可吸收表皮生长因子复合膜防止肌腱粘连的研究★

背景：采用液态分子生物材料作为屏障预防肌腱粘连发生，存在药物降解快、流失量大、屏障作用不理想等问题，因此研究者们越来越多的倾向于膜态屏障材料的研制开发。同时发现肌腱损伤后，腱细胞在多种内源性的生长因子作用下增殖分化，促进了肌腱的内源性愈合，但究竟哪一种因子是肌腱愈合的特异性因子，也是学者们研究的焦点之一。 目的：观察表皮生长因子复合胶原膜在预防鞘管区肌腱粘连、促进肌腱内源性愈合中的作用。 方法：将30只10月龄雄性leghorn公鸡随机分为3组，每组10只。将每只鸡的左足第三趾造成挤压撕脱伤模型，用改良Kessler缝合法缝接。断端分别包裹复合有表皮生长因子的胶原膜、单纯的胶原膜以及断端不加任何处理。术后4周，对标本进行大体观察、生物力学测试、光镜、电镜等观察。 结果与结论：表皮生长因子胶原膜组肌腱粘连程度较轻，腱缝合段内的胶原纤维数量多，以粗大的Ⅰ型胶原为主；成纤维细胞数量少，腱细胞成熟。单纯胶原膜组肌腱粘连较轻，但腱缝合段内的胶原纤维数量少，排列稀疏，以纤细的Ⅲ型胶原为主；空白对照组肌腱与周围组织粘连重，腱缝合段内的胶原纤维数量较多，排列紊乱，Ⅰ、Ⅲ型胶原交错排列。结果表明表皮生长因子来促进肌腱的内源性愈合，可降解胶原膜修复腱鞘可阻止肌腱的外源性愈合，从而达到防止肌腱粘连的目的。     

生骨注射液对骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子表达的影响

背景：在促进骨折修复研究中,应用外源性生长因子极不稳定,且造价高不适宜广泛推广,如何有效地促进内源性生长因子的表达将是值得深入研究的课题。 目的：观察生骨注射液对骨折愈合过程中内源性碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子表达的影响。 设计、时间及地点：完全随机分组设计,对照实验,于2007-07/2008-08在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室完成。 材料：清洁级3月龄雄性SD大鼠60只。生骨注射液由当归、土鳖虫、淫羊藿等药物组成,由湖北省中医院提供,质量浓度为1 g/L。 方法：建立SD大鼠胫骨干骨折愈合模型,分成实验组和对照组各30只,分别在骨折断端等量注射生骨注射液和生理盐水,每两日1次,0.2 mL/次。两组分别于术后第1,2,3,4,5,6周时各处死5只大鼠,取材。 主要观察指标：采用免疫组织化学方法,检测两组大鼠骨折愈合过程中不同阶段骨痂组织中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子蛋白的表达及差异情况。 结果：免疫组织化学染色显示,各时间点实验组骨痂组织中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子表达量及阳性定位均明显强于对照组。 结论：生骨注射液能够增加骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子在骨痂组织中的表达,这可能是生骨注射液促进骨折愈合的机制之一。     

