吡非尼酮通过抑制TGF-β1通路和炎症反应预防大鼠尿道损伤后的纤维化及狭窄

目的 探讨吡非尼酮对大鼠尿道损伤后狭窄形成的预防作用及可能机制。方法 选取SD雄性大鼠30只,随机分为3组（10只/组）：阴性对照组、阳性对照组及吡非尼酮组。吡非尼酮组：切开后尿道海绵体建立大鼠尿道损伤模型,按100 mg·kg-1·d-1腹腔注射吡非尼酮;模型组：同对照组构建大鼠尿道损伤模型,腹腔注射等量溶剂;假手术组：不予尿道损伤处理,但腹腔注射等量溶剂。术后2周逆行尿道造影观察尿道狭窄,留取尿道损伤组织,行HE染色观察尿道组织形态学变化,Masson染色检测胶原变化,免疫组化及Western blot检测a-SMA和TGF-β1的蛋白表达,qRT-PCR检测大鼠尿道组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA的表达。结果 吡非尼酮组大鼠较阴性对照和阳性对照组体质量下降,逆行尿道造影显示阳性对照组大鼠尿道显著变窄,吡非尼酮组大鼠尿道较阳性对照组大鼠明显好转（P<0.05）。HE染色显示阳性对照组尿道上皮细胞增生,管腔狭窄,炎性细胞增多;吡非尼酮组病理学表现与阴性对照组相似。Masson染色显示吡非尼酮组较阳性对照组胶原纤维含量少,排列规则有序。免疫组化和Western blot结果表明阳性对照组尿道a-SMA和TGF-β1表达显著高于阴性对照组（P<0.05,P<0.01）,而吡非尼酮能够抑制TGF-β1和α-SMA的表达。qRT-PCR结果显示吡非尼酮能够抑制损伤组织中TNF-α、IL-6、IL-1β等炎症因子的基因表达（P<0.05,P<0.01）。结论 吡非尼酮可预防尿道损伤后纤维化及狭窄,并可能与抑制TGF-β1通路和炎症反应相关。     

CTGF反义寡核苷酸对大鼠肾间质纤维化的影响

[摘要] 目的 研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的影响,探讨CTGF ASODN应用于临床的可能。方法 32只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(sham-operation group,SOR)、单侧输尿管梗阻组(unilateral ureteral obstruction group,UUO)、CTGF错义寡核苷酸(missense oligodeoxynucleotide,MSODN)对照组和CTGF ASODN治疗组。第15 d收获大鼠。碱水解法测定肾组织胶原含量;Masson染色观测肾皮质胶原染色情况;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、纤连蛋白（fibronectin,FN）、转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）在肾皮质中的蛋白表达。RT-PCR检测肾皮质中α-SMA的mRNA表达水平。结果 肾皮质胶原检测CTGF ASODN组与UUO组、CTGF MSODN组比较,减少胶原含量,p均﹤0.01; Masson染色：CTGF ASODN组较UUO组、CTGF MSODN组胶原染色面积减少; 免疫组化：CTGF ASODN与UUO组、CTGF MSODN组比较,肾皮质α-SMA, FN ,TGF-β1的阳性表达面积、阳性染色强度均下降,p均﹤0.05; RT-PCR：CTGF ASODN组抑制α-SMA的mRNA表达水平,与UUO组、CTGF MSODN组比较,p均﹤0.05。结论 CTGF ASODN有效缓解UUO大鼠肾间质纤维化。     

