白芍总苷对体外培养的成骨细胞和破骨细胞的影响

目的研究白芍总苷(TGP)对成骨及破骨细胞的影响。方法分别取1d龄SD大鼠颅骨及5d龄SD大鼠四肢股骨、胫骨分离培养成骨细胞和破骨细胞。实验分为正常对照组及TGP50,5,0.5,0.05和0.005g.L-1组,采用MTT法检测成骨细胞、破骨细胞活力,金氏法测定成骨细胞培养上清中碱性磷酸酶(AKP)含量。结果 TGP50g.L-1对成骨细胞的存活能力有明显的抑制作用,但对AKP活性影响不明显;TGP5和0.5g.L-1对成骨细胞的存活能力有明显增强作用,使AKP活性明显增强;TGP0.05g.L-1对成骨细胞的存活能力影响不明显,但能明显增强AKP活性;TGP5和0.5g.L-1对破骨细胞存活均有明显的抑制作用。结论白芍总苷可促进成骨细胞存活、增强成骨细胞的AKP活性,过高浓度时则可抑制成骨细胞存活,但对其活性影响不明显;TGP还具有抑制破骨细胞存活的作用。     

女贞子提取物对破骨细胞分化及成骨细胞增殖的影响

目的:探讨女贞子提取物对破骨细胞分化及成骨细胞增殖的影响。方法:以1α,25-二羟基维生素D3诱导兔原代骨髓细胞获取破骨细胞,经女贞子醇提物和水煎物低、中、高剂量(均为2、20、200 mg/L)处理后,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)活性测定法检测各组细胞裂解液中TRACP活性及细胞中TRACP阳性细胞数,采用甲苯胺蓝染色法检测各组细胞骨吸收陷窝数量及骨陷窝面积百分率。以L-抗坏血酸、β-甘油磷酸钠、地塞米松诱导小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14细胞获取成骨细胞,采用MTT法检测各组细胞的相对增殖率,采用碱性磷酸酶(APK)活性测定法检测各组细胞中APK活性。结果:经不同剂量女贞子提取物处理后,TRACP阳性细胞数、骨吸收陷窝数量及其面积均有不同程度的改变,其中女贞子醇提物各剂量组和水煎物高剂量组TRACP活性及阳性细胞数、骨吸收陷窝数量及面积百分率,以及女贞子水煎物中剂量组TRACP活性及阳性细胞数、骨陷窝面积百分率均显著降低或减少,而水煎物低剂量组细胞的骨吸收陷窝数量显著增多(P<0.05或P<0.01);女贞子提取物低、中剂量组细胞的相对增殖率以及提取物各剂量组细胞的APK活性均显著升高,而女贞子提取物高剂量组细胞的相对增殖率均显著降低(P<0.01)。结论:女贞子提取物可抑制破骨细胞的TRACP活性,改变破骨细胞的骨吸收功能和成骨细胞的增殖行为,并增加成骨细胞的APK活性。     

辛伐他汀对体外成骨细胞、破骨细胞的影响

目的 探讨辛伐他汀对体外培养成骨细胞、破骨细胞的影响.方法 分离SD大鼠成骨细胞、破骨细胞,体外培养时给予辛伐他汀刺激,观察药物对成骨细胞增殖率和碱性磷酸酶以及骨细胞骨吸收的影响.结果 辛伐他汀10~(-6)～10~(-9)mol/L对碱性磷酸酶的分泌有明显促进作用,10~(-6)～10~(-8)mol/L的辛伐他汀既促进成骨细胞的增殖,又抑制破骨细胞的骨吸收.结论 辛伐他汀在体外促进骨形成、抑制骨吸收,有望成为治疗骨质疏松的约物.     

葡萄籽提取物对破骨细胞分化的影响

目的检测葡萄籽提取物对破骨细胞分化、形成、功能的影响。方法利用实时定量基因扩增荧光检测系统(qPCR)检测破骨细胞分化标志分子的表达,利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色及 TRAP活性定量实验检测破骨细胞的形成情况,利用c?TX定量实验检测破骨细胞的骨吸收活性。结果细胞克隆经诱导分化后,与对照组相比, GSE组细胞的破骨标志分子 Itgb3 mRNA相对表达量由(216.59±34.61)下降至(104.55±9.54)(n＝3,P＝0.0355); Acp5由(103.37±14.77)下降至(78.96±13.15)(n＝3,P＝0.0351); Dcst由(304.85±14.77)下降至(65.03±11.75)(n＝3,P＝0.0003); Ctsk由(290.23±41.65)下降(132.23±14.06)(n＝3,P＝0.0229)。经葡萄籽提取物处理后,破骨标志分子 Itgb3、Acp5、Dcst、Ctsk mRNA水平均显著降低, TRAP阳性细胞数目减少, TRAP活性由(2.52±0.39)下降至(0.91±0.10)(n＝3,P＝0.0165),TRAP活性显著降低;与对照组细胞相比, GSE组细胞分泌的 c?TX量由(1.01±0.11)nmol/L下降至(0.49±0.06)nmol/L(n＝3,P＝0.0028),c?TX分泌显著减少。结论葡萄籽提取物有效抑制破骨细胞分化、形成及活性,葡萄籽提取物是潜在的预防治疗骨质疏松的营养补充剂。     