生长因子及骨髓间充质干细胞与肺再血管化修复烟熏大鼠肺气肿模型

背景：作者以往研究初步证明在单纯使用胰蛋白酶制作的大鼠肺气肿模型上骨髓间充质干细胞可以“归巢”到病损肺组织,并参与肺血管形成促进肺组织修复。碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子同样具有强大的促进血管新生的作用。 目的：观察碱性成纤维生长因子、血管内皮生长因子、骨髓间充质干细胞对肺气肿模型大鼠肺毛细血管再生和肺气肿病理修复的影响。 方法：除正常对照组外,其余5组大鼠均采用烟熏加气管内一次性滴注猪胰弹性蛋白酶法建立肺气肿模型。成功造模后,碱性成纤维细胞生长因子组气管内注入400 U碱性成纤维细胞生长因子,血管内皮生长因子组气管内注入2 μg血管内皮生长因子,1次/周,共3次;单纯细胞移植组于尾静脉注入4×109 L-1骨髓间充质干细胞悬液1 mL;血管内皮生长因子+细胞移植组气管内注入血管内皮生长因子的同时,尾静脉注入骨髓间充质干细胞;模型对照组、正常对照组给予相同体积的生理盐水。干预4周后行动脉血气分析,观察肺组织病理改变及形态学指标变化,免疫组化法检测肺组织CD34+的表达。 结果与结论：与模型对照组比较,血管内皮生长因子组PaO2值明显升高(P < 0.05),余指标无明显变化(P > 0.05);其余组各项指标均无明显变化(P > 0.05)。大体及光镜观察可见,正常对照组肺表面光滑平整,呈淡粉红色,弹性好,切面可见肺泡大小均匀一致;模型对照组出现慢性阻塞性肺气肿病理改变;余4组均较模型对照组病变程度有所好转。与模型对照组比较,碱性成纤维细胞生长因子组、血管内皮生长因子组、单纯细胞移植组、血管内皮生长因子+细胞移植组平均肺泡数、CD34+相对阳性面积均明显增加(P < 0.05),平均肺泡面积、平均内衬间隔则明显减少(P < 0.05),此4组之间各指标比较均无明显差异(P > 0.05)。提示碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子、骨髓间充质干细胞均能在一定程度上修复烟熏加气管内滴入弹性蛋白酶构建的大鼠肺气肿模型的病变,可能的作用机制是增加肺的毛细血管数、扩张肺血管,增加肺血流量,改善通气/血流,肺组织通过自身的代偿缩小了肺泡面积,减小肺容积。     

碱性成纤维细胞生长因子促进冻干肌腱移植重建前交叉韧带的早期血管生成：组织学表现

背景：以往实验已证实碱性成纤维细胞生长因子在体内外均有促新生血管形成的作用。冻干法可以减低移植物的抗原性，经冻干处理后的移植物保存时间长并且运输方便，更容易商品化。冻干肌腱补充活性细胞生长因子有望加速新血管的生成。 目的：拟验证碱性成纤维细胞生长因子促进冻干肌腱移植重建前交叉韧带后早期血管的生成作用。 设计、时间及地点：对照观察动物实验，于2006-06/2007-06在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成。 材料：选用健康成年家犬14只。 方法：取2只犬，无菌手术取其双下肢伸趾长肌腱16条，冻干处理后供实验用。将其余12只犬左、右侧膝关节分别移植单纯冻干肌腱和复合100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子后冻干肌腱重建前交叉韧带。 主要观察指标：分别于移植后1，2，3，4，5，6周取材，每次取2只。进行苏木精-伊红染色，通过图像分析仪定性观察新生血管的生成情况。 结果：复合碱性成纤维细胞生长因子冻干肌腱组移植后两三周出现新生血管，四五周达到高峰；单纯冻干肌腱组移植后四五周出现新生血管。复合碱性成纤维细胞生长因子冻干肌腱组新血管长入肌腱的时间先于对照组，深度深于对照组。 结论：复合100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子的冻干肌腱移植重建前交叉韧带后，在新血管形成的时间及长入肌腱的深度方面均优于单纯冻干肌腱。     

重组碱性成纤维细胞生长因子/I型胶原复合材料修复兔半月板无血运区软骨损伤

摘要 背景：单独应用重组碱性成纤维细胞生长因子对无血运区半月板损伤的愈合无明显影响,考虑主要与其在体内易被吸收和降解等有关。近年来Ⅰ型胶原作为生物性载体的应用逐渐增多。 目的：观察重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合材料修复兔半月板软骨损伤的效果。 方法：选用健康新西兰大白兔36只,首先在兔半月板上造成统一的无血运区损伤模型。随机分为空白对照组、重组碱性成纤维细胞生长因子组和重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组。术后2,6,12周分批处死实验动物,进行大体形态观察和组织学检查。 结果与结论：重组碱性成纤维细胞生长因子组对无血运区损伤愈合无明显影响,但对半月板边缘滑膜中成纤维细胞有明显的促增殖作用;重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原组表现为纤维软骨样组织愈合,但其愈合组织与正常半月板组织仍有差异。结果表明应用重组碱性成纤维细胞生长因子/Ⅰ型胶原复合型材料治疗半月板无血运区的损伤是一种有效的治疗方法。 关键词：半月板;软骨;损伤;重组成纤维细胞生长因子;I型胶原 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.34.006     