益肾降浊冲剂对慢性肾功能衰竭大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的观察益肾降浊冲剂对慢性肾衰(CRF)大鼠肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化(EMT)的影响,探讨其延缓CRF进展的作用机制。方法采用单侧肾切除加阿霉素重复注射建立慢性肾衰大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦、益肾降浊冲剂治疗组。治疗组分别予缬沙坦、益肾降浊冲剂灌胃8周,Masson染色观察肾小管间质胶原沉积的程度,免疫组化检测肾小管上皮细胞TGF-β1、α-SMA的表达。结果模型组残肾肾小管出现萎缩、扩张、胶原染色阳性面积明显高于假手术组,TGF-β1、α-SMA的表达明显上调(P<0.01);缬沙坦组、益肾降浊冲剂组胶原染色阳性面积及TGF-β1、α-SMA的表达量均明显低于模型组(P<0.01);益肾降浊冲剂组胶原染色阳性面积减少及TGF-β1、α-SMA的表达量均明显低于缬沙坦组(P<0.05)。结论益肾降浊冲剂能通过抑制CRF残肾小管上皮细胞TGF-β1的表达、进而抑制EMT及胶原的沉积,作用优于缬沙坦。     

miR-146b-5p靶向E3泛素蛋白连接酶促进高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化

目的 探讨miR-146b-5p与E3泛素蛋白连接酶(ZNRF3)对高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化(EMT)进程的影响及作用机制。方法 正常培养的小鼠为对照组,采用4.25%葡萄糖透析液和0.1 mg/kg的脂多糖诱导腹膜纤维化小鼠模型,收集小鼠腹膜组织,Masson染色观察腹膜组织胶原纤维变化,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原(COL I)表达。Western blot检测腹膜组织上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、α-SMA和COL I表达。qRT-PCR检测腹膜组织中miR-146b-5p和ZNRF3表达。双荧光素酶报告基因检测验证miR-146b-5p和ZNRF3靶向关系。分离对照组小鼠腹膜间皮细胞,高糖诱导构建小鼠腹膜间皮细胞纤维化模型,将细胞分为对照组、模型组、mimic-NC组、miR-146b-5p-mimic组和miR-146b-5p-inhibitor组。Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测EMT相关蛋白表达。结果 与对照组小鼠比较,模型组小鼠腹膜组织增厚,胶原纤维增多,α-SMA和COL I表...     

LncRNA-MEG3在心肌纤维化过程中的表达变化研究

目的研究LncRNA-MEG3在大鼠心肌纤维化及心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖过程中的表达变化。方法用异丙肾上腺素(ISO)腹部皮下注射SD大鼠构造心肌纤维化动物模型为实验组(ISO组),对照组注射等量的生理盐水;提取乳鼠CFs,采用转化生长因子β1(TGF-β1)作用CFs构建细胞水平纤维化模型为实验组(TGF-β1组),对照组为未经TGF-β1作用正常培养的CFs; HE、Masson染色观察心肌组织胶原变化;用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原分子(CollagenⅠ)蛋白的表达;qRT-PCR法检测CollagenⅠ、α-SMA mRNA和MEG3的表达;CCK-8法检测经TGF-β1作用CFs后的吸光度(OD)值。结果与对照组比较,ISO组的心肌细胞体积变大、紊乱,组织胶原面积明显增加;ISO组和TGF-β1组中CollagenⅠ、α-SMA蛋白和mRNA表达都显著增多,LncRNA-MEG3表达显著减少;CCK-8实验结果提示使用TGF-β1刺激CFs 24、48 h后较对照组的细胞OD值明显增加,即细胞增殖活性增强。结论 LncRN...     

整合素连接激酶在糖尿病肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的:观察整合素连接激酶(ILK)在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中的表达,探讨其与肾小管上皮细胞转分化(EMT)的关系.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=10)、糖尿病模型组(n=10)与糖尿病氯沙坦干预组(n=10)[氯沙坦20 mg/(kg·d)];分别于第8周、第16周每组各处死5只大鼠.留取左肾行HE和Masson染色,阅片并计算肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积;免疫组织化学法检测肾小管上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)与ILK的表达.结果:与正常对照组比较,糖尿病组大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积明显增加(P＜0.01),肾小管上皮细胞α-SMA,Vimentin和ILK阳性表达面积明显增加(P＜0.01),ILK与α-SMA呈正相关(rs=0.621,P＜0.05);氯沙坦组大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积较糖尿病组明显减弱,其肾小管上皮细胞的ILK,α-SMA与Vimentin表达均较糖尿病组明显减弱(P＜0.01).结论:糖尿病大鼠肾小管上皮细胞存在ILK高表达与EMT,二者之间可能有着重要联系;氯沙坦可下调肾小管上皮细胞ILK表达,阻抑EMT.     

