肺炎支原体社区获得性呼吸窘迫综合征毒素及其转运机制的研究

肺炎支原体是引起人类呼吸系统疾病的非典型病原体,能导致包括咽炎、气管支气管炎和社区获得性肺炎(CAP)。它也与气道高反应性、哮喘,甚至急性呼吸窘迫综合征(ARDS)密切相关。在其定植期间,肺炎支原体表达独特的ADP-核糖基化和空泡细胞毒素,被称为社区获得性呼吸窘迫综合征(CARDS)毒素。在CAP患者,哮喘患者和呼吸机相关性肺炎创伤患者中,CAR DS毒素持续存在并定位于气道中,目前研究已明确CARDS毒素与特定的细胞受体结合,被内化,并且诱导气道高反应性,黏液增生和其他气道损伤。但它在细胞内转运的机制仍不清楚。本综述的结果提示CARDS毒素通过早期和晚期细胞核内体和高尔基复合体转运,并集中在核周区达到内质网(ER)。使用ER靶向的SNAP标签证实了CARDS毒素与ER的关联,并确定CARDS毒素遵循逆行途径。此外,研究发现确定了一种新的CARDS毒素氨基酸指纹KELED,这是毒素转运到ER所必需的,即介导细胞毒性的毒素。     

儿童难治性支原体肺炎肺泡灌洗液中白三烯水平研究

目的检测难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中LTB4及CysLTs水平,探讨RMPP患儿病变局部白三烯水平的变化及其意义。方法选择RMPP患儿(42例)为研究对象。根据是否有湿疹、过敏性鼻炎、荨麻疹及相关过敏性疾病家族史等将42例RMPP患儿分为特应性组(11例)和非特应性组(31例)。以同期因支气管异物在该院住院,异物取出4周后纤维支气管镜复查的患儿为对照(12例)。对RMPP患儿及对照患儿BALF中细胞学成分进行分析,并采用ELISA方法检测BALF中LTB4及CysLTs水平。同时测定BALF标本的蛋白含量。结果与对照组比较,RMPP组患儿BALF中细胞总数上升(P<0.05),其中以中性粒细胞上升为主(P<0.01);RMPP组患儿BALF中LTB4及CysLTs较对照组儿童均有升高,其中LTB4显著升高(P<0.05),且中性粒细胞百分比与LTB4浓度呈正相关(γ=0.742,P<0.01)。特应性组及非特应性组BALF中CysLTs较对照组差异无显著性(P>0.05)。特应性组较非特应性组BALF中CysLTs有显著升高(P<0.05)。特应性组及非特应性组BALF中LTB4较对照组均有升高,以特应性组升高为甚,各组间两两相比,差异均有显著性(P<0.05)。结论 RMPP患儿BALF细胞数显著增加,尤以中性粒细胞为甚,LTB4可能参与了RMPP患儿气道炎症的变化调节。在具有特应性体质患儿LTB4的水平高于非特应性体质者。RMPP患儿BALF中CysLTs升高不明显;但具有特应性体质患儿CysLTs含量升高明显,提示CysLTs的水平可能与机体的过敏状态相关。     

纤维支气管镜对儿童难治性肺炎支原体肺炎诊治价值

目的 探讨儿童难治性肺炎支原体肺炎(PMPP)纤维支气管镜镜下常见形态学改变,灌洗液细胞学成分特点,观察支气管肺泡灌洗治疗效果.方法 回顾性总结28例RMPP镜下常见形态学改变及灌洗液细胞学成分特点;比较支气管肺泡灌洗与未灌洗者临床疗效及转归.结果 28例PMPP患儿镜下均见病变部位支气管黏膜肿胀充血,可见多少不等的粘性分泌物.灌洗液细胞学成分分析结果显示,与对照组相比,RMPP惠儿细胞总数上升(P<0.05),其中以中性粒细胞上升为主(P<0.05).行灌洗RMPP患儿痊愈率(81.07%)显著高于未灌洗组(44.40%);行灌洗RMPP患儿肺部啰音出现及消失早;影像学改变恢复好,且较未灌洗组恢复快(P<0.05).结论 RMPP患儿纤维支气管镜镜下形态学特点以及支气管肺泡灌洗液细胞学成分分析对诊断RMPP有一定帮助;纤维支气管镜灌洗对RMPP有治疗作用.     

