.     

脑源性神经营养因子-B型酪氨酸激酶受体-钾氯共转运体2信号通路在大鼠糖尿病周围神经痛机制中的作用

目的 观察鞘内注射B型酪氨酸激酶受体(TrkB)抑制剂K252a对糖尿病大鼠机械性痛阈、脊髓背角脑源性神经营养因子(BDNF)、钾氯共转运体2(KCC2)表达的影响,以了解BDNF-TrkB-KCC2信号通路在糖尿病神经痛机制中的作用.方法 第一部分:22只Sprague-Dawley (SD)雄性大鼠,10只分别于链脲霉素(STZ)注射前及注射后1、2、4周检测其机械性痛阈;上述时间点各取3只大鼠腰膨大处脊髓背角组织,采用Western印迹法检测BDNF、KCC2的表达.第二部分:取40只SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、STZ+0.9％氯化钠溶液组、STZ+K252a组、STZ+K252a溶剂组,每组10只.STZ注射4周后,STZ 3组分别予鞘内注射0.9％氯化钠溶液10 μL、K252a 10 μg/10 μL、K252a的溶剂(0.01％二甲亚砜)10 μL,每天1次,连续4d.分别于给药前30 min及末次给药后30 min,检测大鼠的机械性痛阈值.行为学检测结束后,采用Western印迹法检测各组大鼠腰膨大脊髓背角BDNF、KCC2的表达.结果 第一部分:STZ注射后2周,大鼠的机械性痛阈值较注射前及注射后1周显著降低(P值均＜0.05);STZ注射后4周,大鼠的机械性痛阈值较注射后2周显著降低(P＜0.05).STZ注射后2周,大鼠脊髓背角BDNF表达水平较注射前及注射后1周显著升高(P值均＜0.05);STZ注射后4周,大鼠脊髓背角BDNF表达水平较注射后2周显著升高(P＜0.05).STZ注射后2周,大鼠KCC2表达水平较注射前及注射后1周显著降低(P值均＜0.05);STZ注射后4周,大鼠KCC2表达水平较注射后2周显著降低(P＜0.05).第二部分:鞘内给药后,STZ+K252a组机械性痛阈值较给药前显著增加(P＜0.05),与正常对照组的差异无统计学意义(P＞0.05),STZ+0.9％氯化钠溶液组及STZ+ K252a溶剂组与给药前的差异均无统计学意义(P值均＞0.05);STZ+ K252a组BDNF表达水平较STZ+0.9％氯化钠溶液组及STZ+K252a溶剂组显著降低(P值均＜0.05),与正常对照组的差异无统计学意义(P＞0.05);STZ+K252a组KCC2表达水平较STZ+0.9％氯化钠溶液组及STZ+ K252a溶剂组显著升高(P值均＜0.05),与正常对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 连续鞘内注射K252a后,糖尿病神经痛大鼠机械性痛阈值及脊髓背角BDNF、KCC2表达水平均可恢复正常,BDNF-TrkB信号通路可能通过调节其下游KCC2蛋白的表达参与糖尿病神经痛的形成.     

鞘内注射巴氯芬对急性切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸含量的影响

目的研究急性疼痛时脊髓内兴奋性氨基酸含量的变化、γ-氨基丁酸B受体(GABA_B受体)激动剂巴氯芬(baclofen)的镇痛作用及其与脊髓兴奋性氨基酸含量变化的关系。方法SD大鼠鞘内置管后行左后爪足底切口建立急性切口痛大鼠模型,随即分为假手术组、0.9%氯化钠溶液组、1μg巴氯芬组(鞘内注射巴氯芬1μg)和5μg巴氯芬组(鞘内注射巴氯芬5μg),每组25只。观察大鼠左后爪机械痛阈,并于术后1、2、6、12、24h分离大鼠腰膨大部脊髓节段,检测其中兴奋性氨基酸的含量。结果所有手术组的痛阈均明显低于假手术组(P值均<0.05),脊髓兴奋性氨基酸含量明显增加(P值均<0.05)。鞘内注射巴氯芬后3h内可以部分提高大鼠的痛阈(P值均<0.05),且鞘内注射5μg巴氯芬较1μg后3h内大鼠的痛阈明显提高(P值均<0.05)。鞘内注射1或5μg巴氯芬大鼠脊髓兴奋性氨基酸含量较使用0.9%氯化钠溶液大鼠明显下降(P值均<0.05)。结论大鼠脚爪切口痛模型可以引起大鼠局部痛阈降低,脊髓兴奋性氨基酸含量提高。鞘内注射巴氯芬可以提高切口痛大鼠的局部痛阈,并且抑制脊髓兴奋性氨基酸的升高。     

