结核患者不同标本中结核杆菌DNA的检测

为提高不典型结核患者的诊断符合率，寻求结核病理想的实验室诊断技术，还用合酶链反应抚育地６０例结核病患者７种（１２５份）不同标本中的结核杆菌ＤＡ进行了检测。结果显示痰液、胸水中的ＤＮＡ阳性率较高（分别为５４％、４９．２５％），血清中的ＤＮＡ阳经仅为２８％，其原因主要与不同标本中存在的结核杆菌数目的多少有关。同一标本被检测两次（复检），阳性例数较前有所提高，这样可使有结果得到及时纠正。如果同一患者多种     

快速提取临床标本中结核杆菌DNA方法的研究

介绍了二种快速、简便从临床结核性痰标本及体腔液标本中提取ＤＮＡ的方法，４０例结核性标本ＰＣＲ扩增结果：加热碱裂解法阳性率为６７．５％（２７／４０）；溶菌酶法阳性率是６０％（２４／４０）。二种方法经统计学处理，ＰＣＲ阳性率之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。这些方法中，我们省去了传统的酚抽提及蛋白酶Ｋ的作用步骤，使提取ＤＮＡ能在１小时内完成，适用于临床推广。     

DNA探针板杂交法检测临床标本中结核杆菌的应用

目的：在酶标板上进行ＤＮＡ探针杂交,评价其在检测临床标本中结核杆菌的应用价值。方法：收集７１份结核性标本和３２份非结核性标本,进行ＤＮＡ扩增,把扩增产物分别进行电泳和ＤＮＡ探针杂交,比较其结果。结果：７１份结核性标本电泳法阳性率为４５１％,ＤＮＡ探针法阳性率为６９０％;３２份非结核性标本二者均为阴性。结论：ＤＮＡ探针杂交可提高临床标本中结核杆菌的阳性检出率,是结核病早期诊断的一种新方法。     

聚合酶链反应检测胸水结核杆菌DNA

应用聚合酶链反应技术检测４３例结核性胸水和２１例非结核性胸水，并与涂片镜检和分离培养方法比较，结果，结核性胸水ＰＣＲ阳性率６２．７８％，涂片镜检１３．９５％，培养６．９７５，非结核性胸水有１例ＰＣＲ检测阳性，另两种方法均阴性，表明ＰＣＲ具有早期，快速，高特异和高敏感性等优点，是检测胸水结核杆菌的有力手段。     

结核杆菌DNA聚合酶链反应技术的应用

结核杆菌ＤＮＡ聚合酶链反应技术的应用李秀珍莫英曼（贵阳医学院附院肺内科贵阳５５０００４）结核病是长期以来危害人类健康的常见病，以往结核病的实验室检查依赖于涂片和培养，现在由于免疫学和分子生物学在医学领域中的应用，使结核病诊断的准确性有了很大程度的提高...     

PCR快速检测结核杆菌的临床应用

本文应用聚合酶链反应技术对２８５例痰液、９２例胸水、３８例脑脊液标本中的结核杆菌进行了快速检测。ＰＣＲ法的敏感性为１００％，阳性率分别为２７．４％、２１．７％、１８．４％，明显高于浓缩集菌涂片法，另外对２５例结核病患者痰标本用酶法和热裂解法提取结核杆菌ＤＮＡ获得了相同的敏感性。     

PCR技术检测结核杆菌的进展

用聚合酶链反应(polymeras chain reaction，PCR)技术检测结核杆菌的报道国外始见于1989年；10多年来，应用分子生物学技术检测结核杆菌的研究工作取得了许多进展，部分已应用于临床，近年来，在一般PCR扩增技术的基础上，开发了若干更加敏感的新方法。     

聚合酶链反应对结核杆菌DNA重复序列的检测

本文用聚合酶链反应(PCR)检测结核杆菌(TB)DNA,在TB染色体DNA中的一个片段多次重复出现,将此片段作为靶DNA,用PCR技术进行扩增。引物的DNA核苷酸序列为5’CCT GCG AGC GTA GGC GTC GG3’和5’CTC GTC CAG CGC CGC TTC GG3’在反应中用94℃变性,68℃退火延伸,43个循环可将1fgTBDNA扩增到能通过凝胶电泳检测出其特异性产物,此产物在作为对照的其他细菌中不能检出,加入100ng人基因组DNA对检测效果无影响。本方法为快速、敏感、特异地检测临床标本中的TB打下了基础。     

