m6A修饰相关基因IFIT5与系统性红斑狼疮疾病的关联研究

目的 N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine, m6A)修饰通过调节mRNA表达及功能参与免疫炎症过程逐渐被报道,但在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)中研究有限。故本研究将初步探索m6A修饰相关mRNA表达与SLE的关联及影响。方法 利用实时定量聚合酶链反应和蛋白质印迹实验验证m6A修饰相关干扰素诱导蛋白5(interferon induced protein with tetratricopeptide repeats 5,IFIT5)在SLE患者T淋巴细胞(T细胞)中表达情况;进一步分析IFIT5差异表达与患者临床表现和临床用药之间的关系。构建干扰和过表达IFIT5的Jurkat细胞系,流式细胞术分析T细胞表型及相关细胞因子表达情况。结果 与正常对照相比,SLE中高表达的IFIT5上m6A修饰显著增强;患者T细胞中IFIT5基因表达和蛋白水平均上调(均P<0.05),且与SLE患者疾病活动程度有关(r_s=0.388,P=0.028)。Jurkat细胞实验发现,敲低IFIT5显著抑制细胞增...     

N6-甲基腺苷通过miR-155参与肺腺癌细胞对三氧化二砷的耐受性

目的 探讨N6-甲基腺苷是否通过影响miR-155的水平参与肺腺癌细胞对三氧化二砷的耐受性。方法 以肺腺癌亲本细胞系（A549）和课题组前期研究中构建的耐三氧化二砷的肺腺癌细胞株（A549R）为研究对象,以m6A RNA 甲基化定量检测试剂盒检测亲本细胞和耐砷细胞中总RNA上的m6A水平;免疫印迹法检测甲基转移酶METTL3的蛋白水平;以METTL3 siRNA敲低METTL3的水平后,检测耐砷细胞总RNA上的m6A水平,并采用荧光定量PCR法检测miR-155基因表达量。结果 与亲本肺腺癌细胞（A549）相比,耐砷细胞（A549R）总RNA上的m6A修饰水平增加,甲基转移酶METTL3的蛋白水平升高;与相应的阴性对照细胞相比,耐砷细胞中的METTL3蛋白表达水平降低后,总RNA上的m6A修饰水平下降,同时miR-155表达量也随之降低。结论 高水平的METTL3可催化m6A修饰的形成,进而通过影响miR-155的表达参与肺腺癌细胞对三氧化二砷的耐受性。     

N6-甲基腺苷在三氧化二砷抑制肝癌细胞生长中的作用研究

目的 探讨RNA 上的N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine, m6A）修饰在三氧化二砷（Arsenic Trioxide,ATO）抑制肝癌细胞生长中的作用,为ATO抗肝癌的作用机制研究提供新思路。方法 以人肝癌细胞HepG2 为研究对象,用不同浓度ATO处理细胞24 h,采用MTT实验检测细胞存活率,m6A RNA 甲基化定量检测试剂盒测定RNA上的m6A修饰水平,同时用荧光定量PCR法检测m6A相关酶（METTL3/METTL14/WTAP/FTO/ALKBH5）的mRNA水平。结果 随ATO浓度的增加,细胞存活率逐渐下降,与对照组相比差异具有统计学意义（P＜0.05）。同时,RNA上的m6 A修饰水平随ATO浓度增加而逐渐升高,在5、10和20 μM ATO处理组中,m6A修饰水平分别为对照组的1.81、3.11和4.08倍。此外,5、10和20 μM ATO处理后,3种m6A甲基转移酶（METTL3/METTL14/WTAP）的mRNA表达水平显著升高,METTL3分别为对照组的1.27、2.26和2.31倍,METTL14分别为对照组的2.38、6.95和9.07倍,WTAP分别为对照组的1.71、2.39和2.62倍;2种去甲基化酶的mRNA水平也呈增加的趋势,其中FTO分别为对照组的1.29、2.17和2.60倍,ALKBH5分别为对照组的1.29、1.63和2.13倍。结论 m6A 及其相关酶在ATO抑制肝癌细胞生长中具有重要作用。     