腺嘌呤诱发的大鼠肾间质纤维化组织中α-平滑肌肌动蛋白和Ⅳ型胶原的表达及其意义

[目的]探讨腺嘌呤诱发的大鼠肾间质纤维化组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅳ型胶原的表达及其意义.[方法]正常组大鼠灌胃给予生理盐水10mL/kg,模型组给予腺嘌呤250mg/kg,共24d,检测两组大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、钙离子和磷的含量.剖取肾脏,行HE和直接红染色,观察肾组织的病理变化和纤维的增生程度,行免疫组织化学染色观察肾组织α-SMA和Ⅳ型胶原的表达情况.[结果]模型组与正常组比较,血清BUN,Scr含量明显升高,血清钙离子含量明显下降,磷含量显著升高.模型组肾小球数量明显减少,肾间质内胶原纤维、α-SMA和Ⅳ型胶原阳性面密度明显高于对照组.[结论]在腺嘌呤诱发的大鼠肾间质纤维化的发生发展过程中肌成纤维细胞的增殖活化和Ⅳ型胶原发挥重要作用.     

慢性肾病大鼠血清Bcl-3、Gal-3、TGF-β1与肾间质纤维化的关系

目的 探讨腺嘌呤诱导的慢性肾病大鼠血清Bcl-3、Gal-3、TGF-β1与肾间质纤维化的关系。方法 将20只SPF级雄性大鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(CKD组,n=10),模型组给予腺嘌呤灌胃,对照组给予等体积生理盐水灌胃,分别于第3、6周处死大鼠,留取血检测尿素氮、肌酐及Bcl-3、Gal-3、TGF-β1水平,HE染色观察肾脏病理改变,Masson染色观察肾间质纤维化情况及严重程度,免疫组化染色观察肾组织中α-SMA蛋白的表达情况。结果 与对照组相比,CKD组各时间点的血尿素氮、肌酐、Bcl-3、Gal-3和TGF-β1水平均明显升高(P<0.05)。CKD组大鼠肾组织HE染色可见肾小管上皮细胞变性坏死、肾间质纤维化等病理改变;Masson染色可见蓝色胶原沉积明显增多,同时α-SMA蛋白表达也明显升高(P<0.05)。CKD组肾间质胶原纤维相对面积评分明显高于对照组(P<0.05)。相关性分析显示血Bcl-3、Gal-3、TGF-β1水平与肾间质纤维化相对面积呈正相关(r_s=0.776,P<0.001;r_s     

大蒜素对肺纤维化大鼠肺组织α-SMA和TGF- β1表达的影响

目的 观察大蒜素对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α -SMA)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,并初步探讨大蒜素对大鼠肺纤维化抑制作用的机制.方法 通过气管内注射博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,空白对照组大鼠用生理盐水代替.造模后的Wistar大鼠随机分成4组:空白对照组(气管内注入生理盐水+生理盐水灌胃)、大蒜素组(博莱霉素造模+大蒜素灌胃)、秋水仙碱组(博莱霉素造模+秋水仙碱灌胃)和模型组(博莱霉素造模+生理盐水灌胃),分别于第7天和第28天处死大鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察大鼠肺组织肺纤维化程度,碱水解法检测大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度,免疫组织化学染色检测大鼠肺组织α -SMA及TGF-β1的表达.结果 在HE染色和Masson染色中,大蒜素组及秋水仙碱组肺炎分级和肺纤维化分级较模型组降低.与模型组相比,大蒜素组大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度降低,肺组织内α-SMA及TGF-β1的表达均明显减少,与秋水仙碱组相似.结论 大蒜素对大鼠肺纤维化的干预作用可能与下调TGF-β1的表达,从而减少成纤维细胞α-SMA基因的表达有关.     

