高灵敏度LC-MS/MS法测定犬血浆中的坦洛新

犬口服盐酸坦洛新控释片后血浆药物浓度C_max小于10 ng·mL^-1，需建立测定犬血浆中坦洛新的高灵敏度液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。血浆样品加入内标苯海拉明，用正己烷-二氯甲烷(2∶1)萃取后，反相C₁₈色谱柱分离，以甲醇-乙腈-甲酸铵(30∶40∶30，v/v/v)为流动相，流速为0.4 mL·min^-1。选用大气压化学离子化源(APCI)三重四极杆串联质谱仪，以选择反应监测方式进行检测，用于定量分析的离子反应分别为m/z 409→228(坦洛新)和m/z 256→167(苯海拉明)。坦洛新线性范围为0.02～50 ng·mL^-1，定量下限为0.02 ng·mL^-1。批内、批间精密度(RSD)均小于9.72%，准确度(RE)在-2.61%～8.82%。本方法灵敏度高，专属性强，用于犬口服盐酸坦洛新控释片后的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中西酞普兰及其在制剂生物等效性中的应用

A sensitive and selective LC-MS/MS method for determination of citalopram in human plasma was established to study the bioequivalence of different formulations containing citalopram. The samples were simply pretreated by protein precipitation using acetonitrile, and then analyzed on a Zorbax Extend C₈column. The mobile phase consisted of acetonitrile-water-formic acid (60∶40∶0.2), at a flow-rate of 0.5 mL·min^-1. A Thermo Finnigan TSQ Quantum Ultra tandem mass spectrometer equipped with electrospray ionization source was used as detector and was operated in the positive ion mode. Selected reaction monitoring using the precursor to product ion combinations of m/z325 → m/z109 and m/z265 → m/z167 was performed to quantify citalopram and the internal standard, respectively. The pharmacokinetic parameters of citalopram in different formulations were calculated by non-compartment model. The linear calibration curves were obtained in the concentration range of 0.10-100 μg·L^-1. The lower limit of quantification was 0.10 μg·L^-1. The intra- and inter-day relative standard deviation (RSD) over the entire concentration range was less than 5.2%. Accuracy determined at three concentrations (0.25, 8.00 and 90.0 μg·L^-1 for citalopram) ranged from -4.7% to 1.3%. Each plasma sample was chromatographed within 3.0 min. The method was successfully used in bioequivalence study of citalopram in human plasma after oral administration of 20 mg citalopram. Calculated with AUC_{1-120 h}, the bioavailability of two formulations was (102.1±10.9)%. The method is rapid, selective, robust and is proved to be suitable for bioequivalence evaluation of different formulations containing citalopram.     

LC-MS/MS法测定人血浆中的氨氯地平

目的 采用LC-MS/MS测定人血浆中的氨氯地平.方法 血浆样品经氢氧化钠碱化,乙酸乙酯萃取后进行分析.使用Gmini C18 110A(50 mm×3 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-甲酸(55:45:0.025),流速0.2 ml·min-1,通过电喷雾离子化四极串联质谱,以多反应离子方式检测.氨氯地平m/z 409.4→237.9和莫沙比利m/z 422.1→198.0.结果 线性范围为0.0313～20 ng·ml-1,最低定量限为0.0313 ng·ml-1,萃取回收率为74.4%～83.1%,方法回收率为96.1%～108.7%,日内和日间RSD均<8%.结论 所用方法快速、简便、灵敏度高,适用于人血浆中药物浓度的测定及药物动力学和生物利用度的研究.     

LC-MS/MS法测定人血浆中格列喹酮浓度

目的 建立LC-MS/MS法测定人血浆中格列喹酮的浓度,并应用于人体药代动力学研究.方法 以格列吡嗪为内标,含药血浆50μL经乙腈5倍沉淀后,在Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×50 mm,5μm)上进行色谱分离,以60％乙腈-40％甲醇溶液为有机相(A),10 mmol·L...     