亚砷酸钠诱导的活性氧增加人皮肤细胞N6 -甲基腺苷水平

目的 探究亚砷酸钠诱导的活性氧是否影响N6 -甲基腺苷（m6A）水平,从RNA表观遗传学角度探讨亚砷酸钠的毒性机制。方法 以亚砷酸钠作为活性氧诱导剂,以N -乙酰半胱氨酸作为活性氧清除剂,检测细胞在亚砷酸钠单独处理和亚砷酸钠联合N -乙酰半胱氨酸处理情况下皮肤细胞活性氧积累情况,同时测定m6A及其甲基化酶的mRNA和蛋白水平的改变。结果 在5、10和15 μM的亚砷酸钠处理下,活性氧含量随砷浓度升高而增加;在亚砷酸钠染毒浓度为15 μM时,细胞内总m6A水平水平相比于对照组升高了1.49倍（P＜0.05）,m6A甲基化酶（METTL3、METTL14和WTAP）mRNA表达水平相应升高（P＜0.05）,METTL14和WTAP蛋白表达水平分别为对照组的1.47倍和1.85倍（P＜0.05）。N -乙酰半胱氨酸可以降低异常升高的活性氧、m6A以及其甲基化酶水平。结论 亚砷酸钠诱导的活性氧能增加人皮肤细胞m6A的修饰水平,其机制可能与上调m6A甲基化酶表达水平有关。     

N6-甲基腺苷参与砷致人体肺癌过程的生物信息学分析

目的 探究N6-甲基腺苷(m6A)修饰参与人体砷暴露致肺癌的可能性,为m6A修饰在预防与控制砷致癌的作用及机制研究提供线索。方法 从GEO数据库获取29份饮水砷暴露志愿者RNA表达谱数据与氧化应激的人源细胞样本表达谱数据,采用差异基因分析工具GEO2R筛选差异表达基因,并通过ClueGO和DAVID系统对差异表达基因进行功能注释;从癌症基因组图谱数据库获取59份正常志愿者基因表达谱数据与515份肺腺癌患者基因表达谱数据,采用Ualcan分析系统对肺腺癌患者m6A相关酶的表达水平以及预后进行分析。结果 RNA代谢过程与甲基转移酶活性分别是砷暴露差异表达基因的生物过程和分子功能;转录调节是砷暴露与其公认机制氧化应激共同的差异表达基因的生物过程;相比于健康志愿者,m6A甲基化酶(METTL3)与介导m6A修饰基因翻译的m6A结合蛋白(YTHDF1)在早期肺腺癌患者的表达明显升高( P <0.05),同时,其他m6A甲基化酶(METTL14与WTAP)与去甲基化酶(FTO)明显下调( P <0.05);m6A去甲基化酶FTO表达水平的高低与肺腺癌患者的预后密切相关( P <0.05)。结论 m6A修饰可能参与人体砷暴露致肺癌的过程并受到m6A甲基化酶、去甲基化酶与m6A结合蛋白的影响。     

LncRNA和m6A在镉致胰岛β细胞损伤中的相关性研究

目的 了解N6-甲基腺苷和LncRNA如PVT1、ANRIL和MALAT1等是否参与镉诱导的胰岛β细胞损伤以及LncRNA和m6A在该过程中的相关性。方法 采用CCK8实验检测细胞存活率,采用Hoechst染色观察细胞凋亡形态,利用实时荧光定量PCR实验检测mRNA和LncRNA水平,采用比色法检测总RNA上的m6A水平。结果 随硫酸镉染毒浓度的增加,细胞存活率下降,死亡的细胞呈凋亡形态;在硫酸镉浓度为2 μmol/L和4 μmol/L时,与对照组相比,催化m6A修饰形成的甲基转移酶样3和甲基转移酶样16的mRNA水平下降（P<0.05）,相应的总RNA上的m6A修饰水平与对照组相比也降低（P<0.05）;3个LncRNA（PVT1、ANRIL和MALAT1）的水平随硫酸镉染毒浓度的增加而下降（P<0.05）,且这种下降趋势与m6A修饰水平的变化呈正相关。结论 硫酸镉暴露能明显诱导胰岛β细胞损伤,PVT1、ANRIL和MALAT1等LncRNA和m6A修饰均参与镉致胰岛β细胞损伤的过程,且在该损伤过程中LncRNA和m6A修饰水平呈正相关。     

m6A修饰在女性生殖发育及相关疾病中的研究进展

N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine, m6A)修饰是由m6A甲基转移酶、去甲基化转移酶、阅读蛋白进行调控的一种RNA转录后水平修饰, 在最为广泛, 且在哺乳动物的生殖发育中发挥重要作用。一方面, m6A修饰调控着卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中RNA的代谢过程;另一方面, m6A修饰与卵巢和子宫疾病密切相关, 尤其是妇科肿瘤, m6A修饰影响着肿瘤细胞的增殖和迁移。本文对m6A修饰在女性生殖生理及其相关疾病中的研究进展做一综述, 旨在为临床治疗提供新的思路。     