浙八味煎剂治疗非酒精性脂肪性肝纤维化的实验研究

目的 研究临床经验方“浙八味煎剂”对非酒精性脂肪性肝纤维化(NASF)小鼠模型的治疗作用。 方法 C57BL/6J雄性小鼠,采用随机数字表法随机分为4组,正常组、模型组、浙八味煎剂高、低剂量组,每组8只。采用课题组改良的蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)结合反复低剂量腹腔注射CCl₄制备动物模型。造模第3周首日开始予浙八味煎剂进行灌胃,6周末处死动物采血和肝组织,检测各组血清肝功能(ALT、AST、TBil)水平,血清和肝脏甘油三酯(TG)含量,观察各组肝组织HE染色、油红O染色、天狼猩红病理染色情况,采用免疫组化方法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况。采用单因素方差分析和LSD检验方法进行数据分析。 结果 相对正常组,模型组小鼠血清ALT、AST、TBil活性及肝脏TG含量明显升高(均P<0.01);肝组织出现广泛炎症反应,油红O阳性染色、Masson胶原染色及α-SMA蛋白阳性表达面积显著增加(均P<0.01);浙八味煎剂高剂量组显著降低血清ALT、AST、TBil活性及肝脏TG含量(均P<0.01),显著减少肝组织油红O阳性染色、Masson胶原染色及α-SMA蛋白阳性表达面积(均P<0.01)。 结论 “浙八味煎剂”对非酒精性脂肪性肝纤维化模型小鼠具有良好的治疗作用,抑制星状细胞活化可能是其部分机制。      

转录因子T-bet/GATA-3诱导哮喘模型中α-SMA和Ⅰ型胶原高表达的实验研究

目的观察大鼠肺转录因子T细胞表达的T盒(T-bet)/GATA连接蛋白-3 (GATA3)对肺支气管α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原的调解作用,探讨其比率与哮喘早期气道重塑的关系。方法将大鼠随机分为OVA组即哮喘模型组、生理盐水组、空白对照组。采用实时定量-聚合酶链反应法检测大鼠肺组织中T-bet mRNA和GATA-3 mRNA表达,免疫印迹法检测大鼠肺组织中T-bet和GATA-3蛋白表达;免疫组化法测定大鼠肺组织中α-SMA表达水平,酶联免疫吸附法测定成纤维细胞（LF）中Ⅰ型胶原表达强度;比较T-bet/GATA-3与α-SMA和Ⅰ型胶原的关系。结果OVA组大鼠肺组织中T-bet mRNA和蛋白表达强度均较生理盐水组和空白对照组显著减弱;而OVA组GATA 3 mRNA和蛋白表达强度较其余两组显著增强;T-bet/GATA-3比率较其余两组显著减弱;OVA组肺组织α-SMA和LF中Ⅰ型胶原含量较其余两组显著增强;T-bet/GATA-3比率与α-SMA和Ⅰ型胶原均成负相关。结论 T-bet/GATA-3比率与哮喘早期气道重塑的指标α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原等呈线性负相关,T-bet/GATA-3失衡可能是哮喘早期气道重塑的重要原因之一。     