血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子在缺血预处理大鼠局灶性脑缺血再灌注区域的表达

背景：脑缺血预处理可增加碱性成纤维细胞生长因子的表达,可能导致脑缺血耐受的产生。大鼠大脑中动脉缺血再灌注给予血管内皮生长因子能够起到神经保护作用。 目的：观察缺血预处理对缺血再灌注大鼠血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达的影响。 方法：将SD大鼠随机分为缺血预处理组、模型组和假手术组。缺血预处理及模型组线栓法阻塞大脑中动脉制备脑缺血模型。预处理组在脑缺血-再灌注前3 d用插入尼龙线阻塞大脑中动脉,缺血2 h后再灌注22 h。模型组第一次手术将线栓前推5 mm,不阻断血流,其他同预处理组。假手术组仅插入尼龙线不阻塞大脑中动脉。用苏木精-伊红染色法观察3组间神经细胞变化。用抗生物素-生物素-过氧化物酶复合物法检测各组血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达。分别比较3组神经功能评分、光镜下脑缺血再灌注区神经细胞形态、血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的表达。 结果与结论：与模型组比较,预处理组神经功能评分明显低于模型组(P < 0.01)。光镜下观察结果显示,与模型组比较,预处理组缺血面积及缺血程度均减轻,血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达均明显升高(P < 0.05)。结果提示缺血预处理可能通过增强血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子而对缺血再灌注大鼠神经细胞起保护作用。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对鞘内肌腱愈合和粘连的影响

背景：碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF) 能促进体外腱细胞的增殖及胶原分泌，并促进鞘外肌腱的愈合，但其对鞘内肌腱的作用的资料较少。 目的：探讨外源性bFGF对鞘内肌腱愈合和粘连形成的作用。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2004-05/2005-02在上海市第六人民医院实验动物中心实验室完成。 材料：成年雄性来亨鸡90只制备鸡右爪第3趾趾深屈肌腱横断模型，随机均分为3组，每组30只。 方法：对照组：肌腱横行切断后原位修复。纤维蛋白封闭剂组：在肌腱断端使用纤维蛋白封闭剂0.6 μL后，原位修复肌腱。bFGF组：在断端使用bFGF和内含bFGF 500 ng的纤维蛋白封闭剂混合物0.6 μL，原位修复肌腱。 主要观察指标：术后1，2，4，8周，每组各取6只鸡进行大体、组织学检测；术后8周每组再取6只鸡进行生物力学测定。 结果：对照组与纤维蛋白封闭剂组间各项观测指标比较均无显著性差别，与对照组和纤维蛋白封闭剂组相比，bFGF组修复部位腱鞘、腱外膜及腱实质的新生血管形成、成纤维细胞增殖较好，胶原的分泌出现早，数量也较多；肌腱滑动距离较短，屈曲功和肌腱最大抗拉力较大。 结论：在肌腱断端使用外源性bFGF能促进鞘内肌腱的愈合，但也加重了肌腱的粘连。     