HIF1α通过启动ALKBH5调控整合素蛋白αν表达的机制研究

目的探索缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α, HIF1α)启动N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine, m6A)去甲基化酶ALKBH5改善子宫内膜容受性分子标志物整合素蛋白αν(integrin αν, ITGAV)表达的内在机制。方法利用人子宫内膜癌Ishikawa细胞, 低氧以及干扰HIF1α条件下实时荧光定量PCR(real time quantity PCR, RT-PCR)或Western blotting检测ALKBH5的表达;过表达或干扰ALKBH5表达后, RT-PCR或Western blotting检测对ITGAV基因和蛋白表达的影响;荧光素酶报告基因系统分析miR-136-5p靶向ITGAV mRNA表达;RNA pull-down分析及m6A甲基化检测ALKBH5与miR-136-5p竞争性结合ITGAV mRNA上甲基化位点序列。结果低氧条件下HIF1α时间依赖性促进ALKBH5蛋白在Ishikawa细胞中的表达。过表达ALKBH5后, ITGAV的表达水平升高(P<0.001), Ishikawa细胞...     

m6A甲基化修饰在精子发生中的研究进展

N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine, m6A)甲基化作为真核生物中最常见的RNA修饰, 通过甲基化转移酶、去甲基化酶、甲基化识别蛋白三种调控因子参与多种细胞进程和疾病进展。近年来的研究表明m6A甲基化修饰参与了精子发生的整个过程, 其失调造成的生精障碍可能导致男性不育。本文就m6A调控因子在睾丸中的时空表达、m6A甲基化在精子发生中的作用机制以及m6A甲基化调控异常与男性不育等方面的研究进展作一综述, 旨在为男性不育的基础研究和临床治疗提供参考。     

有机磷阻燃剂TDCIPP诱导的m6A修饰引发雄性小鼠生殖毒性

目的 探讨TDCIPP染毒致雄性C57BL/6小鼠生殖毒性的机制。 方法 将24只4周龄C57BL/6小鼠根据体重随机分为四组,即5、25、125 mg/(kg·d) TDCIPP暴露组和玉米油对照组,灌胃染毒28 d后,HE染色观察小鼠睾丸组织形态学结构、附睾尾精子形态,并计算精子数量和畸形率;评估m6A修饰水平及m6A甲基转移酶（Mettl3、Mettl14、Wtap基因）、去甲基化酶（Alkbh5、Fto基因）mRNA水平;采用m6A - seq测序技术分析125mg/(kg·d) TDCIPP暴露后睾丸组织发生了m6A甲基化的基因差异表达情况;Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase - 3、Bax、Bcl - 2的表达。 结果 与对照组相比,TDCIPP暴露组小鼠睾丸组织结构均发生破坏;25和125 mg/(kg·d) TDCIPP暴露组附睾尾精子数量下降（P＜0.01）、精子畸形率上升（P＜0.01）,存在剂量 - 效应关系。125 mg/(kg·d) TDCIPP暴露组小鼠睾丸组织的RNA m6A修饰水平和Mettl14基因mRNA表达水平显著增加（P＜0.01）;m6A - seq测序发现差异表达基因主要富集在凋亡、RAP1、PI3K/AKT、MAPK等信号通路;Caspase - 3蛋白水平在各暴露组均上升（P＜0.001）,Bax/Bcl - 2比值在25和125 mg/(kg·d) TDCIPP暴露组上升（P＜0.001）,均存在剂量 - 效应关系。 结论 TDCIPP暴露可诱导小鼠睾丸组织内甲基转移酶METTL14介导的m6A甲基化修饰异常,进而引发雄性小鼠生殖毒性。     