粒状头样2在肺纤维化上皮间质转化中的作用研究

目的:探讨粒状头样2(grainyheas-like2,GRHL2)在肺纤维化上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用研究。方法:45只大鼠随机分为正常对照组,模型组及丙戊酸钠组,每组15只,模型组及丙戊酸钠组沿着气管注射博来霉素构建大鼠肺纤维化模型,正常对照组采用同样方法给予等量生理盐水。丙戊酸钠组大鼠腹腔注射200 mg·kg~(-1)·d~(-1)丙戊酸钠,正常对照组及模型组腹腔注射等量生理盐水,连续给药28 d。HE染色检测肺组织病理情况,Masson染色检测肺组织纤维化情况,碱水解法检测羟脯氨酸(HYP)含量,免疫组化及Western Blot检测GRHL2表达,Western Blot检测EMT相关蛋白E-cadherin,α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-SMA),Vimentin,Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肺组织肺泡结构被破坏,大量胶原纤维沉积,胶原染色面积比、Ashcroft评分及HYP含量升高(P<0.01),GRHL2阳性率及蛋白表达量降低(P<0.01),E-cadherin表达量下调(P<0.01),α-SMA,Vimentin,β-catenin,淋巴样增强结合因子(LEF)及基质金属蛋白酶7(MMP7)表达量上调(P<0.01)。与模型组比较,丙戊酸钠组大鼠肺泡组织结构较为完整,胶原纤维沉积程度较轻,胶原染色面积比、Ashcroft评分及HYP含量降低(P<0.01),GRHL2阳性率及蛋白表达量提高(P<0.01),E-cadherin表达量上调(P<0.01),α-SMA,Vimentin,β-catenin,LEF1及MMP7表达量下调(P<0.01)。结论:大鼠肺纤维化过程GRHL2表达量下调,进而激活Wnt/β-catenin信号通路,促进EMT生成,加重大鼠肺纤维化程度,丙戊酸钠能扭转此过程。     

化瘀理肺方对肺纤维化大鼠肺组织miR-27a与α-SMA表达的影响

目的：探究化瘀理肺方对博莱霉素诱导大鼠肺纤维的抑制作用与对miR-27a、α-SMA表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分成正常组、模型组和化瘀理肺方治疗组各10只。采用注射博莱霉素构建肺纤维化大鼠模型。化瘀理肺方治疗组在造模7 d后给与化瘀理肺方灌胃治疗7 d。于造模后第14天分组处死大鼠。取右肺进行HE染色，Masson染色和免疫组化观察α-SMA的表达。通过qRT-PCR检测miR-27a的表达，同时采用双荧光素酶报告基因技术检测miR-27a与ACTA2(α-SMA蛋白编码基因)的结合位点。结果：与模型组比较，化瘀理肺方治疗组大鼠肺组织的病理形态学变化明显减轻，肺泡炎及纤维化明显降低，肺组织中胶原沉积明显减少，α-SMA蛋白表达明显降低。同时，化瘀理肺方治疗组肺组织miR-27a表达显著上升，双荧光素酶报告基因证实miR-27a与ACTA2基因存在结合位点。结论：化瘀理肺方可以抑制博莱霉素诱导大鼠肺纤维化，其机制可能与促进miR-27a表达有关。     

HDAC8在异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化中的作用

目的：初步探讨组蛋白去乙酰化酶( HDAC8)在盐酸异丙肾上腺素( ISO)诱导的大鼠心肌纤维化中表达的机制。方法将40只雄性SD大鼠随机均等分为正常组和模型组。模型组给予ISO 1次/d(5 mg/kg),正常组予以等剂量生理盐水皮下注射,连续注射7d后处死大鼠取血液标本,并取心肌组织。测定心脏质量指数;ELISA法检测血清中I型胶原和Ⅲ型胶原的含量;HE和Masson染色法观察心肌纤维化程度;Western blot法测定HDAC8和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达情况;qRT-PCR 法检测 HDAC8 mRNA 的表达。结果与正常组比较,模型组心脏质量指数明显增加(P<0．05);HE和Masson染色显示模型组心肌组织出现明显的胶原纤维增生;模型组血清标本中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量较正常组明显增加(P<0．05);Western blot法检测显示模型组HDAC8、α-SMA的蛋白表达明显高于正常组( P<0．05,P<0．01);qRT-PCR 检测模型组 HDAC8 mRNA 表达明显高于正常组( P<0．05)。结论 HDAC8在心肌纤维化中高表达,而在正常心肌组织中低表达,提示其在心肌纤维化的发生发展中可能发挥作用。     