支气管肺泡灌洗液炎性因子及肺泡表面活性蛋白与新生儿急性呼吸窘迫综合征的关系

目的 观察急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)新生儿支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)炎性因子、肺泡表面活性蛋白(surfactant protein, SP)水平变化,探讨其与新生儿发生ARDS的相关性。方法 需机械通气的ARDS新生儿30例为ARDS组,根据氧合指数分为轻度组(氧合指数4.0～<8.0)11例,中度组(氧合指数8.0～<16.0)12例,重度组(氧合指数≥16.0)7例;因其他疾病需机械通气新生儿25例为对照组。比较ARDS组与对照组应用肺表面活性物质、脓毒症、窒息比率及机械通气时间等。ARDS组于呼吸机上机前、上机24 h时、撤机前,对照组于呼吸机上机前收集BALF,采用ELISA法检测BALF白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-10、IL-17、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、SP-A、SP-D水平;比较上机前ARDS组与对照组及ARDS组上机前、上机24 h时...     

肺炎支原体肺炎患儿肺泡灌洗液病菌量与临床特征相关性研究

目的研究肺炎支原体(MP)肺炎患儿肺泡灌洗液(BALF)中MP-DNA基因拷贝数和患儿病情严重程度的关系。方法选取河北省儿童医院2012年10月至2013年12月收治的82例MP肺炎患儿作为研究对象,行支气管镜下支气管肺泡灌洗(BAL),采用荧光实时定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对肺泡灌洗液中MP-DNA定量检测,并根据检测结果的基因拷贝数分为低菌量组(MP-DNA的拷贝数103/mL的患儿),中等菌量组(MP-DNA的拷贝数为103~106/mL的患儿)和高菌量组(MP-DNA的拷贝数106/mL的患儿)。比较不同菌量组患儿的临床症状、实验室检查结果和影像学结果。结果高菌量组患儿总病程长,高热患儿和热程大于或等于7d的患儿数量均多于中、低菌量组,使用大环内酯类药物后退热时间也较其他两组更长,差异均具有统计学意义(P=0.027、P=0.025、P=0.029、P=0.003)。实验室检查中高菌量组C反应蛋白值升高明显,高于中低菌量组,差异有统计学意义(P=0.005)。影像学检查中高菌量组大片肺实变、肺不张者较、低菌量组多(P=0.002)。低菌量组未见双侧胸腔积液或大量胸腔积液患儿,中高菌量组此症状患儿较多,差异有统计学意义(P=0.033)。结论 MP肺炎患儿BALF病菌量和临床表现密切相关,高菌量组患儿病情更为严重。可能与患儿体内的肺炎支原体不易清除和存在较强的免疫反应有关,临床需延长抗菌药物治疗时间以及加强免疫治疗。     

儿童急性呼吸窘迫综合征肺泡灌洗液中巨噬细胞的动态变化

目的 观察儿童急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺泡灌洗液(BMLF)中肺泡巨噬细胞(AM)的变化规律，评价巨噬细胞在ARDS早期诊断的作用。方法16例患儿在确诊为ARDS后6h检测血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)浓度，并于6h、12h、18h分别收集肺泡灌洗液检查白细胞总数及分类，8例正常儿童及16例肺炎急性期患儿检测血清MIF。并收集一次肺泡灌洗液并作细胞计数和分类。结果ARDS患儿．MIF显著高于正常儿童及肺炎患儿。BALF肺泡巨噬细胞数在ARDS患儿显著高于肺炎儿童组及正常对照组。随着病程推移，ARDS患儿BALF肺泡巨噬细胞肝占比例呈逐渐下降趋势。而白细胞总数及中性粒细胞数(GRAN)所占比例逐渐增高。结论肺泡巨噬细胞可能是ARDS的早期效应细胞，在启动和激活多形核细胞的趋化和炎症的发展中起重要作用。     

