酪酪肽对人胰腺癌细胞生长的调节作用及其机制研究

目的：观察酪酪肽（PYY）对人胰腺癌细胞生长的抑制作用及其对细胞内环磷酸腺苷(cAMP)含量的影响。方法：采用^3H-胸腺嘧啶（^3H-TdR）掺入、放射免疫法，测定PYY对人胰腺癌细胞株SW－1990生长的调节作用及其对细胞内cAMP含量的影响。结果：PYY对SW－1990细胞的生长有显著抑制作用，随其浓度的增加或作用时间的延长而增强，并可减少细胞内cAMP的产生呈剂量依赖关系。结论:PYY树人胰腺癌细胞生长有抑制作用，其机制可能与通过降低细胞内cAMP含量有关。     

血管活性肠肽对人胰腺癌细胞生长自分泌调节作用及其机制的研究

采用＾３Ｈ－胸腺嘧啶掺入研究了血管活性肠肽（ＶＩＰ）对我院所建一株人胰腺癌细胞生长的影响，并对该细胞株进行ＶＩＰ受体、受休珀细胞内介质ｃＡＭＰ和多胺产生的研究。发现ＶＩＰ在１０＾－６Ｍ和１０＾－７Ｍ对具有ＶＩＰ受体的人胰腺癌细胞有明显促生长作用，且成浓度依赖关系，这种作用可被其受体拮抗剂（４－Ｃｌ－ＤＰｈｅ＾６，Ｌｅｕ＾１７）ＶＩＰ所阻断；ＶＩＰ能显著促进本株人胰腺癌细胞内ｃＡＭＰ及多胺的产生，表     

血管活性肠肽对人胰腺癌细胞生长的自分泌调节作用及其机制的研究

采用３Ｈ－胸腺嘧啶掺入研究了血管活性肠肽（ＶＩＰ）对我院所建一株人胰腺癌细胞生长的影响，并对该细胞株进行ＶＩＰ受体、受体后细胞内介质ｃＡＭＰ和多胺产生的研究。发现ＶＩＰ在１０－８Ｍ和１０－７Ｍ对具有ＶＩＰ受体的人胰腺癌细胞有明显促生长作用，且成浓度依赖关系，这种作用可被其受体拮抗剂（４－Ｃｌ－Ｄ－ｐｈｅ６，Ｌｅｕ１７）ＶＩＰ所阻断；ＶＩＰ能显著促进本株人胰腺癌细胞细胞内ｃＡＭＰ及多胺的产生，表明ＶＩＰ的促生长作用可能与细胞内ｃＡＭＰ和多胺的生物合成增加有关；本株细胞在培养过程中可向培养基中分泌一定量的ＶＩＰ，ＶＩＰ抗体能抑制其在无血清培养基中生长，提示ＶＩＰ对本株人胰腺癌细胞的生长有自分泌调节作用。     

胃泌素对人胃癌细胞生长的调节作用

本文利用我国自己建株的人胃癌细胞HGC803和BGC823,来研究胃动素对胃癌细胞生长的调节作用。在培养的胃癌细胞中,加入不同剂量的五肽胃泌素,观察胃癌细胞生长曲线的变化。在胃癌细胞培养过程中,每隔6小时收集培养上清液,用RIA法测定其中胃泌素含量;同时收集培养72     

胰泌素对人胃癌细胞生长的调节作用 及机制探讨

目的:近年来的研究表明,胰泌素族胃肠激素如VIP和PACAP也是一种生长因于,能调节胃肠肿瘤的生长、增殖和分化。但胰泌素(SEC)在消化系肿瘤中的作用报道尚少。方法:本研究采用~3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(H-TDR)掺入法研究胰泌素对人     