缬沙坦对大鼠梗死后心肌TNF-α及胶原表达的影响

目的:本研究欲通过观察缬沙坦对大鼠急性心肌梗死后的心肌TNF-α及胶原表达的影响,探讨缬沙坦对心肌梗死后心室重构的作用。方法:建立大鼠急性心肌梗死模型。实验动物随机分为假手术组、对照组、心肌梗死加缬沙坦组(予以缬沙坦30mg·kg-1·d-1灌胃)。15天后将三组动物处死,心肌组织经HE染色作形态学观察,用免疫组化SP法检测心肌组织切片内的TNF-α表达变化,用苦味酸-天狼星红染色检测心肌胶原变化,应用SPSS10.0计算机软件包行统计学分析。结果:心肌组织HE染色:心肌梗死加缬沙坦组和对照组可见心肌纤维溶解断裂、炎症细胞浸润等改变;而且心肌梗死加缬沙坦组较对照组TNF-α及心肌胶原表达量明显降低(p<0.01)。结论:缬沙坦可明显降低心肌梗死后心肌TNF-α及心肌胶原的表达,从而减轻了心室的重构。     

罗格列酮抑制大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的：探讨过氧化物酶体增生物激活受体-γ激动剂——罗格列酮对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠。肾间质纤维化的影响。方法：将30只wistar大鼠随机分成罗格列酮治疗组、模型组和假手术组。对治疗组，模型组行单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后第21天取3组术侧。肾组织做HE和Masson三色病理染色及用免疫组化方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)在肾组织的表达水平。结果：罗格列酮可显著下调α-SMA、TGF—β1的表达．减轻Ⅰ型胶原在肾间质中的沉积，改善了肾脏病理改变。结论：罗格列酮对UUO所致的肾间质纤维化的形成有抑制作用。     

通络化纤颗粒对肺纤维化大鼠NF-κB、α-SMA含量的影响

目的观察通络化纤颗粒对博来霉索所致肺纤维化大鼠核因子-κB(NF-κB)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)含量的影响。方法将60只健康Wistar大鼠(雌雄兼用)随机分为5组,即空白组、模型组、阳性药(醋酸泼尼松)对照组和通络化纤颗粒高、中剂量组。除空白组外,其余4组用博来霉素注入大鼠气管内制作肺纤维化模型,于造模后第1天起,各组给予相应的药物,分别于第7、28天处死大鼠,取肺组织进行HE染色,光镜下观察大鼠肺组织病理学变化,并进行免疫组化染色,观察大鼠肺组织NF-κB、α-SMA表达的变化。结果在造模后第7天和第28天,空白组无NF-κB及α-SMA阳性表达,模型组有阳性表达,通络化纤颗粒组和阳性药对照组NF-κB、α-SMA的表达较模型组明显降低(P<0.01);且通络化纤颗粒高、中剂量组较阳性药对照组有所降低(P<0.05)。病理学观察显示,模型组炎性反应明显,纤维化程度重;阳性药对照组及通络化纤颗粒高、中剂量组显著减轻。结论通络化纤颗粒可以有效地抑制实验性肺纤维化大鼠NF-κB、α-SMA的表达。     

葛根素对大鼠酒精性肝纤维化的干预作用以及对肝星状细胞增殖活化的影响

[目的]研究葛根素对大鼠酒精性肝纤维化的干预作用以及对肝星状细胞增殖活化的影响。[方法]Wistar雄性大鼠85只被随机分为正常对照、模型、葛根素低、中、高剂量和阳性药(易善复)对照6组。除正常对照组之外,其余给予大鼠灌胃白酒辅以玉米油、吡唑的混合食料制备酒精性肝纤维化模型,12周后采用苏木精-伊红(HE)、Masson染色观察大鼠肝脏组织纤维化状况。采用免疫组化法检测大鼠肝组织内增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,根据PCNA的表达,计算肝细胞的增殖指数。[结果]模型组和各给药组肝纤维化程度显著高于正常对照组,各给药组肝纤维化程度要轻于模型组,但低剂量组肝纤维化程度重于其他各给药组。模型组肝细胞增殖指数明显高于其他各组,各给药组肝细胞增殖指数高于正常组。模型组α-SMA的表达高于其他各组,葛根素中、高剂量组和阳性药组α-SMA的表达低于模型组,葛根素低剂量组α-SMA的表达与模型组没有显著性差异,但从数据趋势上看低于模型组。[结论]葛根素能通过抑制肝星状细胞的增殖活化从而达到防治酒精性肝纤维化的功效,以中、高剂量效果更明显。     