白介素-22在肺炎支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中的表达及意义

目的探讨肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白介素-22(interleukin-22,IL-22)的水平及意义。方法选取124例MPP患儿为研究组,另选同期20例行支气管异物取出术的患儿为对照组。根据病情严重程度及影像学表现将MPP患儿分成不同亚组:轻症MPP组和重症MPP组、MPP组肺不张组和非肺不张组、肺实变组和非肺实变组、胸腔积液组和无胸腔积液组。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测所有患儿BALF中IL-22的水平;并采用受试者工作特征(receiver operating characteristics,ROC)曲线分析IL-22对重症MPP的预测价值。结果MPP患儿IL-22水平明显高于对照组(P<0.05);重症MPP患儿IL-22水平明显高于轻症MPP患儿(P<0.05)。影像学表现为肺不张、胸腔积液的患儿IL-22水平均较无相关表现者明显升高(均P<0.05),而肺实变患儿和非肺实变患儿IL-22水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。IL-22对重症MPP的诊断效能较好[AUC(95%CI)=0.788(95%CI:0.705~0.856)],最佳界限值为42.2 pg·mL-1,敏感性为65.91%,特异性为88.75%。结论MPP患儿BALF中IL-22水平升高,与肺不张、胸腔积液等影像学表现及病情严重程度明显相关,且对重症MPP具有一定的诊断价值。     

急性呼吸窘迫综合征患者血清和支气管肺泡灌洗液中白介素-1β的变化

目的 :探讨白细胞介素 1β(IL 1β)在急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)发病中的作用。方法 :用酶联免疫吸附试验检测了 13例 ARDS患者和 9例健康者支气管肺泡灌洗液 (BAL F)和血清中 IL 1β含量。结果 :ARDS患者 BAL F及血清中 IL 1β含量〔分别为 (14 4 .6 7± 80 .79) ng/ L 和 (4 5 .71± 7.0 9) ng/ L〕明显高于对照组〔分别为 (2 0 .39± 1.87) ng/ L 和 (35 .0 6± 5 .4 6 ) ng/ L,P=0 .0 0 0和 P=0 .0 0 1〕,且 ARDS患者 BAL F中IL 1β含量也明显高于血清 (P=0 .0 0 0 )。结论 :IL 1β参与了 ARDS的发病过程 ,早期测定 ARDS患者肺内细胞因子可能比血液或血浆中更有价值。     

社区获得性呼吸窘迫综合征毒素在肺炎支原体致病中的作用

支原体属于柔膜体纲,缺乏细胞壁.支原体由一个小基因组的80万碱基对组成,是最小的能进行自我复制的原核细胞型微生物.肺炎支原体是能够感染人类的最常见的病原体.肺炎支原体是一种非典型呼吸道病原体,可引起儿童和成人的社区获得性肺炎.肺炎支原体感染也与慢性肺部疾病和支气管哮喘有关.随着分子诊断方法和超微结构分析的出现,肺炎支原...     

儿童急性呼吸窘迫综合征与肺炎支原体相关性分析

目的:对于儿童急性呼吸窘迫综合征与肺炎支原体相关性展开探讨。方法:选取我院2014年6月~2015年12月收治的40例肺炎支原体感染患儿临床资料,对于其临床表现、胸部影像学及血气变化情况展开统计;以PCR荧光探针法联合患者临床症状表现对于患儿肺炎支原体感染情况进行分析;最后,对于儿童急性呼吸窘迫综合征与肺炎支原体相关性进行分析。结果:经临床检验、分析,儿童急性呼吸窘迫综合征同肺炎支原体感染初期存在较弱的相关性(P0.05),仅病情严重、危急者才可能致使急性呼吸窘迫综合征(P0.05),所选择的40例患儿中感染初、中期共35例,且8例感染肺炎支原体,5例感染重期患儿均患有急性呼吸窘迫综合征。结论:儿童急性呼吸窘迫综合征具有低患病率、高病死率,对于儿童生命健康造成了极大威胁,肺炎支原体感染严重者与其相关系数较高,能够作为临床判断前症,给予临床诊断及治疗以预警。     