维生素K对成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收的影响

目的 比较维生素K₁(VK₁)、维生素K₂(MK₄)、维生素K₂(MK₇)和维生素K₃(VK₃)促进骨形成和抑制骨吸收的作用。方法 采用新生大鼠颅盖骨分离成骨细胞和以核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导骨髓单核细胞的破骨细胞为模型,用磷酸苯二钠法检测成骨碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性;用CellTilter试剂盒检测破骨细胞代谢活力;用Z-FR-MCA荧光底物和胶原底物降解检测组织蛋白酶K(CTSK)抑制作用。结果 MK₄和MK₇在0.1~1 μmol/L时显著促进成骨细胞增殖(P<0.05),1 μmol/L时显著提高ALP活性和骨结节形成面积,VK₃抑制了骨结节形成(P<0.05)。VK₁、VK₃、MK₄和MK₇在1 μmol/L时对破骨细胞代谢活力均无影响,MK₄和MK₇在0.1~1 μmol/L时显著抑制TRAP活性(P<0.05),而VK₁和VK₃无抑制作用。MK₄在25 μmol/L可对CTSK与Z-FR-MCA底物结合的抑制率达58.9%,在100 μmol/L对CTSK胶原降解的抑制率达73.2%。结论 相较于VK₁和VK₃,MK₇和MK₄有显著促进成骨细胞活性和抑制破骨细胞骨吸收的作用,MK₄能显著抑制破骨细胞CTSK酶活性。     

木豆叶芪类提取物对雌激素缺乏性大鼠骨质丢失的影响

植物雌激素具有雌激素的抗骨丢失的作用，却没有雌激素的不良反应，因而受到广泛的重视。各国科学家都在积极寻找安全有效的、具有雌激素样作用的天然产物。已经发现的这类植物雌激素有异黄酮、木酚素、香豆素、二苯乙烯类等，在多种植物和中草药中均含有这些化合物。     

骨新康对大鼠成骨细胞及破骨细胞活性的研究

目的:观察骨新康对新生大鼠成骨细胞及破骨细胞活性影响。方法:SD大鼠灌胃给药3 d取得含药血清。分离成骨细胞及破骨细胞体外培养,MTT法检细胞活性,AKP检测成骨细胞分化程度,用骨吸收陷窝数量评价破骨细胞活性。结果:与对照组相比,含骨新康血清剂量依赖性地促进成骨细胞增殖;与生理盐水组相比,10%,20%骨新康组含药血清显著促进成骨细胞分泌碱性磷酸酶(P<0.01),抑制骨陷窝的生成。结论:骨新康通过促进成骨细胞的增殖和分化,抑制破骨细胞的活性,对临床骨质疏松的防治具有积极意义。     

骨形成肽羧基端衍生物G35I对成骨细胞和破骨细胞的体外影响

目的：探讨骨形成肽羧基端衍生物G35I在体外对成骨细胞和破骨细胞的影响。方法：利用体外人成骨细胞和骨髓来源大鼠破骨细胞培养和RT—PCR方法进行研究。结果：(1)G35I在体外可以刺激人胚胎长骨来源的成骨细胞的增生。(2)G35I在10-7mol／L可以刺激骨髓来源的破骨细胞样细胞的诱导分化形成，而在其他浓度(10^-8-10^-11mol／L)此作用不明显。(3)G35I在10^-7mol／L条件下可以抑制成骨细胞骨保护素的表达，且在72h作用最明显。结论：骨形成肽羧基端衍生物G35I在不同浓度时对骨代谢的两种功能细胞均有一定作用。     

阿魏酸对体外培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响

<正>阿魏酸化学名称为3-甲氧基4-羟基丙烯酸,是当归等抗骨质疏松中药复方制剂的组方中药所含的一种水溶性单体成分,是其主要活性物质之一,具有降低胆固醇、抗氧化、抗血小板聚集等功能~([1])。目前阿魏酸对心肌细胞、淋巴细胞活     