α-平滑肌肌动蛋白在呼吸道合胞病毒感染小鼠肺组织中的表达及意义

目的:通过检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠肺组织的动态表达,观察α-SMA在RSV感染后肺组织的变化,探讨α-SMA是否参与了RSV感染小鼠的发病过程。方法:随机将48只雌性BALB/c小鼠分成对照组(24只)及RSV感染组(24只),其中RSV感染组小鼠鼻腔滴入RSV 100μl,对照组小鼠鼻腔滴入生理盐水100μl,分别在四个时间点(第4天、第8天、第14天、第28天)处死小鼠,留取肺组织,进行HE染色及Masson染色,免疫组化检测肺组织α-SMA的表达。结果:①Masson染色法计算气道外周胶原沉积面积百分比:对照组各时间点气道外周胶原沉积面积百分比比较无统计学差异(P>0.05);RSV感染组各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。RSV感染组在感染的第4天、第8天及第14天气道外周胶原沉积面积百分比逐渐增加,与对照组相应时间点两两比较,差异有统计学意义(P<0.05),感染第28天与对照组相应时间点比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②肺组织α-SMA表达:对照组小鼠肺组织α-SMA各时间点两两比较,表达无差异无统计学意义(P>0.05);RSV感染组小鼠肺组织α-SMA平均光密度值在第4天、第8天和第14天呈逐渐上升趋势,第14天时达高峰,至第28天下降,各时间点两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。RSV感染组小鼠肺组织α-SMA表达与对照组比较,第4天、第8天、第14天RSV感染组与对照组各相应时间点相比较差异有统计学意义(P<0.05),感染第28天与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:α-SMA参与了RSV感染小鼠气道炎症及胶原沉积过程。     

白藜芦醇对哮喘小鼠气道重塑的抑制作用

目的观察白藜芦醇(RV)对慢性哮喘小鼠模型气道重塑的影响。方法 24只雌性BALB/c小鼠随机分成3组,即对照组、哮喘组、RV组,每组8只,3组小鼠均给予鸡卵清蛋白(OVA)致敏,对照组予以磷酸盐缓冲溶液(PBS)激发,哮喘组和RV组予以OVA激发,其中RV组于每次激发前30 min给予腹腔注射溶于二甲基亚砜(DMSO)的RV,对照组和哮喘组给予腹腔注射等量的DMSO。最后一次激发24 h后,取小鼠肺组织固定、切片行过碘酸希夫(PAS)染色、Masson染色及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学检测,分别检测杯状细胞增生、胶原沉积和平滑肌细胞增生肥大程度,结果用杯状细胞(PAS阳性)、胶原(Masson阳性)和平滑肌细胞(α-SMA阳性)阳染面积/支气管基底膜周长(μm2/μm)表示。结果对照组未见PAS+区域,哮喘组和RV组杯状细胞增生显著高于对照组(5.44±1.13、4.18±0.85比0.00±0.00,P均0.01),且RV组显著低于哮喘组(P0.05)。Masson染色提示哮喘组和RV组上皮下胶原沉积显著高于对照组(9.80±2.78、5.71±0.68比1.67±0.65,均P0.01),且RV组显著低于哮喘组(P0.01)。α-SMA免疫组化显示哮喘组和RV组上皮下胶原沉积显著高于对照组(10.39±1.65、7.57±1.98比2.41±1.06,均P0.01),且RV组显著低于哮喘组(P0.05)。结论 RV干预后,小鼠慢性哮喘模型气道重塑指标均有减轻,提示RV可能对慢性哮喘小鼠气道重塑具有抑制作用。