转化生长因子β1中和抗体对转化生长因子β诱导肌腱胶原和术后粘连的影响

背景: 研究表明,转化生长因子β1在肌腱损伤愈合过程中增加了肌腱细胞胶原的合成和术后粘连的形成。 目的：观察转化生长因子β1抗体对转化生长因子β诱导的肌腱细胞胶原产生及术后粘连形成的影响。 设计、时间及地点：随机分组观察实验,于2005-09/2006-06在同济医学院实验动物中心完成。 材料：选择2~5月龄新西兰大白兔,体质量3.5~4.5 kg。转化生长因子由美国Santa Cruz B iotechnology公司提供。 方法：取兔屈指肌腱分离肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞,将细胞随机分成2组,实验组加入1 µg/L 转化生长因子β后,再加入0.1,0.5,1.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体,对照组不添加任何试剂,酶联免疫吸附实验测定Ⅰ型胶原。取84只兔行中趾屈指肌腱切断吻合术,将其中36只兔随机分成3组,腱鞘内分别注入生理盐水、1.0,2.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体,4,8周后取出肌腱行肌腱粘连检测、生物力学测定、组织学观察和扫描电镜观察;余48只兔随机分成2组,腱鞘内分别注入生理盐水和1.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体,1,2,4,8周后取出肌腱,原位杂交方法测定肌腱转化生长因子β1和Ⅰ型胶原mRNA的表达。 主要观察指标：各组兔肌腱细胞胶原产生及术后粘连情况。 结果：酶联免疫吸附实验显示,转化生长因子β1能明显提高肌腱细胞Ⅰ型胶原的产生;转化生长因子β1抗体能降低3种细胞Ⅰ型胶原的产生,随抗体质量浓度增加,Ⅰ型胶原水平逐渐降低,且呈剂量依赖性;术后4,8周,与1.0,2.0 mg/L 转化生长因子β1组比较,生理盐水组屈趾肌腱滑动距离较短,模拟主动屈曲度明显受限(P < 0.05),最大抗断裂载荷各组间比较差异无显著性意义(P > 0.05)。扫描电镜和组织学观察结果显示,术后4,8 周生理盐水组胶原纤维排列紊乱,1.0,2.0 mg/L 转化生长因子β1组胶原纤维排列整齐。原位杂交结果显示,术后各时间点1.0 mg/L 转化生长因子β1组转化生长因子β1 和Ⅰ型胶原mRNA表达均低于生理盐水组(P < 0.05)。 结论：转化生长因子β1抗体能有效抑制转化生长因子β1在肌腱损伤修复中的作用,减少粘连形成。     

生肌玉红胶原海绵修复创面损伤

背景：生肌玉红胶原海绵能显著促进创面愈合。 目的：观察生肌玉红胶原海绵对兔皮肤创面愈合的影响。 方法：在新西兰白兔背部制造3处全层皮肤缺损创面,分别以生肌玉红胶原海绵、贝复剂(重组碱性成纤维细胞生长因子外用溶液)、生理盐水修复。观察各组创面愈合时间、创面愈合率,检测创面修复组织内成纤维细胞数、血红素氧化酶1、转化生长因子β1 mRNA与蛋白及增殖细胞核抗原蛋白表达。 结果与结论：与贝复剂、生理盐水比较,生肌玉红胶原海绵可显著促进成纤维细胞增殖(P < 0.05),增加创面血红素氧化酶1、转化生子因子β1及增殖细胞核抗原的表达(P < 0.05),提高创面愈合率(P < 0.05),缩短创面愈合时间(P < 0.05)。证实生肌玉红胶原海绵能够促进创面修复,其作用机制可能是通过提高创面血红素氧化酶1、转化生长因子β1表达促进细胞增殖,增加成纤维细胞等创面修复细胞。     

壳多糖与外源性碱性成纤维细胞生长因子联合应用修复创面愈合的评估

目的：壳多糖具有抗菌消炎和收敛作用。碱性成纤维细胞生长因子具有促进血管生成、促进神经生长等功能，是创伤愈合和上皮形成的重要调节物。实验联合应用壳多糖和碱性成纤维细胞生长因子，观察其对创面愈合的影响。 方法：实验于2006-04/2007-01在河北省人民医院实验室及河北医科大学第四附属医院实验室完成。实验室标准均为生物安全二级(BSL-2)。①实验材料：48只雄性健康Wistar大鼠由河北医科大学实验动物中心提供，体质量200~250 g，清洁级，实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：以切割法制备大鼠创伤模型，造成全层皮肤创面。将48只Wistar大鼠随机分为对照组、壳多糖组、生长因子组、壳多糖+生长因子组,并分别给予蒸馏水、100 g/L壳多糖、1 000 IU/mL碱性成纤维细胞生长因子、100 g/L壳多糖+1 000 IU/mL碱性成纤维细胞生长因子药液治疗，每组12只。③实验评估：以创面愈合时间和速率、新生毛细血管、炎症细胞和细胞渗出的变化以及血管内皮生长因子在创面组织中的表达来评价修复效果。 结果： 48只大鼠全部进入结果分析。①壳多糖+生长因子组创面愈合时间最快（P < 0.01）。②与其他3组比较，壳多糖+生长因子组第3天有较多毛细血管生成，第14天成纤维细胞排列整齐。③壳多糖+生长因子组血管内皮生长因子表达在术后第10天达到最高峰，至伤后第14天仍保持高水平，且明显高于其他3组（P < 0.01）。 结论：壳多糖+碱性成纤维细胞生长因子促进伤口愈合，缩短愈合过程，提高愈合质量，两者联合应用可更大限度发挥各自功效。     