LC-MS/MS法测定人血浆中的金刚烷胺浓度及其药动学

目的建立HPLC-MS/MS分析方法测定人血浆中的金刚烷胺浓度,并用于研究健康受试者口服氨酚咖黄烷胺片后金刚烷胺的药动学。方法血浆经乙醚-二氯甲烷(4∶1,V/V)提取,采用C18柱为分析柱,甲醇-10 mmol.L-1醋酸铵溶液-冰醋酸(60∶40∶0.08,V/V/V)为流动相,流速1.0 mL.min-1,柱后分流,0.2 mL.min-1进入质谱,柱温35℃。质谱检测方式:多反应离子监测,选择监测的离子为m/z152→m/z135(金刚烷胺)和m/z275→m/z230(内标物,氯苯那敏)。结果金刚烷胺的线性范围为1~200μg.L-1(r=0.9999),血浆中金刚烷胺的最低定量限达1μg.L-1(RS,N>10),回收率>80%。结论本法简便、准确、灵敏度高,适用于金刚烷胺的药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的辅酶Q10

目的:建立一种快速、灵敏的LC-MS/MS法测定人血浆中的辅酶Q10。方法:血浆样品经正己烷液-液萃取2次,以甲醇为流动相,CapcellPakC18柱(35mm×2.0mm,5μm)进行分离,采用大气压化学电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z864→197(辅酶Q10)和m/z796→197(内标辅酶Q9)。结果:测定血浆中辅酶Q10的线性范围为10.0～1000ng·mL-1,定量下限可达10.0ng·mL-1,日内、日间精密度(RSD)均小于8.9%,准确度(RE)在-0.9%～3.8%之间,单个样品分析时间为4.5min。结论:本方法分析测试时间短,灵敏度较高,血浆用量少,适用于人血浆样品中辅酶Q10的测定和药物动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

LC-MS/MS法测定人血浆中阿折地平的浓度

目的:建立测定人血浆中阿折地平浓度的方法。方法:人血浆样本经乙腈沉淀蛋白后采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法进样测定,色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-10 mmol/L乙酸铵(含1%甲酸)(80∶20,V/V)。选用多重反应监测扫描方式进行质谱监测,监测离子反应分别为m/z 583.3→167.1(阿折地平)、m/z 285.1→154.0(内标地西泮)。结果:阿折地平的血药浓度在0.05~40 ng/ml范围内线性关系良好,定量下限为0.05 ng/ml。日内、日间RSD分别为3.01%~7.75%,0.99%~12.08%;平均提取回收率为110.20%~111.99%。结论:该方法简便、快速、灵敏、专属性强、重现性好,适用于人血浆中阿折地平浓度的测定。     

LC/MS/MS法测定血浆中左羟丙哌嗪浓度及其药代动力学

目的建立测定血浆中左羟丙哌嗪的液相色谱-串联质谱法，考察左羟丙哌嗪在中国健康志愿者体内的药代动力学行为。方法血浆样品经液-液提取后，进行色谱分离，在三重四极杆串联质谱仪上，以多重反应离子监测(MRM)方式进行定量分析，用于监测的离子为m/z 237 → m/z 120（左羟丙哌嗪）和m/z 288 → m/z 58(佐米曲普坦，内标)。结果左羟丙哌嗪的最低定量浓度为0.25 μg·L^-1，线性范围为0.25-500.0 μg·L^-1，精密度与准确度符合生物样品分析要求。结论该法操作简便、快速、灵敏度高。可检测出健康志愿者po左羟丙哌嗪60 mg,其24 h后的血药浓度，适于临床药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人体血浆中谷氨酰胺的含量