砷对Keap1基因沉默的人皮肤角质细胞砷甲基化代谢酶表达的影响研究

目的砷对Keap1基因沉默的人皮肤角质(Ha Ca T)细胞砷甲基化代谢酶表达的影响。方法实验共五组,A组为正常Ha Ca T细胞,B、C、D、E组为模型细胞。A、B组不给砷,C、D、E组给予不同浓度的砷。五组细胞在8h、24h、48h、72h,用实时荧光定量PCR(q PCR)检测核转录因子红胞系-2p45(NF-E2)相关因子-2(Nrf2)、KELCH样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、三价砷甲基转移酶(As3MT)、N-6-腺嘌呤DNA甲基转移酶1(N6AMT1)的基因表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞内同型半胱氨酸(HCY)、S-腺苷甲硫氨酸(SAM)、As3MT、N6AMT1的蛋白浓度。结果(1)QPCR结果发现:与A组比,抑制Keap1基因使细胞中N6AMT1基因表达在8h、24h、48h表达上调(P0.05)。与B组比:砷浓度2.9μmol/L,8h、72h N6AMT1、24h As3MT基因表达上调(P0.017),8h、72h As3MT、24h N6AMT1基因表达下调(P0.017);砷浓度5.8μmol/L,8h N6AMT1、48h As3MT基因表达上调(P0.017),8h As3MT、48h N6AMT1基因表达下调(P0.017)。砷浓度29μmol/L时,24h N6AMT1基因表达下调(P0.017),As3MT基因表达上调(P0.017)。(2)ELISA结果发现:与B组比,砷浓度≤5.8μmol/L SAM、HCY蛋白表达上调(P0.0125);砷浓度29μmol/L抑制SAM、HCY蛋白的表达下调(P0.0125)。结论 N6AMT1在抗氧化中发挥重要作用;在砷代谢中,As3MT、N6AMT1表达保持动态平衡;长时间、高浓度的砷会造成砷代谢障碍。     

双酚A对MCF-7细胞内DNA甲基化的影响

目的探讨双酚A对MCF-7细胞内整体DNA甲基化水平及甲基化转移酶的影响。方法分别将浓度为10-6mol/L、10-7mol/L的双酚A作用于MCF-7细胞72 h后,免疫荧光法测5-甲基胞嘧啶的含量,RT-PCR法测DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达。结果双酚A(10-6mol/L、10-7mol/L)作用72 h后,与溶剂对照组(0.1%DMSO)相比,5-甲基胞嘧啶的含量下降,差异有统计学意义(P0.05);RT-PCR结果表明浓度为10-6mol/L双酚A处理组的DNMT1的mRNA的表达下降,10-6mol/L、10-7mol/L双酚A组的DNMT3A和DNMT3B的mRNA的表达均增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论双酚A能够引起MCF-7细胞整体DNA甲基化水平下调,其机制可能是通过改变甲基化转移酶的表达来实现。     

miR-212-3p在乙肝病毒感染诱导的巨噬细胞激活中的作用机制

目的 探究miR-212-3p在乙肝病毒感染诱导的巨噬细胞激活中的作用及其机制。方法 CCK-8法检测不同浓度乙型肝炎E抗原(HBeAg)刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞活力,分别转染miR-212-3p mimic和miR-212-3p inhibitor,检测miR-212-3p mRNA相对表达量、细胞活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平及mRNA相对表达量,采用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂预处理细胞后再用HBeAg刺激,检测PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路蛋白表达。结果 RAW264.7细胞活力随HBeAg浓度增加而上升(P<0.05),HBeAg浓度为2 000 ng/ml时细胞活力最高,miR-212-3p mRNA相对表达量上调,24 h时达到峰值,随后降低(P<0.05); HBeAg刺激后,转染miR-212-3p mimic的细胞中miR-212-3p的mRNA相对表达量上调(P<0.05),且IL-6、TNF-α水平和mRNA相对表达量上升(P<0.05);渥曼青霉素预处理RAW264.7细胞后m...     