种植体周围炎对成骨细胞增殖分化及成骨功能影响的体外研究

利用体外分离培养的种植体周围炎来源和正常组织来源人成骨细胞（osteoblast,OB）,观察炎性微环境对其增殖、分化成熟的影响。探讨种植体周围炎对OB功能的影响,期望能为临床种植修复提供相关的理论基础。首先进行成骨细胞原代及传代培养,然后对细胞爬片进行碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色,光镜下观察计数ALP阳性OB数,并将细胞爬片用茜素红进行钙结节染色,光镜下观察钙结节,计数并拍照,均用于成骨细胞鉴定;传代第三代细胞,收集细胞上清液分别进行ALP活性检测及应用放射免疫方法测定骨钙素（osteocalcin,OCN）含量。原代培养的细胞呈现OB的形态学特征,ALP染色阳性,钙结节茜素红染色呈橘红色钙化结节,此两项结果证实培养细胞为OB;传代细胞种植体来源的细胞,ALP阳性OB数量减少,钙结节数量及骨钙素数值降低。种植体周围炎引发的炎性微环境降低成骨细胞的增殖分化及成骨功能。     

XW630对人的类成骨细胞株TE85细胞增殖、iNOS活性和cGMP含量的影响(英文)

目的:研究XW630对人的类成骨细胞株TE85细胞功能的影响。方法:[~3H]胸腺嘧啶掺入法和细胞计数法测定细胞增殖、放射免疫法测定cGMP含量、精氨酸转化法测定iNOS活性。结果:在培养的人的类成骨细胞中,XW630作用48h后,细胞数增加96.9％,[~3H]胸腺嘧啶掺入量增加62.7％。NOS抑制剂L-NMMA(0.25,0.5,1.0 mmol·L~(-1))作用48h,可剂量依赖地抑制细胞增殖,这一作用可被XW630 1.0nmol·L~(-1)部分阻断。作用时间在30min内,XW630对细胞iNOS活性及cGMP含量无影响。延长作用时间,XW630时间依赖地增加细胞iNOS活性及cGMP含量。结论:XW630刺激人的类成骨细胞增殖,增加细胞iNOS活性和cGMP含量。     

17β-雌二醇长时程作用促进成骨细胞HOS TE85 45Ca摄取及间质矿化

目的　研究 17β 雌二醇 (17β estradiol,E2 )对HOSTE85细胞骨形成的长时程效应。方法　3H 胸腺嘧啶参入法 (3H TdR)测细胞增殖 ;4 5Ca沉积法测细胞钙摄取 ;茜素红染色法测间质矿化。结果　E2 (0 1～ 10nmol·L- 1 )作用14d剂量依赖地刺激细胞3H TdR参入、增加4 5Ca摄取并增加茜素红染色面积。ICI1 82 ,780 (1 0nmol·L- 1 )能部分抑制E2作用 ,使其3H TdR参入分别减少了 36 5 6 % ,19 6 %和 15 4 % ,4 5Ca的摄入则分别减少了 2 2 2 7% ,37 2 8%和 4 0 1% ,茜素红染色面积减少。结论　E2 通过增加细胞数量、增加钙摄入而促进骨间质生成和矿化     

17β-雌二醇长时程作用促进成骨细胞HOS TE85 45Ca摄取及间质矿化

目的研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E₂)对HOS TE85细胞骨形成的长时程效应。方法³H-胸腺嘧啶参入法(³H-TdR)测细胞增殖;⁴⁵Ca沉积法测细胞钙摄取;茜素红染色法测间质矿化。结果E₂(0.1～10 nmol·L^-1)作用14 d剂量依赖地刺激细胞³H-TdR参入、增加⁴⁵Ca摄取并增加茜素红染色面积。ICI182,780(1.0 nmol·L^-1)能部分抑制E₂作用,使其³H-TdR参入分别减少了36.56%,19.6%和15.4%,⁴⁵Ca的摄入则分别减少了22.27%,37.28%和40.1%,茜素红染色面积减少。结论E₂通过增加细胞数量、增加钙摄入而促进骨间质生成和矿化。     

甲壳胺对人牙周膜细胞增殖和分化的影响

目的探讨甲壳胺对人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响。方法用原代培养的人牙周膜细胞,采用MTT法、酶动力学法和放射免疫法检测不同浓度甲壳胺(Chitosan,Chi,0.05,0.1,0.2g·L-1)对人牙周膜细胞增殖、碱性磷酸酶活性和骨钙素分泌的影响。结果与对照组比较,(1)Chi(0.05g·L-1)和Chi(0.1g·L-1)2组在3,5,7d时A570值均明显升高(P<0.05),Chi(0.2g·L-1)组仅在3d时明显升高(P<0.01);(2)不论是细胞裂解液还是细胞培养液中,甲壳胺均能明显增强牙周膜细胞碱性磷酸酶活性(P<0.05);(3)不同浓度的甲壳胺刺激牙周膜细胞骨钙素分泌量均较对照组高,但只有Chi(0.1g·L-1)组比较有显著性差异(P<0.05)。结论甲壳胺对人牙周膜细胞的增殖和分化功能有明显的促进作用。     

桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,探讨其抗癌作用的机制。方法:应用MTT法检测桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显徽镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期及凋亡率,免疫细胞化学法(ICC)检测细胞增殖、凋亡相关调控蛋白的表达。结果:桃儿七根醇提物可明显抑制MCF-7细胞的增殖,1,2,3 mg．L~(-1)桃儿七根醇提物作用72h后,细胞生长抑制率分别为43．0%,54．9%,78．5%,抑制作用呈时间及浓度依赖性。形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成。FCM分析发现桃儿七根醇提物阻断MCF-7细胞生长于细胞周期的G_2/M期,凋亡诱导作用呈时间及浓度依赖性。免疫细胞化学结果显示,2mg·L~(-1)桃儿七根醇提物作用48h后,PCNA,Bcl-2蛋白表达较对照组显著下降;而p21~(WAFI-CIP1)和c-Myc蛋白显著增加(P＜0．01)。结论:桃儿七根醇提物可能通过增加p21~(WAFI-CIP1)蛋白表达及降低PCNA蛋白表达而抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并可能下调Bcl-2蛋白表达和上调c-Myc蛋白表达来促进MCF-7细胞凋亡。     

Effect of rhodoxanthin from Potamogeton crispus L. on cell apoptosis in Hela cells

Carotenoid, a natural functional pigment, is known to have anti-carcinogenic activity. To verify the anti-cancer effects of rhodoxanthin which is a kind of carotenoids, we investigated the effects of rhodoxanthin from Potamogeton crispus L. on the proliferation rate, cell cycle distribution, apoptosis and the change in mitochondrial membrane potential in Hela cell line. The effects of rhodoxanthin were also tested on the concentration of Ca²⁺ in cells. Rhodoxanthin inhibited cell proliferation in Hela cells in a dose and time-dependent manner. Rhodoxanthin induced an accumulation of cells in the S phase of the cell cycle, reduced the mitochondria transmembrane potential and increased the concentration of intracellular Ca²⁺. In summary, our results suggested that rhodoxanthin-induced apoptosis in Hela cells occured via these pathways.     

17β-雌二醇对人成骨细胞株HOS TE85细胞增殖及胞内cAMP,cGMP,iNOS影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对ＨＯＳＴＥ８５细胞增殖及胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，ｉＮＯＳ影响。方法［３Ｈ］－ＴｄＲ参入，放射免疫及Ｌ－３Ｈ－精氨酸转化法。结果Ｅ２１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理４８ｈ，细胞计数为（９４．３×１０７±７．５×１０７）个·Ｌ－１，对照组为（６５．０×１０７±５．９×１０７）个·Ｌ－１，［３Ｈ］－ＴｄＲ参入量增加４５．０％；细胞ｉＮＯＳ活性为（７３．０±６．６）ｐｍｏｌ·Ｌ－１·ｇ－１·ｍｉｎ－１（比对照组增加４６１．５％），ｃＧＭＰ为（０．６９±０．０３）ｐｍｏｌ·Ｌ－１·１０－８ｃｅｌ（比对照组增加３０５．９％）；抑制ｈＰＴＨ诱导胞内ｃＡＭＰ升高。结论Ｅ２能刺激成骨细胞增殖。Ｅ２可能通过影响胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，ｉＮＯＳ含量和活性而发挥作用。     

苏木提取液对胃癌细胞增殖及凋亡作用的研究

目的探讨苏木提取液对人胃癌细胞株SGC-7901的生长抑制及凋亡作用。方法采用细胞计数法绘制生长曲线检测苏木提取液对SGC-7901细胞的生长抑制作用;苏木素-伊红(HE)及荧光染色观察用药后细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯形。结果生长曲线提示苏木提取液对SGC-7901细胞有明显的生长抑制作用;形态学观察可见典型的细胞凋亡特征,如细胞核固缩、染色质凝聚及凋亡小体形成,且药物作用呈现一定的浓度依赖性;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯形。结论苏木提取液对人胃癌细胞株SGC-7901有明显的生长抑制及诱导凋亡的作用。