目的建立测定人血浆中谷氨酰胺浓度的液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)。方法血浆样品用质量分数为10%的三氯乙酸沉蛋白,色谱柱:Inertsil-CN柱,流动相:5 mmol·L~(-1)醋酸铵(含体积分数为0.1%的甲酸)-甲醇-乙腈(体积比为70∶15∶15),流速:750μL·min~(-1),质谱:采用多反应检测模式,API2000电喷雾离子源。结果谷氨酰胺的线性为12~384 mg·L~(-1),定量下限为12 mg·L-1,日间日内精密度(relative standard deviation,RSD)均不大于15%。健康男性受试者单剂量口服谷氨酰胺颗粒5 g后的主要药动学参数为:tmax为(0.77±0.13)h,ρmax为(75.3±29.0)mg·L~(-1),t_(1/2)为(1.83±1.93)h,采用梯形法计算,AUC_(0-t)为(109.2±40.1)mg·h·L~(-1),AUC_(0-∞)为(114.0±40.4)mg·h·L~(-1)。结论该法适合于谷氨酰胺颗粒的人体药动学研究。     

氨溴特罗颗粒剂中氨溴索的生物等效性评价

目的建立LC-MS／MS法测定氨溴索血药浓度,研究口服氨溴特罗颗粒剂与氨溴特罗口服液中氨溴索在人体内的生物等效性。方法采用双周期随机交叉试验设计,研究了18名健康男性受试者单剂量口服氨溴特罗颗粒（受试制剂）与氨溴特罗口服液（参比制剂）的药动学。采用LC-MS／MS法测定血浆中氨溴索的浓度。评价两制剂中氨溴索在人体内的生物等效性。结果单次给予受试制剂或参比制剂（含盐酸氨溴索60nag）后氨溴索的主要药物动力学参数分别为：G。为（183．86±108．22）、（216．68±198．50）μg·L^-1;tmax为（2．1±0．8）、（2．2±1．0）h;AUC0-96为（2274．13±1159．02）、（2016．97±928．48）μg·L^-1;AUC0-∞为（2307．42±1203．33）、（2056．64±961．25）μg·h·L^-1;t1/2为（14．4±4．6）、（17．2±6．9）h。与参比制剂相比,受试制剂的相对生物利用度为（111．3±18．0）％。结论受试制剂与参比制剂中氨溴索的主要药动学参数之间无明显差异,非参数检验未发现两制剂的tmax有显著性差异。双单侧t检验结果表明两制剂为生物等效制剂。     

HPLC-MS/MS测定人体血浆中克拉霉素浓度的方法及方法学确证

目的建立测定人体血浆中克拉霉素浓度的高效液相色谱-串联质谱联法（HPLC-MS/MS）法。方法血浆样本用甲醇沉淀蛋白后,选用色谱柱Agilent-XDB-C8柱（2.1mm×150mm,5μm）,以甲醇（A相）：水（含0.1%甲酸）=85：15（V：V）的比例为流动相,流速为0.2ml/min,选用岛津（SHIMADZU）高效液相色谱系统,串联API3200型三重四极杆质谱仪,采用多重反应监测（MRM）扫描方式进行监测,电喷雾离子化源（ESI源）,正离子方式,用于定量分析的离子反应对分别为质荷比m/z748.4→m/z158.2（克拉霉素）和m/z515.3→m/z276.2（替米沙坦,内标）。结果本方法血浆中克拉霉素的线性范围为10～3000ng/ml（r〉0.99）,定量下限为10ng/ml,批内和批间相对标准偏差均〈15%,准确度（相对回收率）相对标准偏差也均〈15%。稳定性试验中,血浆中克拉霉素在方法学要求的各种贮存条件下均较稳定。结论该方法快速、灵敏、专属性强、重现性好,适用于人体内克拉霉素的药代动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中伪麻黄碱及其药动学研究