miR-374a-3p靶向Syk对ox-LDL诱导内皮细胞损伤及炎症反应的影响

目的探讨miR-374a-3p对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤及炎症反应的影响及作用机制。方法实验分为ox-LDL组、对照(Con)组、miR-NC组、miR-374a-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-374a-3p组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-374a-3p组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-Syk组、ox-LDL+miR-374a-3p+pcDNA3.1组、ox-LDL+miR-374a-3p+pcDNA3.1-Syk组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-374a-3p表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)检测脾酪氨酸激酶(Syk)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;荧光素酶报告实验检测miR-374a-3p和Syk的靶向关系。结果 ox-LDL作用的HUVEC中miR-374a-3p低表达,Syk高表达;细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.05)。过表达miR-374a-3p和抑制Syk表达抑制ox-LDL作用的HUVEC凋亡和炎症因子TNF-α、IL-6的释放。miR-374a-3p靶向调控Syk,过表达Syk逆转了miR-374a-3p对ox-LDL作用的HUVEC损伤及炎症因子释放的抑制作用。结论过表达miR-374a-3p可抑制HUVEC凋亡和炎症因子的释放,保护ox-LDL引起的HUVEC损伤及炎症反应,其机制可能与Syk有关。     

委陵菜酸对小鼠急性肝损伤保护作用

目的观察委陵菜酸(TA)对脂多糖(LPS)/D-半乳糖胺(D-Gal N)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其可能机制。方法雄性C57BL/6小鼠90只,随机分为对照组、模型组、阳性对照组及委陵菜酸低、中、高剂量组,各组小鼠分别灌胃给予受试物,连续3 d,末次给予受试物8 h后,除对照组外,其余小鼠腹腔注射LPS/D-Gal N,1.5 h后眼球取血,6 h后处死小鼠,取肝脏,观察肝组织损伤程度;采用试剂盒测定小鼠血清中门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10水平;RT-PCR法检测TNF-α和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)基因表达;ELISA法测定NF-κB p65蛋白含量;Western blot法检测细胞色素C和Bcl-2含量;另外,取肝组织匀浆检测caspase-3、8、9活性。结果与对照组比较,模型组小鼠ALT、AST、TNF-α、NO含量[分别为(1 833.5±125.4)、(2 183.5±138.9)U/L、(656.8±64.7)pg/m L、(205.28±16.79)μmol/L]明显升高(P0.05),肝脏中NF-κB p65表达[(228.9±14.2)pg/mg]升高、Bcl-2蛋白表达(0.18±0.03)下降、Caspase-3蛋白表达(275.3±14.7)升高(P0.05);与模型组比较,委陵菜酸3 mg/kg组小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、NO含量[分别为(991.3±70.2)、(968.5±68.6)U/L、(226.5±35.9)pg/m L、(133.69±9.79)μmol/L]明显降低(P0.05)、肝脏中NF-κB p65表达[(151.2±6.5)pg/mg]降低、Bcl-2蛋白表达(0.35±0.02)升高、caspase-3蛋白表达(156.3±5.9)下降(P0.05)。结论委陵菜酸可保护LPS/D-Gal N诱导的小鼠急性肝损伤,其机制可能与抑制NF-κB信号通路减轻炎症反应、抑制凋亡蛋白表达、继而减少细胞凋亡有关。     

SLC4A11通过JAK信号通路对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨溶质转运家族4成员11蛋白(SLC4A11)在卵巢癌增殖、迁移和侵袭中的生物学作用机制。方法：RT-qPCR检测卵巢癌细胞中SLC4A11表达。将SKOV3细胞分为对照组(转染siRNA-NC序列)、SLC4A11-siRNA组(干扰SLC4A11表达)和SLC4A11-siRNA+JAK组(干扰SLC4A11表达+激活JAK信号通路)。采用CCK-8、伤口愈合实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。RT-qPCR和Western blot检测Janus激酶2(JAK2)和信号传导及转录激活因子3(STAT3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)表达。结果：SLC4A11在卵巢癌组织中高表达(P<0.05)。SLC4A11-siRNA组SKOV3细胞中p-JAK2/JAK2(0.286±0.048)、p-STAT3/STAT3(0.571±0.042)、Bcl-2(0.335±0.040)均低于对照组(1.001±0.093、1.004±0.089、1.005±0.142),也低于SLC4A11-siRNA+JAK组[p-JAK2/JAK2(1.001±0...     