儿童肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液中受体相互作用蛋白激酶3的表达及其与细胞因子的关系研究

目的:探讨肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中受体相互作用蛋白激酶3(receptor-interacting protein kinase-3,RIPK3)的表达水平及其与细...     

纤维支气管镜肺泡灌洗治疗急性呼吸窘迫综合征

目的探讨在急性呼吸窘迫综合征中采用纤维支气管镜肺泡灌洗治疗的临床效果。方法选取平江县第一人民医院2012年2月至2014年3月60例急性呼吸窘迫综合征患者,分为对照组与研究组,每组30例。给予对照组患者常规临床治疗,研究组患者在对照组基础上实施纤维支气管镜肺泡灌洗治疗,分析比较两组的治疗效果。结果对照组22例患者治愈,有效率为73.3%;研究组28例患者治愈,有效率为93.3%,显著优于对照组。研究组治疗的机械通气时间、平均住ICU时间及平均住院时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。结论在急性呼吸窘迫综合征中采用纤维支气管镜肺泡灌洗治疗方案具有更显著的疗效,有利于改善患者的治愈率,安全性高,值得临床推广及应用。     

难治性肺炎支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中IL-4及INF-γ水平的临床分析

为了研究分析对于难治性肺炎支原体（MP）肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中的IL-4、INF-γ水平在临床上应用的意义。对我院2012年10月至2013年10月接受治疗的42例患儿入院资料进行分析,分析报告如下。     

肺泡灌洗液高迁移率族蛋白B1水平在难治性肺炎支原体肺炎患儿预后中的意义

目的 探讨肺炎支原体肺炎(mycoplasmal pneumonia,MPP)患儿肺泡灌洗液中高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在病情进展和肺外损伤中的意义.方法 收集66例MPP患儿为研究对象,同时收集同期行支气管异物取出术的患儿18例为对照组.根据MP P患儿治疗7...     

纤维支气管镜下温生理盐水灌洗肺绵羊急性呼吸窘迫综合征模型的研究

在对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的研究中，传统的整肺温生理盐水支气管肺泡灌洗。造成类似于淹溺所致ARDS模型的方法临床上仍在广泛应用。为了建立稳定、可重复性好的早期ARDS模型，我们采用了纤维支气管镜支气管肺泡灌洗技术，研究此方法建立ARDS模型的可行性，并探讨肺泡灌洗法对绵羊血流动力学及肺力学的影响。     

咽拭子与支气管肺泡灌洗液荧光定量PCR检测儿童肺炎支原体感染分析

目的了解咽拭子标本以及支气管肺泡灌洗液(BALF)标本在肺炎支原体(MP)临床核酸检测、细菌定量以及实验室分离培养中的效果,初步评估咽拭子作为核酸检测及分离培养标本的意义,并评估MP肺炎患儿的同期咽拭子的MP核酸载量能否准确预测出BALF的MP核酸载量。方法采集29例MP肺炎住院患儿的同期咽拭子及BALF,利用人源性β-globin内参基因质控所有标本采集及核酸提取质量,合格标本使用MP荧光定量PCR对同一患儿同期咽拭子及BALF标本中MP进行定量分析,计算两种标本的MP核酸载量。并对所有标本进行MP培养,比较两类标本的MP阳性培养率、细菌污染率。结果标本的β-globin内参基因检测阳性率为100%,咽拭子和BALF标本荧光PCR检测阳性率均为86.2%(25/29),其中咽拭子MP核酸定量范围是3.2×10~2拷贝/ml～1.8×10~7拷贝/ml,BALF为6.8×10~2拷贝/ml～5.4×10~8拷贝/ml。两种方法检测结果一致率为93.1%(27/29)。按照BALF标本MP载量递增排序后,阳性标本的咽拭子载量没有显示出类似的伴随升高趋势。BALF标本培养阳性率为65.5%(19/29),标本污染率为6.9%(2/29);咽拭子标本的MP培养阳性率为51.7%(15/29),标本污染率为51.7%(15/29)。结论咽拭子可以作为MP荧光PCR定性检测标本使用,但其不适合用于MP的定量研究,这说明咽拭子的MP核酸载量与BALF中载量不存在明显的相关性;BALF相比咽拭子标本培养率高、污染率低,更适合MP分离培养研究。     