IL-6对人胰腺癌细胞生长及STAT3信号转导通路的影响

目的 探讨IL-6对人胰腺癌细胞株Capan-2生长及STAT3信号转导途径的影响.方法 采用MTT法检测不同浓度IL-6刺激后Capan-2细胞的增殖率;免疫细胞化学染色确定磷酸化STAT3(P-STAT3)在Capan-2细胞内的定位及IL-6刺激前后表达量的变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡;Western blot检测IL-6刺激前后Capan-2细胞中P-STAT3、bcl-xl、Cyclin D1蛋白表达量的变化.结果 100 ng/ml的IL-6作用Capan-2细胞后,细胞的增殖从1增加到4.965±0.18(P<0.05);细胞凋亡率从(3.21±0.23)%下降到(1.98±0.67)%(P<0.05);P-STAT3、bel-xl、Cyclin D1蛋白表达明显升高(P<0.05),且bcl-xl的表达与P-STAT3的表达呈正相关(r=0.985,P=0.015);Cyclin D1的表达与P-STAT3表达也呈正相关(r=0.914,P=0.036).结论 JAK/STAT信号转导途径的活化介导了IL-6对Capan-2细胞的增殖促进功能.     

AG490联合健择对人胰腺癌细胞生长的影响

目的:探讨Janus激酶(JAK)特异性抑制剂AG490联合化疗药物健择对人胰腺癌细胞系SW1990的生长增殖及STAT3转导通路的影响和其机制.方法:人胰腺癌细胞系SW1990分为对照组、AG490组、健择组及AG490 健择处理组.培养48 h后,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞仪检测细胞凋亡.Western blot和RT-PCR检测STAT3,Cyclin D1,Bcl-xL,Bax,Survivin的表达情况.结果:AG490组和健择组的细胞增殖明显低于对照组(2.20±0.25,2.30±0.220 vs 3.78±0.42,P<0.05),凋亡率明显高于对照组(35.40%±3.08%,34.64%±1.38% vs 16.49%±1.45%,P<0.05)。并且,AG490 健择组细胞增殖(1.49±0.15)明显低于明显低于AG490或健择组(P<0.05),而凋亡率(43.80%±1.57%)则明显高于AG490或健择组(P<0.05).AG490处理SW1990 48 h后,p-STAT3表达明显低于对照组(13.83%±0.64% vs 79.87%±1.43%,P<0.05),同时Cyclin D1(mRNA:15.63%±0.59% vs 43.83%±0.64%,P<0.05:蛋白:17.50%±0.92% vs 49.87%±1.27%,P<0.05),Bcl-xL(mRNA:13.93%±0.21% vs 75.70%±0.46%,P<0.05:蛋白:34.17%±1.70% vs 83.93%±0.80%,P<0.05)和Survivin(mRNA:58.27%±0.42% vs 82.93%±1.68%,P<0.05:蛋白:13.23%±1.03% vs 18.60±1.08%,P<0.05)表达也明显降低,而Bax的表达则明显增高(mRNA:10.33%±1.18% vs 5.43%±0.70%,P<0.05:蛋白:13.07%±1.04% vs 6.23%±2.40%,P<0.05),健择处理组上述指标与对照组相似.结论:阻断STAT3信号转导通路可以抑制人胰腺癌细胞增殖,促进其凋亡,健择联合AG490能起协同作用.AG490联合健择可能为胰腺癌治疗提供新的思路.     

表皮生长因子对人肝癌细胞生长的影响及生长抑素对其受体的调节作用

采用放射受体分析法确定，人肝癌细胞和正常肝细胞膜存在特异的亲合力不同的二类ＥＧＦ受体。进一步用化学交联法鉴定其受体分子量为１６８ｋＤａ。以３Ｈ－ＴｄＲ掺人和细胞计数为指标，无血清培养下，ＥＧＦ能明显地促进肝癌细胞的生长；ＥＧＦ抗体、ＥＧＦ受体单克隆抗体、生长抑素（ＳＳ）能抑制肝癌细胞的生长并拮抗ＥＧＦ的促生长作用。肝癌细胞在含ＳＳ的无血清培养基中培养后，其ＥＧＦ受体结合率降低。说明ＳＳ对ＥＧＦ受体有下调节作用。这可能是ＳＳ抑制肝癌细胞生长的机制之一。     

基因枪转导K-ras突变反义基因对人胰腺癌细胞生长曲线的影响

目的探讨基因枪转导K-ras突变反义基因对胰腺癌细胞生长的影响。方法利用基因枪技术,将反义基因转导入宿主细胞,通过活细胞计数试剂盒Cell Counting Kit-8和Thermo Multiskan Ascant酶标仪观察K-ras突变特异性反义基因转导后对AsPC-1、MiaPaCa-2和BxPC-3三种人胰腺癌细胞的生长曲线变化情况。结果转导K-ras突变特异性反义基因后,突变型AsPC-1和MiaPaCa-2胰腺癌细胞的生长曲线明显向右下移动。结论转导K-ras突变特异性反义基因后,具有突变型K-ras基因的胰腺癌细胞系的生长都受到明显抑制。     

PUMA基因转染对胰腺癌细胞生长的影响

目的 探讨PUMA基因转染抑制胰腺肿瘤生长的体内外效果.方法 利用脂质体转染法将表达PUMA的质粒转染导入胰腺癌细胞株PC-3中,G418筛选出阳性克隆,Western和RT-PCR法检测PUMA转染后PC-3 PUMA的表达,流式细胞仪检测转染后细胞凋亡率;分别将转染PUMA的PC-3细胞(实验组)和未转染的PC-3细胞移植到裸鼠体内,比较裸鼠移植肿瘤的大小和重量以及PUMA表达.结果 PUMA表达质粒转染的PC-3细胞(PC-3/PUMA)稳定表达PUMA,其细胞凋亡率为(5.50 ± 0.90)%,明显高于未转染组的(1.073 ± 0.248)%和空载体转染组的(1.08 ± 0.35)%(P ＜0.05);裸鼠接种4周后PC-3/PUMA细胞成瘤率为70%,PC-3细胞和空载体PC-3细胞成瘤率为100%(P ＞ 0.05),PC-3/PUMA细胞形成的肿瘤体积比PC-3细胞和空载体PC-3细胞明显减小(P ＜0.05),并且形成的肿瘤组织中PUMA高表达.结论 胰腺癌细胞中缺失PUMA基因表达,PUMA转染胰腺癌细胞后表达PUMA,并能促进细胞凋亡.     

PUMA基因转染对胰腺癌细胞生长的影响

目的探讨PUMA基因转染抑制胰腺肿瘤生长的体内外效果。方法利用脂质体转染法将表达PUMA的质粒转染导入胰腺癌细胞株PC-3中,G418筛选出阳性克隆,Western和RT-PCR法检测PUMA转染后PC-3PUMA的表达,流式细胞仪检测转染后细胞凋亡率;分别将转染PUMA的PC-3细胞(实验组)和未转染的PC-3细胞移植到裸鼠体内,比较裸鼠移植肿瘤的大小和重量以及PUMA表达。结果PUMA表达质粒转染的PC-3细胞(PC-3/PUMA)稳定表达PUMA,其细胞凋亡率为(5.50±0.90)%,明显高于未转染组的(1.073±0.248)%和空载体转染组的(1.08±0.35)%(P<0.05);裸鼠接种4周后PC-3/PUMA细胞成瘤率为70%,PC-3细胞和空载体PC-3细胞成瘤率为100%(P>0.05),PC-3/PUMA细胞形成的肿瘤体积比PC-3细胞和空载体PC-3细胞明显减小(P<0.05),并且形成的肿瘤组织中PUMA高表达。结论胰腺癌细胞中缺失PUMA基因表达,PUMA转染胰腺癌细胞后表达PUMA,并能促进细胞凋亡。     

MEK通路抑制剂对人胰腺癌细胞生长及细胞周期相关抑癌基因表达的影响

目的 观察细胞外信号调节激酶信号通路(MEK)抑制剂对人胰腺癌细胞生长及细胞周期相关的抑癌基因表达的影响。方法 培养人胰腺癌细胞系CFPAC1、PANC1和MiaPaCa2,应用50μmol/L的MEK抑制剂PD98059处理细胞24h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,实时定量PCR法检测p16INK4a、p21 WAF1和p27KIP1 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测DNA甲基化酶(Dnmt)1、3a和3b表达,甲基化特异性PCR(MSP)分析p16INK4a基因启动子甲基化状况。结果 PD98059处理24h后,CFPAC1、PANC1和MiaPaCa2细胞的增殖抑制率分别为69％、78％和45％;G0/G1期细胞比例分别从(68.21±0.73)％、(56.54±0.68)％、(54.89±0.79)％增加到(80.37±0.65)％、(72.05±0.52)％、(79.21±0.93)％(P值均＜0.05);S期和G2/M期细胞比例相应减少。PD98059处理后,CFPAC1、PANC1细胞p27KIP1、p21WAF1和p16INK4a mRNA表达增加,Dnmt1和Dnmt3b蛋白表达减少;p16INK4a启动子甲基化状态被去除。而MiaPaCa2细胞仅p27KIP1 mRNA表达增加;p21WAF1、p16INK4a mRNA和Dnmt表达均无明显变化。结论 MEK通路抑制剂可能通过下调DNA甲基化酶、上调细胞周期相关抑癌基因表达而抑制胰腺癌细胞周期进展和细胞增殖。     

酪酪肽对实验性急性胰腺炎的治疗作用

目的探讨酪酪肽(Peptide YY,PYY)对实验性急性胰腺炎大鼠(AP)的治疗效果,并对其机制进行探讨。方法取40只SD大鼠,雌雄不限,随机分为胰腺炎组(n=20)和酪酪肽治疗组(n=20),急性胰腺炎模型采用经腹腔注射精氨酸完成,测定48 h后大鼠血清及胰腺组织匀浆中的丙二醛(MDA)含量,血清中肿瘤坏死因子-α含量,光镜下观察胰腺组织的病理变化。结果 PYY能有效减轻AP大鼠胰腺的病理损伤,与胰腺炎组相比,PYY组血清中及胰腺组织匀浆中的MDA含量下降,血清中肿瘤坏死因子-α的含量下降。结论 PYY可能通过抗氧自由基的生成,减轻组织的过氧化损伤,以及通过抑制某些细胞因子的作用而对急性胰腺炎发挥保护作用。     

MAT1基因沉默对胰腺癌细胞生长的影响

我们既往的研究证实,作为调控细胞周期循环的关键基因之一,人类MAT1( ménage à trios 1)基因在胰腺癌组织中表达增强,它参与胰腺癌的发生[1-2]引.转染反义MAT1基因可使胰腺癌细胞出现明显的G1期阻滞[3].为此,本研究应用体外转录法合成靶向MAT1基因的小干扰RNA( small interference RNA,siRNA),转染胰腺癌Capan-2细胞,观察其对细胞的生长抑制效应,探讨siRNA沉默MAT1基因用于胰腺癌基因治疗的可行性.     

西咪替丁对人结肠癌细胞生长及凋亡的影响

目的探讨西咪替丁对体外培养的人结肠癌细胞株LoVo的抑制和诱导细胞凋亡的作用.方法采用MTT比色法、流式细胞术、形态学观察和TUNEL法检测不同浓度的西咪替丁溶液处理LoVo细胞后的生长状况、形态学、分子生物学改变.结果西咪替丁可抑制LoVo细胞的增殖,且有剂量依赖性的趋势;1×10-2M西咪替丁处理LoVo细胞48h后,在光镜、电镜检测中,可见典型的凋亡细胞;流式细胞术检测凋亡率为32.7%,bcl-2相关蛋白表达率为36.74%;TUNEL法进一步从分子生物学角度证实凋亡的发生.结论西咪替丁对结肠癌细胞LoVo有抑制作用,主要机制为诱导其发生凋亡,凋亡发生的原因与西咪替丁可下调bcl-2蛋白的表达有关.     

奥曲肽对人肝癌细胞生长增殖、甲胎蛋白合成及细胞凋亡的作用

目的　研究奥曲肽对肝癌细胞生长增殖及细胞凋亡的作用 ,探讨其对肝癌的作用机制 ,为临床应用提供实验依据。方法　采用MTT法、生长曲线观察奥曲肽对肝癌细胞HepG2生长增殖的影响 ,电化学发光法测定培养上清液中甲胎蛋白 (AFP)含量 ,并用荧光染色、透射电镜和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果　奥曲肽在 0 .0 0 5～ 80 μg/ml浓度范围内呈剂量依赖性方式抑制肝癌细胞HepG2的生长增殖 ,并能显著减少肝癌细胞AFP合成。奥曲肽 (0 .2 5～ 4 .0 μg/ml)作用 4 8h后 ,荧光染色与透射电镜可见部分HepG2细胞呈典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测 ,出现凋亡峰 ,与对照组相比 ,细胞的凋亡率显著升高 (P <0 .0 5 )。结论　奥曲肽能够显著抑制肝癌细胞生长 ,并诱导肝癌细胞凋亡 ,有望成为治疗肝细胞癌的一个有效药物     

消化道酪酪肽的作用和受体分布

酪酪肽(PYY)是一种重要的胃肠激素，对消化道动力、分泌、粘膜上皮增殖等均有重要调节作用。酪酪肽的受体有多种亚型，在消化道的分布广泛。酪酪肽的作用机制复杂，涉及肠神经系统、中枢神经系统和其他胃肠激素。     

消化道酪酪肽的作用和受体分布

酪酪肽(PYY)是一种重要的胃肠激素,对消化道动力、分泌、粘膜上皮增殖等均有重要调节作用。酪酪肽的受体有多种亚型,在消化道的分布广泛。酪酪肽的作用机制复杂,涉及肠神经系统、中枢神经系统和其他胃肠激素。     

人工合成杀菌肽对人肝癌细胞的杀伤作用

目的 探讨人工合成杀菌肽（Ｓｈｉｖａ－１）对肿瘤细胞的杀伤及选择性杀伤作用机制。方法 采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，细胞内游离钙含量及动态变化测定。扫描、航向电子显微镜法，观察人工合成杀菌肽Ｓｈｉｖａ－１对人肝癌细胞的生长抑制、细胞ＤＮＡ合成、细胞内游离钙离子含量的动脉变化及对超微结构的影响。结果 人工合成杀菌肽Ｓｈｉｖａ－１可抑制癌细胞生长及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入细胞ＤＮＡ，使细胞内游离钙含量迅速降低，     

大蒜素对人肺腺癌细胞生长抑制作用的实验研究

目的研究大蒜素对人肺腺癌A549细胞增殖抑制、细胞凋亡的影响。方法用不同浓度大蒜素作用体外培养的A549细胞,采用CCK8法检测大蒜素对A549细胞增殖抑制能力,荧光显微镜观察A549细胞形态学变化,ELISA法测定A549细胞上清液VEGF水平,比色法检测caspase3、caspase9活性变化。结果大蒜素对A549细胞增殖有明显抑制作用,并呈时间及浓度依赖性;24 h、48 h及72 h大蒜素对A549细胞的IC50分别为114.26μg/ml、85.27μg/ml、76.83μg/ml(P<0.05);60μg/ml以上大蒜素作用A549细胞48h可产生显著凋亡特征;随大蒜素浓度增加,A549细胞上清液VEGF水平呈下降趋势,A549细胞caspase3、caspase9蛋白活性显著增加。结论大蒜素能显著抑制A549细胞增殖、诱导其凋亡,可能与VEGF表达下降及caspase3、caspase9激活相关。