鞘内注射氟代柠檬酸对骨癌痛小鼠机械痛敏和热痛敏的影响

目的 观察脊髓水平氟代柠檬酸(fluorocitrate)对骨癌痛小鼠机械痛敏和热痛敏的影响,探讨脊髓星形胶质细胞在伤害性信息传递中的作用.方法 C3H/HeJ 小鼠48只,随机分为6组(n = 8) :假手术组( Sham组),骨癌组,骨癌 生理盐水组,骨癌 氟代柠檬酸0.25 nmol/5 μl、0.50 nmol/5 μl、0.75 nmol/5 μl组.骨癌组和Sham组测定术前及术后7、12、17、21天小鼠机械缩腿阈值(MWT)和热缩腿潜伏期(TWL);骨癌各剂量组在第17天鞘内给予不同剂量的氟代柠檬酸,测定给药前和给药后15 min、30 min、1 h、2 h MWT和TWL值.结果 骨癌组从术后12天开始直到本实验观察的术后21天,MWT和TWL均明显降低,与Sham组相比具有显著性差异( P＜0.01＝;骨癌 生理盐水组小鼠在各个时间点上与给药前相比MWT和TWL无明显改变( P＞0.05);骨癌 氟代柠檬酸各个剂量组小鼠在给药后MWT和TWL均逐渐增加,具有剂量依赖性,并随时间的延长又逐渐恢复到给药前水平;骨癌 氟代柠檬酸0.75 nmol/5 μl组在给药后30 min时作用最明显,与给药前和盐水组相比 P＜0.01.结论 鞘内注射氟代柠檬酸能明显减轻骨癌痛小鼠机械痛敏和热痛敏,提示星形胶质细胞在脊髓水平参与疼痛信息传递.     

雌激素对切口痛大鼠痛行为的影响

目的 探讨雌激素对急性疼痛的调节作用.方法 ①雌激素的慢性处理:A组大鼠在去卵巢术5周后行切口痛造模(16只),B组大鼠在去卵巢假手术5周后行切口痛造模(14只),采用von Frey法测定去卵巢前、后基础值以及切口痛术后2、4 h和1、3、7、10 d的机械刺激缩足阈值(PWT值).②雌激索的急性处理:C组为正常雌鼠在切口痛术后第1天鞘内注射1 nmol/L雌二醇10μL(8只),D组为正常雌鼠在切口痛术后第1天鞘内注射0.9%氯化钠溶液10μL(8只).采用von Frey法测鞘内给药前及给药后20、60,120、180 min的PWT值.结果 ①慢性处理:A组去卵巢后基础PwT值及术后1、3、7、10 d的PWT值均显著低于B组(P值均<0.05).②急性处理:C组给药20和60 min的PwT值显著低于给药前(P值均<0.05),而D组给药后各时间点的PWT值与给药前的差异均无统计学意义(P值均>0.05).结论 体内雌激素水平慢性降低的大鼠对于急性疼痛更加敏感,而对于处于急性疼痛状态的大鼠,中枢雌激素水平增加能引起短期痛阈的降低.     

瑞芬太尼对切口痛大鼠脊髓iNOS mRNA和FOS蛋白表达的影响

目的:观察瑞芬太尼对切口痛大鼠脊髓诱导型一氧化氮合酶(i NOS)mRNA及FOS蛋白表达的影响,探讨瑞芬太尼诱发痛觉过敏的可能机制。方法:48只SD大鼠随机分为4组(n=12):对照组(C组),切口痛组(I组),瑞芬太尼1组(R1组),瑞芬太尼2组(R2组)。分别于术前24 h(基础值),术后24,48 h测定机械性痛阈。痛阈测定后,测定脊髓i NOS mRNA和FOS蛋白表达。结果:与术前24 h比较,术后I组、R1组和R2组机械痛阈降低;与C组比较,I组、R1组和R2组机械性痛阈降低;与I组比较,R1组和R2组机械性痛阈降低;与R1组比较,R2组机械性痛阈升高(P<0.05或P<0.01)。与C组比较,I组,R1组和R2组i NOS mRNA和FOS蛋白表达上调;与I组比较,R1和R2组i NOS mRNA和FOS蛋白表达上调;与R1组比较,R2组i NOS mRNA和FOS蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01)。结论:瑞芬太尼可能通过上调切口痛大鼠脊髓i NOS mRNA和FOS蛋白表达而诱导痛觉过敏。     