肺保护性通气对肺内外源性急性呼吸窘迫综合征外周血和肺泡灌洗液中炎性介质影响的比较

目的　观察在肺保护性通气条件下急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)模型犬氧合指数以及外周血和肺不同部位 (肺上区、肺下区腹侧和肺下区背侧 )支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中炎性介质的变化。方法　健康雄性杂种犬 2 4只 ,随机分为肺内源性 ARDS(ARDSp)实验组、ARDSp 对照组、肺外源性 ARDS(ARDSexp)实验组和 ARDSexp对照组 ,每组 6只。采用静脉注射油酸形成 ARDSexp模型 ,应用十六烷磺基丁二酸钠盐气管内吸入形成 ARDSp模型。实验组肺损伤后进行肺保护性通气〔潮气量 8ml/ kg,呼气末正压(PEEP) 10 cm H2 O(1cm H2 O=0 .0 98k Pa)〕;对照组则继续进行大潮气量通气。动态观察肺保护性通气条件下 ARDS模型犬外周血和肺不同部位 (如肺尖叶、肺心叶和肺膈叶 ) BAL F中的炎性介质 ,如肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素 (IL 1β,IL 6 )的变化。结果　肺损伤后 ARDS模型犬氧合指数均显著恶化 ,外周血中炎性介质明显升高 (P均 <0 .0 5 ) ,ARDSp模型犬肺尖叶和心叶 BAL F中炎性介质水平明显高于 ARDSexp模型犬 (P均 <0 .0 5 )。应用肺保护性通气治疗后 ,实验组犬氧合指数有不同程度改善 ,炎性介质水平有不同程度下降 ;但 ARDSp实验组的治疗效果不如 ARDSexp实验组。结论　 ARDSexp和 ARDSp的肺不同部位炎性介质释放和氧合     