微小RNA-574-3p在结肠癌中的表达和临床意义

目的研究微小RNA-574-3p(miR-574-3p)在结肠癌中的表达和临床意义。方法选取2012年6月至2015年6月秦皇岛市第一医院和石家庄市中医院收治的结肠癌患者106例作为研究对象。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结肠癌组织和癌旁正常组织miR-574-3p的表达水平。分析miR-574-3p表达与结肠癌患者临床病理特征及预后的关系。免疫组织化学染色法检测miR-574-3p表达与细胞周期蛋白A2(CyclinA2)或E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的关系。结果相较于癌旁正常组织, 106例结肠癌组织miR-574-3p表达水平显著更低(P<0.01)。miR-574-3p表达降低与肿瘤长径、Dukes分期、组织学分级及淋巴结转移有关(均P<0.05), 与年龄和肿瘤位置无关(均P>0.05)。miR-574-3p表达降低、Dukes分期和组织学分级高、淋巴结转移的患者生存情况较差(均P<0.05)。癌组织miR-574-3p表达降低的患者5年总体生存率明显低于miR-574-3p表达未降低的患者(P=0.007 6)。与miR-574...     

前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子、miRNA-15a、miRNA-34b和miRNA-103及CYP1A2基因多态性研究

目的探讨前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子、微小RNA(microRNA,miRNA)-15a、miRNA-34b和miRNA-103及CYP1A2基因多态性相关性。方法选择浙江省医疗健康集团杭州医院于2017年7月-2019年7月收治的前列腺增生症患者112例,均行经尿道前列腺等离子双极电切术(Transurethral plasmakinetics resection of prostate,TUPKRP),根据是否发生术后尿路感染分为感染组(n=27)与非感染组(n=85)。分析两组患者血清炎症因子,外周血miRNA-15a、miRNA-34b和miRNA-103表达,及CYP1A2基因多态性变化。结果感染组血清CRP、TNF-α、IL-6和PCT水平高于非感染组(P<0.05)。感染组外周血miRNA-15a表达低于未感染组,而miRNA34b和miRNA103表达高于未感染组(P<0.05)。感染组CYP1A2基因位点rs2069514-3859等位基因A分布高于非感染组,而G分布低于非感染组(P<0.05)。感染组CYP1A2基因位点rs20695143859基因型AA分布高于非感染组(P<0.05)。结论前列腺增生症术后尿路感染患者血清炎症因子CRP、TNF-α、IL-6和PCT水平升高,血miRNA-15a低表达及miRNA34b和miRNA103高表达参与了术后尿路感染发生、发展,且CYP1A2基因位点rs20695143859等位基因A可能为术后尿路感染易感基因。     

系统性红斑狼疮患儿外周血IL-6、IL-10、IL-17水平变化及其在单个核细胞中的表达研究

目的研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患儿外周血中白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)水平的变化情况及其在外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中的表达情况。方法选取46例SLE患儿及20例健康儿童分别为病例组(SLE组)和对照组(Control组),采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血中IL-6、IL-10、IL-17蛋白水平,采用实时荧光定量PCR(quantitative real time polymerse chain reaction,q PCR)技术检测PBMCs中IL-6、IL-10、IL-17的m RNA表达水平,分析比较2组的蛋白和m RNA表达量的差异。结果 SLE组IL-6、IL-10、IL-17蛋白及m RNA表达水平均高于Control组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 SLE患儿外周血中IL-6、IL-10、IL-17蛋白及m RNA表达水平升高,提示其可能参与SLE患儿的发病过程。     

微囊藻毒素-LR对小鼠肝细胞DNA甲基化的影响

目的研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)暴露对小鼠肝细胞DNA总体甲基化水平及DNA甲基转移酶(DNMTs)mRNA表达的影响。方法将40只健康SPF级昆明小鼠随机分为4组,分别为对照组(含0.02%DMSO)和5、10、20μg/kg MCLR染毒组,每组10只,雌雄各半。采用腹腔注射方式进行染毒,连续染毒20 d。采用高效液相色谱(HPLC)法检测小鼠肝细胞DNA中的脱氧胞苷和5-甲基脱氧胞苷含量,并计算DNA的总体甲基化水平;采用实时荧光定量PCR法检测DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B m RNA的表达水平。结果 10、20μg/kg MC-LR染毒组小鼠肝细胞DNA总体甲基化水平,DNMT1、DNMT3A及DNMT3B mRNA的表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。小鼠肝细胞DNA总体甲基化水平与DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA表达水平均呈正相关(P0.05)。结论 MC-LR可抑制小鼠肝细胞DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA的表达,降低DNA总体甲基化水平。