脊髓CXCL13在大鼠骨癌痛形成中的作用

目的 探讨脊髓趋化因子CXC配体13(CXCL13)在大鼠骨癌痛形成中的作用.方法 健康雌性SD大鼠20只,体质量160～200 g,分为4组(n=5):假手术组(S组)、骨癌痛组(BP组)、小干扰RNA(siRNA)阴性对照(NC-siRNA)组(NC组)和CXCL13-siRNA组(CS组).S组胫骨骨髓腔内注射生理盐水,BP组、NC组和CS组均采用胫骨髓腔内注射等量Walker-256乳腺癌细胞的方法建立大鼠胫骨癌痛模型,NC组和CS组分别鞘内注射NC-siRNA慢病毒和CXCL13-siRNA慢病毒10μL.分别于造模前1d及术后第7、9、14、21天时测定机械痛阈值,痛阈测定结束后处死大鼠,取脊髓和胫骨组织,采用免疫荧光双标染色检测脊髓CXCL13、小胶质细胞特异性标记物(Iba-1)和神经元特异核蛋白(NeuN)的共表达情况;采用Western-blot、RT-PCR法测定脊髓CXCL13、Iba-1的蛋白及mRNA表达;采用HE染色光镜下观察胫骨骨结构破坏情况.结果 与S组比较,BP和NC组接种后7～21 d机械痛阈下降(P＜0.05),CXCL13在神经元中表达显著上调,小胶质细胞明显活化(P＜0.05),CXCL13和Iba-1蛋白及mRNA水平明显升高(P＜0.05);与NC组比较,CS组造模后9～21 d机械痛阈升高(P＜0.05),CXCL13在神经元中表达明显下调,小胶质细胞活化减少(P＜0.05),CXCL13和Iba-1蛋白及mRNA水平明显下降(P＜0.05);HE染色显示BP、NC组、CA组均出现骨髓腔内肿瘤生长且向外侵蚀破坏骨皮质,S组未见异常.结论 脊髓CXCL13通过激活小胶质细胞参与大鼠骨癌痛的形成.     

胰岛素样生长因子1对切口痛大鼠痛觉敏化和脊髓炎性反应的影响

目的：探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)对切口痛大鼠模型痛觉敏化和脊髓炎性反应的影响。方法：SD大鼠共30只,体重200～250 g,8～10周龄,随机数字法将其平均分为3组：对照组（C组）、手术组（O组）和术后鞘内注射IGF-1受体抑制剂组（I组）。O组构建大鼠趾部切口痛模型,并于术后6 h鞘内注射生理盐水10μL;I组构建大鼠趾部切口痛模型,并于术后6 h鞘内注射IGF-1受体（IGF1R）抑制剂50μg;C组仅在同一时间行鞘内注射生理盐水10μL,不做手术造模处理。在术前1 d及术后2,4,12,24 h行机械缩足阈值检测;术后24 h痛阈检测完成后,采用Western Blot实验和免疫荧光实验检测大鼠脊髓组织GFAP、IGF-1、IL-1β、TNF-α的蛋白表达水平。结果：与C组相比较,O组大鼠在术后2 h出现机械缩足阈值降低,术后24 h脊髓背角星形胶质细胞明显激活,IGF-1阳性细胞数量明显增加,脊髓IL-1β、TNF-α蛋白表达明显增加（P<0.05）;与O组相比较,I组大鼠在术后12 h机械缩足阈值开始升高,术后24 h脊髓IL-1β、TNF-α蛋白表达明显减...     

喷他佐辛鞘内注射对切口痛大鼠背根神经节ERK1/2磷酸化表达的影响

目的 观察喷他佐辛鞘内注射后切口痛大鼠背根神经节ERK1/2磷酸化表达的变化,探讨喷他佐辛脊髓镇痛的机制.方法 选择鞘内置管成功的SD大鼠80只,随机分为4组(n=20):假手术组(S组)、切口痛组(P0组)、喷他佐辛40 μg组(P1组)和喷他佐辛120 μg组(P2组).S组仅予吸入异氟烷麻醉,不做手术;P0组、P1组和P2组吸入异氟醚麻醉后做切口痛模型手术,并且于术前10 min、术后24、48、72 h分别鞘内注射0.9%生理盐水20 μL、喷他佐辛40 μg和喷他佐辛120 μg.各组于术前1 h、术后2、6、24、48、72 h时采用von Frey纤维丝测定机械缩足反射阈值(MWT),并于术后痛阈测定结束后分别处死4只大鼠,取其术侧L4和L5背根神经节用于免疫组化法测定磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的阳性细胞比率.结果 与S组比较,P0组术后2～72 h时MWT均降低,P1组和P2组术后2～24 h时MWT降低,但与P0组比较,P1组和P2组术后2～48 h时MWT上升,且P2组上升更大(P＜0.05).S组背根神经节p-ERK1/2有微弱表达,P0组、P1组和P2组术后2～72 h时p-ERK1/2出现强表达,但与P0组比较,P1组和P2组p-ERK1/2表达下调,而且P2组下调幅度更大(P＜0.05).结论 喷他佐辛鞘内注射可提高切口痛大鼠痛阈,且与剂量相关,其机制可能与抑制背根神经节p-ERK1/2表达有关.     