重组胸腺素β4通过调节血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子促进皮肤创伤愈合

背景：由于机体自身修复愈合的能力极其有限，一旦发生损伤或者病变很难自愈。近年来，胸腺素β4促进创伤愈合的作用受到关注，为创伤愈合药物的研究提供了一个新方向。 目的：通过制作大鼠皮肤全层创伤模型，观察局部给予重组胸腺素β4对创面血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子表达的调节作用，并分析其剂量效应。 设计、时间及地点：细胞因子水平的随机对照动物实验，于2007-03/2008-01在南开大学医学院解剖教研室完成。 材料：胸腺素β4由北京诺思兰德生物技术有限公司提供。 方法：纳入雄性SD大鼠60只，采用直径8 mm的自制打孔器在大鼠脊柱两侧脊肋角处各制备1个全层皮肤缺损模型。将大鼠随机分为胸腺素β4 40，120，360 mg/L组及对照组，每组15只。分别于模型制备后即刻、每天早7：00、晚7：00给每个伤口表面滴加相应剂量的胸腺素β4 50 μL及等量磷酸盐缓冲液。 主要观察指标：于造模后2，4，7 d，每组每时相点取5只大鼠背部全层皮肤标本行苏木精-伊红和三原染色观察组织形态学变化，采用免疫组织化学法检测血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的表达。 结果：创面组织形态观察结果示，与对照组相比，胸腺素β4各剂量组造模后毛细血管增多，成纤维细胞、胶原纤维、网状纤维增多，排列较规则，以胸腺素β4 120 mg/L组最明显。胸腺素β4处理后4 d血管内皮生长因子表达最多，造模后7 d表达减少，胸腺素β4 120 mg/L组血管内皮生长因子表达强度保持在较高水平，阳性血管面积大于 40，360 mg/L组(P < 0.05~0.01)。胸腺素β4 120 mg/L组造模后2 d碱性成纤维细胞生长因子表达较强，造模后4，7 d表达逐渐减弱(P < 0.01)。 结论：实验中120 mg/L胸腺素β4可使血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子持续稳定较高表达。在愈合早期促进血管再生，促进肉芽组织生长和成纤维细胞的增殖、分化，在愈合晚期，下调血管内皮生长因子的表达，同时抑制碱性成纤维细胞生长因子过度表达。     

肩袖损伤模型大鼠肌腱组织中4种生长因子表达及皮质激素和 透明质酸的干预

背景：组织工程学在治疗肩袖损伤中扮演了重要的角色，调控生长因子的表达来促进损伤肩袖的愈合及预防粘连是其中的主要部分。 目的：比较皮质激素和透明质酸对肩袖损伤模型肌腱组织中表皮生长因子、血小板源性生长因子、转化生长因子β、碱性成纤维细胞生长因子表达的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-07/09在上海交通大学医学院动物实验中心完成。 材料：36只SD大鼠随机分成4组：正常组6只，肩袖损伤组6只，透明质酸治疗组12只，皮质激素治疗组12只。 方法：切除大鼠双侧岗下肌腱全厚层50%，宽约5 mm，于滑膜面建肩袖损伤模型。透明质酸治疗组肩峰下滑囊注射0.05 mL透明质酸钠；皮质激素治疗组肩峰下滑囊注射倍他米松0.05 mL。 主要观察指标：术后3周，6周取岗下肌腱标本RT-PCR检测表皮生长因子、血小板源性生长因子、转化生长因子β、碱性成纤维细胞生长因子表达水平。 结果：①皮质激素治疗肩袖损伤后6周表皮生长因子表达强度是3周时的近2倍，透明质酸治疗6周表皮生长因子表达明显减弱（P < 0.01）。②血小板源性生长因子在两种药物治疗3周后表达均增强，其中皮质激素治疗肩袖损伤3周后表达最强（P < 0.01），但6周后回复至正常水平，而透明质酸治疗6周后表达仍高（P < 0.05）。③转化生长因子β在两种药物治疗后3周表达均增强（P < 0.05），6周后回复至正常水平。④碱性成纤维细胞生长因子在皮质激素治疗后3周表达减弱（P < 0.05），6周后回复至正常水平；透明质酸治疗后3周，6周的表达均维持较高水平（P < 0.05）。 结论：皮质激素在肩袖损伤修复过程中对4种因子的调控主要在早期；透明质酸在修复早期、后期均有不同程度的作用；皮质激素的调控作用主要是促进生长因子的表达，而透明质酸存在双向调控作用。     