聚合酶链反应检测HBV与结核杆菌DNA假性结果原因探讨

聚合酶链反应 (ＰＣＲ)检测ＨＢＶ、结核杆菌具有特异性强、灵敏度高、检测时间短等优点。在乙肝、结核的诊断中起到日益广泛的重要作用。但是在实际工作中 ,由于影响因素较多 ,仍然存在假阳性和假阴性结果。我们针对ＰＣＲ检测中ＨＢＶ、ＴＢ、ＤＮＡ常见的几种假性结果分析判     

PCR技术检测胸腹水中结核杆菌

采用ＰＣＲ技术对５６份临床胸腹水标本进行结核菌ＤＮＡ检测。结果；２０例肝硬变，肝癌，肾病等非结核性胸腹水ＴＢ－ＤＮＡ均呈阴性，而３６例临床已确诊为结核性胸膜炎，结核性腹膜炎的腹水中ＴＢ－ＤＮＡ阳性率为６９．４４％，且可在当天完成人武部实验。     

应用PCR技术检测结核标本的评价

应用ＰＣＲ技术检测结核标本的评价熊鸿燕（第三军医大学医疗医学系流行病学教研室）６３００３８薛强（第三军医大学西南医院检验科）６３００３８近年来结核病（ＴＢ）在人群中的发生频率上升，成为当今世界一严重的健康问题［１］时诊断、治疗病人，防治疾病的传播，临...     

应用聚合酶链反应检测血清中结核杆菌DNA的探讨

应用聚合酶链技术对８９例肺部病人血清中结核杆菌ＤＮＡ进行检测。结果表明ＰＣＲ－ＴＢ－ＤＮＡ检出率为７２％。其中７８例确为肺结核的病人的检出率为８３％。由此可见了血清ＰＣＲ－ＴＢ－ＤＮＡ有罗高的应用价值。     

聚合酶链反应结合DNA探针杂交在结核杆菌检测中的应用

应用PCR和Southern转移、光敏生物素标记DNA探针杂交技术进行了结核杆菌检测的应用研究。实验结果表明PCR结合探针杂交可将PCR敏感性提高100倍,但不影响其特异性。106例结核性痰标本PCR检测阳性率为46.2％,结合探针杂交达76.4％,涂片阴性的标本差异尤为明显,因而显著提高了结核阳性诊断变率。21例非结核性痰标本PCR和探针杂交未发现假阳性。对临床可疑而PCR阴性标本有必要合用DNA探针杂交。     

影响结核杆菌PCR结果准确性的因素

自从1989年聚合酶链反应(PCR)应用于结核杆菌检测以来，该技术已广泛应用于结核病的诊断并显示出很多优点；但在临床应用时也遇到了不少问题，如假阳性、假阴性、污染等。如何去除影响结果准确性之因素，是国内外学者普遍关注的问题，现将影响PCR结果准确性的因素做一总结。     

应用嵌套式PCR法检测结核杆菌DNA

应用嵌套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）法检测结核菌ＤＮＡ，所用内、外两对寡核苷酸引物衍生于３７．７ｕ（３８ｋＤａ）蛋白抗原ｂ的编码（Ｐａｂ）ＤＮＡ序列。对６种抗酸分枝杆菌和１０种非分枝杆菌ＤＮＡ进行扩增，经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色证实，只有人型结核杆菌、牛型结核杆菌和卡介苗（ＢＣＧ）出现３２２ｂｐ特异扩增带，而其他菌种未见此种扩增。第１步和第２步ＰＣＲ分别检测到的最低限量为１０ｐｇ和１０ｆｇ的靶ＤＮＡ。采用此法检测７２份临床标本，结果显示：该技术具有特异性强、敏感性高、快速简便的优点，尤适用于肺内外结核的早期诊断。