鞘内注射针对Toll样受体4基因的siRNA缓解坐骨神经结扎大鼠的神经病理性疼痛

目的观察坐骨神经结扎(CCI)大鼠鞘内注射针对Toll样受体4基因(TLR4)的siRNA(TLR4-siRNA)的镇痛作用及对脊髓TLR4、IL-1β、TNF-α表达的影响。方法大鼠随机分为4组(每组10只):假手术组、CCI组(鞘内注射生理盐水)、错配siRNA组(鞘内注射错配siRNA)及siRNA-TLR4组(鞘内注射TLR4-siRNA)。后3组大鼠均行右侧坐骨神经结扎术,并行L5～L6鞘内置管;假手术组仅暴露坐骨神经而不结扎。TLR4-siRNA组大鼠从CCI术前1 d开始鞘内注射脂质体包裹的有效TLR4-siRNA(10μg/30μl),连续7 d;CCI组、错配siRNA组分别注射等量生理盐水和错配siRNA。采用热辐射及von Frey测痛丝分别测定各组大鼠的热痛阈及机械性痛阈;采用实时定量RT-PCR法观察各组大鼠脊髓组织TLR4 mRNA的表达;采用ELISA法测各组大鼠脊髓组织炎症因子IL-1β、TNF-α的含量。结果与假手术组相比,坐骨神经结扎后,大鼠热痛阈及机械性痛阈降低,脊髓TLR4 mRNA表达量增加,脊髓组织IL-1β、TNF-α的含量也增加(P<0.05)。与生理盐水组及错配siRNA组相比,鞘内注射TLR4-siRNA可抑制坐骨神经结扎引起的热痛觉过敏及机械性异常性疼痛(结扎后1、3、7 d,P<0.05),降低脊髓TLR4 mRNA表达(P<0.05),降低脊髓IL-1β、TNF-α含量(P<0.05)。结论鞘内注射TLR4-siRNA可通过干扰大鼠脊髓TLR4基因表达抑制其信号通路下游炎症因子的水平,进而缓解坐骨神经结扎引起的神经病理性疼痛。     

氯胺酮麻醉对老年大鼠学习记忆及痛阈的影响

目的 观察老年大鼠氯胺酮麻醉后,学习记忆能力及痛阈的改变.方法 14只老年大鼠(20月龄)随机分为2组,每组7只对照组生理盐水(NS)4 mL/kg腹腔注射;氯胺酮组,氯胺酮(50 mg/mL)4 mL/kg腹腔注射.采用Morris水迷宫仪进行行为学检测,热水浴甩尾试验测定痛阈.结果 随着训练次数的增加,两组逃避潜伏期呈逐渐缩短趋势;氯胺酮组除第3 d外,其余各d逃避潜伏期均长于对照组(P＜0.05);撤除水下平台后游过原平台所在区域次数氯胺酮组游过原平台区次数(2.7±2.1)次明显低于对照组(4.7±1.8)次(P＜0.05);痛阈测定从第2 d开始,氯胺酮组各天甩尾潜伏期均明显长于对照组(P＜0.05).结论 老年大鼠氯胺酮腹腔注射麻醉后,学习记忆能力明显下降,同时伴随痛阈的明显升高,持续至麻醉后5 d仍未恢复.     

鞘内注射吗啡联合氯胺酮对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸的含量及谷氨酸转运体-1 mRNA表达水平的影响

目的 探讨鞘内注射吗啡联合氯胺酮对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸(EAAs)的含量及谷氨酸转运体-1(GLT-1)mRNA表达水平的影响.方法 成年雄性Sprague-Dawley大鼠125只,体重为250～300 g,随机分为5组,每组各设5个时间点,每个时间点5只大鼠.按Brennan法制备大鼠急性切口痛模型.假手术组(Ⅰ组),0.9%氯化钠溶液组(Ⅱ组)于术后鞘内注射0.9%氯化钠溶液25μL,吗啡组(Ⅲ组)于术后鞘内注射吗啡10μg,氯胺酮组(Ⅳ组)于术后鞘内注射氯胺酮100 μg,吗啡联合氯胺酮组(Ⅴ组)于术后鞘内注射吗啡5μg+氯胺酮50 μg;Ⅲ～Ⅴ组鞘内给药时均以0.9%氯化钠溶液稀释至20μL,注射药物后再以0.9%氯化钠溶液5霯冲洗导管.分别于术后1、2、6、12、24 h(T1～T5)5个时间点,应用von Frey丝线测定大鼠后爪机械缩足阈值(PWT)、随后取大鼠腰段脊髓,测定EAAs[谷氨酸(GLU)、天冬氨酸(ASP)]的含量;应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测T5时间点的大鼠腰段脊髓GLT-1 mRNA的表达水平.结果 与Ⅰ组相比,除Ⅲ组在T1时间点外,Ⅱ～Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著降低(P值均＜0.05);Ⅲ和Ⅴ组T1、T2时间点以及Ⅱ和Ⅳ组术后各时间点的脊髓GLU、ASP含量均显著升高(P值均＜0.05).与Ⅱ组相比,Ⅲ～Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著升高(P值均＜0.05),Ⅳ组在T1、T2时间点以及Ⅲ和Ⅴ组在术后各时间点的脊髓GLU、ASP含量均显著降低(P值均＜0.05).与Ⅲ组相比,除T1时间点外,Ⅴ组在术后各时间点的PWT均升高;Ⅳ组在T3～T5时间点的脊髓GLU、ASP含量显著升高(P值均＜0.05),Ⅴ组在T1、T2时间点的脊髓GLU、ASP含量显著降低(P值均＜0.05).与Ⅳ组相比,Ⅴ组在术后各时间点的PWT均显著升高(P值均＜0.05),脊髓GLU、ASP含量均显著降低(P值均＜0.05).Ⅱ～Ⅴ组在T5时间点的GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅰ组显著减少(P值均＜0.05),Ⅲ～Ⅴ组的GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅱ组显著增加(P值均＜0.05),Ⅴ组的脊髓GLT-1 mRNA表达水平均较Ⅲ、Ⅳ组显著增加(P值均＜0.05).结论 在大鼠切口痛模型中,鞘内注射吗啡联合氯胺酮可减轻大鼠急性切口痛,可能与其降低大鼠脊髓EAAs含量和改变GLT-1 mRNA表达水平有关.     

鞘内注射雷帕霉素对CCI神经病理性痛大鼠痛阈及脊髓背角胶质细胞的影响

目的：评价鞘内注射雷帕霉素对CCI神经病理性痛大鼠的痛阈及脊髓背角胶质细胞表达的影响。方法健康雄性SD大鼠30只随机分为6组：①CCI组：CCI术后14天处死;②正常对照组：不做任何处理;③前对照剂组：鞘内置管3天后行CCI术,术后4小时后鞘内给同体积生理盐水,连给3天;④前给药组：鞘内置管3天后行CCI术,术后4小时鞘内给雷帕霉素溶液,连给3天;⑤后对照剂组：鞘内置管3天后行CCI术,术后7天鞘内给同体积生理盐水,连给3天;⑥后给药组：鞘内置管3天后行CCI术,术后7天鞘内给雷帕霉素溶液,连给3天。各组于CCI术前1天和术后第2、4、6、8、10、12、14天测机械痛阈和热痛阈。术后14天测痛后用多聚甲醛灌注大鼠,取L4～5脊髓,免疫组化染色,星形胶质细胞标记蛋白（GFAP）检测星形胶质细胞表达变化,并定量分析。结果与对照组相比,CCI手术组热痛阈和机械痛阈从CCI手术后第4天开始下降（P＜0.05）;前后给药对照剂组与CCI组相比,差别无统计学意义（P＞0.05）。前给药组痛阈从CCI手术后第4天开始上升并持续至手术后第14天,与CCI组相比,差别有统计学意义（P＜0.05）。与CCI组相比,后给药组痛阈从CCI第8天开始上升并持续至手术后第14天,差别有统计学意义（P＜0.05）。与正常对照组比较,CCI组、前、后对照剂组手术侧脊髓背角GFAP染色阳性区平均光密度与阳性面积均有增加,差别有统计学意义（P＜0.05）。前、后给药组手术侧GFAP染色阳性区平均光密度与阳性面积与CCI组比较,均有明显降低,差别有统计学意义（P＜0.05）。结论鞘内注射雷帕霉素可缓解大鼠神经病理性痛,并抑制脊髓背角胶质细胞的激活。