人胎羊膜移植预防肌腱粘连的实验研究

目的 探讨红花注射液保存的人胎羊膜植入防治肌腱粘连的作用机制。方法 将30只成年鸡随机分成两组,每组15只,各30根屈肌腱予以切断,左足为实验组行断端吻合后植入红花注射液保存的胎羊膜、右足为对照组、空白组分别植入未经药液保存的胎羊膜及单纯吻合。通过肉眼、光镜观察肌腱愈合假鞘形成及粘连情况,并测定生物力学、病理组织学评分及腱组织中羟脯氨酸含量。结果 1、肉眼观察：实验组左足爪肌腱完全恢复正常,腱周无粘连,对照组无明显粘连,空白组有粘连,且粘连程度较重。2、光镜观察：实验组腱周有纤维组织形成,见腱周裂隙,断端愈合,肌腱外周无明显组织粘连。对照组大致同左足爪,断端基本愈合,腱周无明显粘连。空白组无腱周裂隙形成,有较多成纤维细胞及少量单核细胞浸润。3、生物力学测定：趾关节总屈曲角度、屈趾深肌腱滑移距离比较,实验组明显大于空白组,有极显著性差异（P＜0.01）;实验组大于对照组,有显著性差异（P＜0.05）。4、病理组织学观察：实验组纤维增生量、粘连程度及范围显著小于空白组（P＜0.01）。实验组腱内纤维增生量、肌腱粘连程度及范围少于对照组（P＜0.05）; 5、腱组织中羟脯氨酸含量测定：实验组与空白组比较,有显著性差异（P＜0.05）;实验组与对照组比较,有显著性差异（P＜0.05）。结论 红花注射液保存的胎羊膜可有效防治肌腱吻合术粘连。     

血管内皮生长因子在阿托伐他汀干预股骨头缺血性坏死家兔骨组织中的表达

背景：研究证实,体外培养中他汀类药物可显著增加血管内皮祖细胞的数量,同时可以使血管内皮生长因子的含量明显增多。 目的：验证阿托伐他汀对家兔股骨头缺血性坏死骨组织中血管内皮生长因子表达的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-09/2008-11在武汉大学人民医院骨关节外科完成。 材料：健康成年新西兰大耳白兔45只,体质量2.5~3.5 kg,雌雄不限。随机分成空白对照组、模型组和阿托伐他汀组,每组15只。 方法：模型组和阿托伐他汀组应用液氮冷冻法建立家兔股骨头缺血性坏死模型,阿托伐他汀组于造模成功后2周开始用阿托伐他汀灌胃,空白对照组和模型组灌服等量的生理盐水。 主要观察指标：于第4,8,12周每组随机各取5只动物处死,进行大体、X射线及组织学观察;以免疫组织化学法检测股骨头血管内皮生长因子蛋白表达和反转录-聚合酶链反应法检测血管内皮生长因子 mRNA水平。 结果：模型组和阿托伐他汀组血管内皮生长因子蛋白和mRNA表达明显低于空白对照组,但阿托伐他汀组喂药后的第8,12周血管内皮生长因子蛋白和mRNA表达水平明显高于模型组(P < 0.05)。 结论：阿托伐他汀能够提高家兔股骨头缺血性坏死骨组织中血管内皮生长因子蛋白和mRNA的表达。     

耐力运动大鼠跟腱胶原、基质金属蛋白酶1及其抑制剂1的表达

背景：胶原是肌腱细胞外基质中的主要成分,基质金属蛋白酶是降解肌腱细胞外基质蛋白的重要蛋白酶。 目的：观察12周跑台运动对大鼠跟腱胶原、胶原Ⅰ、基质金属蛋白酶1及其抑制剂1表达的影响。 方法：将20只雄性SD大鼠随机分为对照组和运动组。第1周每天运动20 min,速度由12 m/min递增至20 m/min;以后跑台速度均为20 m/min,第2周坡度为5%,时间为30 min,第3~12周坡度为10%,时间为40 min,共运动12周。对照组正常饲养。 结果与结论：末次运动后24 h取大鼠跟腱。与对照组比较,运动组大鼠跟腱前胶原Ⅰα1、基质金属蛋白酶1及其抑制剂1 mRNA的表达明显升高(P < 0.05或P < 0.01),羟脯氨酸的含量也有所增多,但与对照组比较差异无显著性意义(P > 0.05)。表明长期耐力运动可以提高跟腱中胶原的合成和降解能力。     

姜黄素对瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成的影响

背景：近期研究提示姜黄素可能是一种抗纤维化制剂。 目的：以瘢痕疙瘩成纤维细胞为靶细胞，观察不同浓度姜黄素对瘢痕疙瘩成纤维细胞合成胶原的影响。 设计、时间及地点：随机对照实验，于2006-10/2007-11在解放军第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科完成。 材料：瘢痕疙瘩患者的手术标本5份，患者均知情同意。治疗方案经医院医学伦理委员会批准。姜黄素为美国Sigma公司产品。 方法：瘢痕疙瘩成纤维细胞体外原代培养，待细胞融合后传代，取第3~6代对数生长期的成纤维细胞用于实验。将不同浓度姜黄素(5，10，20 μmol/L)分别对瘢痕疙瘩成纤维细胞干预24~48 h，以空白组做对照。 主要观察指标：蛋白免疫印迹检测姜黄素作用瘢痕疙瘩成纤维细胞后结缔组织生长因子的表达。荧光定量聚合酶链反应检测姜黄素作用瘢痕疙瘩成纤维细胞后Ⅰ、Ⅲ型前胶原及结缔组织生长因子基因的表达。 结果：①姜黄素作用瘢痕疙瘩成纤维细胞 48 h后，结缔组织生长因子蛋白的表达减少，均低于对照组（P < 0.01）。②与对照组相比，不同浓度姜黄素干预组Ⅰ、Ⅲ型前胶原及结缔组织生长因子表达均降低（P < 0.01），并且Ⅰ型前胶原表达随着药物浓度的增加，有逐渐降低的趋势，成明显的量效关系。姜黄素20 μmol/L组Ⅲ型前胶原表达低于姜黄素10 μmol/L组，但差异无显著性意义（P > 0.05），姜黄素10 μmol/L组结缔组织生长因子表达低于姜黄素5 μmol/L组，但差异无显著性意义（P > 0.05）。 结论：姜黄素对体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成有明显抑制作用，其作用机制可能与姜黄素抑制结缔组织生长因子在瘢痕疙瘩成纤维细胞的表达有关。     

表皮生长因子联合血糖控制对糖尿病创面愈合的影响：成纤维细胞生长因子蛋白及其mRNA表达的变化

背景：有研究表明急性创伤可导致内源性的重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)表达下调,导致不愈合的发生。 目的：观察局部应用rhEGF联合血糖控制下对糖尿病大鼠烫伤创面成纤维细胞生长因子表达的影响。 方法：将Wistar糖尿病大鼠制备背部深Ⅱ度烫伤模型。联合治疗组于烫伤前1周控制血糖至对照组水平,并在烫伤24 h内创面喷洒rhEGF;rhEGF组仅创面喷洒rhEGF;血糖控制组仅控制血糖;对照组不制备糖尿病模型,烫伤后处理同联合治疗组。烫伤后1,3,5,7,11,15,21 d取创面皮肤组织采用免疫组织化学染色及原位杂交法检测成纤维细胞生长因子蛋白及mRNA的表达,并观察各组大鼠创面愈合情况。 结果与结论：烫伤后各组大鼠创面成纤维细胞生长因子蛋白及mRNA表达均明显增多,分别在5~7 d及7~11 d达高峰,且联合治疗、对照组峰值较rhEGF、血糖控制组高(P < 0.05)。烫伤后7~21 d,联合治疗、对照组创面愈合率高于rhEGF、血糖控制组(P < 0.05)。说明局部应用rhEGF在联合血糖控制下可促进糖尿病大鼠烫伤创面的愈合,可能与促进创面成纤维细胞生长因子表达有关。     