急性呼吸窘迫综合征患者肺泡微环境对肺成纤维细胞生物学活性的影响

目的探讨不同程度急性呼吸窘迫综合征（ARDS）肺泡微环境的变化对肺成纤维细胞（LF）的影响。 方法以2014年1月至2016年12月绍兴市人民医院重症监护病房（ICU）收治的58例符合ARDS诊断标准的患者,依据患者氧合指数和柏林定义标准将患者分为轻度组（26例）、中度组（15例）、重度组（17例）,另纳入10例行机械通气但无肺部疾病患者作为无肺损伤组。所有入选患者均进行支气管肺泡灌洗,留取支气管肺泡灌洗液（BALF）标本,酶联免疫吸附法（ELISA）检测其中白细胞介素1β（IL-1β）、角质细胞生长因子（KGF）和肝细胞生长因子（HGF）水平,并进行蛋白定量及细胞计数。同时,体外培养肺成纤维细胞系MRC-5细胞,与各组患者BALF共培养,采用Transwell法检测细胞迁移能力,采用Western-blotting法检测各组细胞Collagen Ⅰ和血小板源性生长因子α受体（PDGF-Rα）表达。 结果与无肺损伤组比较,ARDS轻度组、中度组及重度组患者的IL-1β[12（8,21）、776（449,943）、802（691,1 004）、886（548,1 130）ng/L]、KGF[2.0（1.0,2.2）、19.0（15.8,24.5）、41.4（36.2,57.3）、64.7（49.2,82.1）ng/L]、HGF[90（75,106）、514（373,785）、867（674,1 248）、940（660,1 344）ng/L]、蛋白含量[（0.09 ± 0.03）、（0.29 ± 0.10）、（0.45 ± 0.09）、（0.68 ± 0.16）g/L]及细胞总数[（2.4 ± 0.6）、（16.5 ± 2.1）、（17.8 ± 2.0）、（18.2 ± 2.0）× 10⁹个/mL]均明显升高（Z=26.182、55.871、36.354,F=72.860、177.291,P均<0.05）,且与重度组患者比较,轻度组及中度组患者的KGF水平及蛋白含量显著降低（P均<0.05）,轻度组仅HGF水平及总细胞数明显降低（P均<0.05）,而ADRS各组间IL-1β比较,差异均无统计学意义（P均>0.05）。同时,与无肺损伤组比较,ARDS各组间趋化指数均明显升高（F=12.291,P=0.003）,且重度ARDS组患者明显高于轻度及中度组患者（P均<0.05）。四组间CollagenⅠ蛋白及PDGF-Rα蛋白比较,差异均有统计学意义（F=358.943,P=0.001;F=4.574,P=0.002）。ARDS各组CollagenⅠ蛋白明显高于无肺损伤组,且中度、重度组明显高于轻度组（P均<0.05）。而PDGF-Rα蛋白在无肺损伤组和轻度组几乎无表达,但在中度、重度组均有明显表达（P均<0.05）。 结论随着ARDS程度的加重,BALF中KGF、HGF明显上升,BALF可通过诱导LF表达PDGF-Rα和CollagenⅠ,促进LF的迁移与分化。     

肺炎支原体肺炎患儿治疗前后肺泡灌洗液β防御素3变化的意义

目的 观察肺炎支原体肺炎（MPP）患儿支气管肺泡灌洗液（BALF）中人β防御素3（hβD‐3）蛋白水平并比较治疗前后MPP患儿BALF中hβD‐3蛋白水平变化,探讨hβD‐3在防御肺炎支原体感染中的作用。方法 用酶联免疫吸附测定（ELISA）测定比较 MPP患儿、非 MPP患儿以及对照组BALF中hβD‐3蛋白含量;比较MPP患儿治疗前和治疗7～14 d后BALF hβD‐3蛋白水平变化。结果 hβD‐3在MPP患者 BALF中蛋白水平较对照组低,经过治疗hβD‐3蛋白水平回升。结论 hβD‐3蛋白水平的降低与上皮细胞损伤程度有关,可能参与M PP免疫损伤机制。     

儿童难治性肺炎支原体肺炎的危险因素分析

目的研究儿童难治性肺炎支原体肺炎发生的危险因素。方法对55例普通肺炎支原体肺炎患儿和37例RMPP患儿进行组间对照分析,应用单因素分析和多因素logistic回归分析RMPP发生的危险因素。结果与GMPP组比较,RMPP组年龄偏大,肥胖儿、特应性体质居多,肺外并发症发生率更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。在实验室指标方面,RMPP组中性粒细胞/淋巴细胞比值、超敏C反应蛋白、CD19^+、CD8^+等指标高于GMPP组(P<0.05),RMPP组人类白细胞DR抗原、CD4^+、CD4^+/CD8^+等指标低于GMPP组(P<0.05);多因素logistic回归分析显示,肺外并发症、hs-CRP明显升高、CD4^+明显降低、CD8^+明显升高为儿童难治性肺炎支原体肺炎的临床危险因素(P<0.05)。结论hs-CRP明显升高、细胞免疫功能紊乱越明显、合并肺外并发症对早期难治性肺炎支原体肺炎的诊断具有一定的临床指导价值。