目的建立人血浆中伪麻黄碱含量的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定法,并对其进行人体药动学研究。方法血样用甲醇沉淀、离心后进行质谱分析,色谱柱：Agilent ZORBAX SB C18（100 mm×3.5 mm,3.0μm）;流动相：甲醇-水（含10 mmol.L-1乙酸铵,0.05%甲酸）=28∶72（v/v）;质谱条件：气动辅助电喷雾离子化（ESI）,正离子检测,选择性多反应检测（SRM）：伪麻黄碱,166.1〉148.1;内标：帕罗西汀,330.1〉192.1。测定20名健康受试者口服受试制剂（单剂量、多剂量）后血浆中伪麻黄碱浓度。结果线性范围1-600μg.L-1,最低定量限（LLOQ）为1.0μg.L-1,绝对回收率为85.8%-87.6%。单剂量口服伪麻黄碱（120、240 mg）后药动学参数：t1/2为（6.8±0.9）、（6.6±1.3）h,tmax为（6.1±1.6）、（7.4±3.8）h,Cmax为（210.44±41.59）、（465.26±87.65）μg.L-1,V为（398.12±91.05）、（353.52±102.34）L,CL为（42.57±9.02）、（39.69±8.87）L.h-1,AUC0-48为（3 256.12±711.26）、（6 954.52±1 955.27）μg.h.L-1,MRT0-48为（11.71±0.89）、（11.87±1.26）h;伪麻黄碱多剂量（120 mg,bid）药动学参数：Cmax为（398.08±102.56）μg.L^-1,V为（309.66±82.37）L,CL为（37.51±7.23）L.h^-1,AUC0-48为（5 463.24±2 256.39）μg.h.L^-1,Cav为（282.11±92.19）μg.L-1,DF为（0.61±0.15）,AUCss为（3 372.85±1 328.78）μg.h.L^-1。结论本方法结果准确、灵敏,伪麻黄碱主要药动学参数与国内外文献报道基本一致。     

LC—MS／MS测定人血浆中的罗红霉素

目的 采用液相色谱-质谱法测定人血浆中的罗红霉素.方法 采用API 3000型LC-MS/MS液质联用系统,Ulti-mate C<,18>分析柱(50 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(80∶20,含0.1%甲酸),流速0.3 ml·min<'-1>.MRM模式检测(离子对837.5/679.5),内标法定量.结果 罗红霉索和内标的保留时间分别为2.39、2.36 min,标准曲线0.01～10.00 μg·ml<'-1>的线性良好,最低定量限为10 ng·L<'-1>,日内、日间RSD分别小于3.4%、2.6%,方法 回收率98.8%～106.6%,萃取回收率70.7%～73.7%.结论 所建方法 快速简便、灵敏准确,适用于血浆中罗红霉素浓度的测定及药物动力学研究.     

高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定人血浆中多潘立酮的浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定人血浆中多潘立酮的浓度.方法:采用Waters公司SymmetryTM C18(3.9 mm×150 mm,5 μm)色谱柱;流动相为 20 mmol·L-1乙酸铵-甲醇(15∶85);流量为 0.6 mL·min-1;采用多反应离子监测(MRM)检测.结果:多潘立酮在0.3～50.0 ng·mL-1浓度范围内有良好的线性关系;最低检测浓度为 0.3 ng·mL-1;日内、日间RSD均小于15%;准确度均在±15%范围内.结论:本方法简单、快速、灵敏、准确,可用于人血浆中多潘立酮浓度的检测.     