血管内皮生长因子与纳米晶胶原基骨支架复合修复大鼠股骨缺损

背景：研究证实纳米晶胶原基骨复合间充质干细胞修复骨缺损具有体内成骨能力。 目的：观察血管内皮生长因子与骨髓间充质干细胞、纳米晶胶原基骨复合物修复大鼠股骨缺损的效果。 方法：制作SD大鼠股骨中段骨缺损模型,随机分为2组：对照组植入骨髓间充质干细胞/纳米晶胶原基骨复合物;实验组植入血管内皮生长因子/骨髓间充质干细胞/纳米晶胶原基骨复合物。术后第2,4,8周行股骨标本影像学与组织学观察;术后第8周行新生骨痂环境扫描电镜检查。 结果与结论：纳米晶胶原基骨支架复合物植入大鼠体内后无排斥反应及炎症反应,且血管内皮生长因子/骨髓间充质干细胞/纳米晶胶原基骨复合物成骨更快,较骨髓间充质干细胞/纳米晶胶原基骨复合物具有更好的骨再生能力,其成骨方式主要为软骨内成骨。推测血管内皮生长因子促进了局部微血管的形成和成骨细胞的分化、增殖,加快了软骨内成骨的速率,缩短了骨修复时间,提高了骨再生的质量和速率。     

缓释降解支架复合碱性成纤维细胞生长因子诱导心肌血管再生的作用☆

摘要 背景：研究证实碱性成纤维细胞生长因子具有刺激血管再生及侧支重建的作用，但是，以往多通过外周静脉、左心房或冠脉介入途径给药，心肌局部难以达到有效治疗浓度。 目的：基于高分子材料聚乳酸/乙醇酸的降解特性，复合碱性成纤维细胞生长因子，保证蛋白生长因子在局部组织中靶向释放，观察其诱导心肌血管再生效果。 方法：以聚乳酸、乙醇酸为原料，二氯甲烷溶解后加入重组人碱性成纤维细胞生长因子，通过模具塑形，制成外径/内径分别为3.0/ 2.8 mm、壁厚0.1 mm、长度10 mm的圆柱形中空管状支架备用。于小型猪冠脉前降支中、远端1/3交界处阻断，局部心肌颜色变为暗紫色，超声观察前壁心尖局部室壁运动异常证实模型制作成功，随机分至空白支架对照组和碱性成纤维细胞生长因子支架组，支架通过自主设计的机械打孔装置植入。6周后，免疫组织化学染色量化分析血管重建的增殖细胞数量，并结合Image Pro Plus软件量化各组新生血管密度，SPECT结合软件Emory Cardiac Toolbox分析灌注缺损区域质量百分率的变化。 结果与结论：6周后碱性成纤维细胞生长因子支架组增殖细胞数量、新生血管密度较空白支架组显著增加(P < 0.001)，心肌核素显像显示灌注质量缺损百分率较空白支架组显著减少(P < 0.001)。结果证实，复合碱性成纤维细胞生长因子的聚乳酸/乙醇酸支架能够显著增加新生血管密度，进而改善缺血部位心肌血流灌注。 关键词：心肌缺血；药物缓释；碱性成纤维细胞生长因子；支架；血管再生；生物医用可降解高分子材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.21.045     

跟腱损伤修补后的运动疗法：组织学及生物力学评价

背景：开放性跟腱断裂修复后康复时间长、并发症多、功能恢复不尽人意。目前尚缺乏系统、科学、简便、易行的运动疗法促进康复。 目的：观察运用运动疗法对跟腱损伤修补后的组织形态学和力学特性的影响。 方法：日本大耳白兔48只,随机分成制动组和运动组,在距跟腱止点2.0 cm处切断跟腱,建立跟腱损伤模型,缝合线缝合腱周组织后,制动组使用石膏绷带进行传统的重力垂足位长腿石膏固定;运动组不予固定处理。术后7,14,21d分别取跟腱标本,观察肌腱粘连情况及最大断裂应力。 结果与结论：制动组肌腱粘连较运动组明显(P < 0.05)。正常运动组跟腱的最大断裂应力明显高于制动组(P < 0.05)。说明在肌腱愈合的过程中,早期给予动态应力刺激,对促进组织的愈合、减少后遗症等十分有利。