LC-MS/MS法测定人血浆中拉米夫定浓度及其生物等效性研究

目的建立测定人血浆中拉米夫定浓度的LC-MS/MS方法,并评价拉米夫定片在健康志愿者体内的相对生物利用度及2种制剂间的生物等效性。方法 24名健康男性志愿者随机分组、自身双交叉,分别单剂量口服100 mg拉米夫定试验制剂和参比制剂,LC-MS/MS法测定血浆中拉米夫定浓度,采用WinNonlin 6.1软件计算药动学参数。结果拉米夫定在20.48～5 000μg L-1与峰面积呈良好的线性关系,最低定量限（LLOQ）为20.48μg L-1。口服100 mg拉米夫定参比制剂和试验制剂后的主要药动学参数如下：Cmax分别为（1 152.6±326.4）和（1 032.4±319.7）μg L-1;tmax分别为（0.93±0.30）和（1.07±0.47）h;t1/2分别为（3.4±0.7）和（3.3±0.6）h;AUC0～16 h分别为（3 811.9±870.2）和（3 753.6±1 067.0）μg h L-1;AUC0～∞分别为（3 958.9±871.3）和（3 914.8±1 087.0）μg h L-1。试验制剂的相对生物利用度为（98.2±17.0）%。结论本方法简单、快速、灵敏、准确,可用于人血浆中拉米夫定浓度的测定。试验制剂与参比制剂具有生物等效性。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中阿魏酸的血药浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中阿魏酸的血药质量浓度。方法色谱柱采用Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),仪器采用API 4000三重四极杆串联质谱仪,采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,采用沉淀蛋白法处理样品,用于定量分析的离子对为m/z 193.1→m/z 134.1(阿魏酸)和m/z 121.2→m/z 77.0(苯甲酸,内标)。结果该方法的线性范围在5.0～2 000.0μg.L-1,定量下限为5.0μg.L-1,且血浆中内源性物质不干扰阿魏酸的测定;日内和日间精密度RSD均小于15%;阿魏酸的平均提取回收率为91.0%～100.5%,基质效应在87.8%～89.7%。结论该方法适用于阿魏酸在大鼠体内的药物动力学研究。     

LC-S／MS法测定人血浆中氟伏沙明浓度及其人体生物等效性

目的建立测定人血浆中氟伏沙明浓度的方法,对国产和进口马来酸氟伏沙明片进行生物等效性研究。方法24名健康男性志愿者按2×2交叉试验方案设计,分别口服受试制剂和参比制剂各50mg,并在给药后96h内动态采集血样,采用LC-MS／MS法测定血浆中氟伏沙明浓度,计算药动学参数,评价两种制剂的生物等效性。结果受试制剂和参比制剂的主要药动学参数‰分别为（18．79±8．15）μg·L^-1和（19．04±7．49）μg·L^-1,t。分别为（3．734±0.90）h和（3．814±1．02）h,AI‰分别为（327．574±131．93）μg·h·L^-1和（349．364±159．63）μg·L^-1,AUC0→∞分别为（346．95±134．84）μg·L^-1和（368．27±163．59）μg·h·L^-1,t1／2分别为（14．554±3．14）h和（14．15±3．17）h,两制剂主要药动学参数经对数转换后进行方差分析及双单侧t检验,并计算90％置信区间,表明两种制剂生物等效,受试制荆相对于参比制剂的生物利用度为（97．08±16．70）％。结论本方法可用于氟伏沙明人体药动学及生物等效性研究,统计分析证实马来酸氟伏沙明国产与进口制剂生物等效。     

LC-MS/MS法测定人血浆中西布曲明代谢物(M2)

西布曲明代谢物M2(N-双脱甲基西布曲明)是减肥药西布曲明(N-[1-[1-(4-氯苯基)环丁基]-3-甲基丁基]-N,N-二甲基胺,sibutramine)的主要活性代谢产物,其体内浓度较低,难以用常规的HPLC-UV法进行测定.国内至今未有西布曲明血药浓度测定的相关报道,为了解西布曲明制剂的体内过程,我们参考有关文献[1],采用液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)法建立了西布曲明主要活性代谢产物M2的血药浓度分析方法,可较好地满足研究工作的需要. 1 材料和方法 1.1 仪器 Waters 2690高效液相色谱仪(美国Waters公司);QuattroLC质谱仪(英国质谱公司,micromass).XW-80A旋涡混合器(上海医科大学仪器厂);CQ50超声波清洗器(上海超声波仪器厂);80-2型离心机(上海手术器械厂);LNG-T83台式快速离心浓缩干燥器(江苏太仓医用器械厂);SHB-Ⅲ循环多用水泵(郑州长城仪器厂);